Bab Fix [PDF]

Citation preview

HALAMAN PENGESAHAN Proposal ini diajukan oleh



:



Nama



: Nadhiffa Anisa



NPM



: 1543050116



Program studi



: Ilmu Farmasi



Judul Proposal



: Formulasi, Stabilitas, Dan Aktivitas Antibakteri



Sediaan Obat Kumur Dari Ekstrak Etanol 96% Daun Ciplukan ( Physalis angulata L. ) Terhadap Bakteri Streptococcus mutans



Telah disetujui sebagai bagian persyaratan yang diperlukan untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Ilmu Farmasi Fakultas Farmasi Universitas 17 Agustus 1945 Jakarta.



DEWAN PENGUJIPembimbing : Dra. Lilih Riniwasih K, M.Farm., Apt (



Ditetapkan di



:



Tanggal



:



i



)



KATA PENGANTAR



Puji syukur atas ke hadirat Allah SWT yang telah melimpahkan nikmat, rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan proposal ini dengan judul “Formulasi, Stabilitas, Dan Aktivitas Antibakteri Sediaan Obat Kumur Dari Ekstrak Etanol 96% Daun Ciplukan ( Physalis angulata L. ) Terhadap Bakteri Streptococcus mutans”. Penulisan proposal ini merupakan salah satu syarat guna meraih gelar Sarjana Ilmu Farmasi pada Program Studi Ilmu Farmasi Fakultas Farmasi, Universitas 17 Agustus 1945 Jakarta. Dalam penyusunan proposal ini, saya selaku penulis menyadari bahwa dalam penyelesaian proposal skripsi ini bukanlah semata-mata hanya karena usaha dari penulis sendiri, melainkan banyak sekali dukungan yang penulis dapat dari berbagai pihak. Dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan terimakasih kepada semua pihak yang telah membantu baik secara langsung maupun tidak langsung. Peneliti mengucapkan terima kasih sebesar-besarnya kepada pihak-pihak berikut: 1. Bapak Dr. Hasan Rachmat M, DEA., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas 17 Agustus 1945 Jakarta. 2. Bapak Drs. Stefanus Lukas, MARS., Apt. selaku Ketua Program Studi Fakultas Farmasi Universitas 17 Agustus 1945 Jakarta. 3. Ibu Dra. Lilih Riniwasih Kadiwijati, M.Farm., Apt. selaku dosen pembimbing skripsi yang senantiasa sabar membantu, membimbing, mengarahkan dan selalu meluangkan waktunya untuk membimbing peneliti dalam penulisan proposal skripsi ini. 4.



Dosen-dosen yang telah memberikan lmu yang bermanfaat selama penulis Menempuh Pendidikan di Fakultas Farmasi Universitas 17. Agustus 1945 Jakarta



ii



5. Kedua orang tua dan adikku yang selalu memberikan doa, dukungan, dan semangat yang tiada henti sehingga penulis dapat menyelesaikan proposal ini dengan baik. 6. Andi Riandi Adlan yang telah memberi nasihat, doa, serta motivasi kepada penulis. 7. Teman-teman satu bimbingan yaitu Shinta Yusnita, David Tanujaya, Ewaldo dan Euis yang telah menjadi tempat bertukar pikiran dan saling membantu satu sama lainnya. 8. Sahabatku, Titi Novi Yanti yang senantiasa memberi dukungan, menghibur dan menemani penulis dalam menyelesaikan proposal ini. 9. Sahabatku sedari awal berkuliah yaitu Chairunissa Herzegovina, Kintan Regita, dan Yustika Alma 10. Rekan-rekan penelitian Fakultas Farmasi Universitas 17 Agustus 1945 Jakarta, terutama angkatan 2015 atas kerja sama, bantuan, dan motivasi selama penulisan proposal skripsi ini. Penulis menyadari bahwa skripsi ini sepenuhnya jauh dari kesempurnaan dan memiliki banyak kekurangan. Oleh karena itu, penulis sangat mengaharapkan kritik dan saran yang membangun dalam upaya penyempurnaan proposal skripsi ini. Demikianlah ucapan terima kasih dan harapan peneliti. Bila ada kesalahan katakata, pengejaan ataupun pengucapan dalam penulisan proposal skripsi ini, penulis memohon maaf yang sebesar-besarnya kepada pembaca dan pihak-pihak terkait.



Jakarta, Nadhiffa Anisa



iii



DAFTA ISI HALAMAN PENGESAHAN .............................................................................. ii KATA PENGANTAR ......................................................................................... ii DAFTAR ISI ...................................................................................................... iv DAFTAR GAMBAR ........................................................................................ viii DAFTAR TABEL .............................................................................................. ix BAB I PENDAHULUAN .................................................................................... 1 1.1 Latar Belakang ........................................................................................... 1 1.2 Perumusan Masalah .................................................................................... 4 1.3 Tujuan Penelitian ........................................................................................ 5 1.4



Manfaat Penelitian ................................................................................. 5



1.5



Hipotesis ................................................................................................ 6



BAB II TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................... 7 2.1 Tanaman Ciplukan ( Physalis angulata L. ) ................................................. 7 2.1.1 Klasifikasi Tanaman Ciplukan ( Physalis angulataL.) ............................. 7 2.1.2 Deskripsi Tanaman .................................................................................. 7 2.1.3 Nama Lain ............................................................................................... 9 2.1.4 Morfologi Tanaman ............................................................................... 10 2.1.5 Kandungan Tanaman ............................................................................. 10 2.2 Karies Gigi ............................................................................................... 12 2.2.1 Pengertian Karies Gigi ........................................................................... 12 2.2.2 Etiologi Karies ....................................................................................... 14 2.2.3 Mekanisme Terjadinya Karies ............................................................... 16 2.3 Ekstraksi................................................................................................... 17 2.3.1 Definisi Ekstraksi .................................................................................. 17



iv



2.3.2 Jenis jenis ekstraksi ............................................................................... 17 2.3.2.1 Ekstraksi Cara Dingin ......................................................................... 17 2.3.2.2 Ekstraksi Cara Panas ........................................................................... 18 2.4 Penapisan Fitokimia ................................................................................. 19 2.5 Bakteri...................................................................................................... 23 2.5.1 Definisi Bakteri ..................................................................................... 23 2.5.2 Klasifikasi Bakteri ............................................................................... 24 2.6 Streptococcus mutans ............................................................................... 25 2.6.1 Klasifikasi Streptococcus mutans ........................................................... 26 2.6.2 Deskripsi Streptococcus mutans ............................................................. 26 2.6.3 Morfologi Streptococcus mutans ............................................................ 27 2.6.4 Uji Aktivitas Antibakteri........................................................................ 28 2.7 Obat Kumur .............................................................................................. 30 2.7.1 Komposisi obat kumur .......................................................................... 31 2.7.2. Uraian Bahan Penyusun Formulasi Obat Kumur ................................... 32 Antibakteri ..................................................................................................... 32 2.8. Mekanisme kerja Antibakteri ................................................................... 33 2.8.1 Mekanisme kerja Antibakteri ................................................................. 34 2.9 Chlorhexidine ........................................................................................... 35 2.10 Evaluasi Formula ................................................................................. 36 2.10.1 Uji Stabilitas Sediaan .......................................................................... 36 2.10.2 Uji pH Sediaan Obat Kumur ............................................................... 36 2.10.3 Uji Homogenitas .................................................................................. 37 2.10.4



Uji Kejernihan ................................................................................. 37



BAB III METODE PENELITIAN ..................................................................... 38



v



3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ................................................................... 38 3.1.1 Tempat Penelitian .................................................................................. 38 3.1.2 Waktu Penelitian ................................................................................... 38 3.2 Alat dan Bahan ......................................................................................... 38 3.2.1 Alat ....................................................................................................... 38 3.2.2 Bahan .................................................................................................... 38 3.3 Prosedur Kerja .......................................................................................... 39 3.3.1 Persiapan Simplisia ................................................................................ 39 3.3.2 Pembuatan Ekstrak Etanol 96% Daun Ciplukan ( Physalis angulata L.) dengan Metode Maserasi ................................................................................ 40 3.3.3 Pemeriksaan Karakteristik Ekstrak Etanol 96% ..................................... 40 Daun Ciplukan ( Physalis angulata L. ) .......................................................... 40 3.3.3.1Perhitungan Rendemen ........................................................................ 40 3.3.3.2 Pemeriksaan Organoleptis ................................................................... 41 3.3.3.3 Pengujian Susut Pengeringan .............................................................. 41 Pengujian Kadar Air ....................................................................................... 41 3.3.4 Skrining Fitokimia ................................................................................. 42 3.3.5 Pembuatan Pelarut, larutan dan Media .................................................. 44 3.3.5.1 Pembuatan Media Kultur ( Mueller Hinton Agar Darah ) untuk Bakteri Uji .................................................................................................................. 44 3.3.5.2 Pembuatan larutan Standar Mc.Farland 0,5 ......................................... 44 3.3.5.3 Larutan Natrium Klorida 0,9% ............................................................ 45 3.3.6 Peremajaan Bakteri Uji .......................................................................... 45 3.3.7 Sterilisasi Alat ....................................................................................... 45 3.3.8 Pewarnaan Gram Bakteri ....................................................................... 46



vi



3.3.9 Penyetaraan Standar Kekeruhan Suspensi Bakteri .................................. 46 3.3.10 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Etanol 96% Daun Ciplukan dengan Berbagai Varian Konsentrasi .......................................................................... 46 3.3.11 Pembuatan Formulasi Sediaan Obat Kumur Ekstrak Etanol 96% Daun Ciplukan ( Physalis angulate L.) ..................................................................... 47 3.3.11.1 Pembuatan Sediaan Obat Kumur ....................................................... 48 3.3.12 Pembiakant Bakteri Uji Streptococcus mutans ..................................... 48 3.3.13 Pengujian Aktivitas Antibakteri Larutan Ekstrak dan Sediaan Obat Kumur Ekstrak Etanol 96% Daun Ciplukan (Physalis angulata L.) ................ 49 3.3.14 Evaluasi Stabilitas Formula .................................................................. 49 3.3.14.1 Uji Stabilitas ..................................................................................... 49 3.3.14.2 Uji Homogenitas ............................................................................... 49 3.3.14.3 Uji Kejernihan .................................................................................. 50 3.3.14.4 Uji pH ............................................................................................... 50 3.3.15 Analisa Data ........................................................................................ 50 DAFTAR REFERENSI ..................................................................................... 53



vii



DAFTAR GAMBAR Gambar 2. 1 Tanaman Ciplukan (Ravianto, 2017) ................................................ 7 Gambar 2. 2 kerangka C6 -C3 FLAVANOID .................................................... 11 Gambar 2. 3 Gigi yang sehat dan bersih ............................................................. 13 Gambar 2. 4 Karies Gigi .................................................................................... 14 Gambar 2. 5 streptococcus mutans (Sofia D. Forssten *, Marika Björklund and



Arthur C. Ouwehand, 2010) ............................................................................... 26



viii



DAFTAR TABEL Tabel 2. 1 Zona hambatan pertumbuhan bakteri ................................................. 29



Tabel 3. 2 Komposisi Obat Kumur .................................................................... 47



ix



BAB I PENDAHULUAN



1.1 Latar Belakang Indonesia dianugerahi banyak tumbuhan yang dapat berguna sebagai obat, tersebar di berbagai daerah di Indonesia, dengan banyak manfaat yang terkandung. Saat ini ada yang sudah dimanfaatkan dengan baik ada juga yang masih tahap penelitian bahkan masih banyak pula yang belum terekspos kekhalayak luas. Pengetahuan tentang tumbuhan obat merupakan warisan budaya bangsa secara turun temurun. Salah satu tanaman asli Indonesia yang mempunyai banyak manfaat dan memiliki potensi untuk diteliti adalah ciplukan (Physalis angulata L.). Tanaman ciplukan ialah salah satu tanaman berkhasiat obat yang mudah dijumpai di berbagai daerah, hal ini dikatakan oleh (Oktavia, Surya, & Yarman2, 2016), Tumbuhan ciplukan biasanya tumbuh liar, mudah dijumpai di tempat yang terlindung, di tanah agak lembab, di kebun, ladang, sawah, tepi jalan, tepi hutan yang terbuka yang disinari terik matahari dan di sela-sela tanaman pokok. Herba ciplukan tumbuhan liar di dataran rendah hingga 1800 meter diatas permukaan laut (mdpl) (Dalimartha, 2006). Selama ini ciplukan sudah banyak digunakan dalam pengobatan, antara lain untuk penyembuhan luka, radang hati, malaria, penyakit kelamin, rematik, sakit telinga, selain itu juga bersifat analgetik, detoksikan (penghilang



1



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



2



racun), antitumor, dan menghambat pertumbuhan kanker terutama kanker usus besar (Aldi, Aria, & Erman, 2014). Tanaman ciplukan merupakan tanaman yang mengandung Flavonoid yang memiliki manfaat pencegah bakteri, (Parubak, 2013) . Berdasarkan penelitian fitokimia, diketahui bahwa akar dan batang tanaman ciplukan mengandung saponin dan flavonoid. Daun ciplukan kaya akan polifenol, alkaloid, dan flavonoid. Bahan aktif tersebut dilaporkan mempunyai aktivitas antimikroba yang cukup baik (Dwi Fitrianti AR, 2011) Berbagai senyawa aktif yang terkandung dalam tanaman ciplukan ini salah satunya terdapat pada bagian daunnya. (Nurul Latifah, 2014) menyatakan bahwa daun ciplukan



mengandung



senyawa



glikosida



flavonoid



(luteolin). Luteolin adalah salah satu kelompok zat yang disebut bioflavonoid (secara khusus, flavanone). Dimana senyawa tersebut memiliki banyak manfaat, diantaranya sebagai senyawa antioksidan, antikanker, antiinflamatori, antidiabetes, antialergi, antivirus dan antibakteri (Lutimax, 2011) Hal ini diperkuat oleh (Xie, 2010) yang menyatakan bahwa



sebagai



antibakteri,



senyawa



luteolin



akan



menghambat aktivitas DNA topoisemerase I dan II, yang akan mengakibatkan beberapa penurunan asam nukleat dan sintesis



protein.



