9 0 242 KB
Laporan Praktikum Biokimia Lipid dan Metabolisme Lipoprotein
Laboratorium Biokimia Departemen Farmasi Klinis dan Komunitas Fakultas Farmasi Universitas Surabaya 2018
BAB I TUJUAN PRAKTIKUM
1. Mengetahui reaksi-reaksi pada identifikasi lipid. 2. Mengukur kadar kolesterol. 3. Mengklasifikasikan lipoprotein utama dan fungsinya. 4. Mengetahui beberapa kondisi klinis akibat gangguan metabolisme lipid. 5. Menjelaskan enzim utama yang terlibat dalam metabolisme lipoprotein.
1
BAB II HASIL PRAKTIKUM 2.1 Uji Kelarutan Bahan Minyak + air
Minyak + alkohol dingin
Hasil Kesimpulan Minyak dan air terpisah dalam 2 Minyak tidak larut dalam fase, lapisan atas minyak dan
air.
lapisan bawah air Minyak dan alkohol dingin
Minyak tidak larut dalam
terpisah dalam 2 fase, lapisan
alkohol dingin.
atas alkohol dingin dan lapisan Minyak + alkohol panas
bawah minyak Minyak dan alkohol panas
Minyak tidak larut dalam
terpisah dalam 2 fase, lapisan
alkohol panas.
atas alkohol panas dan lapisan bawah minyak. Terlihat adanya gelembung pada minyak setelah Minyak + eter
pengocokan. Larutan putih keruh, tidak
Minyak melarut dalam eter.
Asam palmitat
terpisah dalam 2 fase. Larutan putih keruh, terpisah
Asam palmitat tidak
+ air Asam palmitat
dalam 2 fase. Larutan jernih, terpisah dalam 2
melarut dalam air. Asam palmitat tidak
fase.
melarut dalam alkohol
Larutan jernih, tidak terpisah
dingin. Asam palmitat melarut
dalam 2 fase.
dalam alkohol panas
panas Asam palmitat
Larutan jernih, tidak terpisah
Asam palmitat melarut
+ eter Gliserol + air
dalam 2 fase. Larutan jernih, tidak terpisah
dalam eter. Gliserol melarut dalam air.
+ alkohol dingin Asam palmitat + alkohol
2
dalam 2 fase. Larutan jernih, terpisah dalam 2
Gliserol tidak melarut
alkohol dingin Gliserol +
fase. Larutan jernih, tidak terpisah
dalam alkohol dingin. Gliserol melarut dalam
alkohol panas Gliserol + eter
dalam 2 fase. Gliserol dan eter terpisah dalam
alkohol panas. Gliserol tidak larut dalam
2 fase.
eter.
Gliserol +
2.2 Uji Aklorein Bahan Minyak Asam Palmitat Gliserol
Hasil (+) Berbau Menyengat (-) Tidak berbau (+) Berbau Menyengat
Kesimpulan (+) Mengandung gliserol (-) Tidak mengandung gliserol (+) Mengandung gliserol
2.3 Uji Pembentukan Emulsi Bahan Air + Minyak
Hasil Air dan minyak terpisah dalam 2 fase, lapisan atas minyak dan
Kesimpulan Terbentuk Emulsi Tidak Stabil
Air + Minyak +
lapisan bawah air. Tercampur dalam 1 fase
Terbentuk Emulsi
Na₂CO₃ Air + Minyak +
berwarna putih keruh Tercampur dalam 1 fase
Stabil Terbentuk Emulsi
Sabun Minyak + Protein
berwarna putih susu Tercampur dalam 1 fase
Stabil Terbentuk Emulsi
berwarna putih keruh
