Skripsi Revisi [PDF]

Citation preview

SKRIPSI UJI EFEK ANTIINFLAMASI KOMBINASI EKSTRAK ETANOL DAUN KELOR (Moringa oleifera L.) DAN DAUN SALAM (Syzygium polyanthum Wigh Walp) TERHADAP EDEMA KAKI TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) JANTAN GALUR WISTAR YANG DI INDUKSI KARAGENIN



Penelitian Eksperimental Laboratoris



Anak Agung Gede Agung Wahyu Parama Arka 2015.04.1.0022



FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS HANG TUAH SURABAYA 2019 i



SKRIPSI UJI EFEK ANTIINFLAMASI KOMBINASI EKSTRAK ETANOL DAUN KELOR (Moringa oleifera L.) DAN DAUN SALAM (Syzygium polyanthum Wigh Walp) TERHADAP EDEMA KAKI TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) JANTAN GALUR WISTAR YANG DI INDUKSI KARAGENIN Penelitian Eksperimental Laboratoris Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran pada Fakultas Kedokteran Universitas Hang Tuah



Anak Agung Gede Agung Wahyu Parama Arka 2015.04.1.0022



FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS HANG TUAH SURABAYA 2019



ii



PERNYATAAN BEBAS PLAGIARISME Yang bertanda tangan di bawah ini: Nama



: Anak Agung Gede Agung Wahyu Parama Arka



NIM



: 2015.04.1.0022



Dengan ini menyatakan bahwa ANTIINFLAMASI



KOMBINASI



penelitian yang berjudul UJI EFEK EKSTRAK



ETANOL



DAUN



KELOR



(Moringa oleifera L.) DAN DAUN SALAM (Syzygium polyanthum Wigh Walp) TERHADAP EDEMA KAKI TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) JANTAN GALUR WISTAR YANG DI INDUKSI KARAGENIN. Skripsi ini adalah orisinil karya saya sendiri, bebas plagiat, semua sumber baik yang dikutip maupun yang dirujuk telah saya nyatakan dengan benar. Apabila dikemudian hari terbukti terdapat plagiat dalam skripsi saya, maka saya bersedia menerima sanksi sesuai ketentuan peraturan perundangundangan. Demikian pernyataan ini saya buat dengan sesungguhnya dan dengan sebenar-benarnya.



Surabaya, 8 januari 2019



Anak Agung Gede Agung Wahyu Parama Arka 2015.04.1.0022



iii



LEMBAR PERSETUJUAN SKRIPSI UJI EFEK ANTIINFLAMASI KOMBINASI EKSTRAK ETANOL DAUN KELOR (Moringa oleifera L.) DAN DAUN SALAM (Syzygium polyanthum Wigh Walp) TERHADAP EDEMA KAKI TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) JANTAN GALUR WISTAR YANG DI INDUKSI KARAGENIN



Penelitian Eksperimental Laboratoris



Oleh Anak Agung Gede Agung Wahyu Parama Arka 2015.04.1.0022



Menyetujui : Dosen Pembimbing I



Lestari Dewi, dr, M.Kes NIK.01196



iv



LEMBAR PERSETUJUAN SKRIPSI UJI EFEK ANTIINFLAMASI KOMBINASI EKSTRAK ETANOL DAUN KELOR (Moringa oleifera L.) DAN DAUN SALAM (Syzygium polyanthum Wigh Walp) TERHADAP EDEMA KAKI TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) JANTAN GALUR WISTAR YANG DI INDUKSI KARAGENIN



Penelitian Eksperimental Laboratoris



Oleh Anak Agung Gede Agung Wahyu Parama Arka 2015.04.1.0022



Menyetujui :



Dosen Pembimbing I



Dosen Pembimbing II



Lestari Dewi, dr, M.Kes NIK.01196



Prajogo Wibowo, dr, M.Kes NIK. 01170



iv



LEMBAR PENGESAHAN SKRIPSI UJI EFEK ANTIINFLAMASI KOMBINASI EKSTRAK ETANOL DAUN KELOR (Moringa oleifera L.) DAN DAUN SALAM (Syzygium polyanthum Wigh Walp) TERHADAP EDEMA KAKI TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) JANTAN GALUR WISTAR YANG DI INDUKSI KARAGENIN



Penelitian Eksperimental Laboratoris



Oleh: Anak Agung Gede Agung Wahyu Parama Arka 2015.04.1.0022



Mengesahkan: Ketua Penguji,



Lestari Dewi, dr, M.Kes NIK.01196



Anggota Penguji I,



Anggota Penguji II,



Prajogo Wibowo, dr, M.Kes NIK. 01170



Roostantia Indrawati, dr,M.Kes NIK. 02542



v



KATA PENGANTAR Puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa, atas Rahmat dan Bimbingan-Nya, penulis bisa menyelesaikan penelitin dan penulisan karya akhir yang berjudul “UJI EFEK ANTIINFLAMASI KOMBINASI EKSTRAK ETANOL DAUN KELOR (Moringa oleifera L.) DAN DAUN SALAM (Syzygium polyanthum Wigh Walp) TERHADAP EDEMA KAKI TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) JANTAN GALUR WISTAR YANG DI INDUKSI KARAGENIN”.. Skripsi ini diajukan sebagai syarat untuk meraih gelar sarjana kedokteran. Penulis menyadari bahwa skripsi ini tidak akan terselesaikan tanpa bantuan dari beberapa pihak. Oleh sebab itu,dengan rendah hati penulis menyampaikan ucapan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada: 1. Laksamana Muda TNI (Purn) Ir. Sudirman, S.IP., S.E,. M.AP., selaku Rektor Universitas Hang Tuah Surabaya yang telah memberikan



