Reny Indraswari [PDF]

Citation preview

SYSTEMATIC REVIEW : EFEK HEPATOPROTEKTOR TANAMAN OBAT INDONESIA DENGAN POTENSI SEBAGAI ANTIDIABETES SKRIPSI



Oleh : Reny Indraswari NIM. 16040006



PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN dr. SOEBANDI JEMBER YAYASAN PENDIDIKAN JEMBER INTERNATIONAL SCHOOL (JIS) 2020 i



SYSTEMATIC REVIEW : EFEK HEPATOPROTEKTOR TANAMAN OBAT INDONESIA DENGAN POTENSI SEBAGAI ANTIDIABETES



SKIPSI



Untuk Memenuhi Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)



Oleh : Reny Indraswari NIM. 16040006



PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN dr. SOEBANDI JEMBER YAYASAN PENDIDIKAN JEMBER INTERNATIONAL SCHOOL (JIS) 2020 ii



iii



iv



SKRIPSI



SYSTEMATIC REVIEW : EFEK HEPATOPROTEKTOR TANAMAN OBAT INDONESIA DENGAN POTENSI SEBAGAI ANTIDIABETES



Oleh : Reny Indraswari NIM. 16040006



Pembimbing Dosen Pembimbing Utama



: Sholihatil Hidayati, M.Farm., Apt



Dosen pembimbing anggota



: Dina Trianggaluh Fauziah, M.Farm., Apt



v



PERSEMBAHAN Skripsi ini saya persembahkan untuk: 1. Drs. H. Ns. Said Mardijanto, S.Kep., MM, selaku Ketua STIKES dr. Soebandi Jember; 2. Sholihatil Hidayati, M.Farm., Apt. selaku pembimbing 1 yang tiada henti memberikan araha dan nasehat demi terselesaikannya skripsi ini; 3. Dina Trianggaluh F., M.Farm., Apt. selaku pembimbing II yang selalu mensuport dan memberikan arahan demi lancarnya skripsi ini; 4. Jenie Palupi, S.Kp., M.Kes, selaku Dosen Penguji yang telah memberikan bimbingan dan arahan demi kesempurnaan skripsi ini; 5. Rudi Subagyo dan Sri Sugi yeni selaku orang tua yang selalu mensuport dalam bentuk fisik maupun doa; 6. Erina Putri Rahayu selaku adek saya yang membantu menyusun naskah skripsi ini. 7. Teman-teman



dan



semua



keluarga



terselesaikannya skripsi ini.



vi



yang



berkontribusi



demi



MOTTO “Niscaya Allah akan mengangkat (derajat) orang-orang yang beriman di antaramu dan orang-orang yang diberi ilmu beberapa derajat. Dan Allah Maha Mengetahui terhadap apa yang kamu kerjakan” (QS.Al-Mujadilah 58: Ayat 11). “Barang siapa yang menginginkan kebahagiaan di dunia maka haruslah dengan ilmu, barang siapa yang menginginkan kebahagiaan di akhirat maka haruslah dengan ilmu, dan barang siapa yang menginginkan kebahagiaan pada keduanya maka haruslah dengan ilmu” (Imam As-Syafi’i). “ Barang siapa yang berusaha dan berikhtiar maka Allah beri kemudahan baginya “ “ Tidak ada Hasil yang menghianati Usaha” “ Keberhasilan hanya untuk mereka yang berusaha dan berdoa”



vii



viii



ABSTRAK SYSTEMATIC REVIEW : HEPATOPROCTIVE EFFECT OF INDONESIAN MEDICINAL PLANTS WITH POTENTIAL AS AN ANTIDIABETIC Reny Indraswari*, Sholihatil Hidayati**, Dina Trianggaluh*** Hyperglycemia is the main characteristic of diabetes that underlies the excessive production of ROS and results in the formation of AGE, which is the main source of reactive species. The excess production of ROS in diabetes is key in the development of tissue lesions.



This oxidative stress results from an



imbalance between free radical production and decreased antioxidant defenses or both. A large amount of liver damage is also caused by oxidative damage / oxidative stress. This study uses an antidiabetic design to see the potential of hepatoprotektor in Indonesian plants. Diabetes induction agents used are streptozosin, aloxsan, or a combination of streptozosin with nicotamide.



Rats were the experimental



animals that were chosen in this study, both Wistar and Spraguy Dawley rats. The parameters used to determine the level of liver damage that is using blood data seen from ALT, AST and APL, besides that also used histopathological data of the liver which are necrosy, fatty, cholestatic, and cirrhosis of the liver. The result is the provision of Indonesian plants can reduce blood sugar levels and have an effect as a hepatoprotector. Keywords : Diabetes, Hepatoprotective .



ix



KATA PENGANTAR Alhamdulillah Segala puji bagi Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya sehingga penyusunan skripsi ini dapat terselesaikan. Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu persyaratan menyelesaikan pendidikan Program Studi Sarjana Farmasi STIKES dr. Soebandi dengan judul “Systematic Review : Efek Hepatoprotektor Tanaman Obat Indonesia Dengan Potensi Sebagai Antidiabetes”. Selama proses penyusunan skripsi ini penulis dibimbing dan dibantu oleh berbagai pihak, oleh karena itu penulis mengucapkan terima kasih kepada : 1. Drs. H. Ns. Said Mardijanto, S.Kep., MM, selaku Ketua STIKES dr. Soebandi Jember; 2. Dhina Ayu Susanti, S.Farm., M.Kes., Apt. selaku Ketua Program Studi Sarjana Farmasi STIKES dr. Soebandi 3. Sholihatil Hidayati, M.Farm., Apt. selaku pembimbing I. 4. Dina Trianggaluh F., M.Farm., Apt. selaku pembimbing II. 5. Jenie Palupi, S.Kp., M.Kes. selaku penguji. Dalam penyusunan tugas akhir ini penulis menyadari masuh jauh dari kesempurnaan, untuk itu penulis sangat mengharapkan kritik dan saran untuk perbaikan di masa mendatang.



Jember, 15 Juni 2020



Penulis



x



DAFTARISI



Halaman HALAMAN JUDUL ................................................................................................i HALAMAN JUDUL DALAM ................................................................................ii LEMBAR PERSETUJUAN ...................................................................................... iii HALAMAN PENGESAHAN .................................................................................... iv HALAMAN PEMBIMBINGAN ............................................................................... v HALAMAN PERSEMBAHAN ................................................................................ vi MOTTO ....................................................................................................................... vii KEASLIAN PENELITIAN ....................................................................................... viii ABSTRAK ................................................................................................................... ix KATA PENGANTAR ................................................................................................ x DAFTAR ISI .............................................................................................................xi DAFTAR TABEL ....................................................................................................... xiv DAFTAR GAMBAR .................................................................................................. xv DAFTAR LAMPIRAN............................................................................................... xvi BAB. 1 PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ............................................................................................1 1.2 Rumusan Masalah ......................................................................................... 3 1.3 Tujuan Penelitian .......................................................................................... 3 1.4 Manfaat Penelitian ........................................................................................ 4 BAB. 2 TINJAUANPUSTAKA 2.1 Definisi Tanaman Obat Indonesia ..............................................................5 2.1.1 Pengertian Tanaman Obat ................................................................5 2.1.2 Manfaat Tanaman Obat ....................................................................6 2.1.3 Alasan Penggunaan Obat Tradisional...............................................8 2.1.4 Sejarah Tanaman Obat di Indonesia .................................................9 2.2 Tinjauan Tentang Diabetes Milletus ...........................................................12 2.2.1 Definisi Diabetes Melitus .................................................................12 2.2.2 Manifestasi Klinik Diabetes Milletus ...............................................13 2.2.3 Klasifikasi Diabetes Milletus............................................................13 xi



2.2.4 Patofisiologi Diabetes Milletus ........................................................15 2.2.5 Komplikasi Diabetes Milletus ..........................................................16 2.2.6 Faktor Resiko Diabetes Milletus ......................................................18 2.2.7 Farmakoterapi Diabetes Milletus......................................................20 2.2.8 Diabetes Ke Arah Hiperglikemia .....................................................23 2.2.9 Hiperglikemia ...................................................................................24 2.2.10 Patofisiologi Hiperglikemia ............................................................24 2.2.11 Stress Oksidatif Pada Hiperglikemia ..............................................25 2.3 Tinjauan Tentang Hati ................................................................................26 2.3.1 Anatomi dan Fisiologi Hati ..............................................................26 2.3.2 Fungsi Hati .......................................................................................27 2.3.3 Histologi Hati ...................................................................................29 2.3.4 Histopatologi Hati.............................................................................30 2.3.5 Mekanisme Diabetes Dalam Menginduksi Kerusakan Hati .............37 2.3.6 Faktor Resiko NAFLD .....................................................................39 2.3.7 Patogenesis NAFLD .........................................................................39 2.4 Metabolisme Glikogen ...............................................................................42 2.4.1 Glikogen ...........................................................................................42 2.4.2 Glikogenolisis ..................................................................................43 2.4.3 Sintesis Glikogen ..............................................................................45 2.5 Agen Penginduksi Diabetes ........................................................................46 2.5.1 Aloksan .............................................................................................46 2.5.2 Streptozotocin (STZ) .......................................................................51 2.6 Hewan Coba ...............................................................................................52 2.6.1 Pengertian Hewan Coba ...................................................................52 2.6.2 Etika Pemanfaatan Hewan Coba ......................................................54 2.7 Tinjauan Tentang Ektraksi ........................................................................55 2.7.1 Ekstraksi ...........................................................................................55 2.7.2 Tujuan Ekstraksi ...............................................................................56 2.7.3 Penggolongan Ekstraksi ...................................................................56 2.7.4 Faktor yang Mempengaruhi Ekstraksi ..............................................59 2.8 Fraksinasi ..................................................................................................60 xii



BAB 3 KERANGKA KONSEP 3.1 Kerangka Konsep ......................................................................................71 3.2 Hipotesis ....................................................................................................73 BAB 4 METODE PENELITIAN 4.1 Desain Penelitian ........................................................................................74 4.2 Populasi dan Sampel Penelitian .................................................................74 4.2.1 Populasi ..............................................................................................74 4.2.2 Sampel ...............................................................................................74 4.2.3 Intervensi ...........................................................................................75 4.3 Tempat Penelitian .......................................................................................75 4.4 Waktu Penelitian ........................................................................................75 4.5 Definisi Operasional ..................................................................................75 4.6 Pengumpulan Data ......................................................................................77 4.6.1 Sumber Data .......................................................................................77 4.6.2 Strategi Searching .............................................................................77 4.6.3 Pengumpulan dan Ekstraksi Artikel...................................................77 4.7 Analisa Data ..............................................................................................78 4.7.1 Analisa Data .......................................................................................78 4.7.2 Penyajian Data ...................................................................................78 BAB 5 HASIL DAN PEMBAHASAN 5.1 Hasil Penelitian .........................................................................................80 5.1.1 Hasil Tanaman Indonesia Sebagai Hepatoprotektor ..........................82 5.1.2 Hasil Design Penelitian ......................................................................86 5.1.2 Hasil Evaluasi Hepatoprotektor ..........................................................89 5.2 Pembahasan Penelitian ..............................................................................91 BAB 6 KESIMPULAN DAN SARAN .........................................................94 6.1 Kesimpulan ................................................................................................94 6.2 Saran ...........................................................................................................94 DAFTAR PUSTAKA ...............................................................................................95



xiii



DAFTAR TABEL Halaman Tabel 2.1 Penggunaan Obat Antihiperglikemik Oral .................................................22 Tabel 5.1 Tabel Karakterisasi Tanaman dan Senyawa Kandungan ...........................61 Tabel 5.2 Tabel Design Penelitian Hepatoprotektor Dengan Induksi Diabetes.........64 Tabel 5.3 Tabel Data Hasil Evaluasi Hepatoprotektor...............................................67



xiv



DAFTAR GAMBAR



Gambar 2.1 Gambaran Morfologi Hati Mencit..........................................................32 Gambar 2.2 Patogenesis Perlemakan Hati .................................................................33 Gambar 2.3 Struktur Glikogen ...................................................................................33 Gambar 2.4 Sel Hepatosit ..........................................................................................37 Gambar 2.5 Jalur Glikogen ........................................................................................37 Gambar 2.6 Struktur Kimia Aloksan .........................................................................37 Gambar 3.1 Kerangka Konsep ...................................................................................51 Gambar 5.1 Skema Pencarian Jurnal .........................................................................59



xv



DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Histopatologi Hati Tikus Ke 1 ............................................................... Lampiran 2. Histopatologi Hati Tikus Ke 2 ............................................................... Lampiran 3. Histopatologi Hati Tikus Ke 3 ............................................................... Lampiran 4. Histopatologi Hati Tikus Ke 4 ............................................................... Lampiran 5. Lembar Konsultasi ................................................................................



xvi



1



BAB 1 PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Penyakit diabetes melitus merupakan salah satu penyakit yang banyak diderita oleh masyarakat Indonesia. Diabetes mellitus atau yang dikenal dengan nama kencing manis adalah suatu penyakit yang ditandai oleh meningkatnya kadar gula (glukosa) darah melebihi kadar normalnya. Diabetes mellitus disebabkan oleh tubuh kekurangan insulin, dengan gejala klinis yang umum seperti banyak makan, banyak minum, dan sering kencing (Kawatu et al., 2013). International Diabetes Federation (IDF) memperkirakan bahwa sebanyak 183 juta orang tidak menyadari bahwa mereka mengidap diabetes mellitus. Sebesar 80% orang dengan diabetes Mellitus tinggal di negara berpenghasilan rendah dan menengah, Sebagian besar penderita diabetes mellitus berusia antara 40-59 tahun. Kini diabetes mellitus menjadi salah satu masalah kesehatan yang besar. Data dari studi global menunjukan bahwa jumlah penderita diabetes mellitus pada tahun 2011 telah mencapai 366 juta orang, dan diperkirakan akan meningkat menjadi 552 juta pada tahun 2030 (Trisnawati, 2013). Diabetes mellitus menyebabkan peningkatan insiden kesakitan dan kematian diseluruh dunia akibat komplikasi hiperglikemia. Hiperglikemia merangsang pelepasan superoksida (O2-) ditingkat mitokondria yang merupakan pemicu awal timbulnya stress oksidatif pada penderita diabetes mellitus tipe 2. Stress oksidatif ini dapat menyebabkan kerusakan beberapa organ salah satunya adalah organ hati (Wahyuni, 2011)



1



2



Kadar glukosa yang tidak stabil pada penderita diabetes mellitus dapat memicu peradangan pada hati. Peradangan yang terjadi mendorong munculnya perlemakan hati yang berpotensi menjadi penyakit kronik pada hati. Pada penderita diabetes mellitus tipe 2, resistensi insulin dan kekurangan insulin yang terjadi akan berdampak besar terhadap produksi glukosa oleh hati dan kadar glukosa di dalam darah (Silverthorn, 2014). Indonesia memiliki banyak tumbuhan yang berpotensi sebagai tanaman obat tradisional. Pemanfaatan tumbuhan sebagai obat tradisional sudah dilakukan masyarakat Indonesia sejak zaman dahulu (Saifudin, dkk. 2011). Tanaman obat merupakan spesies tanaman yang diketahui, dipercaya, dan benar-benar berkhasiat obat. Menurut Zuhud dkk tanaman obat terbagi menjadi tiga jenis. Tanaman obat tradisional merupakan spesies tumbuhan yang diketahui atau dipercaya memiliki khasiat dan telah digunakan sebagai bahan baku obat tradisional. Tanaman obat modern merupakan spesies tumbuhan yang secara ilmiah telah dibuktikan mengandung senyawa atau bahan bioaktif yang berkhasiat obat dan penggunaanya dapat dipertanggung jawabkan secara medis. Tanaman obat potensial merupakan spesies tumbuhan yang diduga mengandung senyawa atau bahan bioaktif yang berkhasiat obat, tetapi belum dibuktikan secara ilmiah medis atau penggunanya sebagai bahan obat tradisional perlu ditelusuri secara mendalam (Puspaningtyas & Utami, 2013). Tanaman Obat mengandung senyawa-senyawa yang diduga dapat berpotensi untuk pengobatan beberapa penyakit, salah satunya adalah penyakit diabetes dan kerusakan hati akibat diabetes. Penelitian terkait antidiabetes dari tanaman



3



Indonesia telah banyak dilakukan,



termasuk efek



hepatoprotektor nya



(Puspaningryas, 2013). Oleh karena itu perlu dilakukan penulusuran artikel ilmiah terkait tanaman Indonesia yang memiliki efek antidiabetes dan hepatoprotektor sehingga dapat dikembangkan sebagai alternativ obat antidiabetes yang aman untuk melindungi tubuh dari proses kerusakan hati. 1.1 Rumusan Masalah 1.1.1 Tanaman apa sajakah yang dapat digunakan sebagai obat diabetes dan mampu digunakan sebagai hepatroprotektor ? 1.1.2 Apakah



parameter



yang



dievaluasi



dalam



menganalisa



efek



hepatoprotektor dari tanaman yang berpotensi sebagai antidiabetes ? 1.1.3 Bagaimanakah model hewan coba dalam desain penelitian hepatoprotektor yang disebabkan oleh perkembangan penyakit diabetes ? 1.2 Tujuan Penelitian 1.2.1 Tujuan Umum a.



Menganalisa potensi tumbuhan Indonesia untuk pengobatan diabetes dan memiliki efek hepatoprotektor.



1.2.2 Tujuan Khusus a.



Menganalisa potensi tanaman Indonesia untuk pengobatan diabetes dilihat dari penurunan kadar gula sebelum dan sesudah diteliti.



b.



Menganalisa potensi tanaman Indonesia untuk memperbaiki kerusakan pada jaringan hati dilihat dari parameter kerusakannya.



c.



Menganalisa model hewan coba yang digunakan untuk meneliti efek hepatoprotektor yang disebabkan karena penyakit diabetes



4



d.



Menganalisa pelarut yang digunakan untuk menarik senyawa kimia tertentu dari penelitian dengan design antidiabetes yang memiliki efek hepatoprotektor.



1.3 Manfaat Penelitian 1.3.1 Manfaat Bagi Peneliti Menerapkan ilmu pengetahuan yang telah didapat di perkuliahan serta menambah pengalaman untuk meneliti hal-hal baru dibidang Farmasi khususnya obat tradisional. 1.3.2 Manfaat Masyarakat Sebagai Informasi kepada masyarakat luas untuk pengobatan diabetes melitus dan gangguan kerusakan hati bisa menggunakan tanaman obat Indonesia. 1.3.3 Manfaat Bagi Institusi Memberikan Informasi terkait tanaman di Indonesia yang mampu digunakan sebagai terapi alternative diabetes serta mampu dijadikan sebagai hepatoprotektor sehingga bisa dijadikan sebagai obat baru berbasis obat tradisional.



5



BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Definisi Tanaman Obat Indonesia 2.1.1 Pengertian Tanaman Obat Tanaman obat adalah tanaman khusus yang berkhasiat sebagai obat. Biasanya dilingkungan pedesaan setiap rumah memiliki tanaman-tanaman yang dapat digunakan sebagai baham pengobatan herbal atau yang biasa dikenal sebagai “apotek hidup”. Tanaman-tanaman obat yang ada diperumahan antara lain lidah buaya, kunyit, kencur, dan mangkokan, dan lain-lain. Tidak sedikit mereka mengusahakan tanaman obat sebagai usaha keluarga. Jadi, selain untuk pengobatan dalam keluarga juga dapat menambah penghasilan keluarga (Suparni & Wulandari, 2012). Tanaman obat merupakan spesies tanaman yang diketahui, dipercaya, dan benar-benar berkhasiat obat. Menurut Zuhud, Ekarelawan, dan Riswan, tanaman obat terbagi menjadi tiga jenis. Tanaman obat tradisional. Merupakan spesies tumbuhan yang diketahui atau dipercaya memiliki khasiat dan telah digunakan sebagai bahan baku obat tradisional. Tanaman obat modern. Merupakan spesies tumbuhan yang secara ilmiah telah dibuktikan mengandung senyawa atau bahan bioaktif yang berkhasiat obat dan penggunaanya dapat dipertanggungjawabkan secara medis. Tanaman obat potensial, merupakan spesies tumbuhan yang diduga mengandung senyawa atau bahan bioaktif yang berkhasiat obat,tetapi belum dibuktikan secara ilmiah medis atau penggunanya sebagai bahan obat tradisional perlu ditelusuri secara mendalam (Puspaningtyas & Utami, 2013).



5



6



Tanaman obat atau herbal sudah sejak dulu kala telah digunakan sebagai ramuan jamu-jamuan dengan maksud untuk menyembuhkan berbagai penyakit. Bentuk terapi menggunakan herbal merupakan terapi yang memanfaatkan tanaman atau tumbuhan yang masih segar, atau yang sudah dikeringkan. Pengobatan dengan menggunakan terapi herbal ini tidak memiliki efek samping, tetapi dibutuhkan waktu yang relatif lama untuk kesembuhan suatu penyakit (Bangun, 2012). Pengertian pengobatan herbal adalah pengobatan yang menggunakan semua bahan alami yang mengandung zat-zat atau bahan-bahan yang bersifat terapi atau penyembuhan. Pada umumnya kandungan zat-zat didalam bahanbahan pengobatan herbal tidak hanya bersifat menyembuhkan, tetapi juga meningkatkan daya tahan tubuh secara signifikan. Kondisi inilah yang mendorong pengembangan pengobatan herbal diberbagai bidang. Industri pengobatan herbalpun semakin berjamur dimana-mana karena masyarakat kini banyak yang menggunakan tanaman obat untuk kebutuhan sehari-harinya (Suparni & Wulandari, 2012). 2.1.2 Manfaat Tanaman Obat Kecenderungan kuat untuk menggunakan pengobatan dengan bahan alam, tidak hanya berlaku di Indonesia, tetapi juga berlaku dibanyak negara karena cara-cara pengobatan ini menerapkan konsep “back to nature” atau kembali ke alam yang diyakini mempunyai efek samping yang lebih kecil dibandingkan obat-obat modern. Mengingat peluang obat-obat alami dalam mengambil bagian dalam sistem pelayanan kesehatan masyarakat cukup besar dan supaya dapat menjadi unsur dalam sistem ini, obat alami perlu dikembangkan lebih lanjut



7



agar dapat memenuhi persyaratan keamanan, khasiat, dan mutu (Notoatmodjo, 2011). Manfaat tumbuhan obat : 1.



Nyaris tidak Memiliki Efek Samping : Apabila digunakan dalam dosis normal, obat-obatan herbal tidak menimbulkan efek samping. Sebab, obat herbal terbuat dari bahan-bahan organil kompleks dan bereaksi secara alami sebagaimana makanan biasa.



2.



Efektif Pengobatan herbal memiliki tingkat efektivitas yang lebih tinggi dibanding obat kimia. Bahkan, tidak jarang ditemukan kasus penyakit yang sulit diobati secara medis, bisa disembuhkan dengan obat herbal, kendati proses penyembuhannya cenderung memerlukan waktu lebih lama.



3.



Mudah didapat dan Harganya Bersahabat : Obat herbal cenderung lebih murah biayanya dibandingkan obat kimia.Selisih biaya tersebut muncul dari proses pembuatannya



4.



