Proposal ELSI TERBARU [PDF]

Citation preview

PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN PUCUK MERAH (Syzygium myrtifolium Walp.) TERHADAP KADAR ASAM URAT MENCIT PUTIH (Mus musculus L.) JANTAN



SARI SKRIPSI



Oleh :



ELSI ISNEINI RUNANDA NIM :1401016



PROGRAM STUDI S1 FARMASI SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI RIAU YAYASAN UNIV RIAU PEKANBARU 2018



DAFTAR ISI



Halaman DAFTAR ISI...................................................................................................



i



DAFTAR TABEL .......................................................................................... iv DAFTAR GAMBAR ......................................................................................



v



DAFTAR LAMPURAN................................................................................. vi BAB I PENDAHULUAN ..............................................................................



1



BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...................................................................



5



2.1 Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) ................................



5



2.1.1



Klasifikasi Tumbuhan ....................................................



5



2.1.2



Morfologi ........................................................................



6



2.1.3



Kandungan Kimia dan Khasiat .......................................



6



2.1.4



Penelitian Toksisitas Pucuk Merah ................................



7



2.2 Tinjauan Tentang Flavonoid .........................................................



9



2.3 Proses Ekstraksi Bahan Alam ....................................................... 10 2.3.1



Pengertian ...................................................................... 11



2.3.2



Metode Ekstraksi ............................................................ 12



2.3.3



Proses Maserasi .............................................................. 12



2.3.4



Proses Pemekatan ........................................................... 13



2.3.5



Skrining Fitokimia .......................................................... 13



2.4 Asam Urat ..................................................................................... 15 2.4.1



Pengertian Asam Urat..................................................... 15



2.4.2



Metabolisme Asam Urat ................................................. 15



2.4.3



Patologis Asam Urat ....................................................... 18 2.4.3.1 Hiperurisemia ...................................................... 18 2.4.3.2 Gout ..................................................................... 21



2.4.4



Tanda dan Gejala ............................................................ 23



2.5 Penatalaksaan Terapi ..................................................................... 23 2.5.1



Terapi Farmakologi ........................................................... 23



2.5.2



Terapi Non Farmakologi ................................................... 25



2.6 Tinjauan tentang Allopurinol ........................................................ 26 i



2.6.1



Sifat dan Kimia Farmakologi ........................................... 26



2.6.2



Farmakokinetik ................................................................. 27



2.6.3



Interaksi Obat ................................................................... 28



2.6.4



Penggunaan Terapetik ...................................................... 29



2.6.5



Efek Merugikan yang Umum ........................................... 30



2.6.6



Uraian Umum Allopurinol ............................................... 31



2.7 Makanan Tinggi Purin ................................................................... 31 2.8 Hewan Percobaan Mencit Putih (Mus musculus L.) ................... 33 2.9 Metode Pemeriksaan Asam Urat ................................................... 33 BAB III



PELAKSANAAN PENELITIAN ............................................. 35



3.1 Tempat dan Waktu Penelitisn ....................................................... 35 3.2 Metodologi Penelitian ................................................................... 35 3.2.1



Alat dan Bahan ............................................................... 35 3.2.1.1 Alat ..................................................................... 35 3.2.1.2 Bahan .................................................................. 35



3.2.2



Hewan Percobaan ........................................................... 36



3.2.3



Rancangan Penelitian ..................................................... 36



3.2.4



Prosedur Penelitian ......................................................... 36 3.2.4.1



Pengambilan Sampel ........................................ 36



3.2.4.2



Pembuatan Fraksi Etil Asetat Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah ........................................... 37



3.2.4.3



Skrining Fitokimia Daun Segar ........................ 37



3.2.4.4



Skrining Fitokimia Fraksi ................................. 39



3.2.4.5



Persiapan Hewan Uji ........................................ 41



3.2.4.6



Jumlah Sampel .................................................. 41



3.2.4.7



Pengelompokkan Hewan Uji ............................ 42



3.2.4.8



Perencanaan Dosis ............................................ 43



3.2.4.9



Pembuatan Sediaan Uji ..................................... 43



3.2.4.10 Pemberian Sediaan Uji ..................................... 44 3.2.4.11 Cara Pengambilan Darah .................................. 45 3.2.4.12 Penentuan Kadar Asam Urat Darah .................. 45 3.2.4.13 Analisis Data ..................................................... 45 ii



DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 46



iii



DAFTAR GAMBAR



Gambar



Halaman



1.



Struktur Dasar Flavoinoid .........................................................................



9



2.



Strruktur Asam Urat .................................................................................. 15



3.



Pembentukan Asam Urat .......................................................................... 17



4.



Struktur Allopurinol .................................................................................. 31



5.



Tanaman Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) ............................ 51



6.



Daun Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) ................................. 51



7.



Surat Identifikasi Sampel Daun Tanaman Pucuk Merah .......................... 52



8.



Skema Kerja Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) .................................................................................... 53



9.



Skema Uji Penurunan Kadar Asam Urat Darah ....................................... 55



iv



DAFTAR TABEL



Tabel 1.



Halaman



Daftar Makanan Mengandung Purin ......................................................... 32



v



DAFTAR LAMPIRAN



Lampiran



Halaman



1. Tanaman Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) ............................. 51 2. Surat Identifikasi Sampel Daun Tanaman Pucuk Merah ........................... 52 3. Skema Kerja Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) ..................................................................................... 53 4. Skema Uji Penurunan Kadar Asam Urat Darah......................................... 55



vi



BAB I PENDAHULUAN



Asam urat merupakan produk akhir yang terbentuk dari senyawa purin yaitu adenin dan guanin dihasilkan dalam jaringan yang mengandung enzim xantin oksidase terutama di hati dan usus halus. Sekitar 90% penyakit asam urat disebabkan oleh ketidakmampuan ginjal membuang asam urat secara tuntas dari tubuh melalui urin. Sebagian kecil lainnya karena tubuh memproduksi asam urat secara berlebihan (Dalimartha, 2008). Hiperurisemia adalah keadaan dimana kadar asam urat di dalam darah atau serum melebihi kadar normal. Hiperurisemia bersifat asimtomatik, hiperurisemia ditunjukkan dengan adanya kadar asam urat yang abnormal. Kadar asam urat abnormal saat kadar asam urat melebih 7,0 mg/dl dan pada kadar ini beresiko gout arthritis (Dipiro, 2009). Penyakit asam urat atau yang dikenal juga dengan sebutan gout merupakan suatu penyakit karena kelainan metabolisme purin (hiperurisemia). Pada keadaan ini bisa terjadi oversekresi asam urat atau penurunan fungsi ginjal yang mengakibatkan penurunan eksresi asam urat, atau kombinasi keduanya. Kadar asam urat normal pada wanita : 2,6 – 6 mg/dL, dan pada pria : 3 – 7 mg/dL (Smeltzer, 2002). Hiperurisemia merupakan peningkatan kadar asam urat yang terjadi akibat percepatan biosintesis purin (adenin dan guanin untuk membentuk DNA) dan asam amino degradasi purin berlebih akibat adanya kematian sel, kelebihan asupan asam nukleat dan protein melalui makanan atau ekskresi asam urat melalui 1



ginjal yang tidak sempurna (Putra, 2009) sedangkan gout (pirai) adalah penyakit yang sering ditemukan, merupakan kelompok penyakit heterogen sebagai akibat deposisi kristal monosodium urat pada jaringan, akibat gangguan metabolisme berupa hiperurisemia (Misnadiarly, 2008). Umumnya, gout ini menyerang lutut, tumit dan jempol kaki. Sendi yang terserang tampak bengkak, merah, panas, nyeri di kulit, sakit kepala, dan tidak nafsu makan. Penyebabnya adalah naiknya kadar asam urat dalam darah (Hariana, 2005). Prevalensi



penyakit



gout



pada populasi



di



USA diperkirakan



13,6/100.000 penduduk. Sedangkan, di Indonesia sendiri diperkirakan 1,613,6/100.000 orang, prevalensi ini meningkat seiring dengan meningkatnya umur. Perlu diketahui pula di Indonesia gout diderita pada usia lebih awal dibandingkan dengan negara barat. 32% serangan gout terjadi pada usia dibawah 34 tahun. Sementara diluar negeri rata-rata diderita oleh kaum pria diatas usia tersebut. (Sukarmin, 2015). Pirai atau gout merupakan penyakit metabolik yang ditandai oleh episode artritis akut berulang karena adanya endapan kristal monosodium urat pada sendisendi dan jaringan sekitar (Katzung et al, 2012; abdullah et al,2012). Usaha untuk menurunkan kadar asam urat darah dapat dilakukan dengan mengurangi produksi asam urat atau meningkatkan ekstresi asam urat oleh ginjal (Price dan wilson, 2012). Allopurinol adalah contoh obat yang bekerja menghambat pembentukan asam urat melalui penghambatan aktivitas enzim xantin oksdase dan probenesid merupakan contoh obat orikosurik yang dapat meningkatkan ekstresi asam urat dengan menghambat reabsorbsi di tubulus ginjal. Sayangnya, obat-obatan antihiperurisemia ini memiliki efek samping yang tidak 2



diinginkan, seperti hipersensitivitas (allopurinol) atau peningkatan resiko pembentukan batu ginjal atau nefrotoksisitas (urikosurik) (Katzung et al ,2012). Oleh sebab itu, penelitian tentang antihiperurisemia alternatif dengan profil toksikologi yang lebih kecil akan sangat dibutuhkan. Penggunaan tanaman obat sebagai alternatif dalam pengobatan banyak dipertimbangkan masyarakat, sehingga diperlukan penelitian untuk membuktikan khasiat tanaman tersebut. Tanaman obat berkhasiat merupakan kekayaan alam yang belum banyak digali dan dikembangkan secara mendalam, sehingga diperlukan penelitian dan pengujian yang lebih lanjut baik dari segi kkhasiat maupun keamanan penggunaannya pada manusia (Dewoto, 2007). Dewoto, H.R., 2007, Pengembangan Obat Tradisional Indonesia Menjadi Fitofarmaka, Majalah Kedokteran Indonesia, 57(7), 206-211.



