Alat Sterilisasi Kelompok 2 [PDF]

Citation preview

LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI Alat –alat Sterilisasi



Asteria,Godwin Pargaulan Siahaan,Indah Puspita Sari,Wiwik Hendarini Jurusan Fakultas Farmasi – Sains Teknologi Nasional Juni 2020



ABSTRAK Sterilisasi adalah pemusnahan semua mikroorganisme termasuk spora dan bakteri.Sterilisasi dalam mikrobiologi merupakan suatu proses untuk mematikan semua organisme yang terdapat pada atau didalam suatu benda.Dalam melakukan diagnosa mikrobiologi sterilisasi sangat diutamakan baik alat maupun medianya.Suatu alat dikatakan steril apabila alat atau bahan bebas dari mikroba baik dalam bentuk vegetatif maupun spora.Populasi mikroba di alam skitar sangat besar dan kompleks .Mikroba hampir terdapat pada semua tempat di sekitar kita.terlebih alat yang sering digunakan dalam penelitian. Pemusnahan bakteri dilakukan secara steril atau disebut juga sterilisasi yaitu pembunuhan jasad renik mikroorganisme hidup.Oleh karena itu dibutuhkan suatu instrumen yang dapat melakukan proses sterilisasi Kata Kunci : Sterilisasi Tanggal Praktikum : 10 Juni 2020



Pendahuluan Sterilisasi adalah pembebasan suatu material bahan ataupun alat dari berbagai mikroorganisme hidup.Sel-sel vegatatif bakteri dan fungi dapat mati pada suhu 60oC dalam waktu 5-10 menit.proses sterilisasi sendiri juga melibatkan proses fisika,kimia.Sterilisasi secara umum dapat dilakukan berupa ; sterilisasi secara fisik (pemanasan,penggunaan sinar



gelombangpendek yang dapat dilakukan selama senyawa kimia yang disterilkan ridak akan berubah atau terurai akibat temperatur atau tekanan tinggi).Sterilisasi secara kimia dapat berupa desinfektan),sterilisasi secara mekanik digunakan untuk beberapa bahan yang akibat pemanasan tinggi atau tekanan tinggi akan mengalami perubahan.Jika sterilisasi berlangsung sempurna maka spora bakteri yang merupakan bentuk paling resisten dari kehidupan mikrobia



FAKULTAS FARMASI-INSTITUT SAINS DAN TEKNOLOGI NASIONAL



Page 1



•



akan diluluhkan.Sterilisasi basah biasanya menggunakan alat sterilisasi autoklaf yang mulai diangkat dengan menggunakan uap air jenuh dengan menggunakan uap air 121oC selama 15 menit.Adanya pertumbuhan mikroorganisme menunjukkan bahwa pertumbuhan bakteri masih berlangsung dan tidak sempurnanya proses sterilisasi.Pemilihan cara sterilisasi didasarkan pada sifat bahan yang akan disterilkan.Cara sterilisasi yang umum digunakan secara rutin di Laboratorium mikrobiologi adalah pemanasan.Bila panas digunakan bersama-sama dengan uap air maka disebut sterilisasi panas lembab,bila tanpa kelembaban disebut sterilisasi panas kering atau sterilisasi kering.



Masukkan



medium/



larutan



yang akan disterilisasi dalam keranjang, kemudian masukkan dalam autoklaf. •



Tutup



dengan



kencangkan



rapat



baut



lalu



pengaman



agar tidak ada uap yang keluar dari autoklaf. •



Hubungkan arus listrik.



•



Nyalakan autoklaf menekan titik power.



•



Atur suhu, tekanan, dan waktu



autoklaf



dengan dengan



METODOLOGI



sterilisasi dengan menggunakan



Bahan dan Alat



tombol



yang



terdapat



pada



tombol



start



untuk



autoklaf.



Alat –alat yang digunakan pada praktikum ini adalah autoklap,oven ,inkubator



•



Tekan



memulai sterilisasi. Perhitungan Metode



waktu dimulai sejak suhu sudah



Metode yang digunakan untuk mereview jurnal ini yaitu dengan penelusuran studi pustaka,pencarian jurnal dan buku-buku terkait yang semuanya dilakukan secara online seperti google scholar,jurnal dan artikel lainnya.



mencapai suhu dan tekanan yang telah ditentukan. •



Setelah selesai, proses akan berhenti secara otomatis.