Stabil
2.4 Uji Keasaman Minyak Bahan Minyak murni
Minyak tengik
Hasil Kertas lakmus menjadi
Kesimpulan Tingkat keasaman minyak
warna kuning muda
murni pada pH 4, minyak
Kertas lakmus menjadi
murni bersifat asam lemah Tingkat keasaman minyak
warna kuning pekat
tengik adalah pH 3, minyak
3
tengik bersifat lebih asam daripada minyak murni. 2.5 Uji Titik Leleh Lemak Bahan Mentega Lemak Ayam Lemak Sapi
Hasil 30,17 detik 21,03 detik 46,05 detik
Kesimpulan Mentega meleleh dalam waktu 30,17 detik Lemak ayam meleleh dalam waktu 21,03 detik Lemak sapi meleleh dalam waktu 46,05 detik
2.6 Pemeriksaan Kadar Kolesterol Darah No
Nama / NRP
1 2 3 4 5 6
Kadar Kolesterol Total (mg/dL) 117 mg/dL 132 mg/dL 150 mg/dL 101 mg/dL 137 mg/dl 166 mg/dL
Penilaian Normal Normal Normal Normal Normal Normal
BAB III PEMBAHASAN 3.1 Dasar Teori Lipid adalah sekelompok senyawa heterogen, meliputi lemak, minyak, steroid, malam (wax), dan senyawa terkait, yang berkaitan lebih karena sifat fisiknya daripada sifat kimianya. Lipid penghasil energi ada dalam bentuk asam lemak. Lipid simpanan (storage lipid) ada dalam bentuk wax dan gliserida. Lipid
4
struktural berupa fosfolipid, sphingolipid, dan glikolipid. Lipid aktif berupa eikosanoid, fosfatidilinositol, turunan sphingosine, dan steroid. Lipid memiliki sifat umum berupa :
Relatif tidak larut dalam air.
Larut dalam pelarut nonpolar seperti kloroform, eter, benzena, heksana, aseton, dan alkohol panas.
Sifat kelarutan tersebut disebabkan sifat hidrofobik lipid. Sifat lain lipid yaitu titik didih dan ketidakjenuhan ditentukan oleh bentuk struktur lipid dan keberadaan ikatan rangkap. Sifat ketengikan ditentukan oleh kemampuan lipid tersebut teroksidasi. Secara umum, lipid diklasifikasikan menjadi 3 golongan besar, antara lain : a. Lipid sederhana yaitu ester asam lemak dengan berbagai alkohol. Contoh:
Lemak (fat) → Ester asam lemak dengan gliserol
Minyak (oil) → Lemak dalam keadaan cair
Wax (malam) → Ester asam lemak dengan alkohol monohidrat berberat molekul tinggi.
b. Lipid kompleks yaitu ester asam lemak yang mempunyai gugus tambahan selain alkohol dan asam lemak. Contoh:
Fosfolipid → Lipid yang mengandung suatu residu asam fosfor selain asam lemak dan alkohol. Lipid ini sering memiliki basa yang mengandung nitrogen dan substituen lain, misalnya alkohol pada gliserofosfolipid adalah gliserol dan alkohol pada sfingofosfolipid adalah sfingosin.
Glikolipid (glikosfingolipid) → Lipid yang mengandung asam lemak, sfingosin, dan karbohidrat.
Lipid kompleks lain → Lipid seperti sulfolipid dan aminolipid. Lipoprotein juga dapat dimasukkan ke dalam kelompok ini.