Penelitian yang dilakukan terhadap genus Syzygium menunjukkan adanya aktivitas penurunan kadar asam urat yaitu pada rebusan daun salam (Syzygium polyanthum) pada dosis 7,8 g/BB mampu menurunkan kadar asam urat sebanyak 16,10% pada mencit putih jantan (Djohari dan Paramitha, 2015). Hasil penelitian ekstrak etanol daun juwet ( Syzygium cumini L.) mengandung senyawa terpenoid, steroid, dan flavonoid yang menunjukkan aktivitas antihiperurisemia (Rukmana, 2011). Pada penelitian sebelumnya dengan menggunakan fraksi air ekstrak etanol daun salam dosis 210 mg/kgBB dan 420 mg/kgBB (Utami, 2008), infusa daun salam (Syzygium polyanthum) dosis 2,5 g/kgBB (Arianti, 2007) memeiliki efek penurunan kadar asam urat yang setara dengan allopurinol 10 mg/kgBB.



3



Tanaman pucuk merah (Syzygium myrtifolium Walp.) biasa dimanfaatkan sebagai tanaman hias. Namun, tanaman pucuk merah ini juga memiliki kandungan senyawa kimia yang bermanfaat. Daun pucuk merah (Syzygium myrtifolium Walp.) mengandung senyawa flavonoid, fenolik dan terpenoid yang memiliki aktivitas antitumor dan angiogenesis (Aisha, 2013). Hasil penelitian menyatakan bahwa fraksi etil asetat pada daun berwarna merah pucuk merah (Syzygium myrtifolium Walp.) mengandung senyawa alkaloid, triterpenoid, fenolik, dan flavonoid (Wati et al, 2017). Hasil penelitian lain menyatakan bahwa daun pucuk merah (Syzygium myrtifolium Walp.) pada fraksi etanol-air memiliki aktivitas antioksidan paling tinggi (Oktiadina, 2015). Pada penelitian sebelumnya senyawa metabolit yang terkandung pada ekstrak etanol daun hijau tanaman pucuk merah (Syzygium myrtifolium Walp.) adalah senyawa alkaloid, saponin triterpenoid, steroid, flavonoid dan fenolik dan terdapat aktivitas antihiperurisemia pada dosis 7,40 mg/kgBB yang setara dengan allopurinol 10 mg/kg BB (Juwita et al, 2017). Beberapa peneliti terdahulu sudah melakukan penelitian dengan toksisitas daun pucuk merah. Pradila (2015) melakukan penelitian uji toksisitas akut daun pucuk merah dan didapatkan LD50 diatas 1600 mg/kgBB yang berarti tidak toksik. Kemudian penelitian mengenai uji toksisitas subkronik yang telah dilakukan, diantaranya adalah penelitian mengenai pengaruh pucuk merah terhadap fungsi ginjal dilakukan oleh Asnila (2007) mengenai pengaruh pemberian ektrak etanol daun pucuk merah terhadap fungsi ginjal mencit putih jantan yang menunjukkan pemberian ekstrak pada dosis 300,600, dan 900 mg/kgBB tidak mempengaruhi kadar kreatinin serum.



4



Berdasarkan latar belakang masalah diatas, peneliti tertarik untuk melakukan penelitian mengenai pengaruh pemberian fraksi etil asetat daun pucuk merah (Syzygium myrtifolium Walp.) dalam menurunkan kadar asam urat pada dosis yang ditetapkan. Selain itu, penelitian ini juga bisa menjadi rujukan awal dalam pengembangan obat-obat tradisional kedepannya.



5



BAB II TINJAUAN PUSTAKA



2.1



Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) Pucuk merah (Syzygium myrtifolium Walp.,) merupakan spesies tanaman



yang termasuk ke dalam famili Myrtaceae, biasa dimanfaatkan sebagai tanaman hias. Adapun uraian dari tanaman ini meliputi klasifikasi tanaman, morfologi, kandungan kimia dan khasiat serta toksisitas. 2.1.1 Klasifikasi Tanaman Klasifikasi tanaman ini menurut Suhono (2010) sebagai berikut: Kingdom



: Plantae



Divisi



: Spermatophyta



Class



: Magnoliopsida



Subclass



: Magnoliidae



Ordo



: Myrtale



Family



: Myrtaceae



Genus



: Syzygium



Species



: Syzygium myrtifolium Walp.



Sinonim



: Eugenia myrtifolia Roxb, Eugenia oleina Wright, Eugenia parva C.B.Rob, Eugenia sinubanensis Elmer, Syzygium campanellum Mig,



Syzygium campanulatum



Korth,



Syzygium campanulatum Var. Longistylum Chantaran and J. Parn, Syzygium sinubanense (Elmer) Diels. Nama Daerah : Pucuk merah 6



2.1.2 Morfologi Tanaman pucuk merah (Syzygium myrtifolium walp) adalah tanaman bias yang tergolong dalam family myrtacae. Pucuk merah memiliki daun berwarna merah dan hijau. Daun tumbuh rapat antara satu daun dengan daun yang lainnya. Tekstur daunhalus dengan panjang daun berkisar 5 cm dan permukaan daun yang mengkilap. Saat daun masih pucuk dan muda, daun akan berwarna merah dan dapat tumbuh dengan baik dengan mendapat sinar matahari penuh, bunganya berwarna putih atau cream dan tidak mencolok. Panajng daun ± 6 cm dan lebar 2 cm, pertulangan daun pucuk merah menyirip. Buahnya berbentuk buah-buah berry kecil yang berwarna merah hingga coklat kemerahan. Biji pucuk merah berbentuk bulat tidak sempurna, permukaannya tidak rata dan berwarna coklat agak keungu-unguan serta diameternya ±3-4 mm. Sedangkan batangnya berarna coklat dan berbentuk berserpih. Pucuk merah digunakan sebagai tanaman hias dan tanaman peneduh. Batang pucuk merah berbentuk bulat dan keras berkayu, tinggi batangnya bisa mencapai 5 meter. Akar pucuck merah adalah akar tunggang sehingga bisa menopang pohonnya yang tinggi (Gilman, 2013). 2.1.3 Kandungan Kimia dan Khasiat Berdasarkan uji skrining fitokimia daun pucuk merah mengandung flavonoid, fenolik, steroid, dan terpenoid (Anggraini, 2015; Masyitah, 2015; Aisha el al, 2013). Selain itu, daun merah dari tanaman pucuk merah mengandung alkaloid dan triterpenoid (Haryati et al, 2015). Biasanya masyarakat memanfaatan tanaman pucuk merah ini sebagai tanaman hias. Pada daun pucuk merah diperoleh nilai total fenolik dan flavonoid ektrak etanol dan etil asetat daun pucuk merah yang tinggi yang memiliki aktifitas 7



antioksidan dengan nilai LC50 ekstrak etanol dan etil asetat secara berturut-turut 123,38 ppm dan 238,498 ppm (Anggraini, 2015) sedangkan buah pucuk merah yang diisolasi mengandung antosianin juga memiliki aktivitas antioksidan dan aplikasi sebagai pewarna alami (Santoni, et al , 2013). Telah dilakukan juga penelitian, didapatkan dari kristal dimethoxychalcone (DMC) yang diisolasi dari daun pucuk merah dan ekstrak etanol daun pucuk merah memiliki aktivitas sitotoksik (Memon et al, 2014).



Senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam ekstrak total daun pucuk merah (Syzygium myrtifolium Walp.) adalah golongan alkaloid, triterpenoid, steroid,



saponin, fenolik dan flavonoid. Fraksi



n-heksana



mengandung senyawa golongan alkaloid, triterpenoid dan steroid. Fraksi etil asetat mengandung senyawa golongan alkaloid, triterpenoid, steroid, fenolik dan flavonoid



sedangkan



fraksi



etanol-air



mengandung



senyawa



golongan



triterpenoid, saponin dan fenolik (Haryati dan saleh, 2015). Pada penelitian Santoni et al (2013) buah pucuk merah yang diekstraksi menggunakan berbagai pelarut diketahui mengandung senyawa antosianin yang berkhasiat sebagai antioksidan dan sebagai pewarna alami. 2.1.4



Penelitian Toksisitas Pucuk Merah Beberapa peneliti terdahulu telah melakukan penelitian berkaitan dengan



toksisitas daun pucuk merah. (Pradila, 2015) melakukan penelitian uji toksisitas akut dari daun pucuk merah dan didapatkan nilai LD50 diatas 16000 mg/KgBB yang berarti tidak toksik. Pada pemeriksaan biokimia klinis telah dilakukan penelitian toksisitas dari ekstrak etanol daun pucuk merah pada dosis 300, 600, dan 900 mg/KgBB. Diantaranya penelitian mengenai pengaruh pemberian ekstrak 8



terhadap kadar kreatinin serum yang menunjukkan pada dosis 300, 600, dan 900 mg/KgBB tidak mempengaruhi kadar kreatinin serum (Asnila, 2017). Penelitian mengenai pengaruh pemberian ekstrak terhadap kadar nitrogen urea serum menunjukkan pada dosis 300 dan 600 mg/KgBB tidak mempengaruhi kadar nitrogen urea serum, sedangkan pada dosis 900 mg/KgBB mulai mempengaruhi kadar nitrogen urea serum, namun masih berada dalam rentang normal (Renita, 2016). Penelitian mengenai pengaruh ekstrak terhadap kadar birilubin serum total menunjukkan pada dosis 300, 600, dan 900 mg/KgBB tidak mempengaruhi kadar birilubin serum total (Novrita, 2016). Selanjutnya penelitian pengaruh pemberian ekstrak terhadap aktivitas SGOT dan SGPT menunjukkan pada dosis 300, 600, dan 900 mg/KgBB terjadi kenaikan aktivitas SGOT dan SGPT yang masih berada dalam rentang normal (Anggraini, 2017), dan penelitian mengenai pengaruh pemberian ekstrak etanol daun pucuk merah terhadap kadar albumin menunjukkan pada dosis 600, dan 900 mg/KgBB tidak mempengaruhi kadar albumin, namun pada dosis 300 mg/KgBB terjadi penurunan kadar albumin (Astuti, 2016). Selanjutnya pada pemeriksaan histopatolgi juga telah dilakukan penelitian toksisitas dari ekstrak etanol daun pucuk merah pada dosis 300, 600, dan 900 mg/KgBB. Diantaranya penelitian pengaruh pemberian ekstrak terhadap histologi hati mencit putih didapatkan hasil pemeriksaan makroskopis pada dosis 300 mg/KgBB warna organ hati sedikit pucat sedangkan dosis 600 dan 900 mg/KgBB warna organ hati lebih pucat dengan tekstur organ hati licin dan terlihat bintik kecil pada hati, pada pemeriksaan mikroskopis secara kualitatif pada dosis 9