•



Jika tanda selesai berbunyi,



Cara Kerja



tunggu tekanan turun mencapai



1.Sterilisasi Alat



nol dan suhu minimal di bawah



Autoklaf



70oC, lalu keluarkan medium



•



Cek apakah air dalam autoklaf



atau larutan yang sudah steril.



dan wadah penampung uap air



Sebelum itu, tutup autoklaf



sudah sesuai dengan batas yang



tidak boleh dibuka. •



ditentukan. Gunakan air hasil destilasi



untuk



Matikan autoklaf dan cabut kabel penghubung arus listrik



menghindari



apabila



terbentuknya kerak.



sudah



selesai



digunakan. Oven FAKULTAS FARMASI-INSTITUT SAINS DAN TEKNOLOGI NASIONAL



Page 2



• •



Pastikan oven dengan arus listrik



dengan menekan tombol yang



terhubung



terdapat pada alat.



Bungkus peralatan gelas yang akan disterilisai menggunakan kertas yellow pages, masukkan



•



Inkubasikan biakan sesuai waktu yang diinginkan.



•



Matikan inkubator selesai digunakan.



peralatan gelas ke dalam oven.



bila



telah



Susun sedemikian rupa hingga memenuhi ruang dalam oven



Bunsen mensterilisasi jarum tanam,



secara efektif. •



Atur



suhu



tombol



pengatur



suhu



dan



nyalakan tombol power yang ada dala oven •



Catat waktu pada saat oven dinyalakan



•



Setelah selesai sesuai dengan waktu/ lama sterilisasi yang diinginkan, matikan oven



•



Setelah



suhu



mencapai



turun suhu



hingga kamar,



keluarkan peralatan gelas yang telah steril dan simpan pada tempatnya Inkubator •



Pastikan inkubator sudah terhubung dengan arus listrik.



•



Nyalakan inkubator menekan tombol power.



•



Atur



suhu



dan



rpm



dengan (bila



menggunakan shaker incubator) sesuai dengan yang diinginkan. • •



Masukan biakan diinkubasi. Bila



yang



menggunakan



incubator,



pinset dan peralatan gelas yang



menggunakan



nyalakan



akan shaker shaker



digunakan saat bekerja. Hasil dan Pembahasan Hasil 1.Autoklaf adalah suatu bejana yang dapat ditutup,yang diisi dengan uap panas dengan tekanan tinggi.Suhu didalamnya dapat mencapai 115oC ini sampai 125oC dan tekanan uapnya hingga 2-4 atm.Alat tersebut merupakan ruang uap berdinding rangkap yang diisi dengan uap jenuh bebas udara dan dipertahankan pada suhu serta tekanan yang ditentukan selama periode waktu yang dikehendaki.Waktu yang diperlukan untuk sterilisasi tergantung pada sifat bahan yang akan disterilkan,Tipe wadah dan volume bahan.Kondisi yang baik digunakan untuk sterilisasi adalah 15 Psi dan temperatur 121oC selama 15 menit.Agar penggunaan autoklaf efektif,uap air harus dapat menembus setiap alat yang disterilkan.Oleh karena itu,autoklaf tidak boleh terlalu penuh,agar uap air benarbenar menembus semua area.prinsip dari autoklaf ini adalah menggunakan panas dan uap air. 2.Oven Merupakan alat sterilisasi yang menggunakan udara kering.Alat sterilisasi ini digunakan untuk mensterilkan alat-alat



