11 0 57 KB
Glukosa Cair Metode GOD-PAP Uji Kolorimetri Enzimatic Untuk Glukosa Metode Glukosa ditentukan setelah oksidasi enzimatik dengan adanya glukosa oksidase. Hidrogen peroksida yang terbentuk bereaksi dengan katalisis peroksidase dengaan fenol dan 4-aminoantiphyrin menjadi pewarna quinoneimin merah-violet sebagai indikator. Prinsip Reaksi Glukosa + O2 + H2O
GOD
asam glukonat + H2O2
2 H2O2 + 4-aminoantiphyrin
quinoneimine + 4 H 2O
Kandungan REF RGT STD RGT
STD
10260 10121 10123 4 x 100 ml 1 x 1000 ml 1 x 3 ml 1 x 3 ml 9 x 3 ml Reagen Enzim Penyangga Fosfat (fosfat buffer) pH 7,5 4-aminoantiphyrin Fenol Oksidase Glukosa Periksidase Mutarotase Natrium Azida Standar Glukosa
Persiapan Reagen RGT dan STD siap untuk digunakan Stabilitas Reagen Reagen stabil bahkan setelah dibuka hingga tanggal kadaluarsa yang diberikan bila disimpan pada 2 – 8oC. Kontaminasi harus dihindari. Pada 15 -25 oC RGT stabil selama 2 minggu.
Spesimen Serum, Plasma Glukosa stabil selama 24 jam pada suhu 2-8 oC, serum atau plasma dibuat dalam waktu 30 menit setelah pengumpulan. Pembacaan Panjang gelombang: 500 nm, Hg 546 nm Jalur vertikal : 1 cm Suhu : 20-25oC or 37oC Pengukuran : Terhadap regen kosong, hanya satu reagen per seri yang diperlukan Skema Pemipetan Semi mikro Bl STD Sampel Standar 10 ul Sampel 10 ul Blanko 1000 ul 1000 ul 1000 ul Makro Bl STD Sampel Standar 20 ul Sampel 20 ul Blanko 2000 ul 2000 ul 2000 ul Campurka/homogenisasi, inkubasi selama 10 menit pada 20-25oC atau 37oC ukur absorbansi atau STD dan sampel terhadap blanko reagen dalam waktu 60 menit. Perhitungan Konsentrasi Glukosa C= 100 x
Absorben sample
mg/dl
Absorben Standar
Karakteristik Kerja Linearitas Tes ini linear dengan konsentrasi glukosa 400 mg/dl atau 22,2 mmol/dl. Encerkan sampel 1 + 2 dengan aquadest. Jika konsentarsi glukosa sampel melebihi batas ini dan ulangi penentuan. Kalikan hsilnya dengan 3.
Nilai Referensi Serum, plasma
75 – 115 mg/dl
Catatan 1. Serum ikterik mengganggu test dan tidak boeh digunakan sebagai sampel trigliserida hingga 2500 mg/dl dan asam askorbbat hingga 20 mg/dl tidak mengganggu tes. 2. Sedikit sedimen brownies dapat berkembang seiring dengan umur RGT tidak berputar keatas sedimen selama pipetting 3. Hasil glukosa rendah palsu mungkin terjadi dengan sampel dari pasien yang di obati dengan N-asetil sistein (NAC, pengobatan overdosis parasetamol), N-asetil p-benzoquinone imine atau metamizole. Pengambilan sampel darah harus dilakukan sebelum pemberian metamizole.