kesempatan



dan



kemudahan



untuk



mengikuti



pendidikan di Universitas Hang Tuah Surabaya 2. Sakti Hoetama, dr., Sp.U, selaku Dekan Fakultas Kedokteran Umum Universitas Hang Tuah Surabaya yang telah membantu penulis selama mengikuti pendidikan di Fakultas Kedokteran Universitas Hang Tuah Surabaya. 3. Dian Ardiana, dr., Sp.KK, FINSDV, selaku Wakil Dekan I Fakultas Kedokteran Umum Universitas Hang Tuah Surabaya yang telah membantu memberi motivasi untuk teteap semangat menempuh pendidikan di Fakultas Kedokteran Universitas Hang Tuah Surabaya. 4. Suwarno, dr., Sp.PD, FINASIM selaku Wakil Dekan II Fakultas Kedokteran Umum Universitas Hang Tuah Surabaya yang telah memberi kesempatan dan membantu penulis menyelesaikan pendidikan di Fakultas Kedokteran Universitas Hang Tuah Surabya.



vi



5. Prajogo Wibowo, dr.,M.kes, selaku Wakil Dekan III Fakultas Kedokteran Umum Universitas Hang Tuah Surabaya dan selaku pembimbing II yang telah memberi kesempatan dan membantu penulis



menyelesaikan



pendidikan



di



Fakultas



Kedokteran



Universitas Hang Tuah Surabaya. 6. Sihning EJT. dr., MS selaku dosen wali yang selalu membantu dan memberi saran dalam mengerjakan dan menyelesaikan pendidikan di Fakultas Kedokteran Universitas Hang Tuah Surabaya. 7. Lestari Dewi, dr, M.Kes selaku dosen pembimbing I yang memberikan ide, saran, dan bimbingan bagi penulis untuk menyelesaikan penelitian ini. 8. Wienta Diarsvitri, dr, MSc, PhD yang selalu bersedia meluangkan waktu disela- sela kesibukan beliau untuk mengarahkan penulis dalam pelaksanaan kegiatan penelitian dan penulisan skripsi. 9. Fitri Handajani, dr., M.Kes, selaku Kepala Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Umum Universitas Hang Tuah Surabaya yang memberikan kemudahan bagi penulis untuk menggunakan fasilitas laboraturium dalam melakukan penelitianPara dosen Fakultas Kedokteran Umum Universitas Hang Tuah Surabaya yang telah berkenan memberi ilmu, pengalaman dan pelajaran yang berharga kepada penulis. 10. Arlene Kusuma Dewi, S.Si, M.Si., Dini Tri Wulandari, A.Md, dan Eko Wahyu Nugroho selaku staf Laboraturium Biokimia Fakultas Kedokteran Umum Universitas Hang Tuah Surabaya.. 11. Orang tua tecinta dan tersayang Bapak Anak Agung Gede Agung Wiratama dan Ibu Ida Ayu Putu Bintang yang telah memberikan suport pada saat kedaan terpuruk dan mendidik dengan penuh kasih sayang, memberikan pengalaman dan teladan agar selalu menjadi pribadi yang jujur dan tangguh, memotivasi penulis untuk selalu belajar, mendoakan kesuksesan dan keberhasilan penulis, dan selalu memberi dukungan penuh baik secara moral dan materi dalam pendidikan saya.



vii



12. Kakek (alm) Lektol (Purn) Anak Agung Gede Surya dan nenek Anak Agung Adi Ariathy sebagai panutan penulis dan mendidik dengan penuh ketegasan, mengajarkan kejujuran itu penting, mengajarkan arti tanggung jawab, memberikan pengalaman dan teladan agar selalu menjadi pribadi yang tangguh, memotivasi untuk selalu belajar, mendoakan kesuksesan dan keberhasilan penulis, 13. Adik penulis Anak Agung Istri Agung Chandra Puspita Utami, Anak Agung Istri Agung Chandra Wati, Anak Agung Istri Agung Srila Nataswari, serta



semua



keluarga



yang



selalu



memberikan



semangat, serta dukungan dalam bentuk apapun. 14. Rekan satu tim penelitian Aditio Helga Ramanda yang sudah membantu saat penelitian sehingga mampu penelitian dan skripsi ini. 15. Teman penulis Nadia Afnani Er Rahmah dan Tsali Yuna Hafshoh yang telah sabar dan tak kunjung lelah mengajari dan membantu dalam mengerjakan statistik. 16. Teman penulis Ni Made Indah Prasatya Ningsih yang telah sabar membantu dalam proses pembuatan heading. 17. Teman–Teman CLK, yang telah banyak memberi support dan saling bergai refrensi baik jurnal maupun tugas kuliah. 18. Teman – Teman satu kontrakan, sikas wanda, kadek yuda, dewa dede yudi arthawan yang telah banyak memberi support dan mengajak bermain pada waktu jenuh 19. Putu Eka Dianti Putri dan Gede Muliastawan sebagai teman seperjuangan skripsi, teman dalam kondisi sulit, teman belajar, teman yang selalu ada, yang telah menemani penulis dalam keadaan penat dalam pembuatan skripsi, membantu memberikan informasi dan semangat yang tiada henti. 20. Teman-Teman kelompok Bhineka Tunggal Ika, Viona Nadya Dwi Anggraini, Amanda fitria, Desy petronella Yoku, Rahmayati, yang selalu mendorong agar skripsi ini cepat terselesaikan teman