300, 600, dan 900 mg/KgBB sinusoid mengalami pelebaran dan kongesti sedangkan pemeriksaan mikroskopis kuantitatif pada dosis 600 dan 900 mg/KgBB menyebabkan kenaikan persentase kerusakan vena sentralis (Santi, 2017). Penelitian pengaruh pemberian ekstrak terhadap histologi jantung mencit putih jantan didapatkan hasil pemeriksaan makroskopis tidak terjadi perubahan pada tekstur dan warna organ jantung, selanjutnya pada pengamatan mikroskopis



kualitatif



pemberian



ekstrak



pada



dosis



900



mg/KgBB



mengakibatkan sedikit kerusakan pada vena besar dan arteri besar, kemudian pada pengamatan kuntitatif pemberian ekstrak pada dosis 900 mg/KgBB dapat meningkatkan diameter sel otot jantung secara signifikan (Sismayani, 2017). Selanjutnya penelitian pengaruh pemberian ekstrak terhadap histologi ginjal diperoleh hasil bahwa pada dosis 300 mg/KgBB tidak mempengaruhi histologi ginjal kiri dan kanan sedangkan dosis 600 dan 900 mg/KgBB mempengaruhi histologi ginjal kiri dan kanan (Musdalifah, 2017). Dan penelitian uji efek teratogenik ekstrak etanol daun pucuk merah terhadap mencit putih betina menunjukkan terjadinya hemoragi pada fetus mencit pada dosis 900 mg/KgBB; (Latifah, 2017). 2.2



Tinjauan tentang Flavonoid Flavonoid merupakan metabolit sekunder yang terdapat pada tumbuhan



dan didistribusikan secara luas dalam tumbuhan tersebut. Flavonoid banyak ditemukan di dalam sayuran, kacang-kacangan, buah, biji, batang, bunga, dan lain-lain. Struktur dasar flavonoid adalah inti dengan 2-fenil-benzo-γ-piran yang terdiri dari dua cincin benzen (A dan B) yang dihubungkan oleh cincin piran 10



heterosiklik (C) (Shandhar et al, 2011). Struktur flavonoid dapat ditunjukkan pada Gambar 1.



Gambar 1. Struktur dasar flavonoid (Kumar dan Pandey, 2015) Flavonoid diketahui memiliki aktivitas biologis dan farmakologi, seperti antioksidan, antibakteri, antivirus, dan efek antimutagenik. Flavonoid juga dapat menghambat



beberapa



enzim,



seperti



xantin



oksidase,



siklooksigenase,



lipoksigenase, dan fosfoinositida 3-kinase. Xantin oksidase dapat menyebabkan hiperurisemia dan bersifat oksidatif dalam kerusakan jaringan hidup. Flavonoid dapat mengkatalisis oksidasi hipoksantin dan xantin untuk asam urat (Lin et al., 2002). Menurut Mo et al. (2007) flavonoid memiliki 6 golongan senyawa yang aktif sebagai xantin oksidase inhibitor yaitu kuersetin, morin, myricetin, kaemferol, apigenin dan puerarin pada mencit yang diinduksi kalium oksonat. 2.3



Proses Ekstraksi Bahan Alam



2.3.1



Pengertian Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut



sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan menggunakan suatu pelarut. Senyawa aktif yang terdapat dalam berbagai simplisia dapat digolongkan kedalam golongan minyak atsiri, alkaloid, flavonoid dan lain-lain, dengan diketahuinya senyawa aktif yang terkandung pada simplisia mempermudah pemilihan pelarut dan cara ekstraksi yang tepat (Anonim, 2000). 11



Ekstrak adalah sediaan kering, kental atau cair yang diperoleh dengan mengekstraksi senyawa aktif dari simplissia nabati ataupun hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian pelarut diuapkan dan massa yang yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (Anonim, 2000). Ekstrak dikelompokkan atas dasar sifatnya, yaitu (Voight, 2005) : 1. Ekstrak encer adalah sediaan yang memiliki konsistensi semacam madu dan dapat dituang. 2. Ekstrak kental adalah sediaan yang liat dalam keadaan dingin dan tidak dapat dituang. Kandungan air berjumlah sampai 30%. Tinggimya kadar kandungan air menyebabkan ketidakstabilan sediaan obat karena cemaran bakteri. 3. Ekstrak kering adalah sediaan yang memiliki konsistensi kering dan mudah dituang, sebaiknya memiliki kandungan lembab lebih dari 5%. 4. Ekstrak cair adalah ekstrak yang dibuat sehingga 1 bagian simplisia sesuai dengan 2 bagian ekstrak cair. 2.3.2 Metode Ekstraksi (Anonim, 2000) Ekstraksi adalah suatu proses pemisahan kandungan senyawa kimia dari jaringan tumbuhan ataupun hewan dengan menggunakan penyari tertentu. Ada beberapa metode ekstraksi yaitu: a. Cara Dingin 1. Maserasi Maserasi adalah pengekstrakan simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur 12



ruangan (kamar). Remaserasi berarti dilakukan pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan penyaringan maserat pertama dan seterusnya. 2. Perkolasi Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai terjadi penyarian sempurna yang umumnya dilakukan pada temperatur kamar. Proses perkolasi terdiri dari tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya (penetasan/penampungan ekstrak) terus menerus sampai diperoleh ekstrak (perkolat). b. Cara Panas 1. Refluks Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya selama waktu tertentu dan dalam jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendinginan balik. 2. Digesti Digesti adalah maserasi dengan pengadukan kontinu pada temperatur yang lebih tinggi dari temperatur kamar yaitu pada 40-500C. 3. Infusa Infusa adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas air (bejana infusa tercelup dalam penangas air mindidih, temperatur terukur 96-980C) selama waktu tertentu (15-20 menit). 4. Dekokta Dekokta adalah infus pada waktu yang lebih lama dan temperatur sampai titik didih air. 5. Soxhletasi 13



Soxhletasi adalah ekstraksi yang menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut yang relatif konstan dengan adanya pendinginan balik. 6. Destilasi uap Destilasi uap adalah cara destilasi uap khusus yang digunakan untuk senyawa yang dapat ikut diuapkan bersama uap air. 2.3.3



Proses Maserasi Maserasi merupakan metode sederhana yang paling banyak digunakan.



Cara ini sesuai, baik untuk skala kecil maupun skala industri. Metode ini dilakukan dengan memasukkan serbuk tanaman dan pelarut yang sesuai ke dalam wadah inert yang tertutup rapat pada suhu kamar. Proses ekstraksi dihentikan ketika tercapai kesetimbangan antara konsentrasi senyawa dalam pelarut dengan konsentrasi dalam sel tanaman. Setelah proses ekstraksi, pelarut dipisahkan dari sampel dengan penyaringan (Agoes, 2007). Kerugian utama dari metode maserasi ini adalah memakan banyak waktu, pelarut yang digunakan cukup banyak, dan besar kemungkinan beberapa senyawa hilang. Selain itu, beberapa senyawa mungkin saja sulit diekstraksi pada suhu kamar. Namun di sisi lain, metode maserasi dapat menghindari rusaknya senyawa-senyawa yang bersifat termolabil (Agoes, 2007). Remaserasi berarti dilakukan pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan penyaringan maserasi pertama dan seterusnya (Anonim, 2000).



14



2.3.4 Proses Pemekatan Pemekatan adalah peningkatan jumlah partikel solute (senyawa terlarut) dengan cara penguapan pelarut, ekstrak tidak sampai menjadi kering tetapi hanya menjadi pekat/kental. (Anonim, 2000). 2.3.5 Skrining Fitokimia Skrining fitokimia merupakan cara untuk mengindentifikasi bioaktif yang belum diketahui melalui suatu tes atau pemeriksaan yang dapat dengan cepat memisahkan antara bahan alam yang memiliki kandungan fitokimia tertentu dengan bahan alam yang tidak memiliki kandungan fitokimia tertentu. Skrining fitokimia merupakan tahap pendahuluan dalam suatu penelitian yang bertujuan untuk memberikan gambaran tentang golongan senyawa yang terkandung dalam tanaman yang sedang diteliti. Metode skrining fitokimia dilakukan dengan melihat reaksi pengujian warna dengan menggunakan suatu pereaksi warna. Hal penting dalam skrining fitokimia adalah pemilihan pelarut dan metode ekstraksi (Kristanti et al, 2008). Fitokimia adalah ilmu yang mempelajari tentang senyawa organik pada tumbuhan atau zat kimia yang terdapat dari tumbuhan yang memberikan ciri khas tertentu, baik pada rasa, aroma, ataupun warna pada tanaman/tumbuhan itu. Pendekatan secara skrining fitokimia pada hakikatnya adalah analisis secara kualitatif dari kandungan kimia yang terdapat di dalam tumbuhan atau bagian tumbuhan (akar, batang, daun, bunga, dan biji) terutama kandungan metabolit sekunder yang merupakan senyawa bioaktif seperti alkaloid, antrakuinon, flavonoid, glikosida jantung, kumarin, saponin, tannin, polifenol, dan minyak



15



atsiri. Persyaratan yang harus dipenuhi dalam melakukan skrining fitokimia diantaranya: a. Metode yang digunakan sederhana. b. Metode dapat dilakukan dalam waktu yang singkat dan cepat. c. Metode yang digunakan dapat dilakukan menggunakan peralatan sederhana. d. Selektif terhadap golongan senyawa yang dipelajari. e. Semikualitatif dan dapat memberikan keterangan tambahan ada atau tidaknya senyawa tertentu dari golongan senyawa yang dipelajari (Marjoni, 2016)



2.4



Asam Urat



2.4.1



Pengertian Asam Urat



Gambar 2. Struktur Asam Urat : C5H4N4O3 (Murray et al, 2009). Asam urat adalah senyawa derivat purin yang memiliki sifat sukar larut dalam air dan semisolid dengan rumus kimia C5H4N4O3 (Gambar 2). Asam urat memiliki rasio plasma antara 3.6 mg/dL (~214µmol/L) hingga 8.3 mg/dL (~494µmol/L). Pada manusia, asam urat adalah produk terakhir dari metabolisme nukleotida purin, akibat absennya enzim urikase yang mengkonversi asam urat menjadi alantoin (Murray et al, 2009).