Bebas Toksin : Proses biologis pada tubuh kita menghasilkan toksin, yakni sisa-sisa makanan yang tidak bisa dicerna seluruhnya oleh sistem pencernaan. Zat kimia adalah toksin bagi tubuh. Akumulasi toksin itulah yang memicu penyakit-penyakit baru dalam jangka panjang.



5.



Bisa diproduksi sendiri : Prosesnya tidak memerlukan peralatan dan teknologi canggih sebagaimana pada obat-obatan kimia, sehinggga siapa saja bisa memproduksinya sendiri.



6.



Menyembuhkan penyakit dari akarnya : Efek obat herbal yang bersifat holistic (menyeluruh) memberi efek penyembuhan paripurna hingga ke akar-akar



penyebab



penyakit.



Obat



herbal



tidak



berfokus



pada



8



penghilangan gejala penyakit, tetapi pada peningkatan sistem kekebalan tubuh agar bisa melawan segala jenis penyakit (Wibowo, 2015). Pengobatan herbal sering juga disebut Herbalisme atau Pengobatan Botanikal. Metode pengobatan herbal adalah cara pengobatan yang aman dan efektif dengan menggunakan bahan-bahan dari tanaman untuk kemampuan terapeutik atau pengobatannya yang disebut “Herbal” adalah tanaman atau bagian tanaman yang memiliki nilai yang disebabkan kualitas pengobatan, aromatic, atau rasanya. Dan tanaman herbal menghasilkan dan mengandung berbagai unsur kimia yang berpengaruh terhadap tubuh (Bangun, 2012). Dewasa ini, industri herbal kian berkembang pesat. Para produsen mulai memanfaatkan teknologi dalam bidang kefarmasian. Kini industri herbal mampu memproduksi sediaan obat serupa farmasi modern. Herbal kini dapat diolah menjadi bentuk tablet, kaplet, bubuk, maupun sirup. Kita dapat mengkonsumsi dalam bentuk cairan atau ramuan yang fresh. Apabila terpaksa mengkonsumsi herbal dalam bentuk olahan, maka kita harus cerdas memilih herbal yang berkhasiat dan aman dikonsumsi. Pilihlah herbal kemasan yang telah memiliki sertifikat dari badan pengawasan terkait, dalam hal ini BPOM, berikut komposisi dan khasiatnya (Rifiani, 2014). 2.1.3 Alasan Penggunaan Obat Tradisional Menurut Suparni (2012) banyak faktor yang menjadi alasan Masyarakat dapat mempercayai tanaman obat sehingga dapat kembali menggunakan pengobatan herbal. Faktor tesebut diantaranya adalah:



9



1.



Harga obat dari bahan kimia semakin mahal sehingga tidak terjangkau oleh semua kalangan masyarakat, karena alasan tersebut masyarakat memilih menggunakan pengobatan herbal.



2.



Efek samping yang ditimbulkan oleh pengobatan tradisional hampir tidak ada. Berbeda sekali dengan pengobatan kimiawi yang bila digunakan dalam jangka waktu yang lama akan menimbulkan efek samping.



3.



Obat-obatan kimiawi sebenarnya dibuat dari sintetis berdasarkan obat-obatan alami.



4.



Pengobatan dengan menggunakan cara herbal lebih mudah dilakukan dan bahan-bahannya mudah didapatkan.



5.



Ada keyakinan empiris bahwa pengobatan herbal lebih aman digunakan dikalangan masyarakat berdasarkan pengalaman dari leluhur dan orang-orang yang menggunakan pengobatan herbal.



6.



Pembuatan obat herbal yang sudah dibentuk menjadi ekstrak dalam bentuk pil, kapsul dan sirup dikemas dalam bentuk moderen membuat masyarakat kembali menggunakan pengobatan herbal. Namun



biasanya



pengobatan



ini



memakan



waktu



yang



lamasehingga hasilnyatidak langsung terlihat ini berbeda dengan pengobatan medis. 2.1.4. Sejarah Tanaman Obat di Indonesia Sejarah pengobatan herbal cukup panjang. Peradaban-peradaban tua mengenal herbal sebagai bagian dari budaya, dalam bentuk upaya-upaya menghilangkan penyakit, mulai dari metode sangat primitif berupa pengusiran



10



roh jahat sebagai penyebab sakit, hingga penggunaan bahan-bahan yang diambil dari alam. Berawal dari upaya coba-coba, yang kemudian hasilnya dapat diturunkan secara lisan, dan diwariskan kepada keturunan. Fakta-fakta kesembuhan atau kegagalan pengobatan itu menjadi gudang data empiris untuk menyusun patokan-patokan pengobatan pada generasi sesudahnya (Wibowo, 2015). Penggunaan tanaman obat diseluruh dunia sudah dikenal sejak beriburibu tahun yang lalu. Termasuk di Indonesia. Penggunaan tanaman obat di Indonesia juga telah berlangsung ribuan tahun yang lalu. Pada pertengahan abad XVII, seorang botanikus yang bernama Jacobus Rontius (1592-1631) mempublikasikan suatu manfaat dan khasiat tumbuhan dalam De Indiae Untriusquere Naturali et Medica (Suparni & Wulandari, 2012). Tanaman herba sudah digunakan sebagai bahan pengobatan sejak zaman Romawi dan Mesir Kuno. Hal ini terbukti adanya balsam pada zaman lampau. Hingga sekarang, berbagai negara masih menggunakan tanaman herba sebagai salah satu obat dalam melakukan terapi pengobatan (Utami & Puspaningtyas, 2013). Pada tahun 1888 didirikan Chemis Pharmacologisch Laboratorium sebagai bagian dari Kebun Raya Bogor. Tujuannya untuk menyelidiki bahanbahan atau zat-zat yang terdapat dalam tumbuh-tumbuhan yang dapat digunakan untuk obat-obatan. Sejak itulah, penelitian dan publikasi mengenai khasiat tanaman obat-obatan di Indonesia semakin dan berkembang. Dengan demikian banyak masyarakat yang mempercayai tanaman obat (Suparni & Wulandari, 2012).



11



Budidaya tanaman obat Indonesia kini juga mulai digalakkan. Pada dasarnya budidaya tanaman obat Indonesia mempunyai tiga aspek strategis yaitu pertama, menjamin mutu simplisia sesuai dengan standar yang berlaku. Kedua, menjaga kelestarian tanaman obat Indonesia. Ketiga, meningkatkan nilai tambah ekonomi untuk kesejahteraan masyarakat luas. Proses budidaya tanaman obat yang baik dimulai dari pembibitan, penanaman, dan pemanenan. Di samping itu, penelitian dan pengembangan obat herbal di Indonesia perlu terus dilakukan, mengingat pelaksanaannya masih belum optimal dan bersifat marjinal, belum komprehensif dan kurang mendalam (Rifani, 2014). Saat ini sudah ada usaha-usaha untuk melakukan pengembangan dan standarisasi dalam hal pengobatan alamiah atau pengobatan herbal ini. Tentunya ini satu kemajuan yang patut didukung oleh semua pihak. Namun demikian, dilingkungan masyarakat awam sudah banyak dikenali berbagai ramuan tradisional yang sangat popular. Pengobatan-prngobatan tradisional tersebut diyakini secara empiris berdasarkan kebiasaan dan pengalaman turunmenurun dapat menyembuhkan berbagai penyakit (Suparni & Wulandari, 2012). Bahan pengobatan berbasis tanaman masih digunakan sebagai andalan utama perawatan kesehatan oleh 80 persen penduduk dunia, sehingga patut disebut dengan “obat untuk rakyat”. Itu sebabnya Organisasi Kesehatan Dunia (WHO) menetapkan kebijakan untuk melestarikan dan mendorong pengobatan tradisional herba karena bisa dijangkau semua lapisan masyarakat, juga aman serta efektif. Pengobatan herbal adalah sistem pengobatan holistik yang mengarah kepada usaha mengembalikan mekanisme



12



tubuh untuk menyembuhkan dirinya sendiri dari suatu penyakit yang dideritanya (Bangun, 2012). 2.2 Tinjauan Tentang Diabetes Milletus 2.2.1 Definisi diabetes mellitus Diabetes mellitus termasuk ke dalam salah satu penyakit yang perlu diperhatikan di Indonesia. Sebesar 80% orang dengan diabetes mellitus tinggal di negara berpenghasilan rendah dan menengah, Sebagian besar penderita diabetes mellitus berusia antara 40-59 tahun. Kini diabetes mellitus menjadi salah satu masalah kesehatan yang besar. Data dari studi global menunjukan bahwa jumlah penderita diabetes mellitus pada tahun 2011 telah mencapai 366 juta orang, dan diperkirakan akan meningkat menjadi 552 juta pada tahun 2030 (Trisnawati, 2013). Diabetes mellitus atau yang di Indonesia lebih dikenal dengan sebutan kencing manis merupakan penyakit yang terjadi akibat gangguan sekresi insulin yang ditandai dengan peningkatan kadar glukosa darah melebihi batas normal (hiperglikemia). Gejala umum yang biasa terjadi pada penderita diabetes mellitus antara lain banyak makan, banyak minum dan sering kencing (Kawatu et al. 2013). Diabetes melitus merupakan suatu kelompok penyakit metabolik dengan karakteristik hiperglikemia yang terjadi karena kelainan sekresi insulin, kerja insulin atau kedua-duanya (Henderina, 2010). Seseorang dapat didiagnosa diabetes melitus apabila mempunyai gejala klasik diabetes melitus seperti poliuria, polidipsi dan polifagi disertai dengan kadar gula darah sewaktu ≥200 mg/dl dan gula darah puasa ≥126 mg/dl (PERKENI, 2011).



13



2.2.2 Manifestasi Klinik Diabetes Mellitus Beberapa gejala umum yang dapat ditimbulkan oleh penyakit diabetes milletus diantaranya : 1. Timbul rasa haus (Polidipsia) : Rasa haus berlebihan yang timbul karena kadar glukosa terbawa oleh urin sehingga tubuh merespon untuk meningkatkan asupan cairan (Subekti, 2009). 2. Timbul rasa lapar (Polifagia) : Pasien diabetes milletus akan merasa cepat lapar dan lemas, hal tersebut disebabkan karena glukosa dalam tubuh semakin habis sedangkan kadar glukosa dalam darah cukup tinggi (PERKENI, 2011). 3. Peyusutan berat badan : Penyusutan berat badan pada pasien diabetes milletus disebabkan karena tubuh terpaksa mengambil dan membakar lemak sebagai cadangan energi (Subekti, 2009). 2.2.3 Klasifikasi Diabete Milletus 1. Diabetes Milletus tipe 1 : Biasanya terjadi pada remaja atau anak, dan terjadi karena kerusakan sel β (beta) (WHO, 2014). Canadian Diabetes Association (CDA) 2013 juga menambahkan bahwa rusaknya sel β pankreas diduga karena proses autoimun, namun hal ini juga tidak diketahui secara pasti. diabetes tipe 1 rentan terhadap ketoasidosis, memiliki insidensi lebih sedikit dibandingkan diabetes tipe 2, akan meningkat setiap tahun baik di negara maju maupun di negara berkembang (IDF, 2014). 2. Diabetes tipe 2 : Biasanya terjadi pada usia dewasa (WHO, 2014). Seringkali diabetes tipe 2 didiagnosis beberapa tahun setelah onset,



14



yaitu setelah komplikasi muncul sehingga tinggi insidensinya sekitar 90% dari penderita DM di seluruh dunia dan sebagian besar merupakan akibat dari memburuknya faktor risiko seperti kelebihan berat badan dan kurangnya aktivitas fisik (WHO, 2014). 3. Diabetes gestational : Diabetes yang didiagnosis selama kehamilan (ADA, 2014) dengan ditandai dengan hiperglikemia (kadar glukosa darah di atas normal) (CDA, 2013 dan WHO, 2014). Wanita dengan diabetes gestational memiliki peningkatan risiko komplikasi selama kehamilan dan saat melahirkan, serta memiliki risiko diabetes tipe 2 yang lebih tinggi di masa depan (IDF, 2014). 4. Tipe diabetes lainnya



: Diabetes melitus tipe khusus merupakan



diabetes yang terjadi karena adanya kerusakan pada pankreas yang memproduksi insulin dan mutasi gen serta mengganggu sel beta pankreas, sehingga mengakibatkan kegagalan dalam menghasilkan insulin secara teratur sesuai dengan kebutuhan tubuh. Sindrom hormonal yang dapat mengganggu sekresi dan menghambat kerja insulin yaitu sindrom chusing, akromegali dan sindrom genetik (ADA, 2015). 2.2.4 Patofisiologi Diabetes Milletus 1. Patofisiologi diabetes tipe 1 : Pada DM tipe 1, sistem imunitas menyerang dan menghancurkan sel yang memproduksi insulin beta pankreas (ADA, 2014). Kondisi tersebut merupakan penyakit autoimun yang ditandai dengan ditemukannya anti insulin atau antibodi sel anti-islet dalam darah (WHO, 2014). National Institute of



15



Diabetes and Digestive and Kidney Diseases (NIDDK) tahun 2014 menyatakan bahwa autoimun menyebabkan infiltrasi limfositik dan kehancuran islet pankreas. Kehancuran memakan waktu tetapi timbulnya penyakit ini cepat dan dapat terjadi selama beberapa hari sampai minggu. Akhirnya, insulin yang dibutuhkan tubuh tidak dapat terpenuhi karena adanya kekurangan sel beta pankreas yang berfungsi memproduksi insulin. Oleh karena itu, diabetes tipe 1 membutuhkan terapi insulin, dan tidak akan merespon insulin yang menggunakan obat oral. 2. Patofisiologi diabetes tipe 2 : Kondisi ini disebabkan oleh kekurangan insulin namun tidak mutlak. Ini berarti bahwa tubuh tidak mampu memproduksi insulin yang cukup untuk memenuhi kebutuhan yang ditandai dengan kurangnya sel beta atau defisiensi insulin resistensi insulin perifer (ADA, 2014). Resistensi insulin perifer berarti terjadi kerusakan pada reseptor-reseptor insulin sehingga menyebabkan insulin menjadi kurang efektif mengantar pesan-pesan biokimia menuju sel-sel (CDA, 2013). Dalam kebanyakan kasus diabetes tipe 2 ini, ketika obat oral gagal untuk merangsang pelepasan insulin yang memadai, maka pemberian obat melalui suntikan dapat menjadi alternatif. 3. Patofisiologi diabetes gestasional : Gestational diabetes terjadi ketika ada hormon antagonis insulin yang berlebihan saat kehamilan. Hal ini menyebabkan keadaan resistensi insulin dan glukosa tinggi pada ibu



16



yang terkait dengan kemungkinan adanya reseptor insulin yang rusak (NIDDK, 2014 dan ADA, 2014). 2.2.5 Komplikasi Diabetes Milletus Diabetes



melitus



merupakan



salah



satu



penyakit



yang



dapat



menimbulkan berbagai macam komplikasi, antara lain : 1. Komplikasi metabolik akut : Kompikasi metabolik akut pada penyakit diabetes melitus terdapat tiga macam yang berhubungan dengan gangguan keseimbangan kadar glukosa darah jangka pendek, diantaranya: a. Hipoglikemia : Hipoglikemia (kekurangan glukosa dalam darah) timbul sebagai komplikasi diabetes yang disebabkan karena pengobatan yang kurang tepat (Smeltzer & Bare, 2008). b.Ketoasidosis diabetik : Ketoasidosis diabetik (KAD) disebabkan karena kelebihan kadar glukosa dalam darah sedangkan kadar insulin dalam tubuh sangat menurun sehingga mengakibatkan kekacauan metabolik yang ditandai oleh trias hiperglikemia, asidosis dan ketosis (Soewondo, 2006). c. Sindrom HHNK (koma hiperglikemia hiperosmoler nonketotik) : Sindrom HHNK adalah komplikasi diabetes melitus yang ditandai dengan hiperglikemia berat dengan kadar glukosa serum lebih dari 600 mg/dl (Price & Wilson, 2006). 2. Komplikasi metabolik kronik : Komplikasi metabolik kronik pada pasien DM menurut Price & Wilson (2006) dapat berupa kerusakan



17



pada pembuluh darah kecil (mikrovaskuler) dan komplikasi pada pembuluh darah besar (makrovaskuler) diantaranya: a. Komplikasi pembuluh darah kecil (mikrovaskuler) yaitu : 1) Kerusakan retina mata (Retinopati) : Suatu mikroangiopati ditandai dengan kerusakan dan sumbatan pembuluh darah kecil (Pandelaki, 2009). 2) Kerusakan ginjal (Nefropati diabetik) : Ditandai dengan albuminuria menetap (>300 mg/24jam atau >200 ih/menit) minimal 2 kali pemeriksaan dalam kurun waktu 3-6 bulan. Nefropati diabetik merupakan penyebab utama terjadinya gagal ginjal terminal. 3) Kerusakan syaraf (Neuropati diabetik) : Komplikasi yang paling sering ditemukan pada pasien DM. Neuropati pada DM mengacau pada sekelompok penyakit yang menyerang semua tipe saraf (Subekti, 2009). b. Komplikasi pembuluh darah besar (makrovaskuler) : 1) Penyakit jantung koroner : Komplikasi penyakit jantung koroner pada pasien diabetes milletus disebabkan karena adanya iskemia atau infark miokard yang terkadang tidak disertai dengan nyeri dada atau disebut dengan SMI (Silent Myocardial Infarction) (Widiastuti, 2012). 2) Penyakit serebrovaskuler : Pasien diabetes milletus berisiko 2 kali lipat dibandingkan dengan pasien non-DM untuk terkena penyakit serebrovaskuler. Gejala yang ditimbulkan menyerupai



18



gejala pada komplikasi akut DM, seperti adanya keluhan pusing atau vertigo, gangguan penglihatan, kelemahan dan bicara pelo (Smeltzer & Bare, 2008). 2.2.6 Faktor Resiko Diabetes Milletus 1. Faktor risiko yang dapat diubah : a. Gaya hidup : Merupakan perilaku seseorang yang ditunjukkan dalam aktivitas sehari-hari. Makanan cepat saji, olahraga tidak teratur dan minuman bersoda adalah salah satu gaya hidup yang dapat memicu terjadinya DM tipe 2 (ADA, 2009). b. Diet yang tidak sehat : Perilaku diet yang tidak sehat yaitu kurang olahraga, menekan nafsu makan, sering mengkonsumsi makan siap saji (Abdurrahman, 2014). c. Obesitas : Obesitas merupakan salah satu faktor risiko utama untuk terjadinya penyakit DM. Menurut Kariadi (2009) dalam Fathmi (2012), obesitas dapat membuat sel tidak sensitif terhadap insulin (resisten insulin). Semakin banyak jaringan lemak pada tubuh, maka tubuh semakin resisten terhadap kerja insulin, terutama bila lemak tubuh terkumpul didaerah sentral atau perut (central obesity). d. Tekanan darah tinggi : Menurut Kurniawan dalam Jafar (2010) tekanan darah tinggi merupakan peningkatan kecepatan denyut jantung, peningkatan resistensi (tahanan) dari pembuluh darah dari tepi dan peningkatan volume aliran darah.



19



2. Faktor risiko yang tidak dapat diubah : a. Usia : Semakin bertambahnya usia maka semakin tinggi risiko terkena diabetes tipe 2. DM tipe 2 terjadi pada orang dewasa setengah baya, paling sering setelah usia 45 tahun (American Heart Association [AHA], 2012). Meningkatnya risiko DM seiring dengan bertambahnya usia dikaitkan dengan terjadinya penurunan fungsi fisiologis tubuh. b. Riswayat keluarga diabetes melitus : Seorang anak dapat diwarisi gen penyebab DM orang tua. Biasanya, seseorang yang menderita DM mempunyai anggota keluarga yang juga terkena penyakit tersebut (Ehsan, 2010). Fakta menunjukkan bahwa mereka yang memiliki ibu penderita DM tingkat risiko terkena DM sebesar 3,4 kali lipat lebih tinggi dan 3,5 kali lipat lebih tinggi jika memiliki ayah penderita DM. Apabila kedua orangtua menderita DM, maka akan memiliki risiko terkena DM sebesar 6,1 kali lipat lebih tinggi (Sahlasaida, 2015). c. Ras atau latar belakang etnis : Risiko DM tipe 2 lebih besar terjadi pada hispanik, kulit hitam, penduduk asli Amerika, dan Asia (ADA, 2009). d. Riwayat diabetes pada kehamilan : Mendapatkan diabetes selama kehamilan atau melahirkan bayi lebih dari 4,5 kg dapat meningkatkan risiko DM tipe 2 (Ehsan, 2010). 2.2.7 Farmakoterapi Diabetes Milletus 1. Terapi Non Farmakologi



20



a. Diet : Diet yang dianjurkan adalah makanan dengan komposisi yang seimbang dalam hal karbohidrat, protein dan lemak, sesuai dengan kecukupan gizi baik sebagai berikut: 1) Karbohidrat : 60-70% 2) Protein : 10-15 3) Lemak : 20-25% 25 b. Jumlah kalori disesuaikan dengan pertumbuhan, status gizi, umur, stres akut dan kegiatan fisik, yang pada dasarnya ditujukan untuk mencapai dan mempertahankan berat badan ideal. c. Olahraga : Berolah raga secara teratur dapat menurunkan dan menjaga kadar gula darah tetap normal. Saat ini ada dokter olah raga yang dapat dimintakan nasihatnya untuk mengatur jenis dan porsi olah raga yang sesuai untuk penderita diabetes. Prinsipnya, tidak perlu olah raga berat, olah raga ringan asal dilakukan secara teratur akan sangat bagus pengaruhnya bagi kesehatan. Olahraga yang disarankan adalah yang bersifat CRIPE (Continuous, Rhytmical, Interval, Progressive, Endurance Training). Sedapat mungkin mencapai zona sasaran 75-85% denyut nadi maksimal (220-umur),



disesuaikan



dengan



kemampuan



dan



kondisi



penderita. Beberapa contoh olah raga yang disarankan, antara lain jalan atau lari pagi, bersepeda, berenang, dan lain sebagainya. 2. Terapi Farmakologi a. Terapi insulin merupakan satu keharusan bagi penderita Diabetes milletus Tipe 1. Pada diabetes milletus Tipe I, sel-sel β Langerhans



21



kelenjar pankreas penderita rusak, sehingga tidak lagi dapat memproduksi insulin. Sebagai penggantinya, maka penderita diabetes milletus Tipe I harus mendapat insulin eksogen untuk membantu agar metabolisme karbohidrat di dalam tubuhnya dapat berjalan normal. Walaupun sebagian besar penderita Diabtes milletus Tipe 2 tidak memerlukan terapi insulin, namun hampir 30% ternyata memerlukan terapi insulin disamping terapi hipoglikemik oral. b. Terapi Obat Hipoglikemik Oral Berdasarkan mekanisme kerjanya, obat-obat hipoglikemik oral dapat dibagi menjadi 3 golongan, yaitu: 1) Obat-obat yang meningkatkan sekresi insulin, meliputi obat hipoglikemik oral golongan sulfonilurea dan glinida (meglitinida dan turunan fenilalanin). 2) Sensitiser insulin (obat-obat yang dapat meningkatkan sensitifitas sel terhadap insulin), meliputi obat-obat hipoglikemik golongan biguanida dan tiazolidindion, yang dapat membantu tubuh untuk memanfaatkan insulin secara lebih efektif. 3)



Inhibitor katabolisme karbohidrat, antara lain inhibitor αglukosidase yang bekerja menghambat absorpsi glukosa dan umum digunakan untuk mengendalikan hiperglikemia post-prandial (post-meal hyperglycemia). Disebut juga “starch-blocker”



22



Tabel 2.1 Pengggolang Obat Antihipergikemik oral Golongan Sulfonilurea



Contoh Senyawa



Mekanisme Kerja



1. Glibenclamide



Merangsang



sekresi



2. Glipizida



insulin



3. Glikazida



pancreas, sehingga hanya



4. Glimepiride



efektif



5. Glikuidon



dabetes



di



kelenjar



pada



penderita



yang



pancreasnya



sel-el masih



berfungsi dengan baik. Turunan Fenilalanin



Nateglinide



Meningkatkan kecepatan sintesis



insulin



oleh



pancreas. Biguanida



Metformin



Bekerja langsung pada hati,



menurunkan



produksi glukosa hati. Tidak seksresi



merangsang insulin



oleh



kelenjar pancreas. Inhibitor a-glukosidase



1. Acarbose



Menghambat kerja enzim



2. Miglitol



pencernaan mencrna



yang karbohidrat,



memperlambat absorpsi glukosa ke darah.