viii



seperjuangan di kampus, dan selalu mengajak jalan-jalan di saat jenuh. 21. Ida Ayu Cempaka Dewi Yatindra sebagai teman yang telah membangkitkan semangat membuat skripsi ini di karenakan terus menanyakan kabar skripsi. 22. Teman- teman terdekat lainnya yang selalu memberikan semangat, membantu, dan memberi motivasi serta mengingatkan agar skripsi ini dapat terselesaikan dengan tepat waktu. Semoga lulus bersama menjadi dokter yang sukses Penulis menyadari bahwa tidak ada manusia yang sempurna, oleh karena itu penulis mohon maaf apabila terdapat banyak kesalahan dalan penyusunan skripsi ini. Saran dan kritik akan penulis terima dengan lapang hati demi penyempurnaan skripsi ini. Semoga karya ini dapat memberi manfaat bagi kita semua khususnya rekan-rekan mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas Hang Tuah Surabaya. Akhir kata, penulis mengucapkan terima kasih dan Tuhan selalu memberikan berkat-Nya kepada semua pihak yang sudah berkontribusi dalam penelitian ini.



Surabaya, 8 januari 2019



Anak Agung Gede Agung Wahyu Parama Arka 2015.04.1.0022



ix



DAFTAR ISI PERNYATAAN BEBAS PLAGIARISME......................................................iii LEMBAR PERSETUJUAN..........................................................................iv LEMBAR PENGESAHAN.............................................................................v KATA PENGANTAR...................................................................................vi DAFTAR ISI ix DAFTAR TABEL........................................................................................xiii DAFTAR GAMBAR....................................................................................xiv DAFTAR LAMPIRAN..................................................................................xv ABSTRAK



xvi



ABSTRACT xvii BAB 1 PENDAHULUAN...............................................................................1 1.1



Latar Belakang................................................................................1



1.2



Rumusan Masalah..........................................................................3



1.3



Tujuan..............................................................................................4 1.3.1 Tujuan penelitian umum.............................................................................4 1.3.2



1.4



Tujuan penelitian khusus............................................................................4



Manfaat Penelitian...........................................................................4 1.4.1 Bagi peneliti..................................................................................................4 1.4.2 Bagi peneliti lain...........................................................................................4 1.4.3 Bagi masyarakat..........................................................................................4 1.4.4 Bagi universitas............................................................................................5



BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA.......................................................................6 2.1



Kelor (Moringa oleifera L.)...............................................................6 2.1.1 Klasifikasi kelor............................................................................................6 2.1.2 Morfologi kelor..............................................................................................7 2.1.3 Distribusi kelor..............................................................................................8 2.1.4 Komposisi zat gizi daun kelor.....................................................................8 2.1.5 Nama kelor di Indonesia...........................................................................10 2.1.6 Manfaat kelor..............................................................................................10 2.1.7 Kandungan kimia daun kelor (Moringa oleifera L)................................10



2.2



Daun Salam (Syzygium polyanthum wight walp)..........................12 2.2.1 Klasifikasi daun salam...............................................................................12 2.2.2 Morfologi daun salam................................................................................12



ix



2.2.3 Kandungan senyawa aktif........................................................................13 2.2.4 Nama lain daun salam..............................................................................14 2.2.5 Manfaat lain daun salam...........................................................................14



2.3



Kandungan Kimia Aktif..................................................................15



2.4



Inflamasi........................................................................................20 2.4.1 Definisi.........................................................................................................20 2.4.2 Tipe inflamasi.............................................................................................21 2.4.3 Tanda-tanda inflamasi...............................................................................22 2.4.4 Respon inflamasi akut...............................................................................23 2.4.5 Stimulus radang akut.................................................................................24



2.5



Obat Antiinflamasi.........................................................................24 2.5.1 Obat anti-inflamsi non-steroid (OAINS)..................................................25 2.5.2 Kimia & farmakokinetika...........................................................................25 2.5.3 Farmakodinamika......................................................................................25 2.5.4 Efek samping umum semua OAINS.......................................................27 2.5.5 Obat antiinflamasi steroid.........................................................................27



2.6



Obat Standar.................................................................................27 2.6.1 Aspirin.........................................................................................................27



2.7



Karagenin......................................................................................29



2.8



Tinjauan Tentang Tikus.................................................................30 2.8.1 Kasifikasi tikus putih (Rattus norvegicus)...............................................30 2.8.2 Taksonomi..................................................................................................30 2.8.3 Morfologi.....................................................................................................30



BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL DAN HIPOTESIS............................32 3.1



Kerangka Konseptual....................................................................32



3.2



Penjelasan Kerangka Konseptual.................................................33



3.3



Hipotesis........................................................................................34



BAB 4 METODE PENELITIAN.................................................................35 4.1



Rancangan Penelitian...................................................................35 4.1.1 Desain penelitian.......................................................................................35 4.1.2 Metode penelitian......................................................................................35



4.2



Populasi, Sampel, Besar Sampel dan Teknik Pengambilan Sampel..................................................................................36 4.2.1 Populasi......................................................................................................36 4.2.2 Sampel........................................................................................................36



x



4.2.3 Besar sampel.............................................................................................37 4.2.4 Teknik pengambilan sampel.....................................................................37



4.3



Variabel Penelitian........................................................................38 4.3.1 Klasifikasi variabel.....................................................................................38 4.3.2 Definisi operasional variabel....................................................................39



4.4



Bahan Dan Instrumen Penelitian..................................................39 4.4.1 Bahan penelitian........................................................................................39 4.4.2 Alat penelitian............................................................................................39