16



2.4.2



Metabolisme Asam Urat Dua pertiga total asam urat tubuh berasal dari pemecahan purin endogen,



hanya sepertiga yang berasal dari diet yang mengandung purin. Pada pH netral asam urat dalam bentuk ion asam urat (kebanyakan dalam bentuk monosodium urat), banyak terdapat di dalam darah. Konsentrasi normal kurang dari 420 μmol/L (7,0 md/dL). Kadar asam urat tergantung jenis kelamin, umur, berat badan, tekanan darah, fungsi ginjal, status peminum alkohol dan kebiasaan memakan makanan yang mengandung diet purin yang tinggi. Kadar asam urat mulai meninggi selama pubertas pada laki-laki tetapi wanita tetap rendah sampai menopause akibat efek urikosurik estrogen. Dalam tubuh manusia terdapat enzim asam urat oksidase atau urikase yang akan mengoksidasi asam urat menjadi alantoin. Defisiensi urikase pada manusia akan mengakibatkan tingginya kadar asam urat dalam serum. Urat dikeluarkan di ginjal (70%) dan traktus gastrointestinal (30%). Kadar asam urat di darah tergantung pada keseimbangan produksi dan ekskresinya (Spieker et al, 2002). Sintesis dan pemecahan nukleotida purin terjadi di hati. Purin adalah protein yang termasuk dalam golongan nukleoprotein, yang berasal dari makanan dan penghancuran sel-sel tubuh yang sudah tua. Purin merupakan hasil metabolisme protein yang dapat membentuk asam urat. Produksi asam urat tergantung dari kandungan purin dalam diet dan kecepatan biosintesis degradasi purin (Harrison, 2008). Pada awalnya, asam urat dibentuk dari degradasi protein menjadi asam amino. Asam amino akan didegradasi membentuk glutamat. Glutamat akan dimetabolisme membentuk glutamin. Ketika glutamin mengalami reaksi dengan fosforibosil pirofosfat (PRPP) akan membentuk fosforibosilamin. 17



PRPP merupakan suatu gula derivatif dari ribosa-5-fosfat. Fosforibosilamin merupakan prekursor untuk pembentukan nukleotida purin. Bentuk nukleotida purin yang terbentuk pertama kali adalah inosin monofosfat (IMP). IMP akan dikonversi menjadi adenosin monofosfat (AMP) dan guanosin monofosfat (GMP). AMP dan GMP merupakan nukleotida purin yang terdapat pada manusia dan dapat dipecah menjadi bentuk nukleosida yaitu adenosin dan guanosin. IMP juga dapat membentuk suatu nukleosida yaitu inosin. Adenosin akan mengalami deaminase menjadi inosin oleh enzim adenosin deaminase. Fosforilasi inosin dan guanosin yang dikatalisis oleh nukleosida purin fosforilase akan dihasilkan basa purin yaitu hipoxantin dan guanin. Kemudian hipoxantin dan guanin akan membentuk xantin yang masing-masing dikatalisis dengan enzim xantin oksidase dan guanase. Xantin yang terbentuk akan dikatalisis kembali oleh xantin oksidase membentuk asam urat (Harvey dan Ferrier, 2011).



18



Gambar 3. Pembentukan asam urat (Harvey dan Ferrier, 2011) 2.4.3 Patologis Asam Urat Asam urat dari purin diproduksi dari 3 sumber yaitu diet purin, perombakan asam nukleat dan nukleotida purin, dan dari sintesis de novo purin. Kondisi asam urat yang meningkat dalam tubuh menyebabkan terjadi penumpukan asam urat pada jaringan yang kemudian akan membentuk kristal urat yang ujungnya tajam seperti jarum. Kondisi ini memacu terjadinya respon inflamasi dan diteruskan dengan serangan gout (Nyoman, 2009). 2.4.3.1 Hiperurisemia (Sudoyo et al, 2006)



19



Hiperurisemia adalah keadaan dimana terjadi peningkatan kadar asam urat darah diatas normal. Hiperurisemia bisa terjadi karena peningkatan metabolisme asam urat, penurunan asam urat urin atau gabungan keduanya. Banyak batasan untuk menyatakan hiperurisemia, secara umum kadar asam urat diatas 2 standar deviasi hasil laboratorium pada populasi normal dikatakan sebagai hiperurisemia. Batasan pragmatis yang sering digunakan untuk hiperurisemia adalah suatu keadaan dimana terjadi peningkatan kadar asam urat yang bisa mencerminkan adanya kelainan patologi. Hiperurisemia yang berkepanjangan dapat menyebabkan gout atau pirai, namun tidak semua hiperurisemia akan menimbulkan kelainan patologi berupa gout. Gout atau pirai adalah penyakit akibat adanya penumpukan kristal monosodium urat pada jaringan akibat peningkatan kadar asam urat. Penyakit gout terdiri dari kelainan artritis pirai atau artritis gout, pembentukan tophus, kelainan ginjal berupa nefropati urat dan pembentukan batu urat pada saluran kencing. Penyebab hiperurisemia dan gout dapat dibedakan dengan hiperurisemia primer, sekunder dan idiopatik. Hiperurisemia dan gout primer adalah hiperurisemia dan gout tanpa disebabkan penyakit atau penyebab lain. Hiperurisemia dan gout sekunder adalah hiperurisemia atau gout yang disebabkan karena penyakit lain atau penyebab lain. Hiperurisemia dan gout idiopatik adalah hiperurisemia yang tidak jelas penyebab primer, kelainan genetik, tidak ada kelainan fisiologi atau anatomi yang jelas. 1. Hiperurisemia dan Gout Primer



20



Hiperurisemia primer terdiri dari hiperurisemia dengan kelainan molekular yang masih belum jelas dan hiperurisemia karena adanya kelainan enzim spesifik. Hiperurisemia primer kelainan molecular yang belum jelas terbanyak didapatkan yaitu mencapai 99%, terdiri dari hiperurisemia karena underexcretion (80-90%) dan karena overproduction (10-20%). Hiperurisemia primer karena kelainan enzim spesifik diperkirakan hanya 1%, yaitu karena peningkatan aktivitas varian dari enzim phoribosylpyrophosphatase (PRPP) synthetase, dan kekurangan sebagian



dari



enzim



hypoxanthine



phosphoribosyltranferase



(HPRT).



Hiperurisemia primer karena underexcretion kemungkinan disebabkan karena faktor genetik dan menyebabkan gangguan pengeluaran asam urat sehingga menyebabkan hiperurisemia. 2. Hiperurisemia dan Gout Sekunder Hiperurisemia dan gout sekunder dibagi menjadi beberapa kelompok, yaitu kelainan yang menyebabkan peningkatan biosintesis de novo, kelainan yang menyebabkan peningkatan degradasi ATP atau pemecahan asam nukleat dan kelainan yang menyebabkan underecretion. Hiperurisemia sekunder karena peningkatan biosintesis de novo terdiri dari kelainan karena kekurangan menyeluruh enzim HPRT, kekurangan enzim glucose 6-phosphatase pada glycogen storage disease (von gierkee), dan kelainan karena kekurangan enzim fructose-1-phosphate aldolase. Hiperurisemia sekunder tipe overproduction dapat disebabkan karena keadaan yang menyebabkan peningkatan pemecahan ATP atau peningkatan pemecahan asam nukleat dari inti sel. Peningkatan pemecahan ATP akan membentuk AMP dan berlanjut membentuk IMP atau purin nucleotide dalam 21



metabolisme purin. Keadaan ini bisa terjadi pada penyakit akut yang berat seperti infark miokard, status epileptikus atau pengisapan asap rokok yang mendadak. Pemecahan inti sel akan meningkatkan produksi purin nucleotide dan berlanjut menyebabkan peningkatan produksi asam urat. Keadaan yang sering menyebabkan pemecahan inti sel adalah penyakit hemolysis kronis, polisitemia, psoriasis. Beberapa penyakit atau kelainan dapat menyebabkan hiperurisemia sekunder



karena



gangguan



pengeluaran



asam



urat



melalui



ginjal



(underexctretion). Gangguan pengeluaran asam urat melalui ginjal dapat melalui gangguan dalam, filtrasi, reabsorbsi, sekresi dan reabsorbis paska sekresi. Hiperurisemia sekunder dapat disebabkan karena penurunan masa ginjal, penurunan filtrasi glomerulus, penurunan fractional uric acid clearance dan pemakaian obat-obatan. Gangguan pengeluaran asam urat melalui ginjal dapat dihitung dengan pemeriksaan fractional uric acid clearance. Pada keadaan normal pengeluaran asam urat melalui ginjal (kliren urat) berbanding lurus dengan kliren kreatinin darah. 2.4.3.2 Gout (Price dan Wilson, 2006) Gout merupakan istilah yang dipakai untuk kelompok gangguan metabolik,



yang



ditandai



oleh



meningkatnya



konsentrasi



asam



urat



(hiperurisemia). Gout dapat bersifat primer maupun sekunder. Gout primer merupakan akibat langsung pembentukan asam urat tubuh yang berlebihan atau akibat eksresi asam urat. Gout sekunder disebabkan karena pembentukan asam urat yang berlebihan atau eksresi asam urat yang berkurang akibat proses penyakit lain atau pemakaian obat-obat tertentu.