Sumber : Muchid et al. 2005 2.2.8 Diabetes Ke Arah Hiperglikemia Diabetes Mellitus mengalami defisiensi insulin menyebabkan glukagon meningkat sehingga terjadi pemecahan gula baru (Glukoneogenesis) yang menyebabkan metabolisme lemak meningkat kemudian terjadi proses pembentukan



keton



(ketogenesis).



Terjadinya



peningkatan



keton



didalamplasma akan menyebabkan ketonuria (keton didalam urine) dan kadar natrium menurun serta PH serum menurun yang menyebabkan asidosis.



23



Difisiensi insulin menyebabkan penggunaan glukosa oleh sel menjadi menurun sehingga kadar glukosa darah dalam plasma tinggi (hiperglikemia). Jika hiperglikemianya parah dan melebihi ambang ginjal maka timbul glikosuria. Glukosuria ini akan menyebabkan deuresis osmotik yangmeningkatkan pengeluaran kemih (poliuri) dan timbul rasa haus (polidipsi) sehingga terjadi dehidrasi. Glukosuria menyebabkan keseimbangan kalorinegatif sehingga menimbulkan rasa lapar (polifagfi). Penggunaan glukosa oleh sel menurun mengakibatkan produksi metabolisme energi menjadi menurun sehingga tubuh menjadi lemah (Smeltzer, 2001). Hiperglikemia dapat mempengaruhi pembuluh darah kecil (arteri kecil) sehingga suplai makanan dan oksigen ke perifer menjadi berkurang yang akan menyebabkan luka tidak sembuh-sembuh. Karena suplai makanan dan oksigen tidak adekuat yang mengakibatkan terjadinya infeksi dan terjadi ganggren atau ulkus. Gangguan pembuluh darah menyebabkan aliran ke retina menurun sehingga suplai makanan dan oksigen berkurang, akibatnya pandangan menjadi kabur. Salah satu akibat utama dari perubahan mikrovaskuler adalah perubahan pada struktur dan fungsi ginjal sehingga terjadi nefropati. Diabetes mempengaruhi saraf – saraf perifer, sistem saraf otonom dansistem saraf pusat sehingga mengakibatkan neuropati (Smeltzer, 2001). 2.2.9 Hiperglikemia Hiperglikemia adalah kadar gula darah yang tinggi dengan nilai lebih dari normal dikarenakan tubuh tidak memproduksi insulin atau insulin tidak bekerja dengan baik (Hess-Fischl, 2016). Pada keadaan normal, glukosa diperlukan sebagai stimulator sel β pancreas dalam meproduksi insulin. Kadar



24



glukosa darah yang meningkat akan ditangkap oleh sel β melalui glucose transporter 2 (GLUT2). Glukosa akan mengalami fosforilase menjadi glukosa6 fosfat (G6P) dengan bantuan enzim penting, yaitu glukokinase. Glukosa 6 fosfat kemudian akan mengalami glikolisis dan akhirnya akan menjadi asam piruvat. Dalam proses glikolisis ini akan dihasilkan 6-8 ATP. Penambahan ATP akan menyebabkan menutupnya kanal kalium. Dengan demikian kalium akan tertumpuk dalam sel dan terjadi depolarisasi membran sel pankreas, sehingga kanal kalsium terbuka dan kalsium akan masuk ke dalam sel. Dengan meningkatnya kalsium intrasel, akan terjadi translokasi granul insulin ke membran dan insulin akan dilepaskan ke dalam darah (Merentek, 2006). 2.2.10 Patofisiologi Hiperglikemia Penyerapan glukosa ke dalam sel diawali dengan penangkapan insulin oleh insulin receptor substrat-1 (IRS-1) yang kemudian memberikan sinyal pada GLUT 4 untuk memindahkan glukosa dari luar ke dalam sel. Keadaan hiperglikemia kronis menyebabkan terjadinya glucose toxicity yang berakibat pada penurunan ambilan glukosa di membrane sel otot oleh karena terjadinya gangguan translokasi pada GLUT 4, penurunan aktifitas IRS-1 sehingga terjadi resistensi pada insulin. Hal ini menyebabkan glukosa plasma akan meningkat. Resistensi insulin awalnya dapat ditoleransi dengan peningkatan sekresi insulin yang apabila terjadi terus menerus akan menyebabkan kelelahan pada sel beta pancreas yang mengakibatkan destruksinya sel beta sehingga berdampak pada penurunan sekresi insulin (Campos, 2012).



25



2.2.11 Stres Oksidatif pada Hiperglikemia Kondisi hiperglikemia menyebabkan autooksidasi glukosa, glikasi protein dan aktivasi jalur metabolism poliol yang selanjutnya akan mempercepat pembentukan ROS (reactive oxygen species). Pembentukan ROS tersebut dapat meningkatkan modifikasi lipid, DNA, dan protein pada berbagai jaringan.



Modifikasi



molecular



di



berbagai



jaringan



mengakibatkan



ketidakseimbangan antara antioksidan protektif (pertahanan antioksidan) dan pengingkatan produksi radikal bebas. Hal ini merupakan awal kerusakan oksidatif yang dikenal sebagai stress oksidatif (Setiawan dan Suhartono, 2005). Keadaan hiperglikemia kronis dapat menyebabkan terjadinya glucose toxicity yang meningkatkan terbentuknya ROS dengan berbagai cara antara lain: 1. Oksidasi glukosa dalam proses glikolisis akan menghasilkan superoxide radical (O2- ), yang merupakan jenis dari ROS 2. Glukosa yang berlebih akan mengalami reduksi menjadi polyalcohol sorbitol yang reaksinya dapat menurunkan gluthatione, yaitu enzim antioksidan alami tubuh untuk melawan radikal bebas. 3. Aktivasi jalur pembentukan advanced glycation end products (AGEs), glukosa yang berlebih akan berikatan dengan asam amino bebas yang akan membentuk AGEs. AGEs akan berikatan dengan reseptornya di berbagai jaringan yang dapat menghasilkan ROS. 4. Kelebihan glukosa akan menyebabkan aktivasi jalur heksosamin, di mana glukosa berlebih akan diubah menjadi fructose-6-phosphatase dan acetilglucosamine yang dapat mensistesi glikoprotein. Proses ini juga dapat menhasilkan H2O2 yang merupakan jenis dari ROS.



26



5. Hiperglikemi dalam sel akan meningkatkan sintesis molekul diasil gliserol yang merupakan kofaktor penting pada aktifasi protein kinaseC (PKC), yang akan meningkatkan NAD(P)H oxydased pada membran sel yang mengkatalis terbentuknya radical superoxyde Meningkatnya ROS pada kondisi hiperglikemia akan menyebabkan berbagai kerusakan termasuk pada sel β pancreas sehingga dapat menurunkan produksi insulin (Campos, 2012). 2.3



Tinjauan Tentang Hati



2.3.1 Anatomi dan Fisiologi Hati Hati adalah kelenjar paling besar (1200-1800 g) dan organ metabolik utama pada tubuh, yang terletak di bagian teratas dalam rongga abdomen di sebelah kanan bawah diafragma. Hati secara luas dilindungi oleh iga-iga (Paulsen & Waschke, 2012). Hati memiliki permukaan superior yang cembung dan terletak di bawah kubah kanan diafragma dan sebagian kubah kiri. Bagian bawah hati berbentuk cekung dan merupakan atap dari ginjal kanan, lambung, pankreas, dan usus. Hati memilki dua lobus utama yaitu kanan dan kiri. Lobus kanan dibagi menjadi segmen anterior dan posterior oleh fisura segmentalis kanan yang tidak terlihat dari luar. Lobus kiri dibagi menjadi segmen dan lateral oleh ligamentum falsiformis yang terlihat dari luar. Ligamentum falsiformis berjalan dari hati ke diafragma dan dinding depan abdomen. Permukaan hati diliputi oleh peritoneum viseralis, kecuali daerah kecil pada permukaan posterior yang melekat langsung pada diafragma.



27



Beberapa ligamentum yang merupakan peritoneum membantu menyokong hati. Dibawah peritoneum terdapat jaringan ikat padat yang disebut sebagai kapsula Glisson, yang meliputi permukaan seluruh organ; bagian paling tebal kapsula ini terdapat pada porta hepatis, membentuk rangka untuk cabang vena porta, arteri hepatika dan saluran empedu. Porta hepatis adalah fisura pada hati temapt masuknya vena porta dan arteri hepatica serta tempat keluarnya duktus hepatika (Paulsen & Waschke, 2012). 2.3.2 Fungsi Hati Hati memiliki berbagai fungsi, tiga fungsi utamanya adalah produksi dan sekresi empedu yang disalurkan ke dalam saluran pencernaan; keterlibatan dalam berbagai aktivitas metabolik terkait dengan metabolisme karbohidrat, lemak, dan protein; dan filtrasi darah, mengeliminasi bakteri dan partikel asing lain yang masuk ke darah dari lumen intestinum (Snell, 2014). Dalam sistem pencernaan, hati berperan sebagai kelenjar yang mensekresikan getah empedu yang perperan dalam digesti dan absorpsi lemak. Hati juga berperan dalam memetabolisme nutrien (karbohidrat, protein, lipid) setelah diabsorbsi oleh saluran pencernaan. Selain itu hati juga berfungsi dalam proses detoksifikasi atau degradasi produk buangan tubuh, hormon, obatobatan, dan berbagai xenobiotik yang masuk ke tubuh (Sherwood, 2011). Fungsi lain hati adalah sebagai glikogenik, karena dirangsang oleh suatu enzim maka sel hati menghasilkan glikogen (yaitu zat tepung hewani) dari konsentrasi glukosa yang diambil dari makanan hidrat karbon. Zat ini disimpan sementara oleh sel hati dan diubah kembali menjadi glukosa oleh kerja enzim bila diperlukan oleh jaringan tubuh. Karena fungsi ini maka hati membantu



28



agar kadar gula yang normal dalam darah, yaitu 80 sampai 100 mg glukosa setiap 100 cc darah, dapat dipertahankan. Akan tetapi fungsi ini dikendalikan oleh sekresi pankreas, yaitu insulin. Hati juga dapat mengubah asam amino menjadi glukosa (Paulsen & Waschke, 2012). Hati menjadi tempat pembentukan ureum, hati menerima asam amino yang diabsorpsi oleh darah. Di dalam hati terjadi deaminasi oleh sel, artinya nitrogen dipisahkan dari bagian asam amino, dan ammonia diubah menjadi ureum. Ureum dapat dikeluarkan dari darah oleh ginjal dan ekskresikan ke dalam urin (Paulsen & Waschke, 2012). Darah dari lambung dan usus dialirkan terlebih dahulu ke hati melalui vena porta sebelum diedarkan ke sistem sirkulasi. Dengan demikian, hati menjadi organ pertama yang berhadapan dengan beerbagai materi yang diingesti tunuh seperti sari-sari makanan, vitamin, logam, obat-obatan, dan toksikan yang berasal dari lingkungan. Serangkaian proses fisiologis yang terjadi di sel-sel hati mengekstraksi materi-materi tersebut dari darah untuk selanjutnya dikatabolisme, disimpan, atau dieksresikan melalui getah empedu (Corwin, 2010). 2.3.3 Histologi Hati Sel–sel yang terdapat di hati antara lain: hepatosit, sel endotel, dan sel makrofag yang disebut sebagai sel kuppfer, dan sel ito (sel penimbun lemak). Sel hepatosit berderet secara radier dalam lobulus hati dan membentuk lapisan sebesar 1-2 sel serupa dengan susunan bata. Lempeng sel ini mengarah dari tepian lobulus ke pusatnya dan beranastomosis secara bebas membentuk



29



struktur seperti labirin dan busa. Celah diantara 14 lempeng-lempeng ini mengandung kapiler yang disebut sinusoid hati (Junquiera et al. 2007). Sinusoid hati adalah saluran yang berliku–liku dan melebar, diameternya tidak teratur, dilapisi sel endotel bertingkat yang tidak utuh. Sinusoid dibatasi oleh 3 macam sel, yaitu sel endotel (mayoritas) dengan inti pipih gelap, sel kupffer yang fagositik dengan inti ovoid, dan sel stelat atau sel Ito atau liposit hepatik yang berfungsi untuk menyimpan vitamin A dan memproduksi matriks ekstraseluler serta kolagen. Aliran darah di sinusoid berasal dari cabang terminal vena portal dan arteri hepatik, membawa darah kaya nutrisi dari saluran pencernaan dan juga kaya oksigen dari jantung (Eroschenko, 2010; Junqueira et al. 2007). Traktus portal terletak di sudut-sudut heksagonal. Pada traktus portal, darah yang berasal dari vena portal dan arteri hepatik dialirkan ke vena sentralis. Traktus portal terdiri dari 3 struktur utama yang disebut trias portal. Struktur yang paling besar adalah venula portal terminal yang dibatasi oleh sel endotel pipih. Kemudian terdapat arteriola dengan dinding yang tebal yang merupakan cabang terminal dari arteri hepatik. Dan yang ketiga adalah duktus biliaris yang mengalirkan empedu. Selain ketiga struktur itu, ditemukan juga limfatik (Junqueira et al. 2007). Aliran darah di hati dibagi dalam unit struktural yang disebut asinus hepatik. Asinus hepatik berbentuk seperti buah berry, terletak di traktus portal. Asinus ini terletak di antara 2 atau lebih venula hepatic terminal, dimana darah mengalir dari traktus portalis ke sinusoid, lalu ke venula tersebut. Asinus ini terbagi menjadi 3 zona, dengan zona 1 terletak paling dekat dengan traktus



30



portal sehingga paling banyak menerima darah kaya oksigen, sedangkan zona 3 terletak paling jauh dan hanya menerima sedikit oksigen. Zona 2 atau zona intermediet berada diantara zona 1 dan 3. Zona 3 ini paling mudah terkena jejas iskemik (Junqueira et al. 2007). 2.3.4 Histopatologi Hati Beberapa fungsi hati menurut Guyton dan Hall (2008) diantaranya adalah berperan dalam metabolisme karbohidrat, metabolisme lemak, metabolism protein, tempat penyimpanan vitamin, membentuk zat-zat untuk koagulasi darah, dan mengsekresikan hasil metabolisme obat-obatan, hormon, dan zatzat lainnya. Para ilmuan di Harvard menemukan temuan baru yakni diabetes mellitus merupakan penyakit dengan multipatologi. Selain karena kerusakan pada organ pankreas diabetes mellitus juga dipicu oleh metabolisme organ lain diantaranya adalah organ hati. Kadar glukosa yang tidak stabil pada penderita diabetes mellitus dapat memicu peradangan pada hati. Peradangan yang terjadi mendorong munculnya perlemakan hati yang berpotensi menjadi penyakit kronik pada hati. Pada penderita diabetes mellitus tipe 2, resistensi insulin dankekurangan insulin yang terjadi akan berdampak besar terhadap produksi glukosa oleh hati dan kadar glukosa di dalam darah. Dalam proses detoksifikasi bahanbahan sisa metabolisme zat makanan organ yang paling berperan penting adalah hati. Darah yang mengandung zat makanan yang diabsorbsi dari usus atau organ lain dibawa masuk ke hati melalui vena porta. Hal ini membuat hati mudah dan sangat sering berkontak dengan zat kimia dalam jumlah yang besar



31



dan hati merupakan jalur sekresi untuk kebanyakan obat. Hal ini membuat hati rentan terhadap kerusakan (Silverthorn, 2014) Berbagai Kerusakan pada hati diantaranya : 1. Perlemakan Hati (Steatosis) : Perlemakan hati adalah hati yang mengandung berat lipid lebih dari 5%. Adanya kelebihan lemak dalam hati dapat dibuktikan secara histokimia, lesi dapat bersifat akut, seperti yang disebabkan oleh enitopin, fosfor, atau tetratskilin. Etanol dan metotreksat dapat menyebabkan lesi akut atau lesi kronik. Beberapa toksikan seperti tetrasiklin, menyebabkan banyak butiran lemak kecil dalam suatu sel sementara toksikan lainnya, seperti etanol, menyebabkan butiran lemak besar yang menggantikan inti (Lu, 2010). Meskipun



berbagai



toksikan



itu



akhirnya



menyebabkan



penimbunan lipid dalam hati, mekanisme yang mendasarinya beragam. Meskipun mekanisme yang paling umum adalah rusaknya pelepasan trigliserid hati ke plasma. Karena trigliserid hati hanya disekresi bila dalam keadaan tergabung dengan lipoprotein (lipoprotein berdensitas sangat rendah (VLDL). Penimbuna lipid hati dapat terjadi lewat beberapa mekanisme : (Lu, 2010) : a. Penghambatan sintesis satuan protein dari lipoprotein (misalnya, karbon tetraklorida, etionin) b. Penenkanan



konjugasi



trigliserid



(misalnya, karbon tetraklorid).



dengan



lipoprotein



32



c. Hilangnya kalium dari hepatosit, mengakibatkan gangguan transfer VLDL melalui membran sel (misalnya, etionin). d. Rusaknya oksidasi lipid oleh mitokondria (misalnya, etanol). e. Penghambatan sintesis fosfolipid, bagian penting dari VLDL (misalnya, kekurangan kolin, asam orotat) 2. Nekrosis Hati : Nekrosis hati adalah kematian hepatosit. Nekrosis dapat bersifat fokal (sentral, pertengahan, perifer) atau passif. Biasanya nekrosis merupakan kerusakan akut. Beberapa zat kimia telah dibuktikan atau dilaporkan menyebabkan nekrosis hati. Nekrosis hati merupakan suatu manifestasi toksik yang berbahaya tetapi tidak selalu kritis karena hati mempunyai kapasitas pertumbuhan kembali yang luar biasa (Lu, 2010). Kematian sel terjadi bersama dengan pecahnya membran plasma. Tidak ada perubahan ultrastruktural membran yang dapat dideteksi sebelum pecah. Namun, ada beberapa perubahan yang mendahului kematian sel. Perubahan morfologis awal antara lain berupa edema sitoplasma, dilatasi retikulum endoplasma, dan disagregasi polisom. Terjadi akumulasi trigliserid sebagai butiran lemak dalam sel. Perubahan yang terdahulu merupakan pembengkakan mitokondria progresif dengan kerusakan krista. Pembengkakan sitoplasma, penghancuran organel dan inti serta pecahnya membran plasma (Lu, 2010).



33



Jenis-jenis nekrosis hati a. Nekrosis fokal : Nekrosis sel hati fokal merupakan nekrosis yang terjadi secara acak pada satu sel atau sekelompok kecil sel pada seluruh daerah lobulus-lobulus hati. Jadi, tidak seluruh lobulus terkena. Nekrosis ini dikenali pada biopsi melalui (1) badan asidofilik (councilman) yang merupakan sel hati nekrotik dengan inti piknotik atau lisis dan sitoplasma terkoagulasi berwarna merah muda (2) daerah lisis sel hati yang dikelilingi oleh kumpulan sel kupfer dan sel radang. Nekrosis fokal sering dijumpai pada hepatitis virus paling banyak pada nekrosis fokal apoptosis, kerusakan akibat bahan toksik dan infeksi bakteremia. b.Nekrosis Zona : Nekrosis zona sel hati adalah nekrosis sel hati yang terjadi pada regio-regio yang identik di semua lobulus hati. Penyebabnya berbeda-beda sesuai zona yang terkena. Nekrosis sentrizona yang mengenai sel-sel disekeliling vena hepatika sentral, terjadi pada hepatitis virus, keracunan karbon tetraklorida dan kloroform, serta keadaan anoksia (tidak ada oksigen) seperti gagal jantung dan syok. Nekrosis midzona jarang terjadi dan timbul pada demam kuning. Nekrosis zona perifer yang mengenai sel hati disekeliling traktus porta terjadi pada eklampsia (kejang karena hipertensi) dan keracunan fosfor. Diatas itu ada kata piece meal necrosis yaitu suatu nekrosis hati dimana lobulus-lobulus hati dipisahkan oleh kelompok-kelompok kecil sel inflamasi. Bridging hepatic necrosis, bridging itu sendiri



34



adalah suatu struktur yang menghubungkan dua titik yang berjauhan. Bridging necrosis adalah suatu nekrosis yang menjembatani daerah porta dengan v. sentralis c. Nekrosis submasif dan masif : Nekrosis submasif merupakan nekrosis sel hati yang meluas melewati batas lobulus. Sedangkan nekrosis masif itu ditandai dengan adanya pengecilan hati mendadak karena memang terjadi nekrosis yang luas di hati, tampak lunak, kuning dan membubur, dengan kapsul yang berkerut( terkadang disebut dengan atrofi kuning akut). Nekrosis hati masif sering disebabkan oleh virus hepatitis biasanya B dan C. Kadar enzim serum sangat meningkat. 3. Kolestatis : Jenis kerusakan hati ini biasanya bersifat akut, lebih jarang ditemukan dibandingkan dengan perlemakan hati dan nekrosis. Jenis kerusakan ini juga lebih sulit diinduksi pada hewan, kecuali mungkin dengan steroid. Tampaknya zat kolestatik bekerja melalui beberapa mekanisme (Lu, 2010). Beberapa steroid anabolik dan



kontraseptif



di



samping



taurokolat,



klorpromazin,



dan



eritromisin laktobionat telah terbukti menyebabkan kolestatis dan hiperbilirubinemia karena tersumbatnya kanakuli empedu (Lu, 2010). 4. Sirosis : Sirosis ditandai oleh adanya septa kolagen yang tersebar di sebagian besar hati. Kumpulan hepatosit muncul sebagai modul yang dipisahkan oleh lapisan berserat ini (Lu, 2010). Patogenesis tidak sepenuhnya di mengerti, tetapi dalam sebagian besar kasus,



35



tampaknya sirosis berasal dari nekrosis sel tunggal karena kurangnya mekanisme perbaikan. Kemudian keadaan ini menyebabkan aktivitas fibroblastik dan pembentukan jaringan parut. Tidak cukupnya aliran darah dalam hati mungkin menjadi faktor pendukung (Lu, 2010). Beberapa karsinogen kimia dan pemberia CCl4 jangka panjang dapat menyebabkan sirosis pada hewan. Pada manusia, penyebab sirosis yang paling penting adalah konsumsi kronis minuman beralkohol (Lu, 2010). 5. Karsinogenis : Karsinoma hepatoseluler adalah jenis neoplasma ganas yang paling umum pada hati. Jenis karsinoma lainnya yaitu angiosarkoma, karsinoma kelenjar, karsinoma trabecular, dan karsinoma sel hati yang tidak berdiferensiasi. Pentingnya adenoma, hiperplasia basofil fokal, dan nodul hiperplastik belum dipastikan, sementara hipeprlasia saluran emepadu mungkin merupakan suatu reaksi fisiologis terhadap pajanan toksikan (Lu, 2010). Karsinogenis pada hati manusia belum pasti terjadi, sebaliknya peran vinil klorida sebagai penyebab angiosarkoma pada manusia tidak diragukan lagi (Lu, 2010). Penelitian Chen et al., 2015 menyatakan bahwa dalam keadaan mencit diabetes dengan pemberian aloksan dapat menginduksi sitokin proinflamasi dengan terjadinya peningkatan kadar Tumor Necrosis Factor alpha (TNF-α), Interleukin-1 (IL-1) dan Interleukin6



(IL-6)



yang



menyebabkan



peradangan



sehingga



meningkatkan kerusakan hepar, dapat ditunjukkan pada gambar



dapat



36



Gambar 2.1 Gambaran Morfologi Hati Mencit A: Normal dan B : Mencit Diabetes yang diinduksi Aloksan (Chen et al., 2015).