4.5



Lokasi Dan Waktu Penelitian........................................................40 4.5.1 Lokasi penelitian........................................................................................40 4.5.2 Waktu penelitian........................................................................................40



4.6



Prosedur Penelitian.......................................................................40 4.6.1 Tahapan persiapan....................................................................................40 4.6.1.1 Persiapan hewan coba.....................................................................40 4.6.1.2 Pembuatan kombinasi ekstrak etanol daun kelor (moringa oliefera) dan daun salam (Syzygium polyanthum wight Walp).......................41 4.6.1.3 Pembuatan sediaan karagenin.....................................................41 4.6.1.4 Pembuatan larutan CMC-Na 1%......................................................42 4.6.1.5 Pembuatan sediaan aspirin..............................................................42 4.6.1.6 Penghitungan dosis.......................................................................42



4.7



Tahap pelaksanaan penelitian......................................................43 4.7.1 Terminasi..........................................................................................44



4.8



Tahap Analisis Data......................................................................44



4.9



Kerangka Operasional Penelitian..................................................45



BAB 5 HASIL PENELITIAN........................................................................46 5.1



Hasil Volume Edema Pada Hewan Coba Yang Diberi Beberapa Kelompok Perlakuan.............................................................47 5.1.1 Volume edema sebelum diinduksi karagenin hewan coba antar kelompok perlakuan.........................................................................................50 5.1.2 Volume edema 90 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok 51 5.1.3 Volume edema 90 + 60 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok............................................................................................................52 5.1.4 Volume edema 90 + 120 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok............................................................................................................53 5.1.5 Volume edema 90 + 180 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok............................................................................................................54



xi



5.1.6 Volume edema 90 + 240 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok............................................................................................................55 5.1.7 Persentase penghambatan edema.........................................................55



5.2



Uji Normalitas Dan Homogenitas Varian......................................57



5.3



Analisis Hasil Statistik...................................................................60



BAB 6 PEMBAHASAN...............................................................................63 6.1



Hasil Hambata Edema..................................................................63



6.2



Hasil Uji Statistik............................................................................63



6.3



Pembahasan.................................................................................64



BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN...........................................................70 7.1



Kesimpulan....................................................................................70



7.2



Saran.............................................................................................70



DAFTAR PUSTAKA...................................................................................72 LAMPIRAN 76



xii



DAFTAR TABEL 39 48 Tabel 5.2 Persentase Hambatan Edema Kaki Tikus Setiap Menit Tertentu...................................................................................57 83 83



xiii



DAFTAR GAMBAR 6 6 7 8 19 0 0 5 0 1 2 3 4 55 56 57 58



xiv



DAFTAR LAMPIRAN 79 0 1 2 3 3



xv



ABSTRAK UJI EFEK ANTIINFALAMASI KOMBINASI EKSTRAK ETANOL DAUN KELOR (Moringa oleifera L) DAN DAUN SALAM (Syzygium Polyanthum wight Walp) TERHADAP EDEMA KAKI TIKUS PUTIH (RATTUS NORVEGICUS) JANTAN GALUR WISTAR YANG DIINDUKSI KARAGENIN 1



Anak Agung Gede Agung Wahyu Parama Arka Mahasiswa S1 Pendidikan Dokter, 2Fakultas Kedokteran Universitas Hang Tuah Surabaya Email : [email protected]



Latar Belakang: Inflamasi merupakan respon pertama dari sistem imun ditandai oleh beberapa gejala yaitu tumor, dolor, calor, functiolaesa. Tanaman yang sering digunakan dalam pengobatan tradisional adalah daun kelor, kandungan dari daun kelor yaitu tanin, flavanoid, saponin, dan alkaloid. Flavonoid inilah yang mempengaruhi berbagai macam aktivitas biologi atau farmakologi, diantaranya antiinflamasi. Tanaman lain yang dapat digunakan dalam pengobatan tradisional adalah daun salam (Syzygium polyanthum wight Walp). Daun salam mempunyai kandungan minyak atsiri, flavonoid, tannin dan metil, flavonoid memiliki manfaat sebagai antiinflamasi. Tujuan: Untuk Mengetahui efek anti-inflamasi kombinasi ekstrak etanol daun salam (Syzygium polyanthum wight walp) dan daun kelor (moringa oliefera) terhadap kaki tikus putih (Rattus novergicus) jantan galur wistar yang di induksi karagenin. Metode : Penelitian eksperimental laboratorik dengan metode Rat hind paw edema pada telapak kaki tikus putih jantan galur wistar. Menggunakan 5 kelompok, kelompok 1 kelompok kontrol (-) CMC-NA1%, kelompok 2 kontrol (+) diberi aspirin 100 mg/KgBB, dan kelompok perlakuan di beri kombinasi ekstrak etanol daun kelor dan daun salam 300 mg/KgBB, 600 mg/KgBB, 750 mg/KgBB. Hasil : Ekstrak etanol daun kelor (moringa oleifera) dan daun salam (Syzygium polyanthum wight Walp) 300 mg/KgBB memiliki daya antiinflamasi sebesar 7,36%, ekstrak etanol daun kelor dan daun salam 600 mg/KgBB memiliki daya antiinflamasi sebesar 52,8%, ekstrak etanol daun kelor dan daun salam 750 mg/KgBB memiliki daya antiinflamasi sebesar 16,06%. Simpulan: kombinasi ekstrak etanol daun kelor dan daun salam dapat menurunkan volume edema pada kaki tikus dan yang paling tinggi efektivitasnya pada dosis 600 mg/KgBB Keywords : Ekstrak kombinasi, Antiinflamasi, Edema



xvi



ABSTRACT ANTI INFLAMATION EFFECT TEST OF MORINGA LEAVES ETHANOL EXTRACT (MORINGA OLEIFERA L) AND BAY LEAVES (SYZYGIUM POLYANTHUM WIGH WALP) COMBINATION ONMALE WHITE RATWISTAR STRAINLEG EDEMA (RATTUS NORVEGICUS) THAT INDUCED BY CARAGENIN 1