22



Masalah akan timbul jika terbentuk kristal-kristal monosodium urat monohidrat pada sendi-sendi dan jaringan sekitarnya. Kristal-kristal terbentuk seperti jarum ini mengakibatkan reaksi peradangan jika berlanjut menimbulkan nyeri hebat yang sering menyertai serangan gout. Jika tidak diobati, endapan kristal akan menyebabkan kerusakan yang hebat pada sendi dan jaringan lunak. Terdapat empat tahap perjalanan klinis dari penyakit gout yang tidak diobati. 1. Hiperurisemia Asimtomatik Nilai normal asam urat serum pada laki-laki adalah 5,1±1,0 mg/dL, dan pada perempuan adalah 4,0±1,0 mg/dL. Nilai-nilai ini meningkat sampai 9-10 mg/dL pada seseorang dengan gout. Dalam tahap ini pasien tidak menunjukkan gejala-gejala selain dari asam urat serum. Hanya 20% dari pasien hiperurisemia asimtomatik yang berlanjut dengan serangan gout akut. 2. Artritis Gout Akut Pada tahap ini terjadi pembengkakan mendadak dan nyeri luar biasa, biasanya pada sendi ibu jari kaki dan sendi metatarsophalangeal. Artritis bersifat monoartikular dan menunjukkan tanda-tanda peradangan lokal. Mungkin terdapat demam dan peningkatan jumlah leukosit. Serangan dapat dipicu oleh pembedahan, trauma, obat-obatan, alkohol, atau stres emosional. Sendi-sendi lain dapat terserang termasuk sedi jari-jari tangan, lutut, mata kaki, pergelangam tangan, dan siku. Serangan gout akut biasanya pulih tanpa pengobatan, tetapi dapat memakan waktu 10 sampai 14 hari. Perkembangan dari serangan akut gout umumnya mengikuti serangkaian peristiwa sebagai berikut. Mula-mula terjadi hipersaturasi dari urat plasma dan cairan tubuh. Selanjutnya diikuti oleh penimbunan didalam dan sekeliling sendi23



sendi. Serangan gout seringkali terjadi sesudah trauma lokal atau rupture tofi (timbunan natrium urat), yang mengakibatkan terjadi pengendapan asam urat di luar serum. Kristalisasi dan penimbunan asam urat akan memicu serangan gout. Kristal-kristal urat akan memicu mekanisme respon peradangan lainnya. Respons peradangan ini dapat dipengaruhi oleh lokasi dan banyaknya timbunan kristal asam urat. Reaksi peradangan dapat meluas dan bertambah sendiri, akibat dari penambahan timbunan kristal serum. 3. Tahap Interkritis Tidak terdapat gejala-gejala pada masa ini, yang dapat berlangsung dari beberapa bulan sampai tahun. Kebanyakan orang mengalami seranghan gout berulang dalam waktu kurang dari satu tahun jika tidak diobati. 4. Tahap Gout Kronik Pada tahap ini timbunan asam urat yang terus bertambah dalam beberapa tahun jika pengobatan tidak dimulai. Serangan akut artritis gout dapat terjadi dalam tahap ini. Tofi terbentuk pada masa gout kronik akibat insolubilitas relatif asam urat. Secara klinis tofi ini mungkin sulit dibedakan dengan nodul reumatik. 2.4.4



Tanda dan Gejala Tanda-tanda hiperurisemia adalah terjadinya serangan mendadak pada



sendi, terutama sendi ibu jari kaki. Serangan pertama sangat sakit dan sering dimulai pada pertengahan malam. Sendi menjadi cepat bengkak, panas, dan kemerah-merahan. Meskipun serangan pertama terjadi pada jari ibu kaki, tetapi sendi-sendi yang lain seperti lutut, tumit, pergelangan tangan dan kaki juga merasa sakit (Krisnatuti, 2008). 2.5



Penatalaksaan Terapi 24



Tujuan terapi dalam pengobatan asam urat adalah untuk menghentikan serangan akut, mencegah serangan berulang atau kekambuhan, mencegah komplikasi yang berkaian dengan pengendapan kristal urat di jaringan, dan mencegah atau membalikkan fungsi umumnya terkait dengan penyakit termasuk obesitas, peningkatan trigliserida dan hipertensi (Dipiro et al, 2008) terapi untuk penderita asam urat dapat dibedakan menjadi 2, yaitu: 2.5.1



Terapi farmakologi Terapi ini dilakukan dengan mengkonsumsi obat-obatan tertentu. Obat-



obatan yang digunakan dalam mengatasi serangan gout, yaitu: 1.



NSAID, biasanya digunakan untuk terapi pada gout akut karena memiliki tingkat efikasi yang tinggi dan toksisitas yang rendah dalam penggunaan jangka pendek (Dipiro et al, 2008). Contoh obat golongan NSAID yang sering digunakan yaitu indometasin dan naproksen. Dalam penggunaan obatobatan golongan NSAID harus memperhatikan potensi efek sampingnya, antara lain pada gastrointestinal (gastritis, perdarahan, dan perforasi), ginjal (renal



papillary



necrosis,



menurunkan



creatinine



clearance),



pada



kardiovaskular, dan system saraf pusat (gangguan fungsi kognitif, sakit kepala, pusing). Penggunaan NSAID tidak dapat diberikan pada pasien dengan penyakit aktif ulkus peptikum, terkompensasi gagal jantung kongestif, gangguan ginjal berat, atatu riwayat hipersensitivitas terhadap aspirin atau NSAID lainnya (Dipiro et al, 2008). 2.



Kolkisin sangat efektif digunakan untuk menghilangkan serangan akut gout, terapi tidak menurunkan kadar asam urat dalam serum, keuntungan penggunaannya rendah dan rasio toksisitasnya berhubungan dengan gout 25



(Dipiro et al, 2008). Mekanisme kerjanya berdasarkan penghambatan sekresi zat-zat kemotaktik dan/atau glycoprotein dari granulosit yang memegang peranan pada rangkaian proses peradangan hingga siklusnya dihentikan. Mekanisme lainnya adalah dengan menghambat pembelahan sel (Tjay dan Raharja, 2007). Efek samping yang ditimbulkan dari penggunaan kolkisin adalah gangguan gastrointestinal, neutropenia dan axonal neuromyopathy. Kolkisin digunakan apabila pasien toleran atau kontraindikasi dengan NSAID (Dipiro et al, 2008). 3.



Kortikosteroid biasanya digunakan untuk mengobati serangan akut artritis gout, tetapi biasanya diberikan untuk pasien dengan kontraindikasi terhadap NSAID atau kolkisin. Kortikosteroid dapat diberikan secara oral maupun sistemik atau dengan injeksi intraartikular (Dipiro et al, 2008).



4.



Obat orikosurik yaitu golongan obat yang dapat meningkatkan klirens ginjal atau meningkatkan eksresi asam urat. Obat-obat ini bekerja dengan cara menghambat reabsorbsi asam urat di renal proximal tubular sehingga menyebabkan peningkatan eksresi asam urat melalui urin. Obat urikosurik yang paling banyak digunakan adalah probenesid dan sulfinpirazon. Terapi dengan urikosurik harus dimulai pada dosis kecil untuk menghindari uriksuria dan kemungkinan pembentukan batu ginjal. Untuk menghindari kemungkinan tersebut perlu masukan cairan atau minum minimal 2 liter/hari termasuk 2 gelas larutan natrium sitrat/bikarbonat 1% untuk membuat kemih alkalis dan membantu melarutkan asam urat (pH Ca 6,5) (Tjay dan Raharja, 2007).



Efek



samping



utama



dari



obat



urikosurik



adalah



iritasi



gastrointestinal, kulit kemerahan dan hipersensivitas, serangan gout artritis 26



akut, dan pembentukan batu ginjal. Obat-obat ini kontraindiksai pada pasien dengan kelainan fungsi ginjal (kliren kreatinin 15 (5-1)(r-1) > 15 4r-1 > 15 4r > 16 r>4 Jumlah sampel hewan percobaan tiap kelompok dari perhitungan harus lebih besar dari 4 hewan percobaan. Pada penelitian ini digunakan 5 ekor hewan



41



percobaan tiap kelompok, sehingga banyaknya sampel yang digunakan dapat memenuhi syarat. 3.2.4.5 Pengelompokan Hewan Uji Hewan uji dibagi dalam 3 kelompok kontrol dan 3 kelompok perlakuan. Setiap kelompok terdiri dari 5 ekor mencit. Perlakuannya sebagai berikut : a.



Kelompok kontrol normal, massing-masing hewan percobaan diberikan suspensi NaCMC sebanyak 1% dari bobot badan mencit.



b.



Kelompok kontrol (negatif), masing-masing hewan percobaan diberikan hati sapi 0,6 mg/20gBB dan suspensi NaCMC sebanyak 1% dari bobot badan mencit.



c. Kelompok kontrol (positif), masing-masing hewan percobaan diberikan hati sapi 0,6 mL/20gBB dan allopurinol dengan dosis 13 mg/kgBB. d. Kelompok dosis 1, masing-masing hewan percobaan diberikan hati sapi 0,6 mL/20gBB dan fraksi etil asetat daun pucuk merah dengan dosis



100



mg/kgBB. e. Kelompok dosis 2, masing-masing hewan percobaan diberikan hati sapi 0,6 mL/20gBB dan fraksi etil asetat daun pucuk merah dengan dosis 200 mg/kgBB. f. Kelompok dosis 3, masing-masing hewan percobaan diberikan hati sapi 0.6 mL/20gBB dan fraksi etil asetat daun pucuk merah dengan dosis 400 mg/kgBB. 3.2.4.6 Perencanaan Dosis Pada penelitian ini digunakan fraksi etil asetat daun pucuk merah. Dosis fraksi etil asetat daun pucuk merah yaitu 100, 200, dan 400 mg/kgBB. Dosis 42



untuk hati sapi adalah 0,6 mL/20 gBB. Konsentrasi dihitung menggunakan rumus (Thompson, 1985):



Keterangan : VAO : Volume Administrasi Obat 3.2.4.7 Pembuatan Sediaan Uji a. Pembuatan Suspensi NaCMC NaCMC ditimbang sebanyak 1 g, dimasukkan kedalam lumpang yang berisi air suling panas (±60 C) sebanyak 10 mL. diamkan selama ± 15 menit hingga warna menjadi bening, digerus hingga berbentuk gel dan diencerkan dengan sedikit akuades, kemudian dituangkan kedalam labu ukur 100 mL, ditambahkan aquades sampai tanda batas, sehingga didapatkan NaCMC konsentrasi 1 %. b.