Diabetes berpengaruh secara signifikan dan dapat menyebabkan penyakit kronik perlemakan hati non alcohol atau Non-Alcoholic fatty Liver Disease (NAFLD) dan karsinoma hepatoseluler. Penyakit tersebut disebabkan karena peningkatan transaminase hati secara signifikan yang berhubungan dengan obeisitas,tingginya kadar tligiseridaa, kolestrol dan resistensi insulin (ADA., 2015). 2.3.5 Mekanisme Diabetes Dalam Menginduksi Kerusakan Hati Patogenesis NAFLD belum banyak diketahui, namun saat ini hipotesis yang banyak diterima adalah ‘the two hit theory‘. Bukti NAFLD erat berhubungan dengan resistensi insulin (RI ) sudah banyak ditemukan . RI disertai dengan gangguan lipolisis perifer oleh insulin yang akan meningkatkan jumlah asam lemak bebas ( free fatty acid / FFA ) yang diangkut ke hati ( first hit ) . Selanjutnya hati akan beradaptasi dengan cara mithochondrial fatty acid - oxidation re-esterifikasi asam lemak bebas menjadi trigliserida dan dieksport sebagai very low density protein (VLDL). Steatosis hati terjadi bila keseimbangan antara hantaran atau sintesa FFA melebihi kapasitas hati mengoksidasinya atau mengekspornya sebagai VLDL.



37



Gamber 2.2 Patogenesis perlemakan hati dikutip dari Zivkovic



Disfungsi mitokondria juga memegang peranan terhadap kerusakan hati (second hit ). 28-29 Mitokondria pada penyakit perlemakan hati non alcohol mengalami penurunan kecepatan resintesis ATP setelah pertukaran fruktosa, yang menurunkan ATP hati sementara. Mitokondria pada penyakit perlemakan hati non alkohol mengalami lesi struktural dengan adanya benda inklusi parakristalin didalam megamitokondria. Mitokondria ini mengalami penurunan kadar mtDNA. Pada penyakit perlemakan hati menyebabkan adiposit, sel Kupffer dan hepatosit mensekresi TNF-α . TNF-α bekerja pada reseptornya untuk memacu aktivasi caspase-8, tBid, translokasi Bax. Bax menuju mitokondria untuk membuat mitochondria outer membran (MOM) menjadi permiabel dan melepaskan cytochrome c secara parsial dari mitokondria sehingga menghambat sebagian aliran elektron pada rantai respirasi. Secara bersamaan,



peningkatan



β-oxidation



meningkatkan



pembentukkan



nicotinamide-adenine dinucleotide (NADH) , flavine-adenine dinucleotide (FADH2)



xi



dan



pengiriman



elektron



menuju



rantai



respirasi.



Ketidakseimbangan antara peningkatan pengiriman elektron menuju rantai respirasi dan blokade parsial aliran elektron keluar dari rantai respirasi menyebabkan akumulasi elektron dalam rantai respirasi. Komponen rantai



38



respirasi tereduksi dengan oksigen membentuk superoxide anion radical, hydrogen peroxide, hydroxyl radical dan peroxynitrite (ONOO-) dengan adanya kadar inducible nitric oxide synthase (iNOS) tereduksi. Species – species reaktif ini dapat menyebabkan lesi oksidatif pada mtDNA yang dapat menurunkan sintesis polipeptida rantai respirasi yang dikodekan mtDNA sehingga selanjutnya memblokade aliran elektron didalam rantai respirasi dan selanjutnya meningkatkan pembentukan ROS mitokondria. ROS mitokondria dapat merusak cardiolipin mitokondria dan dapat melepaskan produk reactive lipidperoxidation yang bereaksi dengan mtDNA dan cytochrome c oxidase untuk selanjutnya meningkatkan pembentukkan ROS mitokondria. Obesitas menyebabkan resistensi insulin, meskipun pada awalnya masih dapat dikompensasi oleh sel β pancreas. Kadar insulin yang tinggi dapat menyebabkan peningkatan sintesis lemak hati dan menyebabkan perlemakan hati (Jamaludin, dkk. 2016). Kondisi Diabetes juga dapat menyebabkan peningkatakan Oksidatif stress yang akan memicu terjadinya pelepasan respon inflamasi (TNF-α) yang merupakan jalur terjadinya nekrosis (Mariana, dkk. 2018) 2.3.6 Faktor Resiko Non-Alcoholic Fatty Liver Disease NAFLD dianggap merepresentasikan komponen hepatik dari sindroma metabolik berupa obesitas, hiperinsulinemia, resistensi insulin, diabetes, hipertrigliserida dan hipertensi. Diabetes tipe 2 merupakan komponen utama dari sindroma metabolik dan berkaitan dengan obesitas maupun NAFLD. Resistensi insulin memainkan peran besar pada patogenesis NAFLD dimana ditemukan bahwa resistensi ringan sangat umum terjadi pada



39



stadium awal NAFLD dan semakin berat resistensi insulin (diabetes tipe 2) berhubungan dengan semakin beratnya stadium dari NAFLD (Sanyal, 2016) 2.3.7 Patogenesis NAFLD Non-Alcoholic Fatty Liver Disease Resistensi insulin, stres oksidatif dan inflamasi dipercaya memainkan peran pada patogenesis dan progresi NAFLD. Hipotesis ‘multi-hit’ (yang dulunya disebut sebagai ‘two-hit’) telah digunakan dalam menjelaskan patogenesis NAFLD (Gambar 2.3). Resistensi insulin menyebabkan meningkatnya asam lemak bebas yang diabsorbsi oleh hati, menghasilkan keadaan steatosis sebagai hit pertama (first hit). Hal tersebut dilanjutkan dengan berbagai interaksi kompleks (multiple second hit) yang melibatkan sel hati, sel stelata, sel adiposa, sel kupfer, mediator-mediator inflamasi dan reactive oxygen species yang dapat menyebabkan inflamasi (NASH) atau berlanjut sirosis. Resistensi insulin menginisiasi hit pertama. Keadaan resistensi insulin menyebabkan sel adiposa dan sel otot cenderung mengoksidasi lipid, yang menyebabkan pelepasan asam lemak bebas. Asam lemak lalu diabsorbsi oleh hati, menghasilkan keadaan steatosis. Asam lemak bebas di dalam hati dapat terikat dengan trigliserida atau mengalami oksidasi di mitokondria, peroksisom atau mikrosom (Sanyal, 2009)



40



Gambar 2.3. Hipotesis ‘multi-hit’: patogenesis NAFLD.20 Sumber: Clark JM, Brankati FL, Diehl AM. Nonalcoholic Fatty Liver Disease. Gastroenterology. 2002;122:1649-57. Produk-produk hasil oksidasi sifatnya berbahaya dan dapat menyebabkan cedera pada hati yang selanjutnya dapat berlanjut menjadi fibrosis.3 Peroksidasi lipid dan stres oksidatif meningkatkan produksi hidroksineonenal (HNE) dan malondialdehid (MDA) yang meningkatkan fibrosis hati melalui aktivasi oleh sel stelata yang menyebabkan peningkatan produksi transforming growth factor-beta (TGF-ß). Mediator-mediator inflamasi berperan pada progresi NAFLD. Faktor transkripsi prionflamasi seperti nuclear factor kappa beta (NF-κß) sering ditemukan meningkat pada pasien NASH. Adiponektin dan tumor necrosis factoralpha (TNF-α) merupakan dua protein proinflamasi yang berkaitan dengan patogenesis NAFLD. Adiponektin merupakan hormon yang dilepaskan oleh sel adiposa yang menurunkan oksidasi asam lemak dan menghambat glukoneogenesis



hepatik.



Manusia



maupun



tikus



menunjukkan



level



adiponektin yang rendah dan berhubungan dengan peningkatan derajat



41



keparahan inflamasi. Pemecahan adiponektin pada tikus menunjukkan peningkatan signifikan derajat steatosis dan inflamasi. TNF-α merupakan mediator inflamasi yang sebagian besar diproduksi oleh makrofag, serta juga diproduksi oleh sel adiposa dan hepatosit. TNF-α menyebabkan cedera pada hati melalui inhibisi transport elektron mitokondria dan pelepasan reactive oxygen species yang menstimulasi peroksidasi lipid (Sanyal, 2009) Inaktivasi sel Kupfer juga berkaitan pada NAFLD dan penurunan kapasitas regenerasi sel hati. Eliminasi sel Kupfer diasosiasikan dengan peningkatan derajat NASH. Fungsi sel Kupfer terganggu pada situasi peningkatan lemak hati yang mungkin disebabkan karena sinusoid hati yang terlalu ‘penuh’ dan menyebabkan paparan antigen berkepanjangan terhadap sel Kupfer serta penurunan aliran keluar sel Kupfer, yang menyebabkan respon inflamasi yang menetap Selain proses-proses yang telah dikemukakan, terdapat dua proses yang kurang berkaitan namun dinyatakan berkaitan dengan NAFLD berdasarkan penelitian terbaru. Kadar besi berlebihan yang dapat berperan pada patogenesis NAFLD dan keadaan hiperferitinemia berkontribusi pada resistensi insulin, ditemukan pada sepertiga pasien. Belakangan ini, peran retinol binding protein (RBP4) juga menarik perhatian para peneliti. RBP4 diproduksi oleh adiposit



dan



berperan



pada



perkembangan



resistensi



insulin.



Studi



mengemukakan bahwa peningkatan RBP4 merupakan prediktor independen perkembangan NAFLD (Sanyal, 2009).



42



2.4 Metabolisme Glikogen 2.4.1 Glikogen Glikogen adalah salah satu bentuk polisakarida, yaitu polimer dari karbohidrat, yang terdiri dari 1700 - 600.000 mosakarida yang dalam hal ini adalah glukosa (sebagai monosakaridanya).5,6,7,8 Glikogen terdiri dari ikatan 1,4 alfa, dimana setiap 4-10 monomer dgn ikatan 1,4 alfa, akan dimasuki ikatan 1,6 alfa (Stryer, 2009).



Gambar 2.3 Struktur Glycogen



Glikogen merupakan bentuk penyimpanan dari glukosa. Glikogen terdapat didalam sitosol sel dalam bentuk granula dengan diameter 10-40nm, paling banyak konsentrasinya ditemukan di sel hepatosit (sebanyak 10% dari berat total hati), glikogen juga banyak ditemukan di sel otot (1% dari masa otot). Selain banyak ditemukan di hati dan otot, glikogen dalam jumlah yang kecil ditemukan di ginjal, sel glia dari otak dan sel darah putih. Di dalam hati terjadi regulasi glikogen yaitu proses sintesa dan degradasi dari glikogen, dengan tujuan untuk mempertahankan kadar normal glukosa dalam darah sehingga dapat digunakan oleh semua organ dalam tubuh. Regulasi glikogen



43



juga terjadi di dalam sel otot, tetapi glukosa yang dihasilkan dari proses regulasi glikogen hanya dapat digunakan oleh sel otot sendiri (Stryger, 2009).



Gambar 2.4 Sel Hepatosit



2.4.2 Glikogenolisis Ketika tubuh memerlukan glukosa untuk memperoleh energi oleh karena glukosa dalam darah tidak mencukupi, maka hati akan memecah glikogen yang ada dalam sel hati untuk mendapatkan glukosa sebagai sumber energi. Proses pemecahan glikogen dalam sel hati (hepatosit) diawali dengan pemecahan glikogen menjadi glukosa-1-fosfat dan glikogen, dimana reaksi ini disebut fosforilasi, karena reaksi tersebut di katalis oleh enzim fosforilase dan juga terjadi penambahan gugus fosfat. Fosforilasi menyebabkan ikatan 1,4 alfa terputus (Murray, 2003). Setelah terjadi proses fosforilasi dari glikogen yang menghasilkan glukosa-1- fosfat dan glikogen, proses selanjutnya adalah memecah ikatan 1,6 alfa melalui proses hidrolisis dengan bantuan enzim alfa 1,6 glukosidase dan H2O. Karena fosforilasi tidak dapat memecah ikatan 1,6 alfa (Murray, 2003). Setelah ikatan 1,6 alfa terputus, maka akan ada ikatan 1,4 alfa lain yang bebas yang siap mengalami fosforilasi membentuk glukosa 1-fosfat. Dimana kita ketahui sebelumnya bahwa antara 2 ikatan 1,4 alfa akan disisipi ikatan 1,6 alfa, sehingga jika ikatan 1,6 alfa tidak dipecah terlebih dahulu, menyebabkan



44



ikatan 1,4 alfa yang terletak di belakang ikatan 1,6 alfa tidak akan dapat mengalami fosforilasi membentuk glukosa- 1-fosfat (Murray, 2003). Tahap selanjutnya dalam proses degradasi glikogen adalah merubah glukosa-1-fosfat



menjadi



glukosa-6-fosfat,



dengan



bantuan



enzim



“phosphoglucomutase”, dimana enzim ini akan memberikan gugus fosfat ke ikatan karbon no 6 sehingga terbentuk glukosa 1,6 bifosfat, selanjutnya enzim ini akan mengambil gugus fosfat yang ada dikarbon no 1, sehingga terbentuklah glukosa-6-fosfat. Glukosa-6-fosfat ini tidak dapat keluar dari sel hepatosit menuju peredaran darah karena masih mengikat gugus fosfat, sehingga untuk melepaskan gugus fosfatnya diperlukan suatu enzim yang bernama glukosa-6-fosfatase, yang berada di reticulum endoplasmic (Murray, 2003). Glukosa yang terbentuk sudah dapat menembus membran sel hepatosit menuju beredaran darah dan siap digunakan untuk menghasilkan energi. Selain hati, organ yang mempunyai enzim glukosa-6-fosfatase adalah ginjal. Otot skeleton dan otak tidak mempunyai enzim tersebut sehingga organ tersebut hanya menggunakan glukosa yang mereka ambil dari peredaran darah, tanpa bisa mensintesa sendiri (Berg et al, 2003). Glukosa-6-fosfat yang dihasilkan dari degradasi glikogen akan mengalami proses berbeda , yaitu: 1. Memasuki proses glikolisis, untuk dimetabolisme baik melalui proses aerobic maupun anaerobik, didalam sel otot dan sel otak.



45



2. Dirubah menjadi glukosa didalam sel hati dan sel ginjal untuk dibawa ke peredaran darah dan digunakan untuk menghasilkan energi ke semua organ didalam tubuh, 3. Memasuki jalur “pentose phosphate” dan menghasilkan NADPH dan ribose



Gambar 2.5 Jalur Glikogen



2.4.3 Sintesis Glikogen Jika kadar glukosa dalam darah meningkat, maka glukosa tersebut akan disimpan sebagai cadangan energi dalam bentuk glikogen. Sintesa glikogen diawali dengan pengambilan glukosa oleh sel hati, otot,dll. Kemudian didalam sel glukosa berikatan dengan fosfat membentuk glukosa-1-fosfat. Glukosa-1fosfat ini kemudian berikatan dengan Uridine tri Phosphate(UTP), membentuk UDP-glucose (Uridin Tue Phosphat-glucose) dan dilepaskannya PPi (Pyrophosphat), dengan reaksi sebagai berikut:



46



Kemudian UDP-glucose yang terbentuk akan berikatan dengan glikogen pada ujung rantainya, dimana akan mengakibatkan terlepasnya UDP (Berg et al, 2003). 2.5 Agen Penginduksi Diabetes 2.5.1 Aloksan 1. Fisika Kimia Aloksan Aloksan adalah suatu substrat yang secara struktural adalah derivat pirimidin sederhana.1-3 Aloksan diperkenalkan sebagai hidrasi aloksan pada larutan encer. Nama aloksan diperoleh dari penggabungan kata allantoin dan oksalurea (asam oksalurik). Nama lain dari aloksan adalah 2,4,5,6tetraoxypirimidin; 2,4,5,6- primidinetetron; 1,3-Diazinan-2,4,5,6-tetron (IUPAC) dan asam Mesoxalylurea 5-oxobarbiturat. Rumus kimia aloksan adalah C4H2N2O4. Aloksan murni diperoleh dari oksidasi asam urat oleh asam nitrat. Aloksan adalah senyawa kimia tidak stabil dan senyawa hidrofilik. Waktu paruh aloksan pada pH 7,4 dan suhu 37 oC (Lenzen, 2008). Aloksan merupakan bahan kimia yang digunakan untuk menginduksi diabetes pada binatang percobaan . Pemberian aloksan adalah cara yang cepat untuk menghasilkan kondisi diabetik eksperimental (hiperglikemik) pada binatang percobaan. Aloksan dapat diberikan secara intravena, intraperitoneal, atau subkutan pada binatang percobaan (Szkudelski, 2008). Aloksan dapat menyebabkan diabetes melitus tergantung insulin pada binatang tersebut (aloksan diabetes) dengan karakteristik mirip dengan Diabetes Melitus tipe 1 pada manusia.



47



2. Sifat Aloksan Aloksan bersifat toksik selektif terhadap sel beta pancreas yang memproduksi insulin karena terakumulasinya aloksan secara khusus melalui transporter glukosa. Tingginya konsentrasi aloksan tidak mempunyai pengaruh pada jaringan percobaan lainnya. Mekanisme aksi dalam menimbulkan perusakan selektif sel beta pankreas belum diketahui dengan jelas. Efek diabetogeniknya bersifat antagonis terhadap glutathion yang bereaksi dengan gugus SH. Aloksan bereaksi dengan merusak substansi esensial di dalam sel beta pankreas sehingga menyebabkan berkurangnya granula –granula pembawa insulin di dalam sel beta pankreas. Aloksan meningkatkan pelepasan insulin dan protein dari sel beta pankreas tetapi tidak berpengaruh pada sekresi glucagon. Efek ini spesifik untuk sel beta pankreas sehingga aloksan dengan konsentrasi tinggi tidak berpengaruh terhadap jaringan lain. Aloksan mungkin mendesak efek diabetogenik oleh kerusakan membran sel beta dengan meningkatkan



permeabilitas.



Dean



dan



Matthew



(1972)



mendemonstrasikan adanya depolarisasi membran sel beta pankreas dengan pemberian aloksan (Szkudelski, 2008). 3. Mekanisme Kerja Aloksan Penelitian



terhadap



mekanisme



kerja



aloksan



secara



invitro



menunjukkan bahwa aloksan menginduksi pengeluaran ion kalsium dari mitokondria yang mengakibatkan proses oksidasi sel terganggu. Keluarnya ion kalsium dari mitokondria mengakibatkan homeostasis yang merupakan awal dari matinya sel (Suharmiati, 2003).



48



O NH O



O NH O



Gambar 2.6 Struktur kimia aloksan (Yuriska, 2009).



Aloksan secara cepat dapat mencapat pankreas, aksinya diawali oleh pengambilan yang cepat oleh sel β Langerhans. Pembentukan oksigen reaktif merupakan faktor utama pada kerusakan sel tersebut. Pembentukan oksigen reaktif diawali dengan proses reduksi aloksan dalam sel β Langerhans. Aloksan mempunyai aktivitas tinggi terhadap senyawa seluler yang mengandung gugus SH, glutation tereduksi (GSH), sistein dan senyawa sulfhidril terikat protein misalnya SH-containing enzyme (Wilson et al. 1984; Szkudelski, 2001; Walde et al. 2002). Aloksan merupakan molekul radikal bebas yang merusak sel - sel beta pankreas. Pemberian Aloksan digunakan untuk menginduksi diabetes pada hewan coba. Aloksan memiliki cara kerja yang selektif pada sel - sel beta pankreas, karena struktur Aloksan mirip dengan glukosa. Sel beta memiliki efisiensi tinggi dalam pengambilan glukosa sehingga Aloksan memasuki sel tersebut dengan cara yang sama seperti glukosa masuk dalam sel beta pankreas. Dengan demikian sel-sel beta pankreas yang berfungsi memproduksi insulin menjadi rusak oleh Aloksan (Wolf, 2005).