c. Derivate lipid yaitu senyawa yang dihasilkan oleh proses hidrolisis lipid. 5
Contohnya asam lemak, gliserol, steroid, aldehida lemak, badan keton, hidrokarbon, vitamin larut-lemak, dan hormon. Karena tidak bermuatan, asigliserol (gliserida), kolesterol, dan ester kolesteril disebut lipid netral. Lipid memiliki peran dan keterkaitan dengan kolesterol, kolesterol ini termasuk golongan lipid yang disintesis dari asetil-koA dan konsentrasinya di dalam tubuh ditentukan oleh asupan makanan yang mengandung lipid. Lipid dalam bentuk trigliserida akan mengalami lipolisis menjadi asam lemak dan gliserol. Asam lemak tersebut akan mengalami β-oksidasi menghasilkan asetilkoA yang akan masuk ke siklus Krebs untuk menghasilkan energi. Sebagian asetil-koA tersebut digunakan untuk sintesis kolesterol. Hal tersebut menunjukkan bahwa lipid dalam hal ini trigliserida berperan dalam proses pembentukan kolesterol, yaitu sebagai penyedia asetil-koA sebagai bahan bakunya. Lipid memiliki reaksi kimia yang khas, antara lain: 1. Hidrolisis lipid seperti pada triasilgliserol dapat dilakukan dengan bantuan enzim lipase dan akan menghasilkan asam lemak serta gliserol. Sifat lipase pankreas ini dapat dimanfaatkan untuk memecah ikatan ester dari triasilgliserol. 2. Penyabunan merupakan hidrolisis lemak yang dilakukan oleh alkali dan menghasilkan gliserol dan garam alkali asam lemak yang disebut sabun. 3. Penguraian lipid (kerusakan/ketengikan) adalah perubahan kimia yang akan menimbulkan aroma tidak sedap dan rasa tidak enak pada lemak tersebut. Hal tersebut disebabkan karena adanya autooksidasi, hidrolisis dan kegiatan bakteri yang menganggap oksigen di udara menyerang ikatan rangkap pada asam lemak untuk membentuk ikatan peroksida sehingga bilangan yodium turun dan dilepaskannya gliserol dan asam lemak. Timbal maupun tembaga dapat mengkatalis ketengikan, mengasingkan oksigen atau menambah zat antioksidan untuk menghambat proses ketengikan.
6
Asam lemak dalam tubuh terutama terdapat sebagai ester dalam minyak dan lemak alami, tetapi di dalam plasma terdapat dalam bentuk tak terseterifikasi sebagai asam lemak bebas, yakni suatu bentuk transpor. Asam lemak merupakan suatu rantai hidrokarbon dengan suatu gugusan karboksil terminal telah diidentifikasi lebih dari 70 asam lemak yang tersedia di alam. Walaupun asam lemak berantai pendek yang lazim ditemukan, namun triasilgliserolutama ditemukan pada tumbuh-tumbuhan memiliki asam lemak dengan jumlah atom karbon genap, dengan panjang 14 hingga 22 karbon. Rantai asam lemak tersebut dapat jenuh atau tidak jenuh. Asam lemak jenuh tidak mengandung ikatan ganda C=C dalam strukturnya, sementara asam lemak tidak jenuh memiliki satu atau lebih ikatan ganda yang terkadang berada dalam konfigurasi geometris cis. Titik leleh asam lemak karbon berjumlah genap meningkat seiring dengan panjang rantai dan menurun sesuai ketidakjenuhannya. Pada hakekatnya, asam lemak tidak jenuh memiliki titik leleh yang lebih rendah dibandingkan asam lemak jenuh. Contohnya asam lemak jenuh (asam stearat) memiliki titih didih 70oC; suatu bentuk monoenoat (asam oleat) melebur pada 13oC dan suatu bentuk dienoat (asam linoleat) pada -5oC. Triasilgliserol tumbuhan (minyak tumbuhtumbuhan) adalah cair pada suhu ruang, karena mereka memiliki proporsi asam lemak tidak jenuh yang lebih besar daripada triasilgliserol hewan yang padat atau semi-padat pada suhu yang sama.