Pembuatan Suspensi Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) dan Suspensi Allopurinol Ekstrak Etanol daun pucuk merah disuspensikan dalam 5 mL NaCMC 1%



kemudian diaduk sampai homogen. Selanjutnya diberikan pada masing-masing kelompok perlakuan secara peroral. Allopurinol ditimbang sebanyak 13 mg/kbBB kemudian disuspensikan dalam larutan NaCMC 1% sampai volume 5 ml dan diaduk sampai homogen. c.



Pembuatan Suspensi Hati Sapi



43



Hati sapi segar 100 g dicuci bersih, dipotong kecil-kecil, dimasukkan ke dalam lumpang dengan menambahkan 25 mL air. Lalu digerus menjadi halus, kemudian disaring dengan kain kasa dan dimasukkan ke dalam wadah. 3.2.4.8 Pemberian Sediaan Uji Mencit jantan dibagi menjadi 6 kelompok percobaan secara acak dimana setiap kelompok terdiri dariv5 ekor mencit. Kelompok 1 adalah kelompok normal yang tidak diberi perlakuan apa-apa tetapi tetap diukur kadar asam urat darahnya. Kelompok 2 merupakan mencit kontrol negatif yang hanya diberikan suspensi NaCMC 1%. Kelompok 3 adalah mencit kontrol positif yang diberikan allopurinol. Sedangkan kelompok 4,5,6 adalah mencit yang diberi ekstrak uji secara oral, sehari sekali selama 14 hari masing-masing dengan dosis 100,200,400. Hewan diaklimatisasi selama 7 hari, kemudian hewan dipuasakan kurang lebih 16 jam sebelum pengujian, tetapi tetap diberi minum. Sebelum diberi perlakuan, semua hewan uji diukur kadar asam urat darah sebagai kadar awal (normal). Kemudian hewan dibuat hiperurisemia dengan memberikan induksi hati sapi dengan dosis 0,6 mL/20 gBB sebanyak 1 kali sehari secara oral pada pagi hari selama 11 hari, 2 jam setelah diinduksi kemudian hewan diambil darahnya untuk melihat kenaikan kadar asam urat di dalam darah. Kemudian pada hari ke12 hewan diberi perlakuan berdasarkan kelompoknya, yaitu kelompok kontrol negatif diberi diberi hati sapi 0,6 mL/20 gBB dan suspensi NaCMC, kelompok kontrol positif diberi diberi hati sapi 0,6 mL/20 gBB dan allopurinol 13 mg/kgBB, kelompok dosis 1 diberi hati sapi 0,6 mL/20 gBB dan fraksi etil asetat daun pucuk merah 100 mg/kgBB, kelompok dosis 2 diberi diberi hati sapi 0,6 mL/20 gBB dan fraksi etil asetat daun pucuk merah 200 mg/kgBB, kelompok dosis 3 diberi hati sapi 0,6 mL/20 gBB dan fraksi etil asetat daun pucuk merah 400 mg/ kgBB. Pengukuran kadar asam urat darah hewan dilakukan pada hari ke-19, ke-27 dan



44



ke-35 dan dilihat kelompok perlakuan mana yang memiliki efek penurunan kadar asam urat paling tinggi. 3.2.4.9 Cara Pengambilan Darah Sebelum diambil darah, ekor mencit dibersihkan dengan alkohol, darah diambil melalui ekor dengan cara memotong atau melukai ekor dengangunting bedah. darah yang keluar dari ekor lalu diteteskan pada strip asam urat 3.2.4.10 Penentuan Kadar Asam Urat Darah Alat dikalibrasi dengan menggunakan kunci kode strip kemudian strip dipasang pada alat dan secara otomatis alat akan hidup. Layar akan menampilkan nomor kode strip, yakinkan nomor kode sama dengan pembungkus strip. Darah diambil melalui pembuluh vena pada ujung ekor mencit kemudian ditekan pada strip alat dan dalam hitungan 20 detik, layar akan menampilkan pemeriksaan kadar asam urat 3.2.4.11 Analisis Data Analisis data penelitian diuraikan secara deskriptif kualitatif dalam bentuk tabel dan grafik dan Analys of Variance (ANOVA) dua arah dan metoda Tukey.



45



BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN



4.1



Hasil Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan tentang pengaruh pemberian ekstrak etanol daun pucuk merah (Syzygium myrtifolium Walp) terhadap kadar asam urat mencit putih (Mus musculus L.) jantan diperoeh hasil sebagai berikut : 1. Hasil dari 1,6 kg daun pucuk merah (Syzygium myrtifolium Walp) segar diperoleh 0,9 kg sampel kering daun pucuk merah (Syzygium myrtifolium Walp), kemudian dilakukan ekstraksi dan didapat ekstrak kental sebanyak 221,227 g. 2.



46



4.2



Pembahasan Pada penelitian ini dilakukan pengujian tentang pengaruh pemberian



ekstrak etanol daun pucuk merah terhadap kadar asam urat mencit putih jantan selama 28 hari. Parameter yang digunakan adalah kadar asam urat. Pada penelitian ini sampel yang digunakan adalah pucuk merah (Syzygium myrtifolium Walp), yang diambil di jalan Prof.DrMukhtar Lutfi Universitas Riau, kelurahan simpang baru, kecamatan tampan, kota pekanbaru. Bagian tanaman yang digunakan adalah daun pucuk merah. Sampel daun pucuk merah telah diidentifikasi di laboratorium ................. Alasan pengambilan sampel disana agar lebih mudah untuk pengambilan sampel, dapat diambil dalam jumlah yang banyak dan apabila terjadi kekurangan akan mudah diperoleh kembali karena daerah pengambilannya lebih dekat. Sampel segar daun pucuk merah diambil sebanyak 1,6 kg. Setelah itu dilakukan sortasi basah dimana sampel akan dipisahkan dari pengotor seperti batan, daun yang tidak bagus dan pengotor lainnya, seteah itu daun pucuk merah dilakukan proses pencucian dengan air dan mengalir. Proses pengeringan dilakukan di tempat yang terlindung dar paparan cahaya matahari langsung, untuk meminimalisasi rusak atau teruraunya senyawa-senyawa termolabil serta menghndari rusaknya simplisia akibat sinar ultraviolet dai cahaya matahari. Proses pengeringan ini bertujuan untuk mengurangi kadar air sampel, sehingga dapat menghambat proses enzimatis dan mencegah pertumbuhan. Dalam kondisi kering, pengolahan sampel menjadi lebih mudah karena lebih mudah disimpan, ditimbang, serta lebih tahan lama (Gunawan dan Mulyadi, 2004).



47



Setelah dikeringkan daun pucuk merah di sortasi kering untuk memisahkan daun dengan rantingnya serta membuang daun yang busuk dan rusak atau daun yang tidak sempurna proses pengeringannya. Daun kering yang didapat sebanyak 0,9 kg. kemudian daun yang sudah kering dirajang, Proses perajangan dilakukan untuk memperkecil ukuran sehingga memperbesar luas permukaan sampel sehingga kontak antara samel dan pelarut lebih banyak terjadi dan proses ekstraksi maksimal. Penggunaan daun kering untuk menghindari adanya reaksi enzimatik atau tumbuhnya kapang dan jamur. Metoda ekstraksi zat aktif yang dipilih yaitu metode maserasi. Maserasi adalah proses penyarian sederhana dengan merendam sampel dalam pelarut yang sesuai selama 5 hari sebanyak 3 kali pengulangan.. Proses pengulangan maserasi ini dilakukan dengan tujuan agar hasil ekstraksi yang didapat maksimal (Agoes, 2009). Maserasi dilakukan dengan menggunakan pelarut etanol 96%. Karena etanol dengan konsentrasi tersebut dapat lebih mudah berpenetrasi ke dalam sel dan mempunyai kemampuan ekstraksi yang lebi baik dibandingkan dengan etanol konsentrasi rendah. Alasan pemilihan etanol sebagai pelarut karena merupakan pelarut yang bersifat universal yang mampu melarutkan hampir semua jenis zat. Selain itu juga merupakan pelarut yang memiliki kemampuan absorbsi yang cukup baik dan tidak beracun (Anonim, 2000). Maserat yang telah dihasilkan kemudian dipekatkan dengan menggunakan alat rotary evaporator sehingga diperoleh ekstrak yang kental. Metoda ini digunakan dengan tujuan agar ekstrak yang akan dipekatkan tidak rusak karena adanya pemanasan pada suhu tinggi dengan cara divakum dan disertai dengan