49



4. Induksi Diabetes milletus dengan aloksan Adapun penyakit metabolik yang disebabkan oleh aloksan adalah diabetes melitus. Diabetes melitus merupakan suatu kelompok penyakit metabolik dengan karakteristik hiperglikemia yang terjadi karena kelainan sekresi insulin, kerja insulin, atau kedua – duanya yang berhubungan dengan kerusakan jangka panjang, disfungsi, atau kegagalan beberapa organ tubuh. Diabetes mellitus mengakibatkan berbagai komplikasi akut maupun kronik yang dapat mengenai berbagai jaringan dan organ tubuh (Gustaviani, 2007). Abbas (2005) Menyatakan komplikasi akut diabetes melitus



dapat



berupa



ketoasidosis



diabetik,



komahiperosmolar,



hiperglikemi non ketotik, asidosis laktat, hipoglikemik iatrogenic akibat reaksi insulin atau syok insulin, dan infeksi akut. Sedangkan komplikasi kronis diabetes melitus dapat berupa kelainan pada organ mata (retinopati diabetik), ginjal (nefropati diabetik), syaraf (neuropati diabetik), penyakit pembuluh darah koroner dan perifer, infeksi kronik dan ulkus kaki diabetic (Foster, 2000). Price (2005) menyatakan bahwa tujuh puluh lima persen penderita Diabetes melitus akhirnya meninggal karena penyakit vaskular. Serangan jantung, gagal ginjal, stroke, dan gangren adalah komplikasi yang paling utama. Selain itu, kematian fetus intrauterin pada ibu – ibu yang menderita diabetes melitus tidak terkontrol juga meningkat (Price, 2005). Selain komplikasi diabetes melitus yang banyak dan mematikan, insidensinya pun tergolong tinggi. Penelitian epidemiologi telah menunjukkan adanya kecenderungan peningkatan angka insiden dan



50



prevalensi Diabetes melitus di berbagai penjuru dunia. Perserikatan Bangsa – Bangsa (WHO) membuat perkiraan bahwa pada tahun 2000 jumlah pengidap diabetes di atas umur 20 tahun berjumlah 150 juta orang dan dalam kurun waktu 25 tahun kemudian yaitu pada tahun 2025, jumlah itu akan membengkak menjadi 300 juta orang. Data terakhir dari WHO (2005) menunjukkan peningkatan tertinggi jumlah penderita diabetes melitus justru terjadi di Asia Tenggara. Sedangkan Indonesia akan menempati peringkat 5 sedunia dengan jumlah pasien sebanyak 12,4 juta orang pada tahun 2025, naik 2 tingkat dibanding tahun 1995 dimana jumlah pasien sebanyak 4,5 juta orang (Suyono, 2007). 2.5.2 Streptozotocin (STZ) Streptozotocin merupakan antibiotik spektrum luas dengan onkolitik, onkogenik, dan diabetogenik (Weiss, 1982; Akbarzadeh., 2007). Diabetogenik merupakan



suatu



tindakan



yang



dimediasi



secara



selektif



untuk



menghancurkan sel beta pankreas sehingga telah banyak dimanfaatkan sebagai metode untuk merangsang DM dalam hewan percobaan. Berdasarkan penelitian Hua dan Park (2012) melaporkan bahwa pada hewan coba yang diberikan streptozotocin (STZ) pada mencit dengan dosis 60 mg/kgbb yang dilarutkan ke dalam 0.1 M buffer sitrat dengan PH 4,5 di injeksikan secara Intraperitoneal



dapat



memberikan



efek



sehingga



mencit



mengalami



hiperglikemia. Streptozotocin merupakan derivate Streptomyces achromogenes dan secara struktural merupakan turunan nitrosourea. Rakieten adalah untuk pertama kali menggunakan STZ sebagai diabetogenik pada anjing dan tikus yaitu pada tahun 1963 (Nugroho, 2006; Srinivasan dan Ramarao, 2007).



51



Streptozotocin mempunyai mekanisme kerja melalui pembentukan radical Reactive Oxygen Species (ROS), Reactive Nitrongen Species(RNS) sehingga menyebabkan kerusakan sel β pankreas (Srinivasan dan Ramarao, 2007) Injeksi streptozotocin dengan dosis 60 mg/kgbbmelalui intraperitonial pada mencit dapat menyebabkan kerusakan pada sel beta pancreas yang mengakibatkan timbulnya diabetes mellitus dalam waktu 2-4 hari (Akbarzadeh et al. 2007). Streptozotocinmerupakan suatu senyawa glukosamine-nitrosouren berupa agen alkilatingmerupakan kelas nitrosoure, sehingga menimbulkan toksik yang dapat menyebabkan kerusakan pada deoxyribose-nucleic acid (DNA) sel. Streptozotocin menembus sel beta pankreas melalui gluokose transpotter 2(GLUT 2). Aksi Streptozotocin melalui intraselluer menghasilkan perubahan DNA sel beta pankreas yang didahului oleh pembatasan pembentukan adenosin trifosfat pada mitokondria akibat pembentukan radikal bebas, peningkatan enzim xanthine oxidase dan penghambatan siklus Krebs (Erwin et al. 2013). 2.6 Hewan Coba 2.6.1 Pengertian Hewan Coba Hewan percobaan adalah setiap hewan yang dipergunakan pada sebuah penelitian biologis dan biomedis yang dipilih berdasarkan syarat atau standar dasar yang diperlukan dalam penelitian tersebut. Dalam menggunakan hewan percobaan untuk penelitian diperlukan pengetahuan yang cukup mengenai berbagai aspek tentang sarana biologis, dalam hal penggunaan hewan percobaan laboratorium (Ridwan, 2013)..



52



Pengelolaan hewan percobaan diawali dengan pengadaan hewan, meliputi pemilihan dan seleksi jenis hewan yang cocok terhadap materi penelitian. Pengelolaan dilanjutkan dengan perawatan dan pemeliharaan hewan selama penelitian berlangsung, pengumpulan data, sampai akhirnya dilakukan terminasi hewan percobaan dalam penelitian. Rustiawan menguraikan beberapa alasan mengapa hewan percobaan tetap diperlukan dalam penelitian khususnya di bidang kesehatan, pangan dan gizi antara lain: 1. keragaman dari subjek penelitian dapat diminimalisasi, 2. variabel penelitian lebih mudah dikontrol, 3. daur hidup relatif pendek sehingga dapat dilakukan penelitian yang bersifat multigenerasi, 4. pemilihan jenis hewan dapat disesuaikan dengan kepekaan hewan terhadap materipenelitian yang dilakukan, 5. biaya relatif murah, 6. dapat dilakukan pada penelitian yang berisiko tinggi, 7. mendapatkan informasi lebih mendalam dari penelitian yang dilakukan karena kita dapat membuat sediaan biologi dari organ hewan yang digunakan, 8. memperoleh data maksimum untuk keperluan penelitian simulasi, dan 9. dapat digunakan untuk uji keamanan, diagnostik dan toksisitas. Penelitian yang memanfaatkan hewan coba, harus menggunakan hewan percobaan yang sehat dan berkualitas sesuai dengan materi penelitian. Hewan tersebut dikembangbiakkan dan dipelihara secara khusus dalam lingkungan



53



yang diawasi dan dikontrol dengan ketat. Tujuannya adalah untuk mendapatkan defined laboratory animals sehingga sifat genotipe, fenotipe (efek maternal), dan sifat dramatipe (efek lingkungan terhadap fenotipe) menjadi konstan. Hal itu diperlukan agar penelitian bersifat reproducible, yaitu memberikan hasil yang sama apabila diulangi pada waktu lain, bahkan oleh peneliti lain. Penggunaan hewan yang berkualitas dapat mencegah pemborosan waktu, kesempatan,dan biaya. Berbagai hewan kecil memiliki karakteristik tertentu yang relatif serupa dengan manusia, sementara hewan lainnya mempunyai kesamaan dengan aspek fisiologis metabolis manusia. Tikus putih sering digunakan dalam menilai mutu protein, toksisitas, karsinogenik, dan kandungan pestisida dari suatu produk bahan pangan hasil pertanian (Ridwan, 2013). Saat ini, beberapa strain tikus digunakan dalam penelitian di laboratorium hewan coba di Indonesia, antara lain: Wistar; (asalnya dikembangkan di Institut Wistar), yang turunannya dapat diperoleh di Pusat Teknologi Dasar Kesehatan dan Pusat Teknologi Terapan Kesehatan dan Epidemiologi Klinik Badan Litbangkes; dan Sprague- Dawley; (tikus albino yang dihasilkan di tanah pertanian Sprague-Dawley), yang dapat diperoleh di laboratorium Badan Pengawasan Obat dan Makanan dan Pusat Teknologi Dasar Kesehatan Badan Litbangkes. 2.6.2 Etika Pemanfaatan Hewan Coba Hewan percobaan yang digunakan pada penelitian akan mengalami penderitaan, yaitu:ketidaknyamanan, ketidaksenangan, kesusahan, rasa nyeri, dan terkadang berakhir dengan kematian. Berdasarkan hal tersebut, hewan



54



yang dikobankan dalam penelitian yang hasilnya dapat dimanfaatkan oleh manusia patut dihormati, mendapat perlakuan yang manusiawi, dipelihara dengan baik, dan diusahakan agar bisa disesuaikan pola kehidupannya seperti di alam (Ridwan, 2013). Peneliti yang akan memanfaatkan hewan percobaan pada penelitian kesehatan harus mengkaji kelayakan dan alasan pemanfaatan hewan dengan mempertimbangkan penderitaan yang akan dialami oleh hewan percobaan dan manfaat yang akan diperoleh untuk manusia (Ridwan, 2013). 2.7 Tinjauan Tentang Ekstraksi 2.7.1 Ekstraksi Ekstraksi adalah proses pemisahan suatu zat dari campurannya dengan menggunakan pelarut. Pelarut yang digunakan harus dapat mengekstrak substansi yang diinginkan tanpa melarutkan material lainnya. Secara garis besar, proses pemisahan secara ekstraksi terdiri dari tiga langkah dasar yaitu : 1. Penambahan sejumlah massa pelarut untuk dikontakkan dengan sampel, biasanya melalui proses difusi. 2. Zat terlarut akan terpisah dari sampel dan larut oleh pelarut membentuk fase ekstrak. 3. Pemisahan fase ekstrak dengan sampel (Wilson et al. 2000). Ekstraksi merupakan suatu proses pemisahan kandungan senyawa kimia dari jaringan tumbuhan ataupun hewan dengan menggunakan penyari tertentu. Ekstrak adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan cara mengekstraksi zat aktif dengan menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir



55



semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian, hingga memenuhi baku yang ditetapkan (Depkes RI, 1995). Ekstraksi adalah proses pemisahan suatu zat berdasarkan perbedaan sifat tertentu, terutama kelarutannya terhadap dua cairan tidak saling larut yang berbeda. Pada umumnya ekstraksi dilakukan dengan menggunakan pelarut yang didasarkan pada kelarutan komponen terhadap komponen lain dalam campuran, biasanya air dan yang lainnya pelarut organik. Bahan yang akan diekstrak biasanya berupa bahan kering yang telah dihancurkan, biasanya berbentuk bubuk atau simplisia (Sembiring, 2007). 2.7.2 Tujuan Ekstraksi Tujuan ekstraksi bahan alam adalah untuk menarik komponen kimia yang terdapat pada bahan alam. Bahan-bahan aktif seperti senyawa antimikroba dan antioksidan yang terdapat pada tumbuhan pada umumnya diekstrak dengan pelarut. Pada proses ekstraksi dengan pelarut, jumlah dan jenis senyawa yang masuk kedalam cairan pelarut sangat ditentukan oleh jenis pelarut yang digunakan dan meliputi dua fase yaitu fase pembilasan dan fase ekstraksi. Pada fase pembilasan, pelarut membilas komponen-komponen isi sel yang telah pecah pada proses penghancuran sebelumnya. Pada fase ekstraksi, mula-mula terjadi pembengkakan dinding sel dan pelonggaran kerangka selulosa dinding sel sehingga pori-pori dinding sel menjadi melebar yang menyebabkan pelarut dapat dengan mudah masuk kedalam sel. Bahan isi sel kemudian terlarut ke dalam pelarut sesuai dengan tingkat kelarutannya lalu berdifusi keluar akibat adanya gaya yang ditimbulkan karena perbedaan konsentrasi bahan terlarut yang terdapat di dalam dan di luar sel (Voigt, 1995).



56



2.7.3 Penggolongan Ekstraksi Ekstraksi secara umum dapat digolongkan menjadi dua yaitu ekstraksi padat cair dan ekstraksi cair-cair. Pada ekstraksi cair-cair, senyawa yang dipisahkan terdapat dalam campuran yang berupa cairan, sedangkan ekstraksi padat-cair adalah suatu metode pemisahan senyawa dari campuran yang berupa padatan (Anonim, 2012). Metode Ekstraksi Padat Cair Metode ekstraksi berdasarkan ada tidaknya proses pemanasan dapat dibagi menjadi dua macam yaitu ekstraksi cara dingin dan ekstrasi cara panas (Hamdani, 2009): Ekstraksi cara dingin : Pada metode ini tidak dilakukan pemanasan selama proses ekstraksi berlangsung dengan tujuan agar senyawa yang diinginkan tidak menjadi rusak. Beberapa jenis metode ekstraksi cara dingin, yaitu: 1. Maserasi atau dispersi Maserasi merupakan metode ekstraksi dengan menggunakan pelarut diam atau dengan adanya pengadukan beberapa kali pada suhu ruangan. Metoda ini dapat dilakukan dengan cara merendam bahan dengan sekali-sekali dilakukan pengadukan. Pada umumnya perendaman dilakukan selama 24 jam, kemudian pelarut diganti dengan pelarut baru. Maserasi juga dapat dilakukan dengan pengadukan secara sinambung (maserasi kinetik). Kelebihan dari metode ini yaitu efektif untuk senyawa yang tidak tahan panas (terdegradasi karena panas), peralatan yang digunakan relatif sederhana, murah, dan mudah didapat. Namun metode ini juga memiliki beberapa kelemahan yaitu waktu ekstraksi yang lama,



57



membutuhkan pelarut dalam jumlah yang banyak, dan adanya kemungkinan bahwa senyawa tertentu tidak dapat diekstrak karena kelarutannya yang rendah pada suhu ruang (Sarker et al. 2006). 2. Perkolasi Perkolasi merupakan metode ekstraksi dengan bahan yang disusun secara unggun dengan menggunakan pelarut yang selalu baru sampai prosesnya 10 sempurna dan umumnya dilakukan pada suhu ruangan. Prosedur metode ini yaitu bahan direndam dengan pelarut, kemudian pelarut baru dialirkan secara terus menerus sampai warna pelarut tidak lagi berwarna atau tetap bening yang artinya sudah tidak ada lagi senyawa yang terlarut. Kelebihan dari metode ini yaitu tidak diperlukan proses tambahan untuk memisahkan padatan dengan ekstrak, sedangkan kelemahan metode ini adalah jumlah pelarut yang dibutuhkan cukup banyak dan proses juga memerlukan waktu yang cukup lama, serta tidak meratanya kontak antara padatan dengan pelarut (Sarker et al. 2006). Ekstraksi cara panas : Pada metode ini melibatkan pemanasan selama proses ekstraksi berlangsung. Adanya panas secara otomatis akan mempercepat proses ekstraksi dibandingkan dengan cara dingin. Beberapa jenis metode ekstraksi cara panas, yaitu: 1. Ekstraksi refluks : ekstraksi refluks merupakan metode ekstraksi yang dilakukan pada titik didih pelarut tersebut, selama waktu dan sejumlah pelarut tertentu dengan adanya pendingin balik (kondensor). Pada umumnya dilakukan tiga sampai lima kali pengulangan proses pada rafinat pertama. Kelebihan metode



58



refluks adalah padatan yang memiliki tekstur kasar dan tahan terhadap pemanasan langsung dapat diekstrak dengan metode ini. Kelemahan metode ini adalah membutuhkan jumlah pelarut yang banyak (Irawan, 2010). 2. Ekstraksi dengan alat soxhlet merupakan ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru, umumnya dilakukan menggunakan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi konstan dengan adanya pendingin balik (kondensor). Pada metode ini, padatan disimpan dalam alat soxhlet dan dipanaskan, sedangkan yang dipanaskan hanyalah pelarutnya. Pelarut terdinginkan dalam kondensor, kemudian mengekstraksi padatan. Kelebihan metode soxhlet adalah proses ekstraksi berlangsung secara kontinu, memerlukan waktu ekstraksi yang lebih sebentar 11 dan jumlah pelarut yang lebih sedikit bila dibandingkan dengan metode maserasi atau perkolasi. Kelemahan dari metode ini adalah dapat menyebabkan rusaknya solute atau komponen lainnya yang tidak tahan panas karena pemanasan ekstrak yang dilakukan secara terus menerus (Sarker et al. 2006; Tiwari et al. 2011). 2.7.4 Faktor – Faktor Yang Mempengaruhi Ekstraksi Berikut faktor – faktor yang mempengaruhi ekstraksi (Ubay, 2011). 1. Jenis pelarut Jenis pelarut mempengaruhi senyawa yang tersari, jumlah zat terlarut yang terekstrak dan kecepatan ekstraksi. 2. Suhu Secara umum, kenaikan suhu akan meningkatkan jumlah zat terlarut ke dalam pelarut.



59



3. Rasio pelarut dan bahan baku Jika rasio pelarut-bahan baku besar maka akan memperbesar pula jumlah senyawa yang terlarut. Akibatnya laju ekstraksi akan semakin meningkat. 4. Ukuran partikel Laju ekstraksi juga meningkat apabila ukuran partikel bahan baku semakin kecil. Dalam arti lain, rendemen ekstrak akan semakin besar bila ukuran partikel semakin kecil. 5. Pengadukan Fungsi pengadukan adalah untuk mempercepat terjadinya reaksi antara pelarut dengan zat terlarut. 6.



Lama waktu Lamanya waktu ekstraksi akan menghasilkan ekstrak yang lebih banyak, karena kontak antara zat terlarut dengan pelarut lebih lama.



2.8 Fraksinasi Fraksinasi merupakan proses pemisahan antara zat cair dengan zat cair. Fraksinasi dilakukan secara bertingkat berdasarkan tingkat kepolarannya yaitu dari non polar, semi polar, dan polar. Senyawa yang memiliki sifat non polar akan larut dalam pelarut non polar, yang semi polar akan larut dalam pelarut semi polar, dan yang bersifat polar akan larut kedalam pelarut polar (Harborne, 1987). Fraksinasi ini umumnya dilakukan dengan menggunakan metode corong pisah atau kromatografi kolom. Kromatografi kolom merupakan salah satu metode pemurnian senyawa dengan menggunakan kolom (Trifany, 2012). Corong pisah merupakan peralatan laboratorium yang digunakan untuk memisahkan komponenkomponen dalam campuran antara dua fase pelarut yang memiliki massa jenis berbeda yang tidak tercampur (Haznawati, 2012). Ekstrak yang telah dilarutkan dalam aquades, nantinya akan dimasukkan ke dalam corong



60



pisah dan dicampur dengan pelarut berdasarkan tingkat kepolarannya. Setelah itu corong pisah dikocok. Setelah dikocok, akan terbentuk dua lapisan. Pelarut yang memiliki massa jenis lebih tinggi akan berada di lapisan bawah, dan yang memiliki massa jenis lebih kecil akan berada di lapisan atas. Senyawa yang terkandung dalam ekstrak nantinya akan terpisah sesuai dengan tingkat kepolaran pelarut yang digunakan. Senyawa 14 akan tertarik oleh pelarut yang tingkat kepolarannya sama dengan dengan senyawa tersebut.



61



BAB III KERANGKA KONSEP 3.1 Kerangka Konsep Kerusakan Sel B pancreas



Diabetes Milletus



Stress oksidatif



Kerusakan Hati



Parameter Kerusakan Hati Senyawa Kimia



Tanaman Indonesia Gambar 3.1 Kerangka Konsep



Hiperglikemia adalah suatu keadaan yang dapat menjadi suatu tanda seseorang mengidap



penyakit



diabetes



mellitus.



Hiperglikemia



ditandai



dengan



meningkatnya kadar glukosa darah yang terjadi karena tubuh mengalami gangguan produksi insulin. Gangguan produksi insulin ini diakibatkan karena beberapa faktor salah satunya adalah kerusakan sel B panckreas. Saat ini penyakit diabetes mellitus merupakan salah satu penyakit berbahaya yang dapat menyebabkan kematian (Dipiro et al., 2015)



51



62



Penyakit diabetes mellitus sangat berpotensi menderita kerusakan hati. Hal ini disebabkan karena peningkatan kadar glukosa darah yang tinggi menyebabkan hati harus bekerja di atas kemampuannya. Kondisi hiperglikemia juga dapat menyebabkan terjadinya stress oksidatif pada organ Hati (Widowati,2008). Stress oksidatif ini mengakibatkan peningkatan kadar Tumor Nrcrosis Factor alpha (TNF-α), Interleukin1 (IL-1) dan Interleukin-6 (IL-6) yang menyebabkan peradangan, sehingga dapat menyebabkan kerusakan hati (Chen et al. 2015). Saat ini pengobatan penyakit diabetes mellitus dilakukan dengan terapi insulin dan pemberian obat oral antidiabetes. Akan tetapi untuk terapi insulin membutuhkan biaya yang cukup mahal dan terapi obat oral jangka panjang akan memberikan efek samping yang merugikan bagi tubuh. Sehingga diperlukan obat alternative yang aman bagi pasien diabetes milletus dan dapat diperoleh dengan harga yang terjangkau, mengingat obat diabetes milletus harus dikonsumsi dalam jangka waktu yang Panjang (Shafiee, 2012). Beberapa tanaman yang ada di Indonesia dapat digunakan sebagai obat alternative Diabetes Milletus. Hal ini disebabkan karena tanaman Indonesia mengandung senyawa-senyawa yang dapat digunakan sebagai obat diabetes milletus dan juga dapat memperbaiki kerusakan hati. Menurut penelitian Suarsana (2009) menyebutkan bahwa senyawa flavonoid dapat menurunkan kadar glukosa darah dengan cara merangsang sel B-pankreas untuk memproduksi insulin lebih banyak. Sedangkan untuk



memperbaiki kerusakan hati kandungan Flavonoid berkerja sebagai



Antioksidan (Salamah & Hanifah, 2014). Dimana antioksidan dapat menunda,



63



mencegah, atau menghilangkan kerusakan oksidatif akibat stress oksidatif organ hati pada penyakit Diabetes mellitus. 3.2 Hipotesis H0 Tanaman Indonesia tidak dapat digunakan sebagai terapi alternative diabetes dan tidak dapat memperbaiki kerusakan jaringan hati pada hewan coba. H1 Tanaman Indonesia dapat digunakan sebagai terapi alternative diabetes dan dapat memperbaiki kerusakan jaringan hati pada hewan coba.



64



BAB 1V METODE PENELITIAN



4.1 Design Penelitian Desain



penelitian



yang



digunakan



adalah



SystematisReview



dimana



menggunakan teknik kualitatif (meta-sintesis) 4.2 Populasi dan Sampel Penelitian 4.2.1 Populasi Populasi dalam penelitian ini adalah artikel ilmiah terkait dengan pengujian hepatoprotektor tanaman indonesia dengan desain model antidiabetes 4.2.2 Sampel Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah seperti populasi namun sesuai dengan kriteria inklusi 1. Kriteria Sampel 1. Kriteria Inklusi: a. Penelitian diPublikasikan dari 2016-2020 b. Penelitian In Vivo yang dilakukan dengan hewan coba diantaranya Tikus dan Mencit c. Tanaman Indonesia d. Original artikel 2. .Kriteria Ekslusi : a. Artikel terkait dengan manusia atau bukan hewan coba. b. Semua artikel tanpa teks lengkap 54



65



c. Tanaman bukan dari Indonesia d. Efek hepatoprotektor dengan design selain antidiabetes e. Review artikel 4.2.3 Intervensi Intervensi akan mencakup studi dimana pemberian zat dilakukan untuk menginduksi diabetes dan menyebabkan kerusakan hati pada hewan coba. Kelompok intervensi juga akan mencakup studi tanaman Indonesia. 4.3 Tempat Penelitian Penelitian ini dilakukan di Stikes dr.Soebandi Jember Jl. Dr. Soebandi No 99 , cangkring, Patrang, Jember 4.4 Waktu penelitian Waktu penelitian dilakukan sejak Mei 2020. 4.5 Definisi operasional 1. Parameter yang digunakan untuk mengatahui data histopatologi hati yaitu mengunakan hasil atau gambaran dari kerusakan hati yang bisa dilihat dari jumlah perlemakan, nekrosis, kolestatis dan sirosis hati, a. Nekrosis : Nekrosis hati adalah kematian hepatosit. Nekrosis dapat bersifat fokal (sentral, pertengahan, perifer) atau passif. b. Kolestatis : Jenis kerusakan hati ini biasanya bersifat akut, lebih jarang ditemukan dibandingkan dengan perlemakan hati dan nekrosis. Jenis kerusakan ini juga lebih sulit diinduksi pada hewan, kecuali mungkin dengan steroid.