Luteolin



dapat



mempengaruhi



permeabilitas membran bakteri, tetapi tidak merusak integritas



membran langsung.



Hasil dari beberapa



penelitian menunjukan bahwa luteolin dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus s (Xie, 2010) (Cheng, 2009); (Lutimax, 2011).



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



3



Kepedulian masyarakat terhadap kesehatan mulut dan gigi di Indonesia masih cukup rendah terutama di daerah tertinggal atau daerah yang masih terisolasi maupun jauh dari tempat berobat yang memadai, hal ini dapat dilihat dari banyaknya kasus penyakit yang berhubungan dengan gigi maupun mulut. Karies merupakan penyakit yang masih umum ditemukan di Indonesia, hal ini terungkap dalam (Made Asri Budisuari1, 2010). Mikroorganisme yang paling



banyak



tumbuh



pada



rongga



mulut



ialah



Streptococcus sp, yang berperan dalam tahap awal terjadinya karies pada gigi. Pada plak gigi, ditemukan koloni bakteri Streptococcus (Pratiwi S. , 2008). Streptococcus mutans ialah bakteri gram positif yang bersifat anaerob dan merupakan salah satu golongan dari Streptococcus viridians. Streptococcus mutans merupakan bakteri asidogenik yang dapat menghasilkan senyawa asam pada gigi, sehingga dapat menyebabkan deklasifikasi. ( kehilangan kalsium ) dan ter-kikisnya permukaan gigi yang akan mengakibatkan terjadinya karies gigi (Putri dkk., 2010). Obat kumur dapat di definisikan sebagai suatu sediaan larutan dengan rasa yang nyaman, mengandung antimikroba dan juga berguna untuk menyegarkan rongga mulut (RACHMA, 2010). Penggunaan obat kumur sebagai bantuan dalam kebersihan rongga mulut ialah hal yang terbilang relatif baru bagi negara-negara berkembang di dunia (Kamal Rai Aneja, 2010). Beberapa upaya yang dapat dilakukan dalam mencegah penumpukan bakteri penyebab karies gigi yaitu salah satunya dapt



dilakukan dengan



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



4



membersihkan rongga mulut dan gigi menggunakan obat kumur. Dalam penggunaannya, obat kumur merupakan sediaan yang sangat praktis. Penelitian sebelumnya sudah dilakukan penelitian sebagai antibakteri dalam bentuk sediaan obat kumur terhadap bakteri Staphylococcus aureus secara in. (Vitasari, 2012) juga melakukan penelitian terhadap daun ciplukan dan menyatakan ekstrak etanol daun ciplukan efektif menghambat P. Aeuruginosa dan Staphylococcus aureus. Berdasarkan latar belakang diatas,



maka penulis



melakukan penelitian mengenai potensi daya antibakteri ekstrak etanol 96% daun ciplukan (Physalis angulata L.) dari senyawa aktif yang terkandung dalam daun ciplukan terhadap bakteri Streptococcus mutans. 1.2 Perumusan Masalah Berdasarkan latar belakang yang telah diuraikan, maka terdapat beberapa masalah sebagai berikut : 1. Apakah ekstrak etanol 96% daun ciplukan ( Physalis angulata



L.) mempunyai aktivitas antibakteri



terhadap bakteri Streptococcus mutans ? 2. Apakah dengan perbedaan konsentrasi ekstrak etanol 96% daun ciplukan ( Physalis angulata L. ) dalam bentuk sediaan obat kumur mempunyai aktivitas antibakteri erhadap bakteri Streptococcus mutans ? 3. Apakah perbedaan konsentrasi ekstrak etanol 96% daun ciplukan ( Physalis angulata L. ) pada uji stabilitas dalam sediaan obat kumur menunjukan stabilitas yang terbaik?



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



5



1.3 Tujuan Penelitian 1. Mengetahui kemampuan aktivitas antibakteri ekstra etanol 96% daun ciplukan ( Physalis angulata L.) terhadap bakteri Streptococcus mutans 2. Membandingkan dan mencari konsentrasi terbaik ekstrak etanol 96% daun ciplukan ( Physalis angulata L) dalam bentuk sediaan obat kumur terhadap bakteri Streptococcus mutans 3. Mengetahui stabilitas yang terbaik pada berbagai varias konsentrasi ekstrak etanol 96% daun ciplukan ( Physalis angulata L. ) 1.4 Manfaat Penelitian 1. Manfaat Bagi Peneliti Menambah pengetahuan tentang jenis tanaman asli Indonesia



yang



memiliki



kandungan



obat



didalamya, serta memenuhi persyaratan tugas akhir di Universitas 17 Agustus 1945 untuk menjadi sarjana farmasi. 2. Manfaat bagi Intitusi Pendidikan Menjadi bahan acuan ke depanya untuk dunia Pendidikan, khsusunya dunia farmasi mengenai manfaat kandungan didalam tanaman ciplukan untuk mencegah penyebaran bakteri yang dapat menyebabkan penyakit karies pada gigi 3. Manfaat Bagi Masyarakat Penelitian ini diharapkan dapat diterapkan secara dunia nyata dan dapat membantu permasalahan kesehatan gigi yang terjadi di Indonesia



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



6



1.5 Hipotesis Ekstrak etanol 96% daun ciplukan ( Physalis angulata L. ) memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Streptococcus mutans penyebab karies gigi dan dapat diformulasikan menjadi sediaan solid dalam bentuk obat kumur.



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



BAB II TINJAUAN PUSTAKA



2.1 Tanaman Ciplukan ( Physalis angulata L. )



GAMBAR 2. 1 TANAMAN CIPLUKAN (RAVIANTO, 2017) 2.1.1



Klasifikasi



Tanaman



Ciplukan



(



Physalis



angulataL.) Menurut (Steenis., 1997) klasifikasi tanaman Ciplukan ( Physalis angulata L. )



adalah sebagai berikut :



Divisio



: Spermatophyta



Sub divisio



: Angiospermae



Classis



: Dicotyledoneae



Sub classis



: Sympetalae



Familia



: Tubiflorae (Solanales, Personatae)



Ordo



: Solanaceae



Genus



: Physalis



Species



: Physalis angulata L.



2.1.2 Deskripsi Tanaman Tanaman ciplukan merupakan tanaman obat yang berasal dari indonesia dan mengandung banyak manfaat dan khasiat untuk menyembuhkan beberapa penyakit,



7



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



8



(Topik Hidayat, 2017), Ciplukan (Physalis angulata) adalah herbal milik family Solanaceae.Tumbuhan Ciplukan merupakan tumbuhan semak yang tumbuh musiman, dan tersebar luas diwilayah tanah-tanah kosong bertanah lembab namun tidak becek dan tergolong sebagai tanaman liar. Tumbuhan ini dapat ditemukan pada sebagian besar benua di daerah tropis termasuk Afrika, Asia, dan Amerika. Ciplukan



dapat



tumbuh



dengan



baik



pada



ketinggian tanah sekitar 1 - 1.550 meter diatas permukaan laut. Tumbuhan ciplukan tumbuh tegak dengan tinggi dengan tinggi tanaman antara sekitar 0,1 – 1 meter. Batang pokoknya tidak jelas, bersegi tajam, berongga, berusuk, bagian yang hijau berambut pendek atau boleh Di Indonesia, Ciplukan adalah tanaman salah satu tanaman local yang popular, meskipun daerah berbeda memiliki nama yang berbeda untuk itu, seperti Cecenet / Cecendet (Jawa Barat), Nyurnyuran (Madura), dan Kopokkopokan (Bali). Bertahun-tahun, Orang Indonesia telah menggunakan Ciplukan sebagai makanan dan sebagai obat tradisional.



(RetnoWindya



Kusumaningtyasa,



2015),



Tanaman ini tersebar luas di seluruh wilayah tropis dan subtropis di dunia. Ekstrak atau infusnya telah digunakan di banyak negara sebagai obat populer untuk perawatan berbagai macam penyakit seperti malaria, asma, hepatitis, dermatitis dan rematik. (Sri Luliana, 2017). Bagian-bagian dari tanaman ciplukan memiliki manfaat tertentu. Buah ciplukan yang memiliki rasa manis keasaman memiliki fungsi sebagai obat epilepsi, penyakit kuning, dan sulit untuk buang air kecil. Daun ciplukan



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



9



sering digunakan untuk bisul, borok, patah tulang, penguat jantung, keseleo, nyeri perut, dan kencing nanah. Akar tanaman ciplukan umumnya digunakan sebagai obat cacing dan penurunan demam (Nurul Latifah, 2014). Ciplukan (Physalis angulata L.) merupakan tanaman perdu yang termasuk famili Solanaceae. Secara empiris P. angulata L. digunakan untuk mengobati influenza, radang tenggorokan, batuk, radang saluran napas, radang gusi, gondokan, radang testis, hipertensi, dan diabetes. Di beberapa negara tanaman ciplukan digunakan sebagai khasiat yang lain, (Sri Luliana, 2017), Rebusan daun P. angulata L. digunakan masyarakat Brazil sebagai obat radang kandung kemih, limfa, dan ginjal. Selain itu masyarakat di Brazil memanfaatkan daun dan seluruh bagian tanaman tersebut untuk mengobati inflamasi. Di nigeria secara tradisional seluruh bagian tanaman digunakan untuk diuretik, penyakit hati, malaria, susah tidur dan tumor. Ciplukan juga merupakan tanaman yang mengandung antibakteri, Studi etnofarmakologi terbaru menunjukkan hal itu Physalis angulata L. digunakan di banyak bagian dunia untuk mengobati beberapa penyakit, sebagai antikanker, antibakteri, untuk diabetes, pengobatan malaria, anemia dan mengurangi demam (Elsa RENGIFO-SALGADO, 2013). 2.1.3 Nama Lain Morel berry (Inggris), Ciplukan (Indonesia), Ceplukan (Jawa), Cecendet (Sunda), Yor-yoran (Madura), Lapinonat (Seram), Angket, Kepok-kepokan, Keceplokan (Bali), Dedes (Sasak), Leletokan (Minahasa).



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



10



2.1.4 Morfologi Tanaman Ciplukan ( Physalis angulata L. ) merupakan tanaman tahunan atau musiman dengan tinggi 0,1 – 1 m. Batang pokoknya tidak jelas, percabangan menggarpu, berusuk, bersegi tajam, dan berongga. Bunga dan buah ciplukan keluar dari pangkal, buahnya berbentuk seperti lampion, bila sudah matang akan berwarna kuning dan mempunyai rasa manis keasaman. Daunnya tunggal, bertangkai, bagian bawah tersebar, helaian berbentuk bulat telur – bulat memanjang dengan ujung berbentuk runcing, ujung daun tidak sama ( runcing-tumpul-membulatmeruncing). Tepi daun rata atau bergelombang bergigi dengan ukuran daun 5-15 x 2,5-10,5 cm (Nurul Latifah, 2014). 2.1.5 Kandungan Tanaman Tanaman ciplukan memiliki banyak kandung senyawa yang terkandung di dalamnnya, Physalis angulata L. / Ciplukan kaya akan polifenol dan flavonoid dimana flavonoid merupakan salah satu antioksidan yang terdapat dalam tumbuhan yang diperlukan oleh tubuh. Ciplukan juga mengandung komponen aktif physalins, withanolides, phytosterolsand polyunsaturated fatty acids misalnya asam linoleat dan asam oleat yang memberi sifat antioksidan dan hipokolesterolemik (Nur Lailatul Fitri, 2016). Tanaman ciplukan mempunyai banyak manfaat terutama dalam bidang obat-obatan dengan kandungan kimia antara lain glikosida flavonoid, alkaloid, saponin, fisalin, withangulati A, protein, minyak lemak, asam falmitat,



asamasetat.