Perbedaan dalam kandungan asam lemak jenuh mendapat banyak perhatian karena asupan harian yang berlebihan dari asam lemak jenuh dan kolesterol berkaitan dengan terjadinya penyakit jantung. Sebagai akibatnya, penasehat medis dan gizi menyarankan suatu penurunan dari lemak hewan dan kolesterol dalam diet, dengan proporsi yang lebih tinggi dari asupan lemak berupa triasilgliserol yang tinggi dalam asam lemak polyunsaturated yaitu asam lemak yang mengandung dua atau lebih ikatan ganda. Asupan lemak yang lebih rendah juga merupakan kalori dari suatu diet karena atas dasar berat, lebih dari dua kali lipat kalori atau energi yang didapat dari lemak daripada karbohidrat dan protein. 7
Lipoprotein adalah sebuah senyawa kompleks larut air yang terdiri dari protein (apolipoprotein) dan lipid serta berfungsi untuk mentransport lipid dalam sirkulasi tubuh pada semua jenis vertebrata bahkan insektisida (Jonas dan Phillips, 2008). Menurut Almatsier (2002), lipoprotein didefinisikan sebagai gabungan molekul lipida dan protein yang disintesis di dalam hati, dimana tiap jenis lipoprotein berbeda dalam ukuran, densitas, dan mengangkut berbagai jenis lipida dalam jumlah yang berbeda. Lipoprotein disintesis pada organ hepar dan usus melalui suatu perubahan metabolik dari prekursor lipoprotein, atau bisa juga tersintesis di membran sel dari lipid seluler dan eksogenus lipoprotein atau apolipoprotein. Didalam sirkulasi, lipoprotein sangatlah dinamis. Lipoprotein berperan dalam reksi enzimatik dengan komponen lipid yang dimilikinya, memfasilitasi transfer lipid dan melakukan transfer apolipoprotein larut air. Pada akhirnya, lipoprotein diambil dan dikatabolisme di hati, ginjal dan jaringan periferal melalui reseptor termediasi endositosis dan mekanisme lain. 1. Komponen Penyusun Lipoprotein Secara garis besar partikel lipoprotein mengandung proporsi yang bervariasi dari 4 elemen utama, yaitu : Kolesterol, trigliserid, fosfolipid dan protein spesifik yang disebut apoprotein. a. Trigliserida : Trigliserida (dalam bentuk triasilgliserol atau triasilgliserida) adalah sebuah gliserida, yaitu ester dari gliserol dan tiga asam lemak. b. Kolesterol : Kolesterol adalah metabolit yang mengandung lemak sterol yang ditemukan pada membran sel dan disirkulasikan dalam plasma darah. Kolesterol juga banyak terdapat dalam lipoprotein plasma darah, kurang dari 70% dalam bentuk ester kolesterol. c. Fosfolipid : Fosfolipid merupakan golongan senyawa lipid dan merupakan bagian dari membran sel makhluk hidup; bersama dengan protein, glikolipid dan kolesterol. Fosfolipid memiliki kerangka gliserol dan 2 gugus asil. Pada posisi ketiga dari kerangka gliserol ditempati oleh gugus fosfat yang terikat pada amino alkohol. d. Apolipoprotein : Apolipoprotein adalah suatu protein di dalam tubuh yang membantu transportasi lipid. Beberapa apoprotein bersifat menyatu (integral), dan
8
tidak bisa dilepaskan, sementara sebagian lagi (apoprotein perifer) dapat berpindah dengan bebas ke lipoprotein lainnya. 2. Klasifikasi Lipoprotein Berdasarkan komposisi relatif dari protein dan lipidnya, lipoprotein diklasifikasikan menjadi 4 macam yaitu, kilomikron (KM), very low density (VLDL), low density (LDL), dan high density (HDL) lipoprotein. Komposisi relatif dari lipid dan protein pada lipoprotein ini akan menentukan kepadatan dari masing-masing kelas lipoprotein. KM hanya memiliki 1-2% protein, sedangkan HDL memiliki protein hingga 50% dari total beratnya. Diameter dari lipoprotein berbanding terbalik dengan kepadatan mereka, yaitu berkisar antara 6000 Å untuk KM hingga 70 Å untuk HDL 1.
Kilomikron : Kilomikron mempunyai diameter 90 — 1000 nm dan
densitas