Anak Agung Gede Agung Wahyu Parama Arka Mahasiswa S1 Pendidikan Dokter, 2Fakultas Kedokteran Universitas Hang Tuah Surabaya Email : [email protected]



Background: Inflammation is the first response of the immune system to infections that characterized by symptoms of tumors, dolor, calor, functiolaesa. The types of plants commonly used are Moringa leaves, phytochemical contents in Moringa leaves namely tannins, flavanoids, saponins, and alkaloids. These flavonoids affect various kinds of biological or pharmacological activities, one of them is anti-inflammatory effect. Another plant that can also be used in traditional medicine is bay leaves (SyzygiumpolyanthumwightWalp). Bay leaves have the chemical content of essential oils, flavonoids, tannins and methyl, flavonoids have a benefits as anti-inflammatory. Goals : To know the anti-inflammatory effect of moringa leaves ethanol extract (Moringaoliviera l) and bay leaves (syzygiumpolyanthumwighwalp) combination, on male white rat wistar strain leg edema (Rattusnorvegicus) that induced by caragenin. Method: An experimental laboratory study with the Rat hind paw method of edema or inflammation formation on the soles of male white rat wistar strains. Using 5 groups of male white wistar rats, group 1 in the control group (-) was not given anything, group 2 controls (+) were given aspirin 100 mg, and the treatment group was given a combination of ethanol extract of kelor leaves and bay leaves 300 mg / KgBB, 600 mg / KgBB, 750 mg / KgBB. Results: Ethanol extract of Moringa leaf (moringaoleifera) and bay leaf (sygiumpolyanthumsyz) 300 mg / KgBB had anti-inflammatory power of 7.36%, ethanol extract of Moringa leaves and salam leaves 600 mg / KgBB had an anti-inflammatory power of 52.8% , the ethanol extract of Moringa leaves and bay leaves 750 mg / KgBB has an anti-inflammatory power of 16.06%. Conclusion: the combination of ethanol extract of moringa leaves and bay leaves can reduce the volume of edema in rat feet and the highest effectiveness at a dose of 600 mg / KgBB Keywords: Moringa Leaves (Moringa oleifera L), Bay Leaves (Syzygium Polyanthum wight Walp), Antiinflamation, Edema



xvii



BAB 1 PENDAHULUAN 1.1



Latar Belakang Indonesia merupakan suatu negara yang memiliki kekayaan alam



yang berlimpah diantaranya adalah berbagai jenis tanaman obat. Jumlah tanaman obat di indonesia sebanyak 90% dari tanaman obat yang ada di asia (Nugroho 2010).Tanaman obat di Indonesia banyak digunakan oleh masyarakat Indonesia sejak dahulu secara turun temurun untuk keperluan pengobatan guna mengatasi masalah kesehatan. Obat tradisional tersebut perlu diteliti dan dikembangkan sehingga dapat bermanfaat secara optimal untuk peningkatan kesehatan masyarakat (Tjokronegoro. and Baziad. 1992). Salah satu jenis tanaman yang sering digunakan dalam pengobatan tradisional adalah daun kelor (Moringa Oleifera L). Pohon kelor banyak mempunyai khasiat, khasiatnya telah banyak diketahui digunakan sebagai obat tradisional. Beberapa bagian yang berbeda dari pohon kelor bisa digunakan sebagai pengobatan tradisional untuk berbagai jenis penyakit seperti kelumpuhan, epilepsi, rematik. Selain itu ekstrak dari daun, biji dan akar dari pohon kelor telah diteliti bisa untuk berbagai



penggunaan



termasuk



juga



antiinflamasi,



anti



tumor,



antihepatotoksik dan juga analgesik (Sashidhara et al., 2009). Kandungan fitokimia dalam daun kelor yaitu tanin, flavanoid, saponin, dan alkaloid. Flavonoid inilah yang mempengaruhi berbagai macam aktivitas biologi atau farmakologi, diantaranya antioksidan, antiangiogenik, antiinflamasi, antialergik dan antiviral (Kasolo et al., 2010) Tanaman lain yang juga dapat di gunakan dalam pengobatan tradisional adalah daun salam (Syzygium polyanthum wight Walp). Daun salam merupakan jenis rempah-rempah yang sudah tidak asing lagi bagi masyarakat indonesia, daun salam banyak dimanfaatkan sebagai bahan pelengkap dan penyedap alami pada masakan namun selain manfaatnya sebagai penyedap, daun salam juga memiliki khasiat yang dapat digunakan sebagai bahan obat tradisional (Sudirman Azhari 2014). Tanaman salam mempunyai kandungan kimia minyak atsiri 0,2% (sitral,



