Perhitungan HPLC [PDF]

Citation preview

Perhitungan 1. Pembuatan larutan baku Larutan stok hidroquinon 0,1% Artinya 100 mg / 100 mL = 100000 µg / 100 mL =1000 ppm



C standar akhir=







C standar awal x Volume awal Volume akhir



100 ppm



100=



1000 x Volume awal 1000



V awal = 100 µL 



150 ppm



150=



1000 x Volume awal 1000



V awal = 150 µL 



200 ppm



200=







V awal = 200 µL 250 ppm



25 0=







1000 x Volume awal 1000



1000 x Volume awal 1000



V awal = 250 µL 300 ppm



30 0=



1000 x Volume awal 1000



V awal = 300 µL 2. Pembuatan kurva baku hidroquinon C Standar Akhir (ppm) 0 100 150 200 250



280 nm Waktu Retensi Area Under (menit) Curve (AUC) 2,175 80369 2,14 739089 2,151 1144315 2,155 1336598 2,154 1909611



Kurva Baku Hidroquinon pada 280 nm 2500000 2000000 1500000 AUC (Area Under Curve) 1000000



f(x) = 7050.84x + 54879.03 R² = 0.99 Linear ()



500000 0 0 100 200 300 Konsentrasi Standar Akhir



Persamaan y = 7050,8x + 54879, dengan R2=0,9855; a= 7050,8; b= 54879 3. Perhitungan kadar sampel



b x volume total a Konsentrasi sampel= volume sampel awal 54879 x 1000 µL 7050,8 Konsentrasi sampel= 500 µL =



Pengenceran



1000 µL 500 µL



15,56 ppm x 15,56 ppm = 31,13 ppm



31,13 ppm =31,13 µg/mL = 3113 µg/100 mL =3,113 mg/100 mL = 0,003%