48



labu yang berputar. Dengan menggunakan labu yang berputar pemanasan dapat tersebar secara merata (Anonim, 2000). Rotary evaporator merupakan salah satu teknik pemekatan ekstrak yang menggunakan prinsip destilasi (pemisahan). Prisnsip utama dalam instrument ini terletak pada penurunan tekanan udara di dalam alat penguapan atau oleh labu alas bulat agar pelarut dapat menguap lebih cepat dibawah titik didihnya. Teknik yang digunakan dalam rotary evaporator ini bukan hanya terletak pada pemanasannya tapi dengan menurunkan tekanan pada labu alas bulat dan memutar labu alas bulat dengan kecepatan tertentu, sehingga suatu pelarut akan menguap dan senyaa yang larut dalam pelarut tersebut tidak ikut menguap namun mengendap. Dengan adanya pemanasan dibawah titik didih pelarut, senyawa yang terkandung dalam pelarut tersebut tidak rusak oleh suhu tinggi (Agoes, 2009). Instrumen ini lebih disukai, karena hasil yang diperoleh sangat akurat jika dibandingkan dengan teknik pemisahan lainnya, misalnya mengunakan metoda penguapan menggunakan oven. Maka bisa dikatakan bahwa instrumen t ini lebih unggul karena pada instrument ini memiliki suatu teknik yang berbeda dengan teknik pemisahan lainnya (Agoes, 2009). Setelah didapatkan ekstrak kental etanol kemudian dilanjutkan dengan skrining fitokimia. Skrining fitokimia merupakan cara untuk mengindentifikasi bioaktif yang belum diketahui melalui suatu tes atau pemeriksaan yang dapat dengan cepat memisahkan antara bahan alam yang memiliki kandungan fitokimia tertentu dengan bahan alam yang tidak memiliki kandungan fitokimia tertentu. Skrining fitokimia merupakan tahap pendahuluan dalam suatu penelitian yang bertujuan untuk memberikan gambaran tentang golongan senyawa yang 49



terkandung dalam tanaman yang sedang diteliti. Metode skrining fitokimia dilakukan dengan melihat reaksi pengujian warna dengan menggunakan suatu pereaksi warna (Kristanti et al, 2008). Hasil uji fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun pucuk merah (Syzygium myrtifolium Walp) mengandung metabolit sekunder antara lain............................ Hasil identifikasi metabolit sekunder dari ekstrak etanol daun pucuk merah (Syzygium myrtifolium Walp) menunjukkan positif adanya senyawa golongan flavonoid dengan timbulnya warna jingga ketika beberapa tetes lapisan air dari ekstrak dibieri logam magnesium dan larutan asam klorida pekat. Penelitian ini menggunakan hewan percobaan berupa mencit putih jantan. hal ini dikarenakan mencit putih jantan merupakan jenis hean yang memenuhi persyaratan yakni sensitivitas, cara metabolisme sediaan uji yang serupa dengan manusia, serta cara penangannya yang mudah sewaktu dilakukan percobaan (Anonim, 2014). Selain itu mencit cepat berkembang biak, dengan harga yang relatif murah serta tidak memerlukan kandang yang begitu besar (Akbar, 2010). Alasan pemilihan mencit jantan dengan kelamin jantan dikarenakan mencit jantan lebih stabil dibandingkan mencit betina dari segi hormonal. Kondisi hormonal jantan lebih stabil dibandingkan betina karena pada betina mengalami perubahan hormonal pada masa-masa tertentu seperti pada masa siklus estrus, masa kehamilan dan menyusui yang dapat mempengaruhi kondisi psikologis hean uji serta mempengaruhi hasil uji yang didapat (Suhendi et al, 2011; Akbar, 2010). Disamping keseragaman jenis kelamin, hewan uji yang digunakan juga mempunyai keseragaman berat badan (antara 20-30 gram) dan umur (2-3 bulan) hal ini bertujuan untuk memperkecil variabilitas biologis antar hewan uji yang 50



digunakan, sehingga dapat memberikan respon yang relatif lebih seragam terhadap rangsangan kimia yang digunakan dalam penelitian ini. Selain itu juga, pemilihan umur 2-3 bulan dikarenakan pada umur tersebut mencit telah dewasa dan perkembangan organnya telah sempurna (Akbar, 2010). Hewan percobaan yang digunakan harus diaklimatisasi terlebih dahulu selama tujuh hari. Tujuan dari aklimatisasi ini adalah untuk menyesuaikan hean uji dengan kondisi lingkungannya dan meminimalisir stress pada hewan uji yang dapat memepengaruhi penelitian. Setelah aklimatisasi selesai, maka mencit putih jantan ditimbang berat badan rata-rata pada hari ketujuh untuk menentukan mencit yang akan dijadikan hean percobaan. Hewan uji dikelompokkan secara acak sehingga penyebaran berat badan merata untuk semua kelompok dengan variasi berat badan tidak lebih dari 20% dari rata-rata berat badan. Kemudian hewan uji yang dipilih adalah hewan yang sehat, tidak cacat, pertumbuhan dan perilaku normal (Anonim, 2014). Hewan uji yang telah memenuhi kriteria kemudian dikelompokkan secara acak dalam enam kelompok ............... dimana cara ini diharapkan pembagiannya akan merata dan data yang dihasilkan mendekati sama. Sediaan uji dibuat dalam bentuk sediaan suspensi, hal ini disebabkan karena ekstrak yang akan dipakai tidak larut dalam air. Pensuspensi yang digunakn adalah Natrium Carboxymethyle Cellulose (NACMC) dengan konsentrasi 1% dimana konsentrasi ini yang biasa digunakan untuk sediaan oral. Pada konsentrasi ini ekstrak dapat terdispersi dengan baik dan homogen. Pemilihan NaCMC sebagai pensuspensi dapat menghasilkan suspensi yang stabil,



51



selain itu NaCMC bersifat inert sehingga tidak mempengaruhi zat berkhasiat, tidak toksik, tidak mengiritasi dan mudah diperoleh (Rowe et al , 2009).



52



DAFTAR PUSTAKA



Aisha, A.F.A., Ismail, Z., Abu-Salah, K.M., Alrokayan, S.A., dan Majid, A.M.S.A. 2013. Syzigium Campanulatum Korth Methanolic Extract Inhibit Angiogenesis and Tumor Growth in Nude Mice. BMC Complementary & Alternative Medicine 13(168):2-11. Agoes, G., 2007, Teknologi Bahan Alam, Penerbit ITB, Bandung. Akhzami, D.R., Rizki, M. dan Setyorini, R.H. 2016. Perbandingan Hasil Point of Care Testing (POCT) Asam Urat dengan Chemistry Analyzer. Jurnal Kedokteran. 5(4): 15-19. Anggraini, S, 2017, Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) Terhadap Aktivitas SGOT dan SGPT Pada Mencit Putih (Mus musculus L.) Jantan, Skripsi, Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau, Pekanbaru. Anonim, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Anonim, 2000, Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat, Edisi 1, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta. Anonim, 2014, Pedoman Uji Toksisitas Nonklinik Secara In Vivo, Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia. Jakarta. Apriyanti, M. 2013, Menu Sehat bagi Penderita Asam Urat, Pustaka Baru, Yogyakarta Ariyanti, R. Pengaruh Pemberian Infusa Daun Salam (Eugenia polyantha Wight.) Terhadap Penurunan Kadar Asam Urat dalam Darah Mencit Putih Jantan 53



hiperurisemia, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta. 2007. Asnila, 2017, Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) Terhadap Fungsi Ginjal Mencit Putih (Mus musculus L.) Jantan, Skripsi. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau, Pekanbaru. Astuti, R.D., 2016, Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) Terhadap Kadar Albumin Mencit Putih (Mus musculus L.) Jantan, Skripsi, Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau, Pekanbaru.



Dalimartha, S., 2008, Resep Tumbuhan Obat Untuk Asam Urat, Penebar Swadaya, Depok. Dipiro, J.T., Wells, B.G., Talbert, R.L., Yee, G.C., Matzke, G.R., Posey, L.M.,.. 2008. Pharmacotherapy: A Pathophysiological Approach. Edisi 7. Mc Graw Hill, New York. Djohari, M., Paramitha, R., 2015, Efektivitas Rebusan Daun Salam (Syzygium polyanthum) Terhadap Penurunan Kadar Asam Urat Dalam Darah Mencit Putih Jantan, Jurnal Pharmacy 12(02):176-185. Gritter, R.J., Robbit, J.M., dan Schwarting, A.E., 2003, Pengantar Kromatografi, Edisi II, Terjemahan K. Padmawinata dan I. Soedino, ITB, Bandung. Gunawan, N. Sulistia, G., 2012, Farmakologi dan Terapi, Departemen Farmakologi dan Terapetik FKUI, Balai Penerbit FKUI, Jakarta. Hariana, Arief., 2005, Tumbuhan Obat dan Khasiatnya, Jilid 2, Penerbit Swadaya, Jakarta. Harrison, T.R., 2008, Principles of Internal Medicine, Edisi 17, Mc Graw Hill, New York. Harvey, R. A., Ferrier, D. R., 2011, Biochemistry, Edisi 5, Lippincott Williams and Wilkins, USA. Haryati, N.A., Saleh, C., dan Erwin. 2015. Uji Toksisitas dan Antibakteri Ekstrak Daun Merah Tanaman Pucuk Merah (Syzigium myrtifolium Walp.) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Jurnal Kimia Mulawarman 13(1):35-40. Herliana, E., 2013, Penyakit Asam Urat Kandas Berkat Herbal, FMedia, Jakarta. Juwita, R., Saleh, C., dan Sitorus, S. 2017. Uji Aktivitas Antihiperurisemia dari Daun Hijau Tanaman Pucuk Merah (Syzigium myrtifolium Walp.) terhadap 54