1



eugenol) flavonoid (katekin dan rutin), tannin dan metil kavicol (methyl chavicol) yang dikenal sebagai estragole atau p-allylanisole(Chusniatun 2016). Flavonoid merupakan senyawa polifenol yang sesuai dengan struktur kimianya terdiri dari flavonol, flavon, flavanon, isoflavon, katekin, antosianidin dan kalkon. Flavonoid memiliki manfaat sebagai antiinflamasi, antitumor, antiviral, antialergik, antiplatelat, dan antioksidan yang mimiliki manfaat sebagai sistem pertahanan tubuh (Chusniatun, 2016). Aktivitas antiinflamasi flavonoid dan saponin dengan cara



menghambatan



siklooksigenase atau lipooksigenase (3) dalam proses peradangan dan melindungi mukosa lambung pada penggunaanya sebagai antiinflamasi, diharapkan dapat melindungi mukosa lambung dari kerusakan (Risna et al., 2015). Inflamasi merupakan respons pertama dari sistem imun terhadap iritasi, luka jaringan atau infeksi kuman yang disebabkan oleh trauma fisik, zat kimia yang merusak ditandai oleh beberapa gejala yaitu rubor (kemerahan), panas (calor), nyeri (dolor), bengkak (tumor) dan daya gerak berkurang (functio laesa), Inflamasi dapat bersifat lokal dan sistemik, dapat juga terjadi secara akut atau kronis yang menimbulkan kelainan patologis (Corwin, 2008). Inflamasi adalah proses yang kompleks, yang sering dikaitkan dengan rasa sakit dan melibatkan kejadian seperti peningkatan permeabilitas pembuluh darah, peningkatan denaturasi protein dan perubahan membran (Leelaprakash & Mohan, 2011). Rangsangan fisik atau kimiawi yang merusak menyebabkan pelepasan mediator inflamasi seperti histamin, serotonin, bradikidin, prostaglandin dan lain-lain yang menimbulkan reaksi radang berupa panas, nyeri, bengkak, merah, dan gangguan fungsi (Farianty, 1994). Obat–obat antiinflamasi diperlukan untuk memodulasi proses peradangan peradangan.



karena



memiliki



aktivitas



menekan



atau



mengurangi



Aktivitas ini dapat dicapai dengan berbagai cara, yaitu



menghambat pembentukan mediator radang prostaglandin, menghambat migrasi sel-sel leukosit ke daerah radang, dan menghambat pelepasan prostaglandin dari sel-sel pembentuknya. Obat antiinflamasi dibagi dalam



2



dua golongan, yaitu obat antiinflamasi golongan steroid dan obat antiinflamasi non steroid. Obat antiinflamasi golongan steroid terutama bekerja



menghambat



pelepasan



prostaglandin



ke



jaringan



yang



mengalami cedera, sedangkan mekanisme kerja obat antiinflamasi nonsteroid yaitu melalui inhibisi enzim siklooksigenase, sehingga perubahan asam arakidonat menjadi prostaglandin terganggu (Gunawan 2007). Pada umumnya pengobatan yang sering digunakan untuk mengatasi inflamasi adalah obat antiinflamasi dari golongan OAINS (Obat Anti-Inflamasi Non-Steroid) dan golongan steroid yang berguna untuk mengurangi pembengkakan dan rasa sakit peradangan. Obat-obatan antiinflamasi ini memiliki resiko toksisitas terhadap gastrointestinal, jantung dan lainya dalam penggunaan jangka panjang, oleh karena itu adanya kebutuhan untuk menggunakan obat antiinflamasi dengan alasan efek samping yang lebih ringan saat digunakan untuk penyakit inflamasi kronis. Daun kelor dan daun salam banyak dipilih sebagai obat alternatif alami untuk pengobatan, dikarenakan mudah untuk di dapatkan, tetapi masih kurangnya bukti ilmiah untuk khasiat dari tumbuhan sebagai obat (Madhavi et al. 2012). Pada beberapa penelitian ekstrak etanol daun kelor (Moringa Oleifera L) diketahui memiliki efek antiinflamasi (Singh et al. 2012). Daun salam (Syzygium polyanthum wight walp) juga memiliki efek antiinflamsi pada kaki tikus putih jantan dengan metode induksi karagenin (Agustina et al.



2015). Karena itu perlu dilakukan penelitian lanjutan yang akan



memperkuat potensi kedua tumbuhan tersebut sebagai sumber senyawa antiinflamasi dengan menguji aktivitas stabilasi 1.2



Rumusan Masalah Apakah pemberian kombinasi ekstrak etanol daun kelor (moringa



oleifera L) dan daun salam (Syzygium polyanthum wight walp) memiliki efek antiinflamasi terhadap edema kaki tikus putih (Rattus norvegicus) jantan Galur Wistar yang di induksi karagenin?



3



1.3



Tujuan



1.3.1 Tujuan penelitian umum 1) Untuk mengetahui efek anti-inflamasi kombinasi ekstrak etanol daun kelor (moringa oliefera L) dan daun salam (Syzygium polyanthum wight walp) terhadap edema kaki tikus putih (Rattus novergicus)



jantan galur wistar yang di induksi



karagenin. 1.3.2 Tujuan penelitian khusus 1) Mengetahui aktivitas antiinflamasi kombinasi ekstrak etanol daun kelor dan daun salam terhadap edema kaki tikus jantan galur wistar. 2) Untuk mengetahui pengaruh pemberian kombinasi ekstrak daun kelor dan daun salam lebih aman di bandingkan obatobatan antiinflamasi lainnya. 3) Membandingkan efek anti-inflamasi kombinasi ekstrak etanol daun kelor dan daun salam dengan obat-obatan antiinflamasi standar pada tikus jantan galur wistar yang di induksi karagenin. 1.4



Manfaat Penelitian



1.4.1 Bagi peneliti 1) Sebagai salah satu syarat untuk mendapatkan gelar sarjana Kedoteran. 2) Menambah ilmu pengetahuan, keterampilan, dan pengalaman khususnya pada tanaman obat yang memiliki aktivitas antiinflamasi. 1.4.2 Bagi peneliti lain Hasil dari penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi awal bagi peneliti lanjutan tentang aktivitas antiinflamasi yang terdapat pada daun kelor dan daun salam. 1.4.3 Bagi masyarakat 1) Memberikan



pengetahuan



inflamasi.