Tanaman ciplukan



merupakan



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



11



tanaman yang mengandung Flavonoid yang memiliki manfaat pencegah bakteri, (Parubak, 2013) .



GAMBAR 2. 2 KERANGKA C6 -C3 FLAVANOID Tanaman ciplukan juga memilki khasiat antibakteri karena terkandung flavonoid, flavonoid adalah senyawa polifenol yang sesuai dengan struktur kimianya terdiri dari flavonol, flavanon, isoflavon, katekin, antosianidin dan kalkon. Flavonoid berfungsi merusak susunan dan perubahan mekanisme permeabilitas dari dinding sel bakteri. Dan kandungan yang lain yaitu senyawa alkaloid, saponin, tanin, glikosida dan steroid. Saponin yang terkandung dalam ceplukan memberi rasa pahit dan berkhasiat



sebagai



anti



tumor



dan



menghambat



pertumbuhan kanker usus besar (Anonimus, 2010). Artikerl lain yang menerangkan bahwa tanaman ciplukan terdapat kandungan anti bakteri, Ciplukan terbukti sebagai tanaman yang memiliki daya antihiperglikemi, antibakteri, antivirus, imunostimulan dan imunosupresan, antiinflamasi,



antioksidan,



dan



analgesik.



Tanaman



ciplukan kaya akan senyawa-senyawa aktif yang antara lain pada daun terdapat kandungan flavanoid, polifenol, fisalin, asam



klorogenik,



sedangkan



di



buah



terdapat



Withangulatin A, tannin, kriptoxantin, vitamin C dan gula,



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



12



dan pada akar terdapat kandungan alkaloid dan flavanoid . Selain itu, tumbuhan ini memiliki kandungan yang dapat digunakan sebagai obat kencing manis, sakit paru-paru, ayan, borok (Pratika Viogenta, 2017). Beberapa penelitian juga membuktikan bahwa, tanaman ciplukan terdapat antibakteri, Dari hasil penelitian yang telah dilakukan baik secara invivo maupun invitro, didapatkan infomrasi bahrva ciplukan memiliki aktivitas sebagai anti hiperglikemi, antibakteri, antivirus, imunomodulator, anti inflamasi, antioksidan dan dan anti sitotoks (Yufri Aldir, 2013).Daun ciplukan mengandung semua senyawa metabolit sekunder diantaranya flavonoid, alkaloid, steroid, tanin, saponin, antrakuinon dan terpenoid. Senyawa metabolit sekunder ini memiliki sifat antibakteri, pendenaturasi protein serta mencegah proses pencernaan bakteri, serta sebagai antimikroba dan antivirus. Ciplukan merupakan tumbuhan dari famili solanaceae yang lebih dikenal di Indonesia dengan nama ceplukan atau ciplukan. Physalis angulata L. terbukti sebagai tanaman yang memiliki daya anti hiperglikemi, antibakteri, antivirus, imunostimulan dan imunosupresan, antiinflamasi, antioksidan, dan analgesic (Widaryati, 2017) 2.2 Karies Gigi 2.2.1 Pengertian Karies Gigi Karies gigi ialah penyakit infeksi yang merusak struktur gigi yang menimbulkan berlubangnya gigi dan mengakibatkan



terganggunya



fungsi



pengunyahan



sehingga akan berdampak pada asupan makanan ke dalam tubuh apabila tidak ditangani secara serius. Karies gigi merupakan salah satu penyakit yang masih umum dijumpai



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



13



di Indonesia, khususnya daerah pedalaman atau pedesaan. Gigi merupakan jaringan tubuh yang mudah sekali mengalami kerusakan. Hasil Rikesdas (Dr. Triono Soendoro, 2007) menunjukkan prevalensi karies gigi di Indoneisa masih tinggi. Prevalensi karies aktif di Indonesia adalah 43,4% dengan indeks DMF-T secara nasional adalah sebesar 4,85. Ini berarti rata-rata kerusakan gigi pada penduduk Indonesia 5 buah gigi per orang. Umumnya karies gigi ini dapat terjadi akibat buruknya kebersihan mulut seseorang sehingga dapat meyebabkan terjadinya penumpukan plak pada gigi yang mengandung



berbagai



macam



bakteri.



Beberapa



mikroorganisme diketahui terlibat dalam pembentukan karies gigi, diantaranya ialah Streptococcus mutans, Lactobacillus acidophillus, Actinomyces odontolyticus. (Samaranayake



P.



L.,



2012)



menyatakan



bahwa



mikroorganisme yang banyak ditemukan pada rongga mulut manusia dan paling dominan sebagai penyebab karies gigi ialah Streptococcus mutans. Pada artikel lain juga menjelaskan Streptococcus mutans adalah penyebab utama karies, bakteri Streptococcus mutans merupakan bakteri utama penyebab terjadinya karies (Novita, Willia, 2016).



GAMBAR 2. 3 GIGI YANG SEHAT DAN BERSIH



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



14



Sumber : (anonymous, 2016)



GAMBAR 2. 4 KARIES GIGI SUMBER : (ANONYMOUS, 2016) 2.2.2 Etiologi Karies Ada tiga faktor utama yang memegang peranan yaitu faktor host atau tuan rumah, agen atau mikroorganisme, substrat atau makanan dan ditambah faktor waktu. Karies gigi terjadi apabila ketiga faktor utama tersebut ada dan saling mendukung. 1.



Host Struktur dari anatomi gigi terdiri dari lapisan



enamel yang terdapat pada bagian luar gigi dan lapisan dentin yang terletak dibawah lapisan enamel. Enamel ialah jaringan keras gigi yang dengan susunan kimia kompleks yang mengandung 97% mineral ( kalsium, fosfat, karbonat,fluor), air 1% dan bahan organic 2%. Enamel bersifat rapuh dan memiliki struktur sangat tipis (Arora M, 2009). Struktur enamel atau email serta akar gigi dapat mempengaruhi serangan karies karena perbedaan mineral yang terkandung didalamnya (Samaranayake L. S., 2006).. 2.



Mikrobiologi Factor mikroorganisme dipengaruhi oleh jumlah



bakteri dan plak yang menempel pada permukaan gigi.



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



15



Mikroorganisme yang paling banyak dijumpai pada permukaan



gigi



ialah



salah



satu



golongan



dari



Streptococcus viridans yakni Streptococcus mutans. Penebalan plak dapat menghambat fungsi saliva dalam menetralkan pH. Penurunan pH plak menurun sampai dibawah 5 dalam waktu 3-5 menit terjadi akibat tersedianya karbohidrat seperti sukrosa dan glukosa yang mudah meragi. Apabila penurunan pH terjadi berulang-ulang maka akan mengakibatkan dimulainya proses karies sebab permukaan



gigi



(Samaranayake



L.



akan S.,



mengalami 2006),



demineralisasi



(Ireland.,



2006)



,



(Samaranayake P. L., 2012). 3.



Substrat ( makanan ) Makanan dapat mempengaruhi pembentukan plak



di gigi. Bakteri penyebab karies akan memetabolisme sisa makanan yang menempel di permukaan gigi terutama yang berasal dari karbohidrat yang dapat difermentasikan. Karbohidrat memiliki peran penting dalam pembentukan asam untuk bakteri. Makanan dan minuman yang mengandung gula dapat menurunkan pH gigi dengan cepat sampai



mengakibatkan



email



gigi



mengalami



demineralisasi dan terjadi karies gigi (Samaranayake L. S., 2006), (Ireland., 2006), (Samaranayake P. L., 2012). 4.



Waktu Karies memerlukan waktu beberapa bulan bahkan



tahun untuk dapat berkembang secara progresif. Umumnya cukup bervariasi waktu yang dibutuhkan karies untuk berkembang menjadi suatu infeksi yaitu sekitar 6 – 48 bulan (Samaranayake L. S., 2006), (Ireland., 2006), (Samaranayake P. L., 2012).



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



16



2.2.3 Mekanisme Terjadinya Karies Dimulai dari kerusakan yang terjadi pada email gigi yang berlanjut pada dentin gigi. Terdapat 4 faktor yang saling mendukung ataupun berinteraksi dalam terjadinya karis pada gigi. Factor-faktor tersebut berupa host ( gigi ), substrat ( makanan ), waktu, dan mikroorganisme. Terbentuknya



plak



beserta



bakteri



penyusun



dan



karbohidrat ( sukrosa, glukosa, frukstosa, maltose ) merupakan awal terjadinya karies gigi. Karbohidrat seperti sukrosa dapat dibutuhkan bakteri untuk membentuk asam. Streptococcus mutans memiliki peranan yang sangat besar dalam terjadinya proses karies. Awalnya karbohidrat



yang dikonsumsi akan



difermentasikan oleh bakteri Streptococcus mutans dengan bantuan enzim glukosiltransferase membentuk asam (laktat) dan dextran. Dextran akan melekatkan asam pada permukaan email gigi. Asam ini kemudian akan masuk ke dalam email gigi, dengan kadar keasaman yang tinggi, asam ini akan mengakibatkan menurunnya pH gigi hingga pada angka kritis dimana angka kritis pada enamel sekitar 5,2 – 5,5 dan pada dentin sekitar 6,0. Penurunan pH ini akan meenyebabkan ion kalsium, fosfat, mineral pada gigi akan berdifusi keluar hingga akan memicu terbentuknya suatu rongga atau lubang pada gigi. Konsumsi karbohidrat secara berulang-ulang dapat membentuk asam dalam jumlah banyak sehingga mengakibatkan menurunnya pH dan akan memicu terjadinya proses karies (Samaranayake L. S., 2006), (Ireland., 2006), (Samaranayake P. L., 2012).



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



17



2.3 Ekstraksi 2.3.1 Definisi Ekstraksi Ekstraksi merupakan suatu proses penarikan atau pemisahan suatu zat aktif yang diinginkan dari suatu tanaman yang dapat larut sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan menggunakan pelarut yang sesuai (Departemen kesehatan, 2000). (Hanani, 2015) menyatakan bahwa ekstraksi atau penyarian merupakan proses pemisahan senyawa dari matriks atau simplisia dengan menggunakan pelarut yang sesuai. Peran ekstraksi dalam analisis fitokimia sangat penting karena sejak tahap awal hingga tahap akhir menggunakan proses ekstraksi, termasuk permunian dan fraksinasi. Ekstrak adalah suatu produk hasil pengambilan zat aktif melalui proses ekstraksi menggunakan pelarut yang sesuai, dimana pelarut yang digunakan diuapkan kembali hingga zat aktif ekstrak menjadi pekat dan memenuhi baku yang telah ditetapkan (Depkes, 2014). 2.3.2 Jenis jenis ekstraksi 2.3.2.1 Ekstraksi Cara Dingin Metode ekstraksi cara dingin bertujuan untuk menarik zat aktif yang terdapat dalam simplisa yang memiliki



sifat



tidak



tahan



terhadap



pemanasan



(Departemen kesehatan, 2000). Ekstraksi secara dingin dapat dilakuka dengan cara : 1. Maserasi Maserasi ialah proses ekstraksi yang dilakukan dengan cara merendam simplisia dala pelarut yang cocok selama waktu tertentu pada temperature ruangan ( kamar ) dengan



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



18



beberapa kali pengadukan atau pengocokan (Departemen kesehatan, 2000). 2. Perkolasi Perkolasi ialah proses ekstraksi dengan cara mengalirkan pelarut secara kontinyu sehingga pelarut yang digunakan selalu baru sampai sempurna selama waktu tertentu dan dalam suhu ruangan (Departemen kesehatan, 2000). 2.3.2.2 Ekstraksi Cara Panas Metode ekstraksi cara pana bertujuan untuk menarik zat yang terdapat dalam simplisia yang memiliki sifat tahan terhadap pemanasan (Departemen kesehatan, 2000). Ekstraksi ini dapat dilakukan dengan cara : 1.