66



c. Sirosis Hati : Sirosis ditandai oleh adanya septa kolagen yang tersebar di sebagian besar hati. Kumpulan hepatosit muncul sebagai modul yang dipisahkan oleh lapisan berserat 2. Menggunakan data hasil patologi klinik dari hati yang bisa dilihat dengan pengukuran aktivitas enzim hepatoseluler seperti SGPT, SGOT, ALP dan GGT. a. SGPT : Tes serum glutamat piruvat transaminase (SGPT) atau disebut juga Alanin transaminase (ALT) tes ini mengukur kadar enzim SGPT di dalam darah. b. SGOT : Tes serum glutamat oksaloasetat transaminase (SGOT) atau aspartat aminotransferase (AST). Tes ini mengukur kadar enzim SGOT di dalam darah. c. ALP : Alkali fosfatase (ALP) merupakan enzim yang biasanya ditemukan di empedu, kantung empedu, dan hati. Jika hati atau kantung empedu mengalami gangguan atau kerusakan, konsentrasi enzim ALP akan mengalami kenaikan. 3. GGT : Gamma-glutamyl transferase (GGT) merupakan enzim yang ditemukan di berbagai organ tubuh, namun konsentrasinya paling tinggi terdapat di hati. GGT akan meningkat bila terjadi kerusakan di hati atau saluran empedu. 4. SGPT dan SGOT digunakan untuk menilai integritas sel hati sedangkan ALP dan GGT lebih mengarah ke kolestatis. Hasil tersebut dilihat setelah pemberian Tanaman Indonesia.



67



4.6 Pengumpulan Data 4.6.1 Sumber Data Sumber data didapatkan dari jurnal dan laporan yang dicari di Science Direct, Pubmed dan Wiley Online Library. 4.6.2 Strategi searching (Mendapatkan Artikel) Langkah awal yaitu dengan mencari jurnal di Science Direct, Pubmed daan Wiley



Online



Library



dengan



memasukkan



kata



Kunci



:



Diabetes,



Hepatoprotektive. 4.6.3 Pengumpulan dan Ekstraksi Artikel Jurnal penelitian yang sesuai dengan kriteria inklusi dikumpulkan dan dibuat ringkasan jurnal meliputi judul penelitian, nama tanaman, senyawa aktif, metode, hasil penelitian dan ringkasan hasil atau temuan. lalu dibahas untuk menarik kesimpulan. Review Artikel ini di sintesis menggunakan metode naratif dengan mengelompokkan data-data hasil ekstraksi yang sejenis sesuai dengan hasil yang diukur untuk menjawab tujuan penelitian. Ringkasan jurnal penelitian tersebut dimasukan ke dalam tabel diurutkan sesuai alphabet, tahun terbit jurnal dan sesuai dengan format yang ditentukan meliputi judul penelitian, nama tanaman, senyawa aktif, metode, hasil penelitian dan ringkasan hasil . Untuk lebih memperjelas analisis abstrak dan full text jurnal dibaca dan dicermati. Ringkasan jurnal tersebut kemudian dilakukan analisis terhadap isi yang terdapat dalam tujuan penelitian dan hasil atau temuan penelitian. Analisis yang digunakan menggunakan analisis isi jurnal, kemudian dilakukan koding terhadap



68



isi jurnal yang direview menggunakan kategori psikospiritual. Data yang sudah terkumpul kemudian dicari persamaan dan perbedaannya 4.7 Analisa Data 4.7.1 Analisa Data Analisa data menggunakan analisa kualitatif atau disebut juga meta-sintesis dengan mengumpulkan data untuk mendapatkan teori maupun temuan-temuan yang dapat digunakan sebagai hasil atau kesimpulan untuk dapat menjawab tujuan penelitian. 4.7.2 Penyajian data Data disajikan dalam bentuk tabel dimana isi tabel mencakup nama peneliti, tahun, nama tanaman, bagian yang digunakan, senyawa aktif, pelarut, jenis hewan coba, induksi diabetes, dosis perlakuan, lama perlakuan, parameter histologi hati meliputi data darah dan histopatologi hati.



69



BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN 5.1 Hasil Penelitian Penelitian ini dilakukan dengan menelusuri DataBase elektronik seperti Pubmed, Science Direct dan Willey Online Library. Proses pemilihan jurnal dilakukan dengan metode identifikasi, skrining, uji kelayakan, dan inklusi. Berikut ditampilkan skema pencarian jurnal



Sumber Data 



Pubmed



Sumber Data (n=118)



IDENTIFIKASI



SKRINING



 



Sumber Data



Science Direct (n-1328)



Total Artikel (n =1497)







Wiley Online Library (n=51



Total Artikel Duplikasi (=49)



Catatan Masuk Esklusi (n=1412)



Artikel Tanpa Duplikasi (n=1448)







Hepatoprotektor tanpa Diabetes : (n=678)







Diabetes tanpa Hepatoprotektor : (n=736)



KELAYAKAN Full Text (n=32)



Kriteria Eklusi Dengan Catatan (n=18) 



INKLUSI



Full Text masuk Inklusi (n=14)



 



Gambar 5.1 Skema Pencarian Jurnal



69



Tanaman tidak ada di Indonesia (n=12) Bukan design antidiabetes (n=4) Review Artikel (n=2)



70



Stratengi awal yang digunakan untuk penelusuran jurnal yaitu dengan mengakses DataBase di Pubmed, Science Direct dan Wiley Online Library dengan memasukkan kata Kunci: Diabetes, Hepatoprotecktive. Setelah ditemukan hasilnya jurnal disaring sesuai criteria yang telah ditentukan yaitu : jurnal 5 tahun terbaru (2016-2020), jurnal open ascess, jurnal Research, jurnal dengan penelitian hewan coba. Namun menu pada Pubmed, Science Direct dan Wiley Online Library berbeda-beda cara penyaringan datanya, untuk itu perlu disesuaikan dengan menu yang ada di DataBase tersebut. Hasil identifikasi ditemukan beberapa jurnal diantaranya : Pubmed 118 Jurnal, Science Direct 1328 Jurnal dan Wiley Oline Library 51 jurnal. Sehingga total jurnal yang didapatkan yaitu 1497 jurnal. Dari 1497 jurnal perlu diidentifikasi lagi untuk melihat duplikasi. Identifikasi tersebut meliputi judul, tahun dan nama pengarang apabila didapatkan kesamaan, dapat disimpulkan bahwa jurnal tersebut isinya sama. Setelah dilakukan identifikasi terdapat 49 jurnal yang sama. Maka total 1497 jurnal dikurangi dengan jurnal duplikasi sebanyak 49 jurnal sehingga didapatkan 1448 jurnal tanpa duplikasi. Sebanyak 1448 jurnal dilakukan skrining untuk mendapatkan tema yang sesuai dengan criteria yang dicari. Dari 1448 jurnal terdapat 32 jurnal yang sesuai (Full Text). Sebanyak 1412 jurnal tidak sesuai dengan yang dicari. Tahap selanjutnya dari 32 jurnal dianalisa kembali untuk memastikan kelayakan dengan inklusi yang sudah ditentukan yaitu (design antidiabetes dan memiliki efek hepatoprotektor). Hasil yang didapatkan yaitu terdapat 14 jurnal yang masuk dalam kriteria inkusi. 18 jurnal tidak masuk dalam kategori inklusi (12 jurnal membahas



71



bukan tanaman Indonesia, 4 jurnal dengan desain bukan antidiabetes, dan 2 jurnal berupa review artikel) Total hasil pencarian yang didapat dari 3 database yaitu Pubmed, Science Direct dan Wiley Online Library yang sesuai dengan criteria inklusi yaitu sebanyak 14 jurnal. 5.1.1 Hasil Tanaman Indonesia Sebagai Hepatoprotektor Indonesia adalah negara yang memeliki banyak tanaman berkhasiat sebagai obat tradisional. Salah satunya memiliki khasiat sebagai hepatoprotektor. Pada penelitian ini dilakukan penulusuran jurnal terkait tanaman Indonesia yang bisa dijadikan sebagai hepatoprotektor, dimana terdapat 14 jenis tanaman yang bisa digunakan. Data Tanaman Indonesia tercantum di Tabel.1 Table 5.1 Tabel Karakterisasi Tanaman dan Senyawa Kandungan N o



Penulis



Tahun



Tanaman



Bagian Tanaman



Pelarut



Metode Ekstraksi



Kandung an Metabolit



Kecambah Ekstrak mentah dan segar Methanol dari Brassica oleracea



Soxletasi



Senyawa Flavonoid



Daun



Ultrasonika si



Senyawa Flavonoid



Indonesia 1



Sahai et 2020 al.



Brassica oleracea (Brokoli)



2



Muzumb 2019 ukilwa et al.



Moringa oleifera (Kelor)



Ekstrak metanol



72



N o



Penulis



Tahu n



Tanaman Indonesia



3



Iovan al.



et 2019



Syringae Vulgaris flos



Bagian Tanama n



Pelarut



Metode Ekstraks i



Kandunga n Metabolit



Bunga Ekstrak Liliac etanol Putih dan Ungu



Perkolasi



Komponen senyawa poliphenol



Akar



Ekstrak metanol



-



Semua bagian tanaman



Ekstrak metanol



Soxletasi



Flavonoid, terpenoid, dan steroid



(Bunga Liliac) 4



Penga et al.



2019



Calanthe fimbriata F (Myxilla, sejenis anggrek)



5



Safhi et al.



2019



Sargassum muticum (sejenis rumput laut)



6



Ubong et al.



2018



Parkia biglobosa (kedawung )



.Biji



Ekstrak biji berair



Maserasi



=



7



Junejo et al.



2018



Diplazium esculentum (Paku Sayur)



Daun



Ekstrak hidroalkoho l



Maserasi



Flavonoid dan phenol



8



Taghizade h et al.



2017



Rosa canina



Buah



Ekstrak hidroalkoho l



-



Komponen polifenol



-



Ekstrak berair



-



(Mawar) 9



Yusoff et al.



2017



Nypa fruticans wurmb (Palem)



73



No



Penulis



Tahun



Tanaman



Bagian Tanaman



Pelarut



Metode Ekstraksi



Kandungan Metabolit



Indonesia 10



Chahdouraa 2017 et al.



Opuntia Bunga microdasys (Kaktus)



Ekstrak menthol



-



Senyawa Flavonoid



11



Giribabu et al.



2017



Vitis Vinifera Seed (Anggur)



Buah



Ekstrak etanol



Maserasi



-



12



Husin et al.



2017



Hibiscus sabdariffa Linn



Rosella segar



-



-



-



(Rosella) 13



Gargouria et al.



2016



Spirulina



Spirulina segar



Ekstrak methanol



Maserasi



Komponen Fenol



14



Irondi et al.



2016



Mangga



Buah



Ekstrak metanol



-



Flavonooid dan fenol



Berdasarkan (tabel 1) terkait dengan karakteristik dan kandungan senyawa tanaman Indonesia didapatkan hasil searching bahwa tanaman yang memiliki potensi sebagai hepatoprotektor berdasarkan design antidiabetes yaitu terdapat 14 jenis diantaranya: Brassica oleracea (Brokoli), Moringa oleifera (kelor), Syringae vulgaris flos (bunga liliac), Calanthe fimbriata (myxilla yaitu sejenis tanaman anggrek), Sargassum muticum (sejenis tanaman rumput laut), Parkia biglobosa (kedawung), Diplazium esculentum atau (paku sayur), Rosa canina (mawar), Nypa fruticans wurmb (palem), Opuntia microdasys (kaktus), Vitis vinifera atau (anggur), Hibiscus sabdariffa Linn (bunga rosella), Spirulina, Mangisfera indica (mangga).



74



Bagian tanaman yang digunakan dalam penelitian ini yaitu buah, daun, bunga, akar dan seluruh bagian tanaman (herba). Mangisfera indica (mangga), Rosa canina (mawar), Vitis Vinifera atau (anggur) bagian yang digunakan adalah buahnya. Tanaman yang menggunakan daun yaitu Moringa oleifera (kelor) dan Diplazium esculentum atau (paku sayur). Sedangkan untuk bagian yang digunakan bunganya adalah Opuntia microdasys (kaktus), Hibiscus sabdariffa Linn (bunga rosella), Syringae vulgaris flos (bunga liliac). Pada tanaman Calanthe fimbriata (myxilla yaitu sejenis tanaman anggrek) akar adalah bagian tanaman yang digunakan. Pelarut yang paling banyak digunakan dalam penelitian ini yaitu pelarut methanol dan pelarut etanol. Tanaman yang menggunakan pelarut methanol yaitu Brassica oleracea (Brokoli), Moringa oleifera (Kelor), Calanthe fimbriata (myxilla yaitu sejenis tanaman anggrek), Opuntia microdasys (kaktus), Spriluna dan Mangisfera (mangga). Sedangkan Syringae vulgaris flos (bunga liliac), dan Vitis Vinifera atau (anggur) menggunakan pelarut etanol. Pelarut hidroalkohol digunakan pada tanaman Diplazium esculentum atau (paku sayur), Rosa canina (mawar). Metode ekstrasi yang digunakan berbeda-beda diantaranya menggunakan maserasi, perkolasi, sonifikasi dan ultrasonifikasi. Komponen terbanyak dari 14 tanaman Indonesia adalah Komponen senyawa Fenol dan Flavonoid. Dimana komponen tersebut yang diduga kuat berpotensi sebagai hepatoprotektor.



75



5.1.2 Hasil Design Penelitian Penelitian ini menggunakan design antidiabetes yang memiliki efek ke arah hepatoprotektor. Design penelitian ini meliputi jenis hewan coba, metode induksi, dosis perlakukan dan lama perlakuan. Table 5.2 Tabel Design Penelitian Hepatoprotektor Dengan Induksi Diabetes No



Penulis



Tahun



Hewan Coba



Metode Induksi



2020



Tikus laki-laki Streptozotocin jenis Albino (150-200 gr)



Dosis Perlakuan



Lama Perlakuan



1



Sahai et al.



50mg, 100mg 28 hari dan 200 mg



2



Muzumbukilwa et 2019 al.



Tikus Wistar Induksi STZ 250 mg/kgbb 54 hari laki-laki (250- dosis 45 dan 500 300 gram) mg/kgbb secara mg/kgbb intraperitoneal (3 hari)



3



Iovan et al.



2019



Tikus Wistar Induksi STZ 70 150 mg/kgbb laki-laki usia mg/kg BB dewasa secara intraperitonial (3 hari)



4



Penga et al.



2019



Tikus Induksi Kunming pria intraperitonial (20 ± 5 g) 60 mg/kg



6 minggu (42 hari)



62.5 mg/kg, 4 Minggu 125 mg/kg dan (30 hari) 250 mg/kg



STZ (3 hari) 5



Safhi et al.



2019



Tikus laki-laki Induksi dengan berat intraperitonial 150–200 g 60 mg/kg STZ (3 hari)



200mg/500 mg



7 hari



76



No



Penulis



Tahun



Hewan Coba



Metode Induksi



Dosis Perlakuan



Lama Perlakuan



6



Ubong et al.



2018



Tikus Wistar (180 dan 300 g)



Injeksi STZ 40 mg/kg



200 mg/kgbb,400 mg/kgbb,dan 800 mg/kgbb



14 hari



7



Junejo et al.



2018



Tikus laki-laki jenis Albino



STZ (50 mg/kgbb) injeksi intraperitonial 3 hari



250 mg/kgbb, 500 mg/kgbb



21 hari



8



Taghizadeh et al.



2017



Tikus Wistar laki-laki usia 2-3 bulan dengan berat 200 ± 20 gr



Induksi intraperitonial streptozotocin (STZ; 50 mg/kg Bb) 3 hari



250 mg/kg bb dan 500 mg/kg bb



42 hari



9



Yusoff et al.



2017



Tikus laki-laki jenis Sprague dengan berat 200 - 250 gr



Diinduksi Streptozotocin (STZ) dua kali sehari dengan tiga dosis (1000, 500,



250 mg/kgbb,500 mg/kgbb, 1000mg/kgbb



12 hari



dan 250 mg / kg bb) 2 hari per oral 10



Chahdouraa et al.



2017



Tikus Wistar laki-laki (180–200 g)



Alloxan (60 mg / kg bb) diberikan melalui vena ekor.



100mg/kgbb, 200mg/kgbb



28 hari



11



Giribabu et al.



2017



Tikus wistar laki-laki (230 - 250 gr),



Kombinasi STZ dosis 55mg/kg Bb dan Nicotinamid dosis 110 mg/kg Bb (3hari)



50 mg/kgbb,100 mg/kgbb,200 mg/kgbb



28 hari



77



No



Penulis



12



Husin et al.



Tahun



2017



Hewan Coba



Tikus laki-laki jenis Sprague Dawley berat 230-240 gr



Metode Induksi Injeksi streptozotocin secara intravena



Dosis Perlakuan



Lama Perlakuan



100 mg/kg Bb



28 hari



(STZ) (45 mg / kg berat badan, iv) 13



Gargouria et al.



2016



Tikus Wistar 170 180 gr



Injeksi Aloxsan 120 mg/kgbb 3 hari



5% spirulina



21 hari



14



Irondi et al.



2016



Tikus Wistar laki-laki (180–200 g)



STZ (40mg/kg Bb) i.p 3 hari



10% Mangifera



21 hari



Berdasarkan (tabel 2) dari hasil analisa hewan coba yang paling umum digunakan adalah Tikus laki-laki jenis wistar dengan berat 150-300 gram. Selain itu juga terdapat tikus jenis Albino, Sprague Dawley dan Kunming dengan jenis kelamin laki-laki (pria). Penelitian ini menggunakan design diabetes, induksi untuk diabetes yang paling sering digunakan yaitu streptozotocin (STZ) dengan kisaran dosis antara 60mg/kgbb – 70 mg/kgbb, diinjeksikan melalui perut atau secara intraperitonial dengan perlakuan selama 3 hari. Induksi diabetes lainnya yaitu Alloxsan dengan dosis 60 mg/kgbb. Perlakuan dosis pada penelitian ini yaitu berbeda-beda rata-rata menggunakan dosis 50mg/kgbb- 500 mg/kgbb, dengan lama perlakuan 21 hari – 54 hari.



78



5.1.3 Hasil Evaluasi Hepatoprotektor Parameter Hepatoprotektor pada penelitian ini terbagi menjadi 2 bagian yaitu menggunakan data darah dan histopatologi hati. Parameter data darah meliputi AST, ALT, ALP dan GGT. Sedangkan parameter histopatologi hati meliputi kerusakan hati diantaranya : nekrosis, perlemakan, kolestatis dan sirosis hati. Table 5.3 Tabel Data Hasil Evaluasi Hepatoprotektiv Parameter Hepatoprotektor No



Penulis



Tahun Data Darah



Histopatologi Hati



1



Sahai et al.



2020



Penurunan AST,ALT



Penurunan perlemakan



2



Muzumbukilwa et al.



2019



Mereduksi ALT, AST dan Peningkatan hepatosit dan infiltrasi GGT inflamsi yang ditandai dengan fragmentasi nucleus dan lisis sel, nekrosis dan kongesti vena hepatik



3



Iovan, et al.



2019



4



Penga, et al.



2019



Penurunan kadar AST dan Meningkatan sintesis glikogen Hati ALT



5



Safhi, et al.



2019



Penurunan ALT,ALP,AST, ACP



6



Ubong et al.



2018



Penurunan AST,ALT dan Perbaikan Peradangan,, ALP Perlemakan, dan steatotis hati



7



Junejo et al.



2018



Penurunan AST,ALT dan Penurunan nekrosis jaringan hati ALP



8



Taghizadeh al.



et 2017



9



Yusoff et al.



2017



10



Chahdouraa al.



et 2017



Perbaikan peradangan pada Hati



Perbaiakn AST ALT



Penurunan Respon Peradangan



Perbaikan hepatost hati Perbaikan hepatosit



Penurunan AST, ALP



Pengurungan Perlemakan



79



Parameter Hepatoprotektor No



Penulis



Tahun Data Darah



Histopatologi Hati



11



Giribabu et al.



2017



Penurunan AST,ALT,ALP,ACP,GGT



Perbaikan peradangan,perdarahan dan nekrosis



12



Husin et al.



2017



Penurunan AST,ALT



Perbaikan Hepatosit Nuklleus



13



Gargouria et al.



2016



Penurunan AST,ALT dan Penurunan Peradangan,, ALP Perlemakan, dan steatotis hati



14



Irondi et al.



2016



Penurunan aktivitas Penurunan Nekrosis AST,ALT dan ALP



Berdasarkan (tabel 3) diatas parameter data darah yang diamati yaitu penurunan ALT, AST dan ALP. Namun pada penelitian 2017 ada yang menyebutkan terjadi penuruan pada data darah GGT dan ACP. Histopatologi hati diukur dari tingkat kerusakan hati, pada penelitian ini didapatkan hasil bahwa terjadi penurunan peradangan, penurunan perlemakan, penurunan nekrosi, penurunan steatotis hati, perbaikan hepatosit nuklleus, Peningkatan hepatosit dan infiltrasi inflamsi yang ditandai dengan fragmentasi nucleus dan lisis sel, nekrosis dan kongesti vena hepatic. Data ini menunjukkan bahwa 14 tanaman yang telah tersebut memiliki efek sebagai hepatoprotektor. 5.2 Pembahasan Penelitian Hiperglikemia merupakan cirri utama diabetes yang mendasari produksi berlebihan ROS dan mengakibatkan pembentukan AGE, yang menjadi sumber utama spesies reaktif. Kelebihan produksi ROS pada diabetes adalah kunci dalam



80



perkembangan lesi jaringan. Sel-sel tubuh manusia, termasuk hepatosit secara konsisten terpapar konsisten terpapar pada aksi langsung berbagai senyawa berbahaya dan metabolitnya, yang menginduksi peningkatan produksi radikal bebas dan peroksida lipid dengan cedera oksidatif dari membrane sel. Di hati, organ dengan peran sentral dalam metabolism, penyimpanan, dan detoksifikasi. Stress oksidatif tidak hanya dapat mengubah fungsionalitas normal membtran sel seluler dan organ seluler, tetapi juga menginduksi sinyal abnormal dan respon seluler dapat mempengaruhi homeostatis seluruh tubuh (Ristiana dkk. 2016). Stres oksidatif diketahui memainkan pernanan penting dalam induksi kelainan ini. Stress oksifatif dihasilkan dari ketidakseimbangan antara produksi radikal bebas dan penurunan pertahanan antioksidan atau keduanya (Ristiana dkk., 2016). Tingkat stress oksidatif yang tinggi dengan pembangkitan radikal bebas yang berlebih dan kadar enzim radikal bebas yang berlebihan telah dibuktikan dalam beberapa studi, baik dalam model hewan percobaan dan pada manusia dengan diabetes. Hasilnya menunjukkan bahwa ada keterkaitan diabetes mellitus dangan kerusakan hati (Rashidi, et al. 2017). Sejumlah besar kerusakan hati juga disebabkan oleh kerusakan oksidatif / stress oksidatif. Stress oksidatif adalah suatu keadaan dimana tingkat oksigen reaktif intermediate (ROI) yang toksik melebihi pertahanan antioksigen endogen. Keadaan ini mengakibatkan radikal bebas. Insulin adalah pengatur utama glikogenesis hati. Dengan demikian, glikogen hati menurun pada tikus diabetes, secara pararel dengan penurunan kadar insulin. Itu menunjukkan bahwa diabetes mellitus merusak kapasitas normal hati untuk



81



mensintesis glikogen melalui inaktivasi glikoginase. Hal tersebut memperkuat gagasan bahwa resistensi insulin penyebab keadaan hiperglikemik dan stress oksidatif, menyebabkan nekrosis jaringan hati (Gargauri et al. 2016). Selain itu peningkatan kadar glucagon juga menghambat pengeluaran trigliserida hati (Nafizah, 2017). Gangguan yang diamati pada tikus dengan induksi diabetes (aloxsan atau STZ) mengkonfirmasi bahwa diabetes melitus adalah gangguan mekanisme yang ditandai dengan hiperglikemia karena cacat dalam produksi insulin dan fungsi. ( Maney Gourgi., 2016 & Emmanuel., 2016). Mekanisme dasar yang mendasari hiperglikemia pada diabetes mellitus melibatkan produksi berlebih dan penurunan pemanfaatan glukosa oleh jaringan. Hati yang sehat mengatur pertumbuhan sel dan fungsinya dengan mekanisme homeostatis, menjaga masa jaringan persisten dibandingkan dengan tingkat stress metabolic pada tubuh. Hati memainkan peran dominan dalam mengatur homeostatis glukosa, ini menunjukkan bahwa pathogenesis intoleransi glukosa pada diabetes mellitus (Alam dkk, 2019). Indonesia memiliki banyak tumbuhan yang berpotensi sebagai tanaman obat tradisional. Baru-baru ini sudah banyak dilakukan penelitian terkait penggunakan bahan alam untuk dijadikan alternative pengobatan. Salah satunya adalah penelitian tentang antidiabetes yang memiliki efek sebagai hepatoprotective.