Mencit Jantan (Mus musculus). Jurnal Atomik 02(1):162-168. Kumar, S., Pandey, A. K., 2015, Chemistry and Biological Activities of Flavonoids: An Overview. The Scientific World Journal. Vol. 2013: 1-16. Krisnatuti, 2008, Perencanaan Menu Untuk Penderita Gangguan Asam Urat,. Penebar swadaya, Jakarta. Kristanti, A. N, S. Aminah, M. Tanjung, B. Kurniadi, 2008, Buku Ajar Fitokimia, Jurusan Kimia Laboratorium Kimia Organik FMIPA, Universitas Airlangga, Surabaya. Latifah, S.H., 2017, Uji Efek Teratogenik Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) Terhadap Mencit Putih (Mus musculus L.) Betina, Skripsi, Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau, Pekanbaru. Lin, C.M., Chen, C.S., Liang, Y.C., Lin, J.K., 2002, Molecular Modeling of Flavonoids that Inhibits Xanthine Oxidase. Biochemical and Biophysical Research Communications, 294: 167–172. Marjoni, M.R. 2016. Dasar-Dasar Fitokimia. Trans Info Media. Jakarta. Misnadiarly, 2008, Mengenal Penyakit Arthritis, Riset, Puslitbang Biomedis Dan Farmasi, Badan Litbangkes, Jakarta. Mo, S.F., Zhou, F., Lv Y.Z., Hu, Q.H., Zhang, D.M., Kong, L.D., 2007. Hypouricemic Action of Selected Flavonoids in Mice: Structure-activity Relationships. Biological & Pharmaceutical Bulletin. 30: 1551–1556. Murray, R. K., Granner, D. K., dan Rodwell, V. W. 2009, Biokimia Harper, Edisi 27, Terjemahan oleh Brahm U. Pendit, EGC, Jakarta. Musdalifah., 2017, Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) terhadap Histologi Ginjal Mencit Putih (Mus musculus L.) Jantan. Skripsi. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau. Pekanbaru. Ng, F.S.P., 1978, Tree Flora of Malaya A Manual For Foresters, volume 3, Forest Departement Ministry Of Primary Industries, Malaysia, 68. Novrita, S, 2016, Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzgium myrtifolium Walp.) Terhadap Kadar Bilirubin Mencit Putih (Mus musculus L.) Jantan. Skripsi, Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau, Pekanbaru. Nurcahyanti, W. R. Munawaroh, 2007, Efek Daun Salam terhadap Kadar Asam Urat pada Mencit Terinduksi Oxonate dan Profil Kromatografi Lapis Tipisnya, Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. 55



Nyoman, K., 2009, Asam Urat, Kartika Medika, Yogyakarta. Oktiadina, G., 2015, Uji Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak dan Fraksi Dari Daun Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) Dengan menggunakan Metode DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl), Skripsi, FMIPA Universitas Mulawarman, Samarinda. Pacher, P., Nivorozhkin, A. & Szabe, C., 2006, Therapeutic Effects of Xanthin Oxidase Inhibitors: Renaissance Half A Century After The Discovery of Allopurinol. Pharmacological Reviews, 58 (1), 87- 114 Permadi, I., 2016, Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzgium myrtifolium Walp.) Terhadap Kadar Trigliserida Mencit Putih (Mus musculus L.) Jantan, Skripsi, Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau, Pekanbaru. Price, A.S., Wilson, M.L. 2005. Patofisiologi: Konsep Klinis Proses-Proses Penyakit. Diterjemahkan oleh Pendit, B.U., Hartanto, H., Wulansari, P., dan Maharani, D.A. EGC. Jakarta. Putra, T.R., 2009, Hiperurisemia, Dalam : Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam Jilid III, Edisi 5, FKUI, Jakarta. Pradila, Y., 2015, Uji Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzgium myrtifolium Walp.) Terhadap Mencit Putih (Mus musculus L.) Jantan, KTI. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau, Pekanbaru. Priyambodo, S., 2003, Pengendalian Hama Tikus Terpadu Seri Agrikat, Penebar Penyakit Edisi 4. EFC, Penerbit Buku Kedokteran, Jakarta. Renita, L., 2016, Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzgium myrtifolium Walp.) Terhadap Kadar Nitrogen Urea Darah Mencit Putih (Mus musculus L.) Jantan. Skripsi. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau. Pekanbaru. Rukmana, D., 2011, Uji Aktivitas Ekstrak Etanol 96% Daun Juwet (Syzygium cumini L) Dalam Menurunkan Kadar Asam Urat Dalam Darah Mencit Hiperurisemia, Skripsi, Universitas Airlangga, Surabaya. Santi, F., 2017, Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzgium myrtifolium Walp.) Terhadap Histologi Hati Mencit Putih (Mus musculus L.) Jantan, Skripsi, Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau. Pekanbaru. Schlesinger, N., 2004, Management of Acute and Chronic Gouty Arthritis Present State of the Art, Drugs 64 (21): 2399-2416.



56



Smeltzer, S. C., & Bare, B. G., 2002, Buku Ajar Keperawatan Medikal Bedah, Edisi 8, EGC, Jakarta. Shandhar, Kumar, Prasher, Tiwari, Salhan, dan Sharma. 2011. A Review of Phytochemistry and Pharmacology of Flavonoids. Internationale Pharmaceutica Sciencia 1(1): 25-41. Sismayani, R. 2017, Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzgium myrtifolium Walp.) Terhadap Histologi Jantung Mencit Putih (Mus musculus L.) Jantan. Skripsi. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau. Pekanbaru. Spieker, E.L., Ruschitzka, T.F., Lűscher, F.T., Dan Noll, G., 2002, The Management of Hyperuricemia And Gout In Patient With Heart Failure. The European Journal Of Heart Failure 2002(2):403–410. Sudoyo, A.W., Setiyohadi. B., Alwi. I., Simadibrata. M, Setiati, S., 2006, Editors. Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Edisi 4. Pusat Penerbitan Ilmu Penyakit Dalam FKUI, Jakarta. Suhono, B., 2010, Ensiklopedia Flora, Jilid 5, Cetakan I, PT. Kharisma Ilmu, Jakarta. Sukarmin, 2015, Faktor-Faktor yang Berhubungan dengan Kadar Asam Urat Dalam Darah Pasien Gout di Desa Kedungwinong Sukolilo Pati, jurnal The 2nd University Research Coloquium 2015:95-100. Supranto, J. 2000. Teknik Sampling Untuk Survei dan Eksperimen. PT Rineka Cipta. Jakarta. Sutrani L, Alam S, Hadibroto I., 2004, Asam Urat. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta. Thompson, E. B., 1985, Drug Bioscreening, Graceway Publishing Company, Inc, America. Utami, I.W., 2008, Efek Fraksi Air Ekstrak Etanol Daun Salam (Syzygium polyanthum Wight.) Terhadap Penurunan Kadar Asam Urat Mencit Putih (Mus musculus) Jantan Galur Balb-C yang Diinduksi dengan Kalium Oksonat, Skripsi, Universitas Muhammadiyah, Surakarta. Tjay, T.H dan Raharja, K., 2007. Obat-obat Penting Khasiat, Penggunaan dan Efek-Efek Sampingnya, Edisi 6, PT. Elex Media Komputindo, Jakarta. Voight, R., 2005, Buku Ajaran Tekhnogi Farmasi, Alih Bahasa : Soendani Noerono Soewandhi, Universitas Gajah Mada, Yogyakarta.



57



Wati, M., Erwin., Tarigan, D., 2017, Isolasi dan Identifikasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Fraksi Etil Asetat Pada Daun Berwarna Merah Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp), Jurnal Kimia Mulawarman 14(2):100-107.



Zhao, Y., Yang, X., Lu, W., Liao, H. dan Liao, F. 2009. Uricase Based Methods for Determination of Uric acid in Serum. Microchim Acta. 164: 1-6.



Lampiran 1.Tanaman Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp)



Gambar 5.Tanaman Pucuk Merah(Syzygium myrtifolium Walp)



58



Gambar 6. Daun Pucuk merah(Syzygium myrtifolium Walp)



59



Lampiran 2. Surat Identifikasi Sampel Daun Tanaman Pucuk Merah



Gambar 7. Surat Identifikasi Sampel Daun Tanaman Pucuk Merah



60



Lampiran 3. Skema Kerja Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp) Sampel (daun pucuk merah) segar (3 kg)   



Sortasi Cuci bersih Kering-anginkan selama 5 hari



Sampel (daun pucuk merah) kering (1 kg)  



Sortasi kering Proses perajangan



Sampel (daun pucuk merah) yang telah dirajang 







Maserat



Maserasi dengan etanol dalam wadah tertutup dan terlindung cahaya selama 5 hari sebanyak 3 kali. Saring dengan kapas dan kertas saring



Ampas



Pekatkan dengan Rotary evaporator Ekstrak etanol kental daun pucuk merah (114,5843 g)



Gambar 8. Skema Kerja Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) 61



Lampiran 5. Skema Uji Penurunan Kadar Asam Urat Darah Mencit diaklamasi selama 7 hari



Pengukuran kadar asam urat mencit sebelum perlakuan



Diinduksi hati sapi 0,6 mL/20 gBB satu kali sehari secara peroral selama 14 hari



Mencit hiperurisemia



Fraksi etil asetat daun pucuk merah



Hati sapi 0,6 mL/20 gBB + Allopurinol 13 mg/kgBB



Hati sapi 0,6 mL/20 gBB + suspensi NaCMC 1%



Hati sapi 0,6 mL/20 gBB + Dosis 100 mg/kgBB



Hati sapi 0,6 mL/20 gBB + Dosis 200 mg/kgBB



Hati sapi 0,6 mL/20 gBB + Dosis 400 mg/kgBB



Pemberian diberikan pada hari ke-12 sampai hari ke-35



Pengambilan darah dan Pengukuran kadar asam urat pada hari ke-19,ke-27 dan hari ke-35



Analisis Data



Gambar 10. Skema Uji Penurunan Kadar Asam Urat Darah 62



Lampiran 6. Skema pembuatan suspensi sediaan uji ekstrak etanol daun pucuk merah (syzygium myrtifolium walp) Air  dipanaskan



63



Lampiran 7. Kandungan metabolit sekunder dari sampel segar dan ekstrak etanol daun pucuk merah (syzygium myrtifolium walp)



no



pereaksi



Sampel segar



Ekstrak etanol



Keterangan



1



Kandungan metabolit sekunder Alkaloid



Mayer



+



+



(+) bila terbentuk endapan putih/jingga



2



Flavonoid



Mg/HCl



+



+



(+) bila terbentuk warna merah, kuning atau jingga



3



Saponin



Air



-



+



(+) bila terbentuk busa ±10 menit



4



Steroid



Liebermann- + burchard



+



(+) bila terbentuk warna biru atau hijau



5



Terpenoid



Liebermann- + burchard



+



(+) bila terbentuk warna merah/violet



6



Fenolik



FeCl



+



+



(+) bila terbentuk warna hijau, biru atau ungu



Keterangan : + -



: mengandung metabolit sekunder : tidak mengandung metabolit sekunder



Gambar :



64