FAKULTAS FARMASI-INSTITUT SAINS DAN TEKNOLOGI NASIONAL



Page 3



gelas seperti erlenmeyer,cawan petri,tabung reaksi dan gales lainnya.Bahan-bahan lainnya seperti kapas,kain,kertas juga dapat disterilkan dalam oven tetapi dalam temperatur tertentu.Pada umumnya temperatur yang digunakan cara kering biasanya 140-170oC selama paling sedikit adalah 2 jam.Lamanya sterilisasi tergantung pada jumlah alat yang disterilkan dan ketahanan alat terhadap panas. 3.Inkubator Alat sterilisasi yang digunakan untuk menginkubasi atau mengerami suatu biakan.Inkubator memiliki alat pengaturan suhu sehingga temperatur dapat diatur sesuai biakan yang akan diinkubasi.Pada awal suhu yang dipertahankan oleh alat ini berada pada kisaran suhu efektif organisme yaitu sekitar 37o41oC.Berfungsi untuk menumbuhkan



untuk menggambarkan langkah yang diambil agar mencapai tujuan meniadakan atau membunuh semua bentuk kehidupan mikroorganisme (Gabriel, 1996). Cara sterilisasi yang tepat tergantung pada jenis dan sifat bahan yang disterilkan. Macam-macam sterilisasi : 1. Sterilisasi Kering Sterilisasi kering atau sterilisasi panas kering dapat diterapkan dengan cara pemanasan langsung melewatkan di atas nyala api, pembakaran dan sterilisasi dengan udara panas (oven). a. Api Api digunakan untuk mensterilisasi peralatan seperti jarum inokulasi, kaca objek,



bakteri pada suhu tertentu,menumbuhkan ragi dan jamur,menyimpan biakan murni mikroorganisme pada suhu rendah.



pinset, mulut tabung biakan,



4.Bunsen



dibakar kembali untuk



Alat ini merupakan alat yang jika dinyalakan berbentuk api yang fungsinya untuk meminimalisi kontaminan yang terdapat pada kultur sel.Pada saat bekerja menggunakan nyala api berwarna biru yang bisa dilihat pada bagian tengahnya.Nyala api biru menghasilkan panas yang tinggi sehingga mikroorganisme dan partikel debu dipaksa naik keatas dan menjauhi area kerja.



menghilangkan sisa alkoholnya.



spatel, dan lain-lain. Sesudah dipijarkan atau kemudian



b. Sterilisasi panas kering Memerlukan suhu 160oC selama 2 jam. Sterilisasi panas kering terjadi melalui mekanisme konduksi panas. Panas akan diabsorpsi oleh permukaan luar



Pembahasan



alat yang disterilkan, lalu



Pada praktikum perlu dilakukan sterilisasi sebelum menggunakan alat dan bahan. Sterilisasi atau suci hama adalah suatu proses untuk membunuh segala bentuk kehidupan mikroorganisme yang ada di dalam sampel atau contoh, alat-alat atau lingkungan tertentu. Dalam bidang bakteriologi kata sterilisasi sering dipakai



merambat ke bagian dalam permukaan sampai mencapai suhu sterilisasi. Sterilisasi tersebut umumnya digunakan untuk alat yang terbuat dari kaca, misalnya: Erlenmeyer, Tabung



FAKULTAS FARMASI-INSTITUT SAINS DAN TEKNOLOGI NASIONAL



Page 4



reaksi, Cawan Petri, dan kurang



Cara ini ditujukan untuk sterilisasi



efektif dalam membunuh



bahan yang peka panas atau



mikroorganisme.



termolabil yang akan rusak atau



2. Sterilisasi Basah Sterilisasi basah atau sterilisasi panas lembab dapat diterapkan dengan cara pemanasan dengan membuat uap air dengan tekanan (autoklaf) pada suhu yang tinggi. Pelepasan energi uap pada sterilisasi basah bertekanan mengakibatkan denaturasi atau koagulasi protein sel mikroba sehingga melemahkan aktivitas mikroba. Sterilisasi menggunakan autoklaf merupakan cara yang paling baik karena uap air panas dengan tekanan tinggi menyebabkan penetrasi uap air ke dalam sel- sel mikroba menjadi optimal sehingga langsung mematikan mikroba. Sterilisasi ini digunakan untuk alat yang terbuat dari kaca dan bahan/media,



terurai oleh suhu tinggi. Contohnya antibiotik, enzim, asam amino, vitamin, senyawa gula, dan lain-lain. Sterilisasi secara mekanik tersebut dilakukan penyaringan menggunakan filter yang mempunyai pori sangat halus (0,220,45 µm), dan pompa vakum digunakan untuk menyedot sehingga larutan akan melalui filter dengan lancar. Beberapa macam filter yang biasa digunakan antara lain : a.Filter Chamberland-Pasteur Filter ini berbentuk seperti lilitan yang terbuat dari porselen berpori halus. b.Fiber Gelas Fiber ini berupa piringan yang terdiri dari butiran-butiran gelas yang pori-porinya sangat halus.