82



Dari hasil penulusuran jurnal yang saya lakukan ada 14 jenis tanaman Indonesia yang mampu dijadikan sebagai obat antidiabetes dan memiliki efek hepatoprotective. Hal itu diduga karena secara umum dari 14 tanaman Indonesia, kandungan yang ada didalamnya adalah komponen senyawa fenol dan flavonoid. Flavonoid merupakan salah satu golongan metabolit sekunder yang dihasilkan oleh tanaman yang termasuk dalam kelompok besar polifenol. Senyawa ini terdapat pada semua bagian tanaman termasuk daun, akar, kayu, kulit, bunga, buah dan biji. Flavonoid



mempunyai kemampuan



sebagai penangkap radikal bebas



dan



menghambat oksidasi lipid (Banjarnahor & Artanti, 2014). Komponen fenol dan flavonoid diketahui bekerja sebagai antioksidan. Antioksidan adalah senyawa yang digunakan untuk menanggulangi stress oksidatif. Antioksidan dari senyawa fenol maupun flavonoid mengangkap ROS (reactive oxygen species) secara langsung, mencegah regenerasi ROS dan secara tidak langsung dapat meningkatkan aktivitas antioksidan enzim seluler (Sinaga, 2016). Disamping itu Komponen senyawa fenol dan flavonoid merupakan senyawa yang paling efektif sebagai scavenger spesies reaktif, misalnya super dioksida, radikal peroksil, dan peroksinitrit dengan cara mentransfer atom H+. Kandungan senyawa komponen fenol dan flavonoid yang ada pada tanaman Indonesia memiliki efek sebagai antioksidan, dimana antioksidan mampu menanggulangi stress oksidatif akibat diabetes dan kerusakan hati. sehingga



83



pemberian dari 14 tanaman yang ada di Indonesia efektif untuk menurunkan kadar gula dalam darah dan memperbaiki kerusakan hati akibat diabetes. Pengambilan senyawa aktif dalam tumbuhan dapat dilakukan dengan ekstraksi pelarut. Metode ekstraksi yang digunakan berbeda-beda yaitu maserasi atau perendaman dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari. Perkolasi proses penyarian simplisia dengan jalan melewatkan pelarut yang sesuai secara lambat pada simplisia dalam suatu percolator. Sonifikasi suatu metode atau proses pemisahan suatu komponen yang terdapat dalam zat padat dengan cara penyaringan berulang-ulang dengan menggunakan pelarut tertentu, sehingga semua komponen yang diinginkan akan terisolasi. Sokletasi digunakan pada pelarut organik tertentu dan Ultrasonifikasi yaitu memanfaatkan gelombang ultrasonic (Anonim, 2016).. Pemelihan jenis pelarut harus mempertimbangkan beberapa faktor antara lain selektivitas, kemampua untuk mengekstrak, toksisitas, kemudahan untuk diuapkan dan harga pelarut. Larutan pengekstraksi yang digunakan disesuaikan dengan kepolaran senyawa yang diinginkan. Menurut prinsip like dissolves like suatu pelarut akan cenderung melarutkan senyawa yang mempunyai tingkat kepolaran yang sama. Pelarut polar akan melarutkan senyawa polar dan sebaliknya (Citra dkk, 2015). Flavonoid adalah senyawa golongan polifenol yang terdistribusi luas pada tumbuhan dalam bentuk glikosida yang berikatan dengan suatu gula, karena itu



84



flavonoid merupakan senyawa yang bersifat polar. Pelarut polar yang bisa digunakan untuk ekstraksi flavonoid adalah methanol, seton, air, etanol dan isopropnal. Metanol atau dikenal sebagai metil alcohol adalah senyawa kimia dengan rumus kimia CH3OH, merupakan bentuk alcohol yang paling sederhana. Etanol atau disebut etil alcohol (alcohol murni) dengan rumus kimia C2H5OH. Hidroksi alkohol yaitu gugus hidroksi dengan rumus OH (Citra dkk., 2016). Dari sini disimpulkan bahwa ketiga pelarut tersebut digunakan pada penelitian karena memiliki bersifat polar untuk menarik senyawa polar yang ada dalam komponen fenol dan flavonoid. Methanol adalah yang paling sering digunakan. Hewan percobaan adalah setiap hewan yang dipergunakan pada sebuah penelitian biologis dan biomedis yang dipilih berdasarkan syarat atau standar dasar yang diperlukan dalam penelitian (Adiyati, 2011). Tikus sering digunakan dalam penelitian karena memiliki kelebihan sebagai model yang mencerminkan karakter fungsional dari system tubuh mamalia. Tikus memiliki banyak keunggulan seperti perkembangbiakan yang cepat, ukuran lebih besar dari mencit, mudah dipelihara dalam jumlah yang banyak. Selain itu tikus tergolong hewan yang tidak bisa muntah karena struktur anatomi tikus yang tidak lazim. Organ esofagusnya bermuara ke dalam lambung dan tidak memiliki kantong empedu, sehingga memudahkan pemberian terapi pengobatan secara per oral (Malole, 1989; Adiyati, 2011). Tikus laki-laki sering digunakan dalam penelitian karena system reproduksi tidak serumit pada tikus wanita.



85



Pada penelitian ini hewan coba yang digunakan adalah tikus dengan galur Wistar dan Sprague-Dawley. Beberapa keuntungan dari galur ini yaitu rentang hidup yang panjang, ukuran yang besar, pertumbuhan dan kesuburan yang cepat (Suckow et al., 2006). Berat tikus yang digunakan pada pada penelitian adalah berat tikus dewasa 150-300 gram. Induksi diabetes adalah suatu cara yang digunakan untuk membuat kondisi hewan coba memiliki kadar gula berlebih dalam darah (diabetes) (Khawia Adouni, Dkk 2017). Ada beberapa jenis induksi diabetes, tetapi pada penelitian induksi yang digunakan adalah STZ, kombinasi STZ dan nicotamid, serta Aloxsan. Ketiga reagen ini membuat kondisi hewan coba menjadi diabetes. Streptozotocin merupakan derivate Streptomyces achromogenes dan secara struktural merupakan turunan nitrosourea). Streptozotocin mempunyai mekanisme kerja melalui pembentukan radical Reactive Oxygen Species (ROS), Reactive Nitrongen Species(RNS) sehingga menyebabkan kerusakan sel β pankreas (Srinivasan dan Ramarao, 2007). STZ atau streptozosin menginduksi diabetes dengan secara selektif menghancurkan sel-sel pancreas yang mengeluarkan insulin. Peneliatan yang dilakukan Hua dan Park tahun 2012 menyebutkan pemberian dosis 60 mg/kgbb kgbb melalui intraperitonial pada tikus dapat menyebabkan kerusakan pada sel beta pancreas yang mengakibatkan timbulnya diabetes mellitus dalam waktu 2-4 hari. Dalam penelitian ini dosis yang digunakan 60mg/kgbb – 70 mg/kgbb, ini menunjukkan bahwa dosis berada direntang penelitian yang telah dilakukan sehingga bisa membuat hewan coba diabetes.



86



Aloksan bersifat toksik selektif terhadap sel beta pancreas yang memproduksi insulin karena terakumulasinya aloksan secara khusus melalui transporter glukosa. Aloksan adalah racun agen untuk sel b pancreas dan hati, dan mekanisme kerjanya memodifikasi enzim dan metabolism, perubahan membrane elektrolit, peningkatan lipoperoksida dan penurunan pertahanan antioksidan (Gargouri et al, 2016). Dosis induksi aloksan 60 mg/kgbb-120 mg/kgbb mampu membuat keadaan hiperglikemia pada hewan coba. Kombinasi STZ dan Nicotamide, STZ secara selektif menghancurkan sel beta pancreas, sementara dinotamide membatasi kerusakan, menciptakan keadaan defisiensi insulin parsial, meniru kondisi diabetes tipe 2 (Giribabu et al, 2017).Kombinasi STZ dosis 55mg/kg Bb dan Nicotinamid dosis 110 mg/kg Bb mampu membuat keadaan hiperglikemia pada hewan coba. Pemberian dosis dilakukan secara intra peritoneal, per oral dan intra vena. Pemberian intraperitonial yaitu dilakukan dengan cara menyuntikkan dibagian perut, pemberian secara intraperitonial ini sangat efektif dan juga cepat. Pemberian secara intra vena yaitu dilakukan di bagian vena biasanya di bagian ekor tikus, pemberian cara ini juga sangat cepat. Ketiga adalah pemberian secara oral dengan disondekan ke mulut tikus, ini rute pemberian yang paling mudah. Pada penelitian ini rute yang banyak digunakan adalah rute intraperitonial karena mudah diaplikasin pada hewan coba, memiliki efek yang cepat dan juga efektif. Dari sini disimpulkan bahwa induksi diabetes yang sering pada penelitian ini adalah sterptozosin dengan dosis 60mg/kgbb – 70 mg/kgbb secara intraperitonial selama 3 hari.



87



Pada peneltian ini dosis dan lama perlakukan yang digunakan adalah berbedabeda dari setiap jenis tanaman. Pada tanaman Brassica olerace (brokoli) dosis yang digunakan adalah 200mg/kgbb dengan lama perlakuan 28 hari. Moringae oleifera (kelor) yaitu500 mg/kgbb dengan lama perlakuan 58 hari. Dosis Syringe vulgaris yaitu 150mg/kg bb dengan lama perlakuan selama 6 minggu. Calanthe fimbriata yaitu 250 mg/kg lama perlakuan selama 4 minggu. Sargassum muticum yaitu 200mg/kgbb dengan perlakuan dilakukan selama 7 hari. Dosis untuk Parkia biglobosa 800mg/kgbb dengan perlakuan dilakukan selama 14 hari. Dosis tanaman Diplazum esculum 500mg/kgbb. Dengan lama perlakukan selama 21 hari. Rosa canina dosis 250mg/kgbb dengan lama perlakuan selama 42 hari. Dosis tanaman Nypa fruticans yaitu dosis 500mg/kgbb, dan 1000 mg/kgbb dengan lama perlakuan selama 12 hari. Dosis pada Opuntia microdays yaitu dosis 200mg/kgbb dengan lama perlakuan selama 28 hari. Dosis pada tanaman Vitis vinifera yaitu 200mg/kgbb dengan lama perlakuan 28 hari. Dosi pada tanaman Rosella yaitu 100 mg/kgbb dengan lama perlakuan dilakukan selama 28 hari. Dosis tanaman Spirulina yaitu sebanyak 5% dengan lama perlakuan dilakukan selama 21 hari. Dosis Mangifera indica yaitu 20% dengan ama perlakuan 21 hari. Dosis tersebut signifikan menurunkan kadar gula dalam darah dan memperbaiki kerusakan hati



88



Pada penelitian ini digunakan 2 parameter untuk hepatoprotektor yaitu data darah dan histopatologi hati. Data darah adalah penelitian ini adalah data darah yang dihasilkan dari hasil SGPT (glutamat piruvat transaminase), SGOT (glutamat oksaloasetat transaminase), ALP (Alkali fosfatase) dan GGT (Gamma-glutamyl transferase). Histopatologi hati adalah cabang biologi yang mempelajari kondisi dan fungsi jaringan dalam hubungannya dengan penyakit dalam kasus ini adalah organ hati. Histopatologi hati meliputi nekrosis, kolestatis dan sirosis hati serta penyebab lainnya (Silverthorn, 2014). SGPT atau Tes serum glutamat piruvat transaminase disebut juga Alanin transaminase (ALT) tes ini mengukur kadar enzim SGPT di dalam darah. SGOT adalah tes serum glutamate oksaloasetat transminase atau aspartat aminotransferase (AST). Tes ini mengukur kadar enzim SGOT di dalam darah. ALP atau Alkali fosfatase merupakan enzim yang biasanya ditemukan di empedu, kantung empedu, dan hati. Jika hati atau kantung empedu mengalami gangguan atau kerusakan, konsentrasi enzim ALP akan mengalami kenaikan. GGT atau Gamma-glutamyl transferase (GGT) merupakan enzim yang ditemukan di berbagai organ tubuh, namun konsentrasinya paling tinggi terdapat di hati. GGT akan meningkat bila terjadi kerusakan di hati atau saluran empedu (Puspita, 2015). Nekrosis adalah kematian hepatosit, dapat bersifat fokal (sentral, pertengahan, perifer) atau passif. Kolestatis adalah Jenis kerusakan hati ini biasanya bersifat akut, lebih jarang ditemukan dibandingkan dengan perlemakan hati dan nekrosis, Perlemakan adalah adanya lemak pada hati. Sirosis ditandai oleh adanya septa



89



kolagen yang tersebar di sebagian besar hati. Kumpulan hepatosit muncul sebagai modul yang dipisahkan oleh lapisan berserat (Lu, 2010). Pada tikus diabetes terjadi peningkatan serum darah ALP, ALT dan AST ini menunjukkan bahwa kurangnya pengendalian insulin dalam hati dapat menyebabkan efek beragam pada fungsi hati (Emmanuel et al, 2016). Setelah diberikan perlakukan dengan 14 tanaman Indonesia yang disebutkan menunjukkan adanya penurunan kadar serum darah ALP, ALT dan AST yang signifikan, hal ini dapat disimpulkan bahwa 14 tanaman Indonesia mampu dijadikan sebagai terapi adiabetes yan memiliki efek perbaikan terhadap perbaikan fungsi hati. Histopatologi hati juga dilakukan pada penelitian ini, beberapa menyebutkan bahwa diabetes mengakibatkan adanya perlemakan pada hati, Perlemakan hati adalah hati yang mengandung berat lipid lebih dari 5%, adanya kelebihan lemak dalam hati dapat dibuktikan secara histokimia, lesi dapat bersifat akut (Lu, 2010). Selain itu juga menyebabkan peningkatan nekrosis yang ditandai dengan penurunan hepatosit, kolestatis dan kematian jaringan atau peningkatan peradangan. Setelah diberikan perlakukan dengan 14 tanaman Indonesia yang disebutkan menunjukkan adanya : peningkatan hepatosit dan infiltrasi inflamsi yang ditandai dengan fragmentasi nucleus dan lisis sel, nekrosis dan kongesti vena hepatic, perbaikan peradangan pada hati, penurunan perlemakan, meningkatan sintesis glikogen hati, penurunan respon peradangan, penurunan nekrosis jaringan hati, perbaikan hepatost hati. Hal ini menunjukkan bahwa ke 14 tanaman Indonesia mampu memperbaiki jaringan pada hati akibat diabetes.



90



Tanaman Indonesia mampu dijadikan sebagai hepatoprotektor. Hepatoprotektor adalah suatu senyawa obat yang dapat memberikan perlindungan pada hati dari kerusakan yang ditimbulkan oleh obat, senyawa kimia dan virus (Islamy, 2019). Ke 14 tanaman Indonesia ini mampu memperbaiki hati baik dari parameter data darah maupun parameter histopatologi hati. Dalam penelitian Spirulina ditunjukkan oleh pemeriksaan histologis pada tikus yang diberi perlakuan efek hipoglikemik dari Spirulina berlanjut melalui regenerasi atau perlindungan sel-sel hati yang dihancurkan oleh induksi diabetes, mempotensi sekresi insulin, bahkan jika peningkatan pemanfaatan glukosa oleh perifer tidak bisa dikesampingkan. Ini menunjukkan tingkat tinggi insulin pada tikus diabetes yang diobati dengan Spirulina mengembalikan kadar normal glukosa dalam darah. Dari penelitian ini Spirulina memiliki efek hipoglikemik lebih kuat dari pada insulin. Dimana peran insulin adalah pengatur utama Glikogenesis hati (Gargaouri, 2016). Efek menguntungkan dari Syringe vulgaris flos dikaitkan dengan kandungan antioksidan yang dapat mengatasi ROS dan melindungin jaringan hati dari kerusakaan oksidatif. Pertahanan dari Syringe vulgaris flos menunjukkan hasil yang baik terhadap stress oksidatif dan bisa menjadi sumber antioksidan alami yang mampu mencegah radikal bebas dari kerusakan jaringan akibat diabetes (Ristiana dkk, 2016).



91



BAB V1 KESIMPULAN DAN SARAN



6.1 Kesimpulan 1. Tanaman Indonesia memiliki potensi sebagai diabetes dan memiliki efek hepatoprotektor. Tanaman itu diantaranya yaitu Brassica oleracea (Brokoli), Moringa oleifera (kelor), Syringae vulgaris flos (bunga liliac), Calanthe fimbriata (myxilla yaitu sejenis tanaman anggrek), Sargassum muticum (sejenis tanaman rumput laut), Parkia biglobosa (kedawung), Diplazium esculentum atau (paku sayur), Rosa canina (mawar), Nypa fruticans wurmb (palem), Opuntia microdasys (kaktus), Vitis Vinifera Seed atau (anggur), Hibiscus sabdariffa Linn (bunga rosella), Spirulina, Mangisfera (mangga). 2. Kandungan yang diduga memiliki efek antidiabetes dan hepatoprotektor yaitu komponen senyawa fenol dan flavonoid. 3. Pelarut yang digunakan adalah pelarut polar seperti methanol, etanol, dan hidrosialkohol. 4. Design Penelitian ini menggunakan STZ (streptozosin) untuk induksi diabetes selama 3 hari dan hewan coba yang digunakan adalah tikus dengan jenis kelamin laki-laki.



80



92



5. Ke-14 Tanaman Indonesia ini mampu menurunkan kadar gula dalam darah dan mampu memperbaiki kerusakan hati dilihat dari parameter data darah meliputi ALT, AST, ALP dan GGT dan dari data histopatologi hati yaitu peningkatan hepatosit dan infiltrasi inflamsi yang ditandai dengan fragmentasi nucleus dan lisis sel, nekrosis dan kongesti vena hepatic, perbaikan peradangan pada hati, penurunan perlemakan, meningkatan sintesis glikogen hati, penurunan respon peradangan, 5.2 Saran 1. Perlu dilakukan pengujian ketahap klinik agar ke-14 tanaman Indonesia tersebut dapat dijadikan sebagai Fitofarmaka. 2. Perlu



dilakukan



penelitian



lebih



dalam



mengenai



efek



yang



menguntungkan dari Syringe vulgaris flos dan Spirulina. 5.3 keterbatasan Penelitian Design diabetes yang digunakan adalah karena adanya induksi dari bahan kimia yang bisa meningkatn kadar gula meningkat dan terjadi kerusakan hati sehingga menyebabkan stress oksidatif.



93



DAFTAR PUSTAKA



Abbas AK, Maitra A. The endocrine syste. In: Kumar V, Pathologisc basis of disease. 7th ed. Philadelphia, USA: Elsevier Saunders,2005:1115-224. Abdurrahman, Fadlullah. (2014). Faktor Pendorong Perilaku Diet Tidak Sehat Pada Mahasiswi. Ejournal Psikologi, Vol 2, No 2: 163-170, 2014. Diakses pada 27 Juni 2015 dari https://www.portal.fisip.unmul.ac.id/site/?p=2298. ADA, 2009, Standart of Medical Care in Diabetes-2009, Diabetes Care, Volume 32, S13-S61 (Suppl 1). Adiyati Pn. 2011. Ragam Jenis Ektoparasit Pada Hewan Coba Tikus Putih (Rattus Norvegicus) Galur Sprague Dawley. Skripsi. Bogor: Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor Agus Riyanto, (2011). Aplikasi Metodologi Penelitian Kesehata. Nuha. Medika. Yogyakarta Akbarzadeh, A. Et Al., 2007, Induction Of Diabetes By Streptozotocin In Rats. Indian Journal Of Clinical Biochemistry, 22(2), 60–64. Alam et al. 2019 Hepatoprotective Potential of Sargassum muticum against STZInduced Diabetic Liver Damage in Wistar Rats by Inhibiting Cytokines and the Apoptosis Pathway. https://doi.org/10.1155/2019/7958701 American Heart Association.(2012). Heart Disease And Stroke Statistic. Diperoleh pada tanggal 12-10-17 dari http://ahajournal.org.com. Alfira, A.2014 Uji Aksivitas Antioksidan dan Fraksi Aktif Kulit Batang Sintok. Skripsi. Jakarta: UIN Syarif Hidayatullah Anonim, 2009. Klasifikasi Mencit. http://wapedia.mobi/id/mencit. 20 November 2010. American Diabetes association (ADA). (2014). Diagnosis and Classification of Diabetes



Mellitus.



Diabetes



Care.



Jan:



34(Suppl



1):



S62-S69,



doi:10.2337/dc11-S062,PMCID:3006051. Clinical Diabetes Association (CDA). 2013. Clinical Practice Guidelines for the Prevention and Management of Diabetes in Canada.