Soxhletasi



Metode ini merupakan ekstraksi yang menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinyu dengan jumlah pelarut yang relative konstan dengan adanya pendinginan baik (Departemen kesehatan, 2000). 2.



Destilasi



Destilasi



adalah



metode pemisahan zat



cair



dari



campurannya berdasarkan perbedaan titik didih dari zat tersebut. Pada proses pendinginan, senyawa dan uap air akan terkondensasi dan terpisah menjadi destilat air dan senyawa yang diekstraksi. 3.



Dekok



Ekstraksi dengan cara dekok ialah menyari simplisia dengan pelarut air selama 30 menit dihitung setelah suhu mencapai 90°C (Departemen kesehatan, 2000). 4.



Infusa



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



19



Infusa merupakan ekstraksi yang menggunakan alat bejana infusa yang tercelup dalam penangas air dan menggunakan pelarut air pada suhu 96-98°C untuk menyari simplisia selama 15-20 menit (Departemen kesehatan, 2000). 5.



Refluks



Ekstraksi dengan cara refluks yaitu dengan menggunakan pelarut pada temperature titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relative konstan dengan adanya pendingin balik (Departemen kesehatan, 2000). 2.4 Penapisan Fitokimia Penapisan fitokimia atau skrining fitokimia adalah metode yang dilakukan untuk mengetahui komponen senyawa kimia tumbuhan yang memiliki aktivitas biologi. Penapisan fitokimia dimaksudkan sebagai pemeriksaan pendahuluan tentang kandungan kimia tumbuhan. Metode yang digunakan untuk skrining fitokimia yaitu dengan melihat reaksi pengujian warna dengan menggunakan suatu pereaksi warna. Hal yang berperan penting dalam skrining fitokimia adalah pemilihan pelarut dan metode ekstraksi (Kristanti, 2008). Menurut (Robinson, 1991) alasan lain melakukan fitokimia yaitu untuk menentukan ciri senyawa aktif penyebab efek racun atau efek yang bermanfaat, yang ditujukan oleh ekstrak tumbuhan kasar bila diuji dengan sistem biologis. Berikut ini merupakan senyawa metabolit sekunder yang umum terdapat pada tanaman: 1.



Flavonoid Adalah kelompok senyawa fenol terbesar yang ditemukan di alam terutama pada jaringan tumbuhan tinggi. Senyawa



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



20



ini merupakan produk yang terjadi dari sel dan terakumulasi dari tubuh tumbuhan sebagai zat racun (Robinson, 1991). Flavonoid umumnya terikat pada gula sebagai glukosida dan aglikon flavonoid. Identifikasi pada flavonoid yang terpenting yaitu uji warna dengan menggunakan serbuk Mg dan HCl pekat.. diantara flavonoid hanya flavalon yang menghasilkan warna merah ceri kuat (Harborne J. , 1984). 2. Alkaloid Alkaloid adalah suatu golongan senyawa yang tersebar luas hampir pada semua jenis tumbuhan. Semua alkaloid mengandung paling sedikit satu atom nitrogen yang biasanya bersifat basa dan membentuk cincin heterosiklik (Harborne J. , 1984). Alkaloid dapat ditemukan pada biji, daun, ranting dan kulit kayu dari tumbuhtumbuhan. Kadar alkaloid dari tumbuhan dapat mencapai 10-15%.



Identifikasi



alkaloid



dilakukan



dengan



ekstrak uji ditambahkan ammonia 30%, setelah itu tambahkan kloroform, saring campuran sampai didapat filtrat ( larutan A ). Larutan A



dipipet sebagian dan



ditambahkan larutan HCl 10% dengan pengocokan dalam tabung reaksi. Lalu pada bagian atasnya, dipipet (larutan B). Larutan A ditetesi beberapa tetes pada kertas saring, dan ditetesi pula pereaksi dragendorf, adanya senyawa alkaloid ditandai dengan terbentuk warna merah atau jingga pada kertas saring. Larutan B dibagi menjadi 2 tabung reaksi, lalu ditambahkan masing-masing pereaksi mayer dan dragendorf, terbentuknya endapan merah bata dengan perekasi dragendorf dan adanya endapan putih dengan pereaksi mayer menunjukkan adanya positif senyawa golongan alkaloid (Farnsworth, 1966).



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



21



3. Tanin tannin terdapat luas pada tumbuhan berpembuluh dan memiliki batang sejati. Fungsi dari tannin pada tumbuhan ialah sebagai penolak hewan pemakan tumbuhan. Oleh sebab itu sebagian besar tumbuhan yang mengandung tanin akan dihindari oleh hewan pemakan tumbuhan sebab rasanya yang pahit (Harborne J. , 1987). Secara kimia terdapat dua jenis tanin, yaitu: (1) tanin terkondensasi atau flavolan dan (2) tanin yang terhidrolisis. 1) Tanin terkondensasi atau flavolan Tersebar luas dalam tumbuhan angiospermae, terutama pada tumbuhan-tumbuhan berkayu. Nama lainnya adalah proantosianidin karena bila direaksikan dengan asam panas, beberapa ikatan karbon-karbon penghubung satuan terputus dan dibebaskanlah monomer antosianidin. Kebanyakan proantosianidin adalah prosianidin karena bila direaksikan dengan asam akan menghasilkan sianidin. Proantosianidin dapat dideteksi langsung dengan mencelupkan jaringan tumbuhan ke dalam HCl 2M mendidih selama setengah jam yang akan menghasilkan warna merah yang dapat diekstraksi dengan amil atau butil alkohol. Bila digunakan jaringan kering, hasil tanin agak berkurang karena terjadinya pelekatan tanin pada tempatnya didalam sel. 2). Tanin yang terhidrolisis Terbatas pada tumbuhan berkeping dua. Terutama terdiri atas dua kelas, yang paling sederhana adalah depsida galoiglukosa. Pada senyawa ini glukosa dikelilingi oleh lima gugus ester galoil atau lebih. Jenis kedua, inti molekul berupa senyawa dimer asam galat, yaitu asam heksa hidroksidifenat yang berikatan dengan glukosa. Bila



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



22



dihidrolisis menghasilkan asam angelat. Cara deteksi tanin terhidrolisis



adalah



dengan



mengidentifikasi



asam



galat/asam elagat dalam ekstrak eter atau etil asetat yang dipekatkan (Harborne J. , 1987). Identifikasi senyawa tannin dapat dilakukan dengan cara yaitu ekstrak uji ditambahkan air secukupnya, lalu dididihkan selama kurang lebih 15 menit, lalu setelah itu didinginkan, setelah dingin, disaring menggunakan kertas saring dan hasil filtrat yang didapat dibagi menjadi 2 tabung reaksi. Pada tabung 1 ditambahkan 3 tetes pereaksi FeCl3 1%



dan akan



membentuk warna biru, hijau, atau violet yang menunjukan ada nya golongan tanin. Tabung 2 ditambahkan beberapa tetes larutan gelatin 1% dan reaksi positif akan menunjukkan terbentuknya endapan putih (Farnsworth, 1966) 4. Terpenoid Terpenoid



merupakan



komponen-komponen



tumbuhan yang mempunyai bau dan dapat diisolasi dari bahan nabati dengan penyulingan yang disebut minyak atsiri. Minyak atsiri yang berasal dari bunga pada awalnya dikenal dari penentuan struktur secara sederhana, yaitu dengan perbandingan atom hidrogen dan atom karbon dari senyawa terpenoid yaitu 8:5 dan dengan perbandingan tersebut dapat dikatakan bahwa senyawa tersebut adalah golongan terpenoid. d. Steroid. Steroid adalah terpenoid yang kerangka dasarnya terbentuk



dari



sistem



cincin



siklopentana



prehidrofenantrena. Steroid merupakan golongan senyawa metabolik sekunder yang banyak dimanfaatkan sebagai obat. Hormon steroid pada umumnya diperoleh dari senyawa-senyawa steroid alam terutama dalam tumbuhan



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



23



(Djamal, 1988).



Identifikasi senyawa steroid dapat



dilakukan dnegan cara yaitu ekstrak dimasukkan kedalam mortar, lalu ditambahkan eter, lalu di gerus halus, kemudian disaring dengan menggunakan kertas saring hingga didapat filtrat. Filtrat yang telah didapat diuapkan dalam cawan penguap



hingga



diperoleh residu.



Residu



tersebut



ditambahkan 2 tetes pereaksi Liebermann-Bouchardad, hasil positif menunjukan terbentuknya warna hijau atau merah (Farnsworth, 1966). 5. Saponin Menurut (Harborne J. , 1984), saponin adalah glikosida triterpen dan sterol. Saponin merupakan senyawa aktif permukaan dan bersifat seperti sabun, serta dapat dideteksi berdasarkan kemampuannya membentuk busa yang stabil dalam air dan menghomolisis sel darah merah. Dari segi pemanfaatan, saponin sangat ekonomis sebagai bahan baku pembuatan hormon steroid, tetapi saponin kadang-kadang dapat menyebabkan keracunan pada ternak (Robinson, 1991). Identifikasi senyawa saponin dapat dilakukan dengan cara larutan sisa hasil percobaan identifikasi



golongan



flavonoid dikocok secara vertikal selama 10 detik, lalu dibiarkan selama 10 menit. Apabila terbentuk busa yang stabil, maka positif menunjukkan adanya senyawa golongan saponin, lalu apabila ditambahkan 1 tetes HCl 1% busa akan tetap stabil (Farnsworth, 1966). 2.5 Bakteri 2.5.1 Definisi Bakteri Bakteri merupakan organisme uniseluler yang relative sederhana yang memiliki diameter 0,2-2 mikron dengan



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



24



panjang 2-8 mikron dan terlsebar luas di biosfer (Radji, 2011). 2.5.2 Klasifikasi Bakteri Berdasarkan bentuk morfologinya, maka bakteri dapat di bagi atas tiga bagian (Pratiwi S. , 2008) yaitu : 1. Bentuk Basil Basil adalah bakteri yang bentuknya menyerupai batang atau silinder, membelah dalam satu bidang, sebagian besar basil tampak sebagai batang tunggal, berpasangan atau dalam bentuk rantai pendek atau panjang. Contohnya Escherichia coli dan Salmonella thypii. Bentuk basil ini dapat dibedakan atas : a. Bentuk tunggal, yaitu basil yang terlepas satu sama lain dengan ujung-ujungnya yang tumpul. b. Diplobasil, yaitu basil yang bergandengan dua – dua dengan ujung-ujungnya yang tumpul. c. Streptobasil, yaitu basil yang bergandeng – gandingan panjang dengan ujung – ujungnya yang tumpul. 2. Bentuk kokus Kokus adalah bakteri yang berbentuk bulat atau oval, ada yang hidup sendiri dan ada yang dijumpai hidup berpasangan, kubus atau membentuk rantai panjang, bergantung pada caranya membelah diri kemudian melekat atau



sama



lain



setelah



pembelahan.



Contohnya



Staphylococcus aureus dan Streptococcus mutans. Bentuk kokus ini dapat dibedakan atas :



a) Diplokokus, yaitu kokus yang bergandengan dua dua. b) Tertakokus, yaitu kokus yang mengelompok berempat.