misalnya Erlenmeyer, tabung reaksi, cawan petri, PDA, NA. 3. Sterilisasi Uap Steriliasasi dengan alat ini dilakukan pada suhu 100oC dan harus diulang 3 kali berturutturut dengan selang waktu satu hari. Cara ini disebut juga dengan sterilisasi diskontiu atau sterilisasi bertingkat.



a. Filter Seitz Lembaran filter ini terbuat dari asbes dengan ukuran pori tertentu. Filter ini diletakkan dalam bejana anti karat. Semua filter, anti karat dan labu hisap disterilkan terlebih dahulu sebelum digunakan.



4. Penyaringan (Filtrasi) FAKULTAS FARMASI-INSTITUT SAINS DAN TEKNOLOGI NASIONAL



Page 5



Selain sterilisasi alat dan media, prosedur kerja mikrobiologi lainnya dikenal dengan teknik aseptis. Teknik aseptis bertujuan untuk mengurangi keberadaan mikroba kontaminan. Teknik aseptis dilakukan setiap kegiatan/pekerjaan yang berhubungan dengan mikroba, yaitu dengan menyemprot seluruh bagian dalam LAF dengan alkohol 70%, memijarkan jarum Ose di atas api Bunsen, memutar cawan petri saat dibuka dan mulut tabung reaksi saat dibuka sebelum atau sesudah digunakan di dekat api Bunsen.



Noor Saputera,Nurkamalia,Zuraidah,Qomariah, Roy Hidayatullah,Rancang Bangun Alat Sterilisasi Kesehatan Berbasismart Relay Zelio SR2B12IJD.Banjarmasin.2018 Ririn Andriani,Pengenalan Alat-alat Laboratorium Mikrobiologi Untuk mengatasi Keselamatan Kerja dan Keberhasilan Praktikum.Universitas Halu Oleo.Maret 2016 Ika Yudianti,Suprapti,Hapitoyo,Perbandingan Efektifitas Sterilisasi Panas Kering dan Desinfeksi Tingkat Tinggi Teknik Rebus terhadap Pertumbuhan Bakteri Ecoli,Malang.2015



Pada



praktikum ini dilakukan semua uji sterilisasi . KESIMPULAN Berdasarkan dari penelitian diatas dapat disimpulkan bahwa sterilisasi sangat berperan penting untuk mrnghilangkan mikroorganisme yang tumbuh.Jenis-jenis sterilasi yang digunakan adalah sterilisasi panas / kering ,sterilisasi basah ,sterilisasi uap, penyaringan (filtrasi),contoh dari sterilisasi panas adalah oven dan sterilisasi kering adalah autoklaf.Pemilihan teknik sterilisasi didasarkan pada sifat dari benda itu sendiri. DAFTAR PUSTAKA Buku penuntun praktek Fakultas farmasi ISTN



mikrobiologi



Mohammad Yusuf,Ir.Welina Ratnayanti,Akif Rakhmatillah.Rancang Bangun Sistem Sterilisasi Alat-alat Kedokteran secara Otomatis.Universitas Airlangga.



FAKULTAS FARMASI-INSTITUT SAINS DAN TEKNOLOGI NASIONAL



Page 6



Lampiran



3.



A. Peralatan 1.Autoklaf



Fungsi: menyimpan dan ditumbuh biakan mikroorganisme pada suhu tertentu.



Fungsi : untuk steriliasi basah (medium/larutan), alat gelas, metal berpanas tinggi.



Inkubator



4. Pembakar Spirtus (Bunsen) 2.Oven Fungsi : untuk mensterilisasi alat-alat dari kaca atau peralatan gelas (sterilisasi kering)



Fungsi : untuk mensterilisasi jarum tanam, pinset dan peralatan gelas yang digunakan saat bekerja.



FAKULTAS FARMASI-INSTITUT SAINS DAN TEKNOLOGI NASIONAL



Page 7