94



American Diabetes Association (ADA) (2015). Diagnosis and Clasification of diabetes mellitus. American Diabetes Care, vol.38, pp: 8-16. Arifin, A L, dkk. 2006. Krisis Hiperglikemia pada Diabetes mellitus. Bandung : Bagian Ilmu Penyakit Dalam FK UNPAD RS. DrR Sadikin Bandung. Banjarnahor SDS, Artanti N (2014). Antioxidant properties of flavonoid. Med J Indonesia, 23(4): 239-244 Bangun, Wilson. 2012. “Manajemen Sumber Daya Manusia”. Jakarta: Erlangga Chahdoura et al. 2017. Hepatoprotective effect of Opuntia microdasys (Lehm.) Pfeiff flowers



against



diabetes



type



II



induced



in



rats.



http://dx.doi.org/10.1016/j.biopha.2017.07.093 Chen, Gao, Xiang, Ji, Wu, Xiao, Wei, Wang, Lan, Ji, & Yan. 2015. Protective Effect Of Platycodin D On Liver Injury In Alloxan-Induced Diabetic Mice Via Regulation Of Treg/Th17 Balance. Internatiobnal Immunopharmacology, Vol.26:338-348. Citra Dkk; 2015 Pengaruh Jenis Pelarut Terhadap Kandungan Total Flavonoid Dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Matoa (Pometia Pinnata) Jurnal Buku Dan Teknologi Pangan Universitas Udayana C.Lu, Frank. Toksikologi Dasar. Asas, Organ Sasaran, dan Penilaian Resiko. Jakarta: Universitas Indonesia. Corwin, Elisabeth J. 2009. Buku Saku Patofisoology.Jakarta:EGC. Desy Islamy. 2019. Efek Antihiperglikemik Ekstrak Etanol Tumbuhan Suruhan (Peperomia Pellucida [L.] Kunth) Terhadap Histopatologi Hati Mencit Jantan Yang Diinduksi Aloksan. Universitas Lampung. Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan. 1995. Farmakope Indonesia. Edisi IV. Depkes RI. Jakarta. Dipiro J.T., Wells B.G., Schwingshammer T.L., and Dipiro C.V., 2015, Pharmacotherapy



Handbook,



Ninth



Edit.,



McGraw-Hill



Education



Companies,Inggris. Edhie Sulaksonol.Et Al., 2015 Keadaan Dan Masalah Hewan Percobaan Di Indonesia



95



Ehsan (2010). Faktor-faktor Resiko Tertentu Yang Berhubungan Dengan Proses Terjadinya DM Tipe 2. Tesis. Depok. Universitas Indonesia. Emmanuel et al. 2016 Antidiabetic effects of Mangifera indica Kernel Floursupplemented diet in streptozotocin-induced type 2 diabetes in rats. doi: 10.1002/fsn3.348 Eroschenko



VP.2010.



Atlas



Histology



Difiore



Dengan



Koreksi



Fungsional.Jakarta.EGC Fajar Apollo Sinaga (2016) Stress Oksidatif Dan Status Antioksidan Pada Aktivitas Fisik Maksimal, Jurnal Generasi Kampus Volume 9, Nomor 2 Fathmi, A. 2012. Hubungan Indeks Massa Tubuh dengan Kadar Glukosa Darah Pasien



Dm tipe



2



Di



RSUD



Karanganyar.



Skripsi.



Universitas



Muhammadiyah Surakarta. Federer, WT., 1991, DA., Statistic and Society: Data Collection and Interpretation, ed.2, Dekker, New York. Foster-Powell KF, Holt SHA, Miller JCB.2002. International table of Glycemic index and Glycemyc load values. 2002. Ajc j Clin Nutr 76.5-56. Gargaouri et al. 2016. Hyperglycemia, oxidative stress, liver damage and dysfunction in alloxaninduced diabetic rat are prevented by Spirulina supplementation. doi: 10.1016/j.nutres.2016.09.011 Giribabu et al. 2017. Anti-Inflammatory, Anti-Apoptotic and Pro-Proliferative Effects of Vitis Vinifera Seed Ethanolic Extract in the Liver of Streptozotocin



Nicotinamide-Induced



Diabetes



in



Male



Rats.



http://dx.doi.org/10.1016/j.jcjd.2017.04.005 Hamdani, S., (2009), Metode Ekstraksi, http://catatankimia.com/catatan/metodaekstra ksi.html, (diakses 20 September 2012) Harborne, J.B. 1987. Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Penerbit ITB. Bandung. Haznawati, H. 2013. Fraksinasi. http://darknessthe.blogspot.com. Diakses pada 10 Desember 2013.



96



International Diabetes Federation., Nam Han Cho, David Whiting, Leonor Guarguata, Poblo asehner Montoyo, Woligang Rathmann, Gojka Roglic, Jonathan Shaw, Martin Silink, D.R.R. Williams, Ping Zhang. 2013. IDF DIABETES ATLAS, 9th Edition. Irsyad, M. 2013. Standarisasi Ekstrak Etanol Tanaman Ketumpang Air (Paperomia pellucid L. Kunth). (Skripsi). Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan. Jakarta. JM Berg et al, “Glycogen Metabolism”, 2002, Biochemistry-Fifth Edition, WH Freemen



Company,



New



York,



diakses



6



Maret



2012,



http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK21190/ Junqueira L.C.,J Carneiro,R.O, Kelley,2007.Histologi Dasar. Edisi ke-5. Tambayang J.,Penerjemah. Terjemahan dari Basic Histology.EGC.Jakarta. Junejo et al. 2017. Exploration of antioxidant, antidiabetic and hepatoprotective activity of Diplazium esculentum - A wild edible plant from North Eastern India. https://doi.org/10.1016/j.fjps.2017.10.005 Kariadi, Sri hartini.2009. Diabetes? Siapa Takut!!: Panduan Lengkap Untuk Diabetesi, Keluarganya, dan Profrisional Medis. PT Mizan Pustaka Bandung: 30-34, 101-106. Kawatu, C., Bodhi, W., Mongi, J. 2013. Uji Efek Ekstrak Etanol Daun KucingKucingan (Acalypha Indica L.) terhadap Kadar glukosa darah Tikus Putih Jantan Galur Wistar (Rattus novergicus). PHARMACON Jurnal Ilmiah Farmasi. 2: 81-85. Khan, A., M. rahman., and S. islam. 2008. Neuropharmacological Effects of Paperomia pellucida Leaves in Mice. DARU, 16:35-40. Kurniawan, Indra (2010). Diabetes Mellitus Tipe 2 pada Usia Lanjut. Majalah Kedokteran Indonesia 60(12). Lenzen S.2008. The mechanism of alloxan and



streptozotocin induced diabetes



internet.cited 2016-March-23.Available.,from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18087688?ordinalpos=1&itool=Entrez System2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultPanel.Pubmed_DiscoveryPanel.Pu



97



bmed_Discovery_RA&linkpos=4&log$=relatedreviews&logdbfrom=pubme d Lestari, P. 2010. Karakteristik Simplisia dan Isolasi SenyawaTriterpenoid/steroid Dari Herba Suruhan. Universitas Sumatera Utara. Sumatera. Malole, M.B.M., Pramono C.S.U., 1989. Penggunaan Hewan-hewan percobaan di Laboratorium. Bogor: PAU Pangan dan Gizi, IPB. Muchid, A., Umar, F., Ginting, M. N., Basri, C, Wahyuni, R., Helmi, R., et al., 2005, Pharmaceutical Care untuk Penyakit Diabetes Mellitus, Jakarta, Bina Kefarmasian dan Alat Kesehatan Departemen Kesehatan RI. Murray K , robert et all, Metabolism Glikogen, 2003, Harper’s illustrated Biochemistry, McGraw-Hill Companies, USA. Muzumbukilwa et al. 2019 Antidiabetic effects of Mangifera indica Kernel Floursupplemented diet in streptozotocin-induced type 2 diabetes in rats. doi: 10.1002/fsn3.348 Nafizah, 2015. Aqueous calyxes extract of Roselle or Hibiscus sabdariffa Linn supplementation improves liver morphology in streptozotocin induced diabetic rats. http://dx.doi.org/10.1016/j.ajg.2017.02.001 National Institute for Diabetes and Digestive and Kidney Disease (NIDDK). (2014). Cause of diabetes. NIH publication. Nwokocha, C.R., D.U. Owu., K. Kinlocke., J. Murray., R. Delgoda., K. Thaxter., G. McCalla., and L. Young. 2012. Possible Mechanism of Action of the Hypotensive Effect of Peperomiapellucida and Interactions between Human Cytochrome P450 Enzymes. Medicinal and Aromatic Plants.1:1-5 Pandelaki, K. 2009. Retinopati Diabetik. Jakarta: Interna Publishing. Pang et al.2019. Antidiabetic and hepatoprotective activity of the roots of Calanthe fimbriata Franch. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2018.12.066 Paulsen F. & J. Waschke. 2013. Sobatta Atlas Anatomi Manusia: Anatomi Umum dan Muskuloskeletal. Penerjemah: Brahm U. Penerbit. Jakarta : EGC. PERKENI. Konsensus Pengelolaan dan Pencegahan Diabetes Mellitus Tipe 2 di Indonesia. Jakarta: PERKENI; 2011



98



Pradana Soewond. 2006. Ketoasidosis Diabetik. Dalam: Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Jilid 3. Edisi VI. Jakarta: Departemen Ilmu Penyakit Dalam Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Hal: 1896-1900. Price, S.A., dan Wilson, L.M., 2006, Patofisiologi, Konsep Klinis Proses-proses Penyakit, Edisi 6, hal, 1271; Huriawati H, Natalia S, Pita Wulansari, Dewi Asih (eds), Penerbit Buku Kedokteran, EGC, Jakarta. Price, S.A., dan Wilson, L.M.,2005, Patofisiology: Konsep Klinis Proses-proses Penyakit, Edisi 6, Vol.2, diterjemahkan oleh Pendit, B. U., Hartono, H., Wulansari, p., Mahanani, D. a., Penerbit Buku Kedokteran, EGC, Jakarta. Purba, Ritson, Nugroho, D. S. 2007. Analisis Fitokimia dan Uji Bioaktivitas Daun kaca (Peperomia pellucida (L.) Kunth). Jurnal Kimia Mulawarman. 5(1): 58. Puspaningtyas; 2013 Utami, P., & Puspaningtyas, D. E. (2013). The Miracle of Herbs. Jakarta: PT AgroMedia Pustaka. Puspita, 2015. Effect of Electromagnetic Wave Mobile Exposure Chronic on SGOT and SGPT levels. Universitas Lampung. Rashidi AA, Mirhashemi SM, Taghizadeh M, Sarkhail P. 2013. Iranian medicinal plants for diabetes mellitus: a systematic review. Pak J Biol Sci. 16:401–411. https://doi.org/10.3923/pjbs.2013.401.411 PMID:24498803 Ristiana, dkk. 2016. Efek Hepatoprotektif dari Syringe vulgaris flos ekstrak etanol pada diabetes yang diinduksi streptozotocin pada tikus. Jurnal Morfologi & Embriologi Rumania. Sahai et al. 2020. Anti-diabetic, hepatoprotective and antioxidant potential of Brassica oleracea sprouts. https://doi.org/10.1016/j.bcab.2020.101623 Sanyal AJ. Nonalcoholic fatty liver disease. In: Yamada T, editor. Textbook of gastroenterology Volume 1 (5th ed). Chichester: Wiley-Blackwell Publishing, 2009; p. 2274-2301. Suckow et al; 2006 Suckow M.A, et al. 2006. The Laboratory Rat, Elsivier, ed 2th. United Kingdom



99



Sahlasaida, (2015). Penyakit Diabetes Mellitus, Penyebab dan Gejalanya. Diakses pada tanggal 04 maret 2017. http://tipkesehatan.com/2015/10penyakitdiabetes-mellitus-penyebab-dan-gejalanya/ Saifudin, Aziz, Rahayu, Viess, Teruna & Hilwan Yuda. (2011). Standarisasi Bahan Obat Alam. Edisi Pertama. Yogyakarta: Graha Ilmu. Salamah Nina, Hanifah Lina. 2014 Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak JI Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Suruhan (Peperomia pellucid (L) H.B & K) Dengan metode Fosfomolibdat. SPBOA XVI & Muktamar XII PERHIPBA Sarker SD, Latif Z, & Gray AI. 2006. Natural products isolation. In: Sarker SD, Latif Z, & Gray AI, editors. Natural Products Isolation. 2nd ed. Totowa (New Jersey). Humana Press Inc. hal. 6-10, 18. Setiawan, Meddy., 2011, Pre-Diabetes dan



Peran HBA1C Dalam Skrining dan



Diagnosis Awal Diabetes Mellitus. Fakultas Kedokteran, Universitas Muhammadiyah Malang. Sembiring B. 2007. Teknologi Penyiapan Simplisia Terstandar Tanaman Obat. Warta Puslitbangbun Vol 13 No 12 Agutus 2007. Balitro.litbang.depta.go.id (dikses 30 Juni 2015). Shafiee, G., Mohammadreza M.T., Mohammad P., & Bagher L., 2012. The importance of hypoglycemia in diaberic patients. Journal of Diabetes & Meetabolic Disordwrs, Sherwood, Laure lee, 2011. Fisiologi Manusia. Jakarta:EGC. Silverthorn, D. U. 2014. Fisiologi Manusia Sebuah Pendekatan Terintegrasi Edisi 6. EGC. Jakarta. Smeltzer & Bare. (2008). Brunner &



Suddarth’s textbook of medical surgical



nursing. Philadelpia: Lippincott.. Smith, J.b dan Mangkoewidjojo.(1998). Pemeliharaan, Pembiakan Penggunaan Hewan Percobaan di daerah Tropis. Jakarta: Ui Press. Snell, R.S.2012. Anatomi Klinis Berdasarkan Sistem. Dialih bahasakan oleh Sugarto L., Jakarta: EGC.



100



Srinivasan dan Ramarao; 2017 Srinivasan & Ramarao, 2007, Animal models in type 2 diabetes research: An overview, Indian J Med Res 125, March 2007, pp 451-472. Suarsana,I.N.,2009. Aktivitas Antioksidatif Ekstrak Metanol Tempe Terhadap Kadar Malondialdehide (MDA) Dan Profil Enzim Antioksidan Intrasel Pada Pankreas Tikus Diabetes. Skripsi. Bogor:IPB. Suparni & Wulandari, 2012, h. 4. Suparni & Wulandari, Ari. (2012). Herbal Nusantara: 1001 Ramuan Asli Indonesia. Yogyakarta Subekti L., 2009. Buku Ajar Penyakit Dalam: Neuropati Diabetik, Jilid III, Edisi 4, Jakarta: FK UI pp.1948. Suharmiati. Pengujian bioaktifitas anti diabetes mellitus tumbuhan obat. Cermin Dunia Kedokteran. (internet). 2003 (cited 2009 Januari 20); dalam FKUI, 2007:1852-6. Sugiyono. (2012). Memahami Penelitian Kualitatif. Bvandung: ALFABETA. Sugiyono. (2016). Metode Penelitian Kualitatif, Kualitatif dan R&D. Bandung. PT Alfabet. Suyono, Slamet. 2007. Patofisiologi diabetes mellitus dalam: Waspadi, S., Sukardji, K., Octariana, M. Pedoman Diet Diabetes Mellitus. Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta. Stryer,Lubert,”Glicogen Metabolism”, 2009, Biochemistry-Fourth Edition, WH Freemen



Company,



New



York,



diakses



7



Maret



2012



http://www.natuurlijkerwijs.com/english/Glycogen_metabolism.htm Szkudelski, T. 2008. The Mechanism of Alloxan And Streptozotocin Action In β Cell of The Rat Pancreas. Physiologi Research. 50: 536-54. Taghizadeh, et al 2017. The Protective Effect of Hydroalcoholic Extract of Rosa canina (Dog Rose) Fruit on Liver Function and Structure in StreptozotocinInduced Diabetes in Rats. http://dx.doi.org/10.1080/19390211.2017.1369205 Trifany, A.W. 2012. Kromatografi kolom. http://data-farmasi.blogspot.com. Diakses pada 10 Desember 2013.



101



Trisnawati, S., K Setyorogo, S. (2013). Faktor Resiko Kejadian Diabetes Milletus Tipe II Di Puskesmas Kecamatan Cingkareng Jakarta Barat Tahun 2012. Jurnal Ilmiah Kesehatan, Volume 5(1): 6-11. Ubay, bey. 2011. Ekstraksi padat-cair. www.ekstraksi-padat-cair.html diakses pada tanggal 6 Juni 2016. Ubong Et Al. Effects Of Parkia Biglobosa Aqueous Seed Extract On Some Biochemical,



Haematological



Streptozotocin



And



Histopathological



Induced



Diabetic



Parameters



In



Rats.



https://doi.org/10.1016/j.jep.2018.09.016 Voigt, R., 1995, Buku Pelajaran Teknologi Farmasi, Diterjemahkan Oleh Soendani N. S., Ugm Press, Yogyakarta. Wahyuni, E 2011. Pengaruh Pemberian Folat Terhadap Kadar Hemosistein Serum Dan Melondialdehid Plasma Studi Experimental Pada Tikus Sprague Dawley yang Diinduksi Streptozotocin. http://eprints.undip.ac.id/29184/. Diakses pada tanggal 25 April 2014 Walde, S.S., Dohle, C., Schott-Ohly, P., Cleichemann, H., 2002, Moleculer target structures in alloxan-induced diabetes in mice, Life Sciences, 71,1681-1694. Wei, L.S., Wee, W., Siong, J. Y. F., Syamsumir, D. F. 2011. Characterization of Anticancer,



Antimicrobial,



Antioxidant



Properties



andChemical



Compositions of Peperomia pellucida Leaf Extract. Acta Medica Iranica. 49(10): 670-674. Weiss, Akbarzadeh; 2007 Akbarzadeh, A. et al., 2007. Induction of Diabetes By Streptozotocin in Rats. Indian Journal of Clinical Biochemistry, 22(2), pp.pp:60–64. Widyastuti, W., 2012 Hubungan Antara Depresi dengan Kepatuhan melaksanakan Diit pada Diabetisi di Pekalongan. Jurnal Ilmiah Kesehatan. Vol IV.No.1.(56). Widiowati, W., 2008, Potensi antioksidan sebagai antidiabetes,jkm, Vol.7 No.2., 193=202.



102



Wijaya, S., dan S.W Monica.2004. Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Herba Suruhan (Peperomia pellucid L. Kunth) pada Tikus Putih Jantan. Berk.Penel.Hayati. 9:115118 Wilson, G.L., N.J Patton., J.M . McCord., D.W Mullins., and B.T. Mossman. 1984. Mechanisms of streptozotocin- and alloxan-induced damage in rat β cells, Diabetologia., 27(6):587-591. Wilson, G.L. and S.P. LeDoux. 1989. The Role of Chemical in The Etiology of Diabetes Mellitus, Toxicologic Pathology, 17 : 357 –3 62. Wilson I D, Michael C, Colin F P, Edward R A. 2000. Encyclopedia of Separation Science. Academic Press. 118-119. Wolf G. 2005. History of Antioxsidant. http://en.wikipwdia.org/wiki/antioksidant. 10 Oktober 2009. Gustaviani, R. (2006). Diagnosis dan Klasifikasi Diabete Mellitus-Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Edisi IV. Jilid III. Jakarta: Pusat Penerbitan Departemen Ilmu Penyakit Dalam FKUI, hal.1879-1881. World health Organization (WHO) 2014. Commission on Ending Childbood Obesity, Geneva, World Health Organization, Departemen of Noncommunicable disease surveillance. International Diabetes Federation (IDF). (2014). IDF Diabetes ATLAS 4th Edition. ISBN-13: 978-2-930229-71-3.ADA. Xu., S., Li., M.M. Ning., C.H. Zhou., Q.R. Yang., and M.W. Wang. 2005. Bioactive Compound from peperomia pelleucid. American Chemical Society and American Society of Pharmacognosy.10:1. Yuriska, A., 2007,



Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Biji Alpukat (Persea



Americana Mill) Bentuk Bulat, Karya Tulis Ilmiah: Fakultas Farmasi, Universitas Padjajaran Bandung. Yusoff et al. 2017. Nypa fruticansWurmb. Vinegar’s Aqueous Extract Stimulates Insulin Secretion and Exerts Hepatoprotective Effect on STZ-Induced Diabetic Rats. www.mdpi.com/journal/nutrients Zheng, X. Et Al., 2011. Anti-Diabetic Activity And Potential Mechanism Of Total Flavonoids Of Selaginella Tamariscina ( Beauv .) Spring In Rats Induced By



103



High Fat Diet And Low Dose Stz. Journal Of Ethnopharmacology, 137(1), Pp.662–668. Available At: Http://Dx.Doi.Org/10.1016/J.Jep.2011.06.018



104



LAMPIRAN Gambar Histopatologi Hati Tikus



Keterangan : 1. (A,A’) = Tikus normal 2. (B,B’) = Tikus Diabetes 3. (C,C’) = Tikus diabetes yang diberi Perlakuan Tanaman Indonesia 4. (D,D’) = Tikus yang di Obati Insulin Panah Menunjukkan



dilatasi Parenkim



Degenerasi Sel



Steatosis



Infiltrasi Leukosit



Nekrosis Sel



105



Keterangan : 1. CV = menunjukkan sel hati yang normal termasuk vena sentral dan sel hati (hp) 2. Panel C = Hati penderita diabetes yang tidak diobati, degenerasi hepatosit dan infeksi inflamantory dengan fragmentasi nucleus dan lisis sel (F), hepatosit nekrotik (N), Kemacetan vena hepatic (C), sitoplasma vesicular (V) 3. Panel B = Diberi perlakuan Tanaman Indonesia menunjukkan tidak diabetes dan histopatologi normal yang serupa dengan control 4. Panel D = Insulin yang diabetes yang diobati menunjukkan peningkatan arsitektur hepatosit 5. Panel E = Hati penderita diabetes yang diobati dengan Tanaman Indonesia (dosis rendah) menunjukkan arsitektur hepatosit yang meningkat mirip dengan kelompok diabetes degan insulin 6. Panel F = Hati penderita diabetes yang diobati dengan Tanaman Indonesia (dosis sedang) menunjukkan hati diabetic dengan ventral menonjol (CV), mengurangi kongesti vena hepatica (C), hepatosit nekrotik (N), Frafmentasi nucleus dan lisis sel (F), dan Sitoplasma vestikular (V).



106



A



C



B



D



E.



F



Keterangan : 1. A = Penampang hati tikus control (G1) yang tidak diobati menunjukkan tali hepatosir yang memancar dari vena centrilobular 2. B = Penampang hati dari tikus diabetes yang tidak diobati (G2) menunjukkan arsitektur parenkim hati yang tidak teratur, dilatasi vena sentral, infiltrasi inflamasi pada ruang portal 3. C = Penampang hati dari tikus diabetes yang tidak diobati (G2) menunjukkan degenerasi hepatosit dan vakulasi lipid 4. D = Penampang hati tikus diabetes yang diobati dengan Tanaman Indonesia (G5) lobules hati dengan aspek yang relative normal, dilatasi sinusoidal ringan. 5. E = Penampang hati tikus diabetes yang diobati dengan Tanaman Indonesia (G3) menunjukkan peningkatan seluleritas dan berkurangnya infiltrasi inflamasi pada ruang portal 6. F = Penampang hati tikus diabetes yang diobati dengan Tanaman Indonesia (G4) menunjukkan hepatosit normal, dilatasi sinusoidal ringan disekitar ruang portal.



107



Keterangan : 1. NC = a dan b = sel parenkim normal, area portal, sinusoid dan gradual glikogen 2. NR = c dan d = tidak ada perbedaan yang signifikan dibandingkan dengan kelompok control 3. DC = e dan f = penghancuran arsitektur hati dengan vena sentral 4. D = vakuolasi sitoplasma, hepatosit 5. V = hyperemia pasif 6. H = urat nadi tengah melebar di leukosit 7. L = nukleotida 8. P = nekrosis 9. DR = g dan h = mengurangi tanda-tamda cidera hati



108