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



25



c) Staphylokokus, yaitu kokus yang mengelompok merupakan suatu untaian. d) Streptokokus, yaitu kokus yang bergandeng – gandingan panjang seperti rantai. e) Sarsina, kokus yang mengelompok serupa kubus. 3. Bentuk Spiral Kelompok bakteri ini terdiri atas beraneka ragam bentuk bakteri berbentuk silinder, yang bukan lurus seperti basil melainkan melingkar. Contohnya Spirilliumminor dan Vibrio coma. Bakteri bentuk spiral ini dibedakan menjadi beberapa jenis antara lain : a) Vibrio, yaitu bakteri yang benbentuk batang melengkung menyerupai koma, ada yang tumbuh sebagai benang – benang membelit atau berbentuk s. b) Spiril, yaitu dari kata spirilium yang menyerupai spiral atau lilitan yang sebenarnya. c) Spirochaeta, yaitu juga merupakan bakteri spiral, tetapi bedanya bakteri ini memiliki spiri yang bersifat fleksibel (mampu melenturkan dan melekukkan tubuhnya sambil bergerak). 2.6 Streptococcus mutans



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



26



Gambar 2. 5 streptococcus mutans (Sofia D. Forssten *, Marika Björklund and Arthur C. Ouwehand, 2010) 2.6.1 Klasifikasi Streptococcus mutans Kingdom



: Bacteria



Divisio



: Firmicutes



Class



: Diplococcic



Order



: Lactobacilalles



Family



: Streptococcaceae



Genus



: Streptococcus



Species



: Streptococcus mutans



2.6.2 Deskripsi Streptococcus mutans Streptococcus mutans merupakan bakteri gram positif, bersifat nonmotil, dan anaerob fakultatif yang dapat memetabolisme



karbohidrat



(Novita,



Willia,



2016)



Streptococcus mutans pertama kali diisolasi oleh Clark pada tahun 1924 dari gigi manusia yang mengalami karies. Istilah Streptococcus mutans diambil berdasarkan hasil pemeriksaan mikrobiologi dengan pengecatan gram. Bakteri ini berebentuk oval dan lain dari bentuk spesies Streptococcus yang lain, sehingga disebut sebagai mutan dari Streptococcus. Streptococcus mutans menyebabkan terbentuknya karies. S. mutans



merupakan kuman yang kariogenik



karena mampu segera membentuk asam dari karbohidrat yang dapat diragikan. Kuman tersebut dapat tumbuh subur



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



27



dalam suasana asam dan dapat menempel pada permukaan gigi karena kemampuannya membuat polisakarida ekstra sel. Polisakarida ekstra sel ini terutama terdiri dari polimer glukosa yang menyebabkan matriks plak mempunyai konsistensi seperti gelatin, akibatnya bakteri terbantu untuk melekat pada gigi serta saling melekat satu sama lain. Plak makin lama makin tebal, sehingga akan menghambat fungsi saliva untuk melakukan aktivitas antibakterinya (Pratiwi R. , 2005) 2.6.3 Morfologi Streptococcus mutans Streptococcus mutans diklasifikasikan berdasarkan serotype menjadi 8 kelompok yaitu serotype “a” sampai “h”. Pembagian serotype ini berdasarkan perbedaan karbohidrat pada dinding sel. Akan tetapi, berdasarkan hibridasi DNA bakteri ini dibagi menjadi 4 kelompok genetic. Pembagian ini berdasarkan prosentase basa DNA yaitu guanine dan cytosine. Strain Streptococcus mutans yang banyak terdapat pada manusia adalah serotype c, e dan /(36 to 38% G + C), dimana Streptococcus mutan serotype c merupakan bakteri utama penyebab karies gigi (Fatmawati, Dwi Warna Aju, 2011). Streptococcus mutans merupakan gram positif yang dapat tumbuh dnegan optimal pada kisaran suhu sekitar 18 – 40°C.Suhu optimal untuk pertumbuhan bakteri ini sekitar 37°C. Streptococcus mutans berbetuk kokus tunggal, bulat atau ovoid dan berantai dengan diameter 0,5 – 0,75 µm. Pada keadaan lingkungan yang asam, bakteri ini dapat berbentuk batang dengan panjang 1,5 – 3,0 µm. (Oktanauli, 2011).



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



28



Streptococcus mutans dapat dibiakan dalam media yang tidak biasa. Media yang dapat digunakan untuk membiakannya yaitu media agar darah ( blood agar ) dan juga Tryptone Yeast Cystein (Bidarisugma, 2012) 2.6.4 Uji Aktivitas Antibakteri Pengamatan potensi antibakteri dari suatu zat dapat dilakukan dengan metode, yaitu (Jawetz, 2001): 1. Metode Dilusi Pada metode dilusi ini tedapat dua macam macam yaitu dilusi padat dan cair. 1. Metode Dilusi Padat Metode ini mengukur KHM ( Kadar Hambat Minimun ) dan KBM ( Kadar Bakterisidal Minimum ). Cara yang dilakukan ialah dengan membuat seri pengenceran beberapa konsentrasi zat uji pada media padat ( agar ) yang ditambahkan dengan mikroba uji. Keuntungan dari metode ini ialah satu konsentrasi agen antimikroba yang diuji dapat digunakan untuk menguji beberapa mikroba ujin (Pratiwi S. , 2008) 2. Metode Dilusi Cair Metode ini serupa dengan metode dilusi padat yang membedakan hanya pada media. Dilusi cair dilakukan dengan membuat seri pengenceran agen antimikroba pada medium cair lalu ditambahkan dengan mikroba uji (Pratiwi S. , 2008). 2. Metode Difusi 1.



Metode Ditch-plate, sampel diletakkan pada parit



yang dibuat dengan cara memotong bagian tengah media agar dalam cawan petri secara membujur dan mikroba uji. 2.



Metode disc diffusion ( Tes Kirby-bauer )



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



29



Metode ini dilakukan untuk menentukan aktivitas gen antimikroba. Piringan yang berisi agen antimikroba diletakkan pada



media



agar



yang



telah ditanami



mikroorganisme yang akan berdifusi pada media agar tersebut. Area jernih mengindikasikan adanya hambatan pertumbuhan mikroorganisme oleh agen antimikroba pada permukaan media. Menurut Kirby & Bauer terdapat dua macam zona hambat yang terbentuk (Pratiwi S. , 2008) Zona Radikal Merupakan daerah yang tidak ditemukannya pertumbuhan bakteri disekitar disc. Aktivitas antibakteri dapat diukur pada diameter zona radikal.



a.



Zona Iradikal



Zona ini merupakan daerah yang terdapat pertumbuhan bakteri di sekitar disc dan dapat dihambat oleh antibakteri tetapi tidak mematikan bakteri. Uji disc diffusion dilakukan dengan mengukur diameter zona



bersih



/



jernih



yang



tidak



memperlihatkan



pertumbuhan bakteri di sekeliling senyawa antibakteri pada permukaan media agar. Keadaan ini menunjukan indikasi adanya



respon



penghambatan



pertumbuhan



mikroorganisme. Respon



hambatan



pertumbuhan



bakteri



dapat



diklasifikasikan seperti berikut (Greenwood, 1995) : TABEL 2. 1 ZONA HAMBATAN PERTUMBUHAN BAKTERI



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



30



Diameter Zona Terang



Respon Hambatan Pertumbuhan



˃ 20 mm



Kuat



16 – 20 mm



Sedang



10 – 15 mm



Lemah



˂ 10 mm



Tidak ada



3.



Metode cup plate



Menggunakan metode yang serupa denga metode disc diffusion, dimana pada media agar yang telah ditanami mikroorganisme dibuat suatu sumur. 4.



Metode E-test



Metode ini berperan untuk mengestimasi konsentrasi hambat



minimum



menggunakan



antimikroorganisme.



strip



plastic



yang



Dengan terkandung



antimikroorganisme didalamnya dari kadar rendah ke tinggi serta diletakkan pada permukaan media yang sudah ditanami mikroorganisme. 2.7 Obat Kumur Obat kumur ( gargarisma / gargle) adalah sediaan berupa larutan yang umumnya harus diencerkan terlebih dahulu sebelum digunakan sebagai pencegahan atau pengobatan infeksi tenggorokan (Anonim, Farmakope Indonesia, Edisi III, 1979) Obat kumur merupakan sediaan larutan dengan rasa yang nyaman, mengandung antimikroba dan juga berguna untuk menyegarkan mulut. Obat kumur ialah sediaan cair dengan viskositas yang tidak terlalu rendan dan juga tidak terlalu tinggi (Rieger, 2001)



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



31



2.7.1 Komposisi obat kumur 1.



Zat aktif



untuk mencegah dan mengobati bau mulut, mencegah kerusakan gigi dan penyakit-penyakit periodontal lainnya. Contoh



: Senyawa fenolik, senyawa antimikroba,



garam zinc, dll. 2.



Pelarut



Etanol dapat berfungsi melarutkan zat-zat yang larut dalam alcohol, menyegarkan mulut, menurunkan titik beku saat



formulasi, dan dapat bertindak sebagai pengawet



untuk mencegah pertumbuahn bakteri. Sedangkan aquadest dapat melarutkan zat-zat yang larut dalam air dan sebagai penyesuai volume akhir sediaan. Contoh : Aquadest, Etanol 3.



Emulsifier



Melarutkan flavouring agent, memberi efek bersih pada rongga mulut. Contoh



:



Poloxamer



407,



polysorbate,



PEG-40



Hydrogenated, Caster oil. 4.



Corigensia ( Saporis, Odoris, Koloris )



Memberi sensasi yang sejuk dan segar pada mulut, dapat menutupi rasa yang tidak enak, dan juga untuk mengurangi rasa terbakar yang ditimbulkan oleh alcohol dalam pemakaian obat kumur. Contoh : Sodium saccharin, oleum menthae, menthol, peppermint oil. xylitol. 5.



Humektan



Untuk mencegah hilangnya ir, manambah rasa manis dan meningkatkan tekanan osmotic obat mengurangi



resiko



pertumbuhan



kumur, untuk



mikroba



dalam



konsentrasi tinggi, humektan biasanya digunakan pada obat kumur yang



bersifat non-alkoholik. Contoh:



gliserin,



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



32



sorbitol, hydrogenated starch hydrolysate, propilengilkol, xylitol. 6.



Pengawet



Mencegah pertumbuhan mikroba dalam sediaan, sehingga dapat mencegah kerusakan pada sediaan. Contoh : Natrium benzoate, ethyl paraoxybenzoate, asam benzoate. 7.



Dapar



Untuk menstabilakn pH, tingkat pH mulut ( saliva ) yang berkisar antara 5,6 – 7. Contoh : Asam sitrat dan garamnya, asam benzoate dan garamnya.



2.7.2. Uraian Bahan Penyusun Formulasi Obat Kumur Antibakteri 1. Gliserin (Anonim, Farmakope Indonesia, Edisi III, 1979) Gliserin merupakan cairan jernih seperti sirup, rasa manis diikuti rasa hangat, tidak berwarna, hanya boleh berbau khas leamah ( tajam atau tidak enak ). Higroskopik, Jika disimpan beberapa lama pada suhu rendah dapat memadat membentuk massa hablur tidak berwarna yang tidak melebur hingga suhu mencapai kurang lebih 20°. Gliserin dapat bercampur dengan air dan dengan etano (95%) P. Tidak larut dalam eter, dalam kloroform, dalam minyak menguap dan dalam minyak lemak. Pada sediaan farmasi, konsentrasi gliserin sebagai antimikroba berkisar < 20%, dan sebagai emollient dan humektan berkisar 30% . (Rowe, 2009) 2. Mentholum (Anonim, Farmakope Indonesia, Edisi III, 1979)



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



33



Hablur berbentuk jarum atau prisma, tidak berwarna, bau tajam seperti minyakl permen, rasa panas dan aromatic diikuti rasa dingin. Gliserin mudah larut dalam paraffin cair P dan dalam minyak atsiri, sukar larut dalam air dan sangat mudah larut dalam etanol (95%) P, dalam kloroform dan dalam eter P. Konsentrasi menthol yang dapat digunakan dalam sediaan obat kumur berkisar 0,1 – 2% (Rowe, 2009). 3. Natrium Benzoat (Anonim, Farmakope Indonesia, Edisi III, 1979) Natrium benzoate berupa butiran atau serbuk hablur putih, tidak berbau atau hampir tidak berbau. Natrium benzoate larut dalam 2 baguan air dan dalam 90 bagian etanol (95%) P. Konsentrasi natrium benzoate yang digunakakan umumnya berkisar 0,1-0,5 % dalam kosmetik, 0,5% untuk produk parenterall, dan 0,02-0,5% untuk penggunan obat oral (Rowe, 2009) 4. Natrium Lauril Sulfat (Rowe, 2009) Natrium lauril sulfat merupakan kristal berwarna atau serbuk, putih atau krem sampai kuning pucat. Natrium lauril sulfat mudah larut dalam air, praktis tidak larut dalam kloroform dan eter. Konsentrasi 0,5-2,5% 2.8. Mekanisme kerja Antibakteri Antibakteri merupakan zat yang dapat menekan pertumbuhan bakteri ( bakteriostatik ) atau membunuh bakteri ( bakterisidal ). Berdasarkan cara kerja terhadap bakteri uji, antibakteri tergolong menjadi 2 tipe yaitu antibakteri



spektrum



luas



yang



mampu



menekan



pertumbuhan atau menumbuh bakteri gram positif dan negative. Dan antibakteri spektrum sempit yang mampu



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



34



menekan pertumbuhan atau membunuh bakteri gram positif atau negative saja ( Ryan and Ray, 2004 ). 2.8.1 Mekanisme kerja Antibakteri Setiap jenis antibakteri mempunyai mekanisme kerja tersendiri dalam menghambat



pertumbuhan bakteri.