4



kepada



masyarakat



tentang



2) Memberikan pengetahuan kepada masyarakat tentang bahan alami dari kombinasi ekstrak daun kelor dan daun salam dalam proses penyembuhan edema (bengkak) dengan biaya yang



cukup



terjangkau,



mudah



didapatkan



dan



efek



sampingnya minimal. 1.4.4 Bagi universitas Dengan adanya hasil penelitian ini di harapkan instansi yang terkait dapat



memberikan



informasi



kepada



masyarakat



mengenai



kombinasi ekstrak daun kelor dan daun salam sebagai antiinflamsi.



5



efek



BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 2.1



Kelor (Moringa oleifera L.)



2.1.1 Klasifikasi kelor Menurut (Tilong, 2012). Taksonomi tanaman kelor (Moringa oleifera Lamk ) seperti tercantum pada Kerajaan



: Plantae



Sub kerajaan



: Tracheobionta



Superdivisi



: Spermatophyta



Divisi



: Magnoliophyta



Kelas



: Magnoliopsida



Subkelas



: Dilleniidae



Bangsa



: Capparales



Suku



: Moringaceae



Genus



: Moringa



Spesies



: Moringa oleifera L.



Sumber : (Tilong, 2012).



Gambar 2.1 Daun Kelor



Sumber:(https://www.google.co.id/search? q=daun+kelor&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=0ahUKEwislaXx3aXa AhVGgI8KHd4cDRYQ_AUICigB&biw=1366&bih=613#imgrc=sbziKM4Lh2 gb9M:)



6



2.1.2 Morfologi kelor Kelor (Moringa oleifera L) termasuk jenis tumbuhan berumur panjang berupa semak atau pohon dengan ketinggian 7-12 meter. Batangnya berkayu (lignosus), tegak, berwarna putih kotor, berkulit tipis dan mudah patah. Cabangnya jarang dengan arah percabangan tegak atau miring serta cenderung tumbuh lurus dan memanjang (Tilong, 2012). Daun kelor berbentuk bulat telur, bersirip tak sempurna, beranak daun gasal, tersususun majemuk dalam satu tangkai, dan hanya sebesar ujung jari. Helaian daun kelor berwarna hijau, ujung daun tumpul, pangkal daun membulat, tepi daun rata, susunan pertulangan menyirip serta memiliki ukuran 1-2 cm (Yulianti, 2008). Bunga kelor beraroma khas dan berwarna putih kekuning-kuningan. Buah kelor berbentuk segitiga, dengan panjang sekitar 20-60 cm dan berwarna hijau. Kelor berakar tunggang, berwarna putih, berbentuk seperti lobak, berbau tajam dan berasa pedas (Tilong, 2012). Tanaman Kelor dapat mentolerir berbagai kondisi lingkungan, sehingga mudah tumbuh meski dalam kondisi ekstrim seperti temperatur yang tinggi, dan dapat bertahan hidup di daerah bersalju ringan. Kelor tahan dalam musim kering yang panjang dan tumbuh dengan baik di daerah dengan curah hujan tahunan berkisar antara 250 sampai 1500 mm. Meskipun lebih suka tanah kering lempung berpasir atau lempung, tetapi dapat hidup di tanah yang didominasi tanah liat. Budidaya kelor dapat dilakukan dengan metode penyemaian langsung dengan biji atau menggunakan stek batang. Daun Kelor dapat dipanen setelah tanaman tumbuh 1,5 hingga 2 meter, yang biasanya memakan waktu 3 sampai 6 bulan. Namun dalam budidaya intensif yang bertujuan untuk produksi daunnya, Kelor dipelihara dengan ketinggian tidak lebih dari 1 meter. Pemanenan dilakukan dengan cara memetik batang daun 5 dari cabang atau dengan memotong cabangnya dengan jarak 20 sampai 40 cm di atas tanah (Krisnadi, 2013).



7



2.1.3 Distribusi kelor Asal dari sepesies ini tidak diketahui secara pasti karena telah dibudidayakan dimanfaatkan



secara oleh



luas



Roma,



sejak Yunani



zaman dan



dahulu.



Mesir



Tumbuhan



Kuno



kini



ini



banyak



dibudidayakan di seluruh negara yang beriklim tropis dan subtropis (Fahey, 2005). Namun, (Moringa oleifera L) dikatakan tumbuhan asli untuk subwilayah Himalaya India Utara. Umum juga ditemukan di seluruh wilayah di india serta didataran Punjab, Sind, Baluchistan, dan di daerah North West Frontier Province Pakistan, walaupun populasi ini mungkin dihasilkan dari budidaya awal. Beberapa penulis juga menganggapnya bagian asli dari Asia Barat (Oman,Qatar,Arab Saudi, Uni Emerat Arab dan Yaman) dan bahkan Afrika Utara. Moringa oleifera L juga banyak dinaturalisasi di daerah tropis lain nya di dunia. Dilaporkan disebagian besar selatan dan timur Asia termasuk juga Afganistan, Israel, Iran, Nepal, Banglades, Cina, Taiwan, Srilangka, Myanmar, Malaysia, Filipina, Thailand, Vietnam, Indonesia dan Papua New Guinea. Tumbuhan ini juga banyak dinaturalisasi di sub-Sahara Afrika, termasuk di Zimbabwe, Madagaskar, Afrika selatan. Di Amerika kelor di naturalisasi di wilayah selatan-timur Amerika serikat (Florida) Amerika Tengah (Belize, Kosta Rika, El Salvador,Guatemala dan Panama) dan Amerika Selatan (Colombia, Brazil dan Paraguay) Kelor juga di naturalisasi di pulau-pulau Pasifik,termasuk Kiribati, Kepulauan Marshall, Kepuluan Mariana Utara, Kepuluan Solomon dan Amerika Federasi Mikronesia (Narvie and Steve, 2010). 2.1.4 Komposisi zat gizi daun kelor Kelor merupakan tanaman yang kaya akan nutrisi seperti halnya zat gizi makro elemen seperti (potasium, kalsium, magnesium, sodium, dan fosfor) dan mikro elemen seperti (mangan, seng, dan besi.), mineral, vitamin. Berbagai bagian dari tanaman Kelor seperti daun, akar, biji, kulit kayu, buah, bunga dan polong dewasa, bertindak sebagai stimulan jantung dan peredaran darah, memiliki antitumor, anti-piretik, anti-epilepsi, anti-inflamasi,