Mekanisme kerja antibakteri menurut (Dra. Sujati Woro l., 2016) sebagai berikut: 1. Menghambat metabolisme sel mikroba Mikroba membutuhkan asam folat untuk kelangsungan hidupnya. Bila sintesis asam folat dari PABA dihambat oleh antimikroba maka kelangsungan hidupnya akan terganggu. Dengan mekanisme kerja ini diperoleh efek bakteriostatik. Contoh obat: sulfonamide, trimetoprim, asam p-aminosalisilat, dan sulfonamide.



2. Menghambat sintesis dinding sel mikroba Dinding sel terdiri dari polipeptidoglikan, bila sintesis polipeptidoglikan dihambat maka dapat menyebabkan dinding sel lisis oleh karena tekanan osmosis dalam sel yang lebih tinggi dibandingkan dengan tekanan diluar sel. Contoh antibiotik yang bekerja dengan mekanisme seperti ini adalah penisilin, sefalosporin, basitrasin, vankomisin, dan sikloserin. 3. Mengganggu keutuhan membran sel mikroba Kerusakan membran sel menyebabkan keluarnya berbagai komponen penting dari dalam sel mikroba, seperti protein, asam nukleat, nukleotida, dan lain-lain. Contoh antibiotic yang bekerja dengan mekanisme tersebut ialah polimiksin,



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



35



gol



polien



serta



berbagai



antimikroba



golongan



kemoterapetik. 4. Menghambat sintesis protein sel mikroba Untuk kehidupannya sel mikroba perlu mensintesis berbagai protein dan asam nukleat dalam keadaan alamiahnya.



Obat



antibiotic



diatas



msenghambat



pembentukan protein, atau mengakibatkan terbentuknya protein yang abnormal dan nonfungsional. Contoh obat: aminoglikosida, makrolid, linkomisin, tetrasiklin, dan kloramfenikol. 2.9 Chlorhexidine Chlorhexidine adalah merupakan derivate bisbiguanite yang efektif dan mempunyai spectrum luas, bekerja cepat dan toksisitas rendah. Chlorhexidine telah terbukti efektif terhadap bakteri rongga mulut karena dapat mengurangi jumlah mikroorganisme plak sebanyak 80%. Aplikasi obat kumur chlorhexidine adalah mencegah timbulnya plak dan karies karena chlorhexidine memiliki kemampuan bakterisid dan bakteriostatik terhadap bakteri rongga mulut, termasuk Streptococcus mutans (Jeanne Mervrayano; Rahmatini; Elizabeth Bahar, 2015). Di Indonesia, salah satu contoh obat kumur yang sangat mudah kita peroleh di pasaran yaitu klorheksidin. Klorheksidin merupakan agen antimikroba berspektrum luas dan memiliki efek bakterisidal terhadap semua jenis mikroba, termasuk bakteri, jamur, dan virus. Klorheksidin terbukti dapat



menghambat



pembentukan



plak,



mengurangi



inflamasi gingiva dan mencegah karies gigi (Fajriani¹, 2014).



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



36



2.10 Evaluasi Formula Chlorhexidine adalah merupakan derivate bisbiguanite yang efektif dan mempunyai spectrum luas, bekerja cepat dan toksisitas rendah. Chlorhexidine telah terbukti efektif terhadap bakteri rongga mulut karena dapat mengurangi jumlah mikroorganisme plak sebanyak 80%. Aplikasi obat kumur chlorhexidine adalah mencegah timbulnya plak dan karies karena chlorhexidine memiliki kemampuan bakterisid dan bakteriostatik terhadap bakteri rongga mulut, termasuk Streptococcus mutans (Jeanne Mervrayano; Rahmatini; Elizabeth Bahar, 2015). Di Indonesia, salah satu contoh obat kumur yang sangat mudah kita peroleh di pasaran yaitu klorheksidin. Klorheksidin merupakan agen antimikroba berspektrum luas dan memiliki efek bakterisidal terhadap semua jenis mikroba, termasuk bakteri, jamur, dan virus. Klorheksidin terbukti dapat



menghambat



pembentukan



plak,



mengurangi



inflamasi gingiva dan mencegah karies gigi (Fajriani¹, 2014). 2.10.1 Uji Stabilitas Sediaan Dalam uji stabilitas sediaan obat kumur meliputi pemeriksaan bentuk, bau, warna yang diamati secara visual. Sedian dinyatakan stabil apabila warna, bau, bentuk penampilan tidak mengalami perubahan secara visual selama penyimpanan. Pengamatan dilakukan pada suhu kamar pada minggu ke 0, 1, 2, 3, dan minggu ke 4. (POM, 2000) 2.10.2 Uji pH Sediaan Obat Kumur Uji pH dilakukan dnegan menggunakan alat yang disebut pH meter. Terlebih dahulu alat pH meter



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



37



dikalibrasikan menggunakan larutan dapar standar pH netral ( pH 7,0 ) dan larutan dapar pH asam ( pH 4,0). Kemudian elektroda dicuci dengan air suling dan dikeringkan dengan tissue. Elektroda dicelupkan ke dalam larutan obat kumur. Angka yang ditunjukkan pH meter merupakan harga pH sediaan (Rawlins, 2003). 2.10.3 Uji Homogenitas Pengujain homogenitas terhadap sediaan obat kumur dilakukan dengan pengamatan secara visual 2.10.4 Uji Kejernihan Kejernihan yang diamati pada sediaan obat kumur dapat dilakukan pengamatan secara visual .



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian 3.1.1 Tempat Penelitian Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi Universitas 17 Agustus 1945 Jakarta. Proses determinasi tanaman Ciplukan ( Physalis angulata L. ) dilakukan di Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Cibinong, Bogor. 3.1.2 Waktu Penelitian Penelitian ini akan dilakukan pada bulan Januari – Maret 2019 3.2 Alat dan Bahan 3.2.1 Alat Alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi autoklaf, silinder cup, timbangan analitik, kompor listrik, incubator, botol kaca gelap, rotary evaporator, mikroskop, oven, alat-alat gelas laboratorium (gelas ukur, gelas kimia, labu ukur, cawan petri, erlenmeyer, dan tabung reaksi), jangka sorong, ose , Bunsen,



batang pengaduk, spatel



logam, sarung tangan, pH meter, kertas saring, jangka sorong. 3.2.2 Bahan Bahan yang digunakan dalam penelitian adalah Daun dari tanaman Ciplukan ( Physalis angulata L.) yang diperoleh dari BALITRO ( Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat ) Bogor, etanol 96%, aquadest, gliserin,



38



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



39



menthol, natrium lauril sulfat, natrium benzoate, BaCl 1%, H2SO4 1%, NaCl 0,9%



media Mueller Hinton Agar



( MHA ), darah domba, control negative Chlorhexidine gluconate 0,2% , mutans (ATCC



yaitu



bakteri Streptococcus



) yang diperoleh dari laboratorium



Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia . 3.3 Prosedur Kerja 3.3.1 Persiapan Simplisia Simplisia yang digunakan dalam penelitian ini ialah daun dari tanaman ciplukan ( Physalis angulata L.) yang telah dideterminasi di LIPI ( Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia ), Bogor. Daun Ciplukan dilakukan sortasi basah, lalu simplisia dicuci dan dijemur selama tiga hari dengan menutupi nya menggunakan kain hitam hingga diperoleh simplisia yang kering. Tahap selanjutnya dilakukan sortasi kering untuk memisahkan kotoran-kotoran dari simplisia. Daun yang telah kering, kemudian di masukan ke dalam oven pada suhu 40 C. lalu simplisia di haluskan dan diayak. Kemudia hasil ayakan tersebut ditimbang bobot serbuk simplisianya (Anonim, Farmakope Indonesia, Edisi IV, 1995)



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



40



3.3.2 Pembuatan Ekstrak Etanol 96% Daun Ciplukan ( Physalis angulata L.) dengan Metode Maserasi Proses ekstraksi simplisia daun ciplukan dilakukan dengan ekstraksi cara dingin yaitu secara maserasi dengan pelarut polar yaitu etanol 96%. Pertama dilakukan dengan menimbang 1000 gram serbuk daun ciplukan dan memasukannya



kedalam



botol



kaca



gelap,



lalu



ditambahkan 3000 ml pelarut etanol 96% dan dibiarkan selama 3 hari dan dilakukan sesekali pengadukan. Hasil maserasi kemudian disaring untuk memisahkan antara cairan etanol dan ampasnya. Lalu dilakukan remaserasi selama 3 hari untuk mendapat hasil zat aktif yang lebih banyak. Proses remaserasi ini dilakukan sebanyak 2 kali dengan merendam kembali ampas simplisia daun ciplukan dalam etanol 96% selama 3 hari. Setelah itu hasil ekstrak cair



(etanol)



yang



didapat



dilakukan



menggunakan



rotary



evaporator,



jika



pemekatan perlu



hasil



pemekatan tersebut di uapkan kembali diatas penangas air untuk memperoleh ekstrak kental. 3.3.3 Pemeriksaan Karakteristik Ekstrak Etanol 96% Daun Ciplukan ( Physalis angulata L. ) 3.3.3.1Perhitungan Rendemen Rendemen ialah perbandingan antara bobot ekstrak yang didapat dengan bobot simplisia awal (Departemen kesehatan,



2000).



Nilai



rendemen



dapat



dihitung



berdasarkan : Rendemen Ekstrak (%) =



𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑘𝑒𝑛𝑡𝑎𝑙 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑠𝑖𝑚𝑝𝑙𝑖𝑠𝑖𝑎 𝑎𝑤𝑎𝑙



x 100%



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



41



3.3.3.2 Pemeriksaan Organoleptis Pemeriksaan parameter spesifik ekstrak berupa pemeriksaan



organoleptis



yang



dilakukan



untuk



mendeskripsikan bentuk, warna, bau, dan rasa dari ekstrak kental yang diperoleh. Pemeriksaan parameter non spesifik ekstrak berupa salah satunya ialah pemeriksaan kadar air (Departemen kesehatan, 2000).. 3.3.3.3 Pengujian Susut Pengeringan Pengujian Kadar Air Susut pengeringan merupakan pengukuran sisa zat setelah pengeringan pada suhu 105 ºC hingga diperoleh bobot konstan. Penetapan susut pengeringan dilakukan dengan cara menimbang seksama sebanyak satu sampai dua gram simplisia dalam botol timbang tertutup yang sebelumnya telah dipanaskan pada suhu 105 ºC selama 30 menit dan telah ditara. Ekstrak diratakan dalam botol timbang dengan menggoyangkan botol hingga memiliki lapisan setebal 5-10 mm, kemudian dimasukkan ke dalam oven pada suhu 105 ºC hingga bobot tetap. Botol dimasukkan ke dalam desikator dan setelah dingin ditimbang (POM, 2000).



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



42



% 𝑆𝑢𝑠𝑢𝑡 𝑃𝑒𝑛𝑔𝑒𝑟𝑖𝑎𝑛 =



B−C 𝑋 100% B−A



Keterangan: A



= Bobot botol timbang



B



= Bobot botol timbang + ekstrak sebelum dipanaskan



C



= Bobot botol timbang + ekstrak setelah dipanaskan



3.3.4 Skrining Fitokimia Skrining fitokimia dilakukan untuk mengetahui dan memastikan kandungan-kandungan senyawa metabolit sekunder yang terkandung didalam ekstrak daun ciplukan a.



Identifikasi Senyawa Golongan Flavonoid Sebanyak



1



ml



ekstrak



cair



masing-masing



ditambahkan dengan serbuk Mg dan HCl 2N kemudian dipanaskan diatas penangas air. Setelah itu, ditambahkan dengan 5ml amil alcohol, dikocok hingga tercampur rata. Hasil positif menunjukan tertariknya warna kuning-merah pada lapisan alkohol (RI, 1995). b.



Identifikasi Senyawa Golongan Tanin Ekstrak ditambahkan air secukupnya, lalu dididihkan selama kurang lebih 15 menit, lalu setelah itu didinginkan, setelah dingin, disaring menggunakan kertas saring dan hasil filtrat yang didapat dibagi menjadi 2 tabung reaksi. Pada tabung 1 ditambahkan 3 tetes pereaksi FeCl3 1% dan akan membentuk warna biru, hijau, atau violet yang menunjukan ada nya golongan tanin. Tabung 2 ditambahkan beberapa tetes larutan



gelatin



1%



dan



reaksi



positif



akan



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



43



menunjukkan terbentuknya endapan putih (Farnsworth, 1966). c.



Identifikasi Senyawa Golongan Saponin Larutan sisa hasil percobaan identifikasi



golongan



flavonoid dikocok secara vertikal selama 10 detik, lalu dibiarkan selama 10 menit. Apabila terbentuk busa yang stabil, maka positif menunjukkan adanya senyawa golongan saponin, lalu apabila ditambahkan 1 tetes HCl 1% busa akan tetap stabil (Farnsworth, 1966). d.



Identifikasi Senyawa Golongan Alkaloid Ekstrak diletakkan didalam mortar lalu tambahkan ammonia 30% kemudian digerus. Lalu ditambahkan kloroform dan gerus kembali. Campuran tersebut lalu disaring sampai didapat filtrat (larutan A). Larutan A



dipipet sebagian dan



ditambahkan larutan HCl 10% dengan pengocokan dalam tabung reaksi. Lalu pada bagian atasnya, dipipet (larutan B). Larutan A ditetesi beberapa tetes pada kertas saring, dan ditetesi pula pereaksi dragendorf, adanya senyawa alkaloid ditandai dengan terbentuk warna merah atau jingga pada kertas saring. Larutan B dibagi menjadi 2 tabung reaksi, lalu ditambahkan masing-masing pereaksi mayer dan dragendorf, terbentuknya endapan merah bata dengan perekasi dragendorf dan adanya endapan putih dengan pereaksi mayer menunjukkan adanya positif senyawa golongan alkaloid (Farnsworth, 1966)). e.



Identifikasi



Senyawa



Golongan



Steroid



dan



Triterpenoid Ekstrak dimasukkan kedalam mortar, lalu ditambahkan eter, lalu di gerus halus, kemudian disaring dengan



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



44



menggunakan kertas saring hingga didapat filtrat. Filtrat yang telah didapat di uapkan dalam cawan penguap hingga diperoleh residu. Residu tersebut ditambahkan 2 tetes pereaksi Liebermann-Bouchardad, hasil positif menunjukan terbentuknya warna hijau atau merah (Farnsworth, 1966). 3.3.5 Pembuatan Pelarut, larutan dan Media 3.3.5.1 Pembuatan Media Kultur ( Mueller Hinton Agar Darah ) untuk Bakteri Uji Media kultur yang digunakan pada penelitian ini untuk pembiakan bakteri Streptococcus mutans ialah Mueller Hinton Agar Darah. Media Mueller Hinton Agar Darah dibuat dengan mengkombinasikan bahan-bahan dari MHA dengan 10% darah domba. Timbang seksama 35 gram MHA, dimasukkan ke dalam Erlenmeyer, dilarutkan dalam 1000 mL aquadest. Media MHA diaduk dan dipanaskan hingga larut sempurna. Lalu dibungkus dengan kertas perkamen, dan disterilkan didalam autoklaf pada temperatur sebesar 121 °C selama 20 menit. Hasil sterilisasi media MHA didiamkan dan diturunkan sampai suhu 50°C, kemudian ditambahkan 10% darah domba. Setelah tercampur homogen, lalu ambil 20 ml Muller Hinton Agar Darah dan masukkan ke dalam cawan petri steril secara aseptis. Media Muller Agar Hinton Darah siap digunakan untuk pengujian aktivitas antibakteri. . 3.3.5.2 Pembuatan larutan Standar Mc.Farland 0,5 Kekeruhan suspense bakteri disesuaikan dengan 1,0 standar Mc.Farland, yang diperkirakan terdapat 1,5 x 108 jumlah bakteri dalam suspense tersebut per mililiternya. Larutan



standar



Mc.farland



0,5



dibuat



dengan



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



45



mencampurkan 0,05 ml BaCl2 1% ke dalam 9,95 ml H2SO4 1% 3.3.5.3 Larutan Natrium Klorida 0,9% Timbang seksama 900 mg natrium klorida, larutkan dalam 100 mL aquadest. Masukkan ke dalam erlenmeyer yang tersumbat kapas. Larutan natrium klorida 0,9% disterilkan dalam autoklaf. Larutan natrium klorida 0,9% siap



digunakan untuk



pembuatan suspensi



bakteri



Streptococcus mutans. 3.3.6 Peremajaan Bakteri Uji Proses ini dilakukan dengan menanam bakteri murni pada media Mueller Hinton Agar Darah dalam cawan petri yang telah steril. Setelah dilakukan penanaman, biakan tersebut dimasukan kedalam incubator pada suhu 37°C selama 24 jam. Setelah itu, kemurnian bakteri Streptococcus mutans di teliti dengan pewarnaan gram. Lakukan



pengamatan



dari



bentuk



dan



koloninya



menggunakan mikroskop. Lalu biakan tersebut ditanami kembali pada agar miring Mueller Hinton Agar Darah. 3.3.7 Sterilisasi Alat Alat dan Bahan yang digunakan dalam pengujian ini disterilkan dengan menggunakan autoklaf pada suhu 121 °C selama 15 menit (Pelczar, 2005). Alat pinset, ose, mulut tabung reaksi, dan batang pengaduk disterilkan dnegan cara api langsung pada nyala bunsen, dan untuk alat-alat gelas yang tidak mempunyai skala, disterilkan didalam oven dengan suhu 160°C selama 1-2 jam. Untuk bahan yang berbahan karet disterilkan dengan merendam nya dalam alkohol 70% selama 1-2 jam.



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



46



3.3.8 Pewarnaan Gram Bakteri Biakan bakteri Streptococcus mutans diambil dnegan menggunakan ose steril, kemudian direkatkan di atas object glass dengan cara fiksasi secara aseptik. Tambahkan zat warna I kristal violet biarkan warna meresap selama 30 detik, bilas dengan air. Lalu tambahkan larutan iodium biarkan selama 30 detik, bilas dengan air. Hilangkan warnanya dengan menambahkan etanol 96% selama 10-20 detik, bilas dengan air. Tambahkan zat warna II safranin selama 30 detik, bilas dengan air. Object glass dikeringkan dengan kertas saring. Kemudian tambahkan satu tetes minyak imersi di atas object glass, dilakukan pengamatan bentuk dan warna sel bakteri di bawah mikroskop dengan perbesaran 1000 x (Suriawiria, 2005). 3.3.9 Penyetaraan Standar Kekeruhan Suspensi Bakteri Bakteri murni ditanam kedalam larutan suspense 5ml NaCl 0,9% dengan menggunakan ose yang telah disterilkan terlebih dahulu, dikocok dan kemudian tingkat kekeruhan larutan disetarakan dengan larutan standar McFarland 0,5. 3.3.10 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Etanol 96% Daun Ciplukan dengan Berbagai Varian Konsentrasi Larutan uji dibuat dalam 5 varian konsentrasi yaitu 5%, 10 %, 15%, 20%, dan 25% yaitu dengan melarutkan 2,5 gram ekstrak kental daun ciplukan dengan aquadest sampai volume 10 ml. kemudian dilakukan pengenceran larutan stok untuk mendapatkan konsentrasi 20%, 15%, 10%, 5%.



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



47



3.3.11 Pembuatan Formulasi Sediaan Obat Kumur Ekstrak Etanol 96% Daun Ciplukan ( Physalis angulate L.) Adapun rancangan formulasi obat kumur ekstrak etanol 96% daun ciplukan adalah sebagai berikut : TABEL 3. 1 KOMPOSISI OBAT KUMUR Bahan



Keguna an



Komposisi (Gram) F II F III



FI



EKSTRAK



ZAT



5



10



ETANOL 96%



AKTIF



F IV



FV



15



20



25



0,4



Standar (%)



DAUN CIPLUKAN 0,1 – 2



MENTHOL



PERASA



0,4



0,4



0,4



0,4



GLISERIN



KOSOLV



7,5



7,5



7,5



7,5



0,1



0,1



0,1



0,1



0,1



0,01 – 0,3



1



1



1



1



1



1-2



100 mL



100



100



100



100



ML



ML



ML



ML



< 20



EN



NATRIUM



PENGAW



BENZOATE



ET



NATRIUM



PEMBUS



LAURIL SULFAT



A



AQUADEST



PELARUT



Sumber : Handbook of Pharmaceutical Excipients 6th Edition ( Rowe, 2009) Keterangan F : Formula



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



48



3.3.11.1 Pembuatan Sediaan Obat Kumur Siapkan



seluruh



bahan-bahan



yang



hendak



digunakan, timbang bahan masing-masing terlebih dahulu. Kalibrasikan botol kaca yang akan dipakai untuk wadah sediaan obat kumur dengan aquadest hingga batas kalibrasi ( 100 ml ). Menthol dicampur dengan gliserin, digerus hingga larut dan homogen ( campuran 1 ). Kemudian, ekstrak etanol 96% daun ciplukan dicampurkan ke dalam campuran 1, digerus hingga homogen ( campuran 2 ). Natrium



benzoate



dilarutkan



didalam



air



hangat



secukupnya, lalu diaduk hinggaa larut dan homogen. Natrium benzoate yang sudah dilarutkan tadi dicampur kedalam campuran 2 dan digerus hingga homogen ( campuran 3 ). Setelah itu, campuran 3 ditambahkan natrium lauril sulfat, digerus hingga homogen ( campuran 4 ). Larutan hasil ( campuran 4 ) di saring dengam menggunakan kertas saring, lalu larutan hasil dari penyaringan tersebut ditambahkan aquadest hingga batas kalibrasi ( 100 ml ) pada wadah botol kaca. 3.3.12 Pembiakant Bakteri Uji Streptococcus mutans Pembiakan bakteri dilakukan pada cawan petri yang telah berisi media Mueller Hinto agar Darah. Pembiakan dilakukan dengan cara mencelupkan kapas lidi steril ke dalam suspense bakteri Streptococcus mutans terlebih dahulu, lalu diolehkan diatas permukaan media Mueller Hinton agar Darah.



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



49



3.3.13



Pengujian



Aktivitas



Antibakteri



Larutan



Ekstrak dan Sediaan Obat Kumur Ekstrak Etanol 96% Daun Ciplukan (Physalis angulata L.) Pengujian aktivitas antibakteri menggunakan metode difusi agar. Cup plate technique. Media MHA darah ( Mueller Hinton Agar Darah ) sebanyak 10 ml dimasukkan kedalam cawan petri steril sebagai lapisan pertama lalu biarkan memadat dan letakkan 7 silinder cup di permukaan media kemudian 100 ml media yang telah dicampur dengan 2µl suspense bakteri dituang ke dalam erlenmeyer dan dihomogenkan, selanjutnya diukur sebanyak 10 ml dan masukkan kedalam cawan petri sebagai lapisan kedua. Ekstrak daun ciplukan dengan konsentrasi 5%, 10%, 15 %, 20 % , 25 % serta aquadest sebagai control negative dan chlorhexidine sebagai control positif dituangkan kedalam lubang sumuran. Cawan petri diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. Diameter zona bening disekitar sumuran diukur dengan jangka sorong dan dibandingkan dengan chlorhexidine. 3.3.14 Evaluasi Stabilitas Formula 3.3.14.1 Uji Stabilitas Pengamatan yang dilakukan dalam pemeriksaan stabilitas sediaan obat kumur dengan mengamati bentuk, bau, dan warna sediaan pada minggu ke 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 dan minggu ke dalam suhu kamar. 3.3.14.2 Uji Homogenitas Uji Homogenitas sediaan obat kumur dilakukan dengan pengamatan secara visual.



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



50



3.3.14.3 Uji Kejernihan Pemeriksaan kejernihan pada sediaan obat kumur dapat dilakukan dengan mengamati secara visual. ss 3.3.14.4 Uji pH Pengujian



pH



pada



sediaan



obat



kumur



menggunakan alat pH meter. Dengan cara mencelupkan elektroda pada sediaan obat kumur



lalu didiamkan



beberapa saat hingga diperoleh angka pembacaan yang stabil oleh pH meter , lalu nilai pH dicatat. 3.3.15 Analisa Data Data zona hambat yag diperoleh dari hasil penelitian diolah menggunakan Analisa statistic variansi satu arah ( One Way Analysis of Variance; One Way ANOVA ) untuk mengetahui ada atau tidaknya pengaruh perbedaan konsentrasi ekstrak etanol 96% daun ciplukan ( Physalis angulata L. ) terhadap aktivitas antibakteri ekstraknya dan obat kumurya. Sebelum dilakukan nya analisis ANOVA satu arah, terlebih dahulu dilakukan uji normalitas data dan homogenitas untuk memastikan apakah data yang didapat valid. Uji normalitas ini dilakukan guna mengetahui apakah data terdistribusi normal atau tidak.



Universita 17 Agustus 1945 Jakarta



DAFTAR REFERENSI



1. Aldi, Y., Aria, M., & Erman, L. 2014. UJI EFEK IMUNOSTIMULASI EKSTRAK ETANOL HERBA CIPLUKAN (Physalis angulata L.) TERHADAP AKTIVITAS DAN KAPASITAS FAGOSITOSIS SEL MAKROFAG PADA MENCIT PUTIH BETINA. SCIENTIA, 38. 2. Anonim. 1979. Farmakope Indonesia, Edisi III. In Anonim, Farmakope Indonesia, Edisi III (pp. 6-7, 93-94, 265, 338-339, 691.). Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 3. Anonim. 1995. Farmakope Indonesia, Edisi IV. In Anonim, Farmakope Indonesia, Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik. 4. Anonimus. 2010. Keanekaragaman Hayati Tumbuhan Indonesia. Retrieved from Keanekaragaman Hayati Tumbuhan Indonesia.: http://kehati.or.id/florakita/browser 5. anonymous. 2016. kondisiumum. http://kondisiumum.com/karies-gigi/



Retrieved



from



kondisiumum:



6. Arora M, W. J. 2009. Association of environmental cadmium exposure with periodontal disease . 7. Bidarisugma, B. T. 2012. Antibodi Monoklonal Streptococcus Mutans 1 (c) 67 kDa sebagai Imunisasi Pasif dalam Alternatif Pencegahan Karies Gigi secara Topikal . Berkala IlmiahMahasiswa Kedokteran Gigi Indonesia,, 612. 8. Cheng, A. H. 2009. Genetic requirements for Staphylococcus aureus abscess formation and persistence in host tissues. FASEB J, 23:3393–3404. 9. Dalimartha, S. 2006. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Jilid 5. In S. Dalimartha, Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Jilid 5 (p. 160). Jakarta: Pustaka Bunda. 10. Departemen kesehatan, R. 2000. Parameter StandarUmum Ekstrak Tumbuhan Obat. In R. Departemen kesehatan, Parameter StandarUmum Ekstrak Tumbuhan Obat (pp. 31-32). Jakarta: Direktorat jendral pengawan obat dan makanan Direktorat pengawasan obat tradisional. 53



11. Depkes, R. 2014. Pusat Data dan Informasi. In R. Depkes, Pusat Data dan Informasi. 12. Djamal, R. 1988. Tumbuhan Sebagai Sumber Bahan Obat. In R. Djamal, Tumbuhan Sebagai Sumber Bahan Obat. Padang: Universitas Negeri Andalas. 13. Dr. Triono Soendoro, P. 2007. Riset Kesehatan Dasar. Jakarta. 14. Dra. Sujati Woro l., M. A. 2016. Farmakologi. In M. A. Dra. Sujati Woro l., Farmakologi. Jakarta. 15. Dwi Fitrianti AR, N. A. 2011. Efektivitas Ekstrak Daun Ceplukan sebagai Antimikroba terhadap Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus In Vitro. Jurnal Kedokteran Brawijaya, 213. 16. Elsa RENGIFO-SALGADO, G. V.-A. 2013. Physalis angulata L. (Bolsa Mullaca): A Review of its Traditional Uses, Chemistry and Pharmacology. Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas, 432. 17. Fajriani¹, J. N. 2014. Reduction of Salivary Streptococcus mutans Colonies in Children After Rinsing with 2.5% Green Tea Solution . Journal of Dentistry Indonesia , 80. 18. Farnsworth, N. R. 1966. Biological and phytochemical screening of plants. Journal of pharmaceutical sciences. 19. Fatmawati, Dwi Warna Aju. 2011. HUBUNGAN BIOFILM STREPTOCOCCUS MUTANS TERHADAP RESIKO TERJADINYA KARIES GIGI. Stomatognatic(J.K.G Unej), 128. 20. Greenwood. 1995. Antibiotics Susceptibility (Sensitivity) Test, Antimicrobial ant. In Greenwood, Antibiotics Susceptibility (Sensitivity) Test, Antimicrobial ant. San Fransisco, USA. : Addison Westley Longman Inc. 21. Hanani, E. 2015. Analisis Fitokimia. ECG. . In E. Hanani, Analisis Fitokimia. ECG. (pp. 86-87). Jakarta.



54



22. Harborne, J. 1984. Phytochemical Methods: A Guide to Modern Technique of. In J. Harborne, Phytochemical Methods: A Guide to Modern Technique of (pp. 37–168). London: Chapman and Hall. 23. Harborne, J. 1987. Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis. In J. Harborne, Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis. 24. Ireland., R. 2006. Clinical Textbook of Dental Hygiene and Therapy. Blackwell Munksgaard, 75-82. 25. Jawetz, E. M. 2001. Mikrobiologi Kedokteran, Edisi XXII. In E. M. Jawetz, Mikrobiologi Kedokteran, Edisi XXII (pp. 205-209). 26. Jeanne Mervrayano; Rahmatini; Elizabeth Bahar. 2015. Perbandingan Efektivitas Obat Kumur yang Mengandung Chlorhexidine dengan Povidone Iodine terhadap Streptococcus mutans. Jurnal Kesehatan Andalas, 169. 27. Kamal Rai Aneja, R. J. 2010. The antimicrobial potential of ten often used mouthwashes against four dental caries pathogens . Jundishapur Journal of Microbiology, 15. 28. Kristanti, A. N. 2008. Buku Ajar Fitokimia. In A. N. Kristanti, Buku Ajar Fitokimia. Surabaya: Airlangga University Press. 29. Lutimax. 2011. a natural bioflavonoid product containing luteolin . 30. Made Asri Budisuari1, O. M. 2010. HUBUNGAN POLA MAKAN DAN KEBIASAAN MENYIKAT GIGI DENGAN. Buletin Penelitian Sistem Kesehatan , 84. 31. Novita, Willia. 2016. UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI DAUN SIRIH (PIPER BETLE L) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI STREPTOCOCCUS MUTANS SECARA IN VITRO. JMJ, 141. 32. Nur Lailatul Fitri, R. E. 2016. PENGARUH EKSTRAK BUAH CIPLUKAN (Physalis angulata L.) TERHADAP KADAR SGPT DAN SGOT MENCIT PUTIH JANTAN (Mus musculus) HIPERGLIKEMIA YANG DIINDUKSI ALOKSAN SEBAGAI SUMBER BELAJAR BIOLOGI. JURNAL PENDIDIKAN BIOLOGI INDONESIA, 182.



55



33. Nurul Latifah, A. A. 2014. Ciplukan (Physalis angulata L.). Retrieved from Ciplukan (Physalis angulata L.): http://ccrc.farmasi.ugm.ac.id/en/?page_id=193 34. Oktanauli, L. D. 2011. Efek Antimikroba polifenol teh hijau terhadap Streptococus Mutans. Jurnal ilmiah dan teknologi kedokteran, 19-23. 35. Oktavia, S., S. D., & Yarman2, A. 2016. PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL HERBA CEPLUKAN (Physalis angulata L.) TERHADAP GANGGUAN FUNGSI GINJAL MENCIT PUTIH JANTAN. Jurnal Farmasi Higea, 40. 36. Parubak, A. S. 2013. SENYAWA FLAVONOID YANG BERSIFAT ANTIBAKTERI DARI AKWAY (Drimys becariana.Gibbs). Senyawa flavonoid yang bersifat antibakteri dari akway (Drimys beccariana Gibbs), 34. 37. Pelczar, M. J. 2005. Dasar-dasar Mikrobiologi 1. In M. J. Pelczar, Dasardasar Mikrobiologi 1. Jakarta: UI Press. 38. POM, D. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. In D. POM, Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat (pp. 9-11,16). Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 39. Pratika Viogenta, L. K. 2017. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Akar Ceplukan (Physalis angulata L.) Terhadap Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa. Jurnal Farmasi Lampung, 39. 40. Pratiwi, R. 2005. Perbedaan daya hambat terhadap Streptococcus mutans dari beberapa pasta gigi yang mengandung herbal. Maj. Ked. Gigi. (Dent. J.), 64. 41. Pratiwi, S. 2008. Mikrobiologi farmasi. In S. Pratiwi, Mikrobiologi farmasi (p. 150). Jakarta : Erlangga. 42. Putri dkk., A. S. 2010. Konsep kebidanan. In S. S. Asrinah, Konsep kebidanan. yogyakarta: Graha Ilmu. 43. RACHMA, M. 2010. FORMULASI SEDIAAN OBAT KUMUR YANG MENGANDUNG MINYAK ASTIRI TEMULAWAK (curcuma xanthorriza) SEBAGAI ANTIBAKTERI porphyromonas gingivalis PENYEBAB BAU MULUT. 7.



56



44. Radji, M. 2011. Buku Ajar Mikrobiologi Panduan Mahasiswa Farmasi dan. In M. Radji, Buku Ajar Mikrobiologi Panduan Mahasiswa Farmasi dan (pp. 107, 118, 201-207, 295). Jakarta: Buku Kedokteran EGC. 45. Ravianto. 2017. Mahalnya Harga Cecenet atau Ciplukan Bikin Netizen Heboh. Retrieved from Mahalnya Harga Cecenet atau Ciplukan Bikin Netizen Heboh: http://jabar.tribunnews.com/2017/06/27/mahalnya-hargacecenet-atau-ciplukan-bikin-netizen-heboh?page=3 46. Rawlins, E. 2003. Bentley's Textbook of Pharmaceutics. 18th ed. In E. Rawlins, Bentley's Textbook of Pharmaceutics. 18th ed (pp. 22, 355). London: Bailierre Tindall. 47. RetnoWindya Kusumaningtyasa, N. L. 2015. Potential of Ciplukan (Physalis angulata L.) as Source of Functional Ingredient. Procedia Chemistry, 368. 48. RI, D. 1995. Farmokope Indonesia. In D. RI, Farmokope Indonesia (pp. 449-450). Jakarta: Depkes RI. 49. Rieger, M. 2001. Harry’s Cosmetology. Edisi VIII. In M. Rieger, Harry’s Cosmetology. Edisi VIII. London: Chemical Publishing. 50. Robinson, T. 1991. Kandungan Organik Tumbuhan Obat Tinggi. 51. Rowe, R. C. 2009. Handbook of Pharmaceutical Excipients. In R. C. Rowe, Handbook of Pharmaceutical Excipients. London. 52. Samaranayake, L. S. 2006. Essential Microbiology for Dentistry. In L. S. Samaranayake, Essential Microbiology for Dentistry (pp. 261-264). Philadelphia: Churchill Livingstone Elsevier. 53. Samaranayake, P. L. 2012. Investigative and Clinical Dentistry. In P. L. Samaranayake, Investigative and Clinical Dentistry. John Wiley & Sons Australia, Ltd. 54. Sofia D. Forssten *, Marika Björklund and Arthur C. Ouwehand. 2010. Streptococcus mutans, Caries and Simulation Models. Nutrients, 294. 55. Sri Luliana, R. S. 2017. Uji Aktivitas Antiinflamasi Ekstrak Air Herba Ciplukan (Physalis angulata L.) terhadap Tikus Putih (Rattus norvegicus L.) Jantan Galur Wistar yang Diinduksi Karagena. Traditional Medicine Journal, 199.



57



56. Steenis., C. G. 1997. Flora. Jakarta: Pradnya Paramita. 57. Suriawiria. 2005. Mikrobiologi Dasar. In S. U, Mikrobiologi Dasar. Jakarta: Papas Sinar Sinanti. 58. Topik Hidayat, L. J. 2017. Random Amplified Polymorphism DNA Method to Authenticate Indonesian medicinal Plant Ciplukan (Physalis angulata; Solanaceae. SCIENCE & TECHNOLOGY, 13. 59. Vitasari, O. N. 2012. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Ciplukan (Physalisangulata L.) Terhadap Staphylococcus aureus Dan Pseudomonas aeruginosa”. . 60. Widaryati, R. 2017. Penambahan Ekstrak Jenis Tanaman Herbal yang Berbeda pada Media Pemeliharaan Terhadap Kelangsungan Hidup Benih Ikan Nila (Oreochromis niloticus). Jurnal Ilmu Hewani Tropika , 52. 61. Xie, M. 2010. Antibacterial activityand mechanism of luteolin on staphylococ cus aureus. Acta Microbiologica Sinica, 1180-4. 62. Yufri Aldir, D. y. 2013. UJI AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL HERBA SEBAGAI ANTIANAFILAKSI KUTAN AKTIF IIILUKAN (pft1safts angutata L.) PADA NIENCIT PUTIH BETINA . JURNAL FARMASI DAN KESEHATAN, 77.



58