anti-ulcer,



anti-spasmodic,



8



diuretik,



anti-hipertensi,



menurunkan kolesterol, antioksidan, anti-diabetik, hepatoprotektif, antibakteri dan anti-jamur (Krisnadi, 2013). Akar, batang dan kulit batang kelor mengandung saponin dan polifenol. Selain itu kelor juga mengandung alkaloida, tannin, steroid, flavonoid, gula tereduksi dan minyak atsiri. Akar dan daun kelor juga mengandung zat yang berasa pahit dan getir. Sementara biji kelor mengandung minyak dan lemak (Utami and Puspaningtyas, 2013) Tabel 2. 1 Kandungan daun kelor per 100g Komponen Komposisi Air 75 g Energi



92 Kal



Protein



6.8 g



Lemak



1.7 g



Karbohidrat



12.5 g



Serat



0.9 g



Kalsium



440 mg



Potasium



259 mg



Fosfor



70 mg



Besi



7 mg



Zinc



0.16 mg



ß-karoten



6.78 mg



Tiamin (vitamin B1)



0.06 mg



Riboflavin (vitamin B2)



0.05 mg



Niacin (vitamin B3)



0.8 mg



Vitamin A



16,3 mg



vitamin E



113,6 mg



Vitamin C



220 mg



Selenium µg 0,9



0,9 µg



Flavonoid



473.3 mg



Sumber :(Fuglie, 2001). Hasil studi fitokimia daun kelor (Moringa oleifera) menyebutkan bahwa daun kelor mengandung senyawa metabolit sekunder flavonoid, alkaloid, Saponin, Tanin. Komposisi dan konsentrasi senyawa fitokimia



9



mengalami perubahan selama pertumbuhan tanaman. Daun yang lebih muda mempunyai kandungan fitokimia paling tinggi (Nugraha, 2013). 2.1.5 Nama kelor di Indonesia Kelor terdapat pada seluruh daerah di Indonesia, mulai dari Sabang sampai Meurauke. Karena itu tanaman kelor dikenal diberbagai daerah, seperti murong (Aceh), munggai (Sumatera Barat), kilor (Lampung), kelor (Jawa Barat dan Jawa Tengah), marongghi (Madura), kiloro (Bugis), parongge (Bima), kawona (Sumba), dan kelo (Ternate) (Mardiana, 2013). 2.1.6 Manfaat kelor Tanaman kelor pada daerah pedesaan biasanya digunakan untuk membuat pagar rumah atau pagar dari ladang. Dimana kelor dapat digunakan



sebagaii



antifertilitas



dan



antiinflamasi



(peradangan),



rubefacient (obat kulit merah), antilithic (pencegah terbentuknya batu urine), vesicant (menghilangkan kutil). Batang kelor dapat dimanfaatkan sebagai rubefacient, vesicant, dapat digunakan untuk menyembuhkan penyakit mata, pengobatan pasien mengigau, mencegah terjadinya pembesaran pada limpa dan digunakan untuk menyembuhkan bisul (Krisnadi, 2014). Getah dari kelor bila dicampur dengan minyak wijen dapat digunakan sebagai pereda sakit kepala, demam, keluhan usus, disentri, dan juga asma. Bunga dari kelor memiliki fungsi untuk menyembuhkan radang, penyakit otot, histeria, tumor, dan pembesaran limpa dan dapat menurunkan kolesterol. Daun dari kelor secara tradisional banyak dimanfaatkan untuk pangan seperti sayur hingga saat ini dapat dikembangkan menjadi suatu produk pangan yang modern seperti tepung kelor, kerupuk kelor, kue kelor, permen kelor dan teh dari daun kelor. Selain itu ekstrak daun kelor berfungsi sebagai antiinflmasi, antimikroba dan biji dari kelor dapat berfungsi untuk menjernihkan air (Krisnadi, 2014). 2.1.7 Kandungan kimia daun kelor (Moringa oleifera L) Tanaman kelor dikenal dapat digunakan pada pengobatan tradisional Afrika dan India bertindak sebagai stimulan jantung dan peredaran darah, antitumor, antipiretik, antiepilepsi, antiinflamasi, diuretik,



10



antihipertensi, dan dapat menurunkan kolesterol, antioksidan, antidiabetik, antibakteri, dan antijamur (Toripah and Abidjulu, 2014). Daun kelor sebagai sumber antioksidan alami yang sangat baik, karena hasil dari studi fitokimia daun kelor (Moringa oleifera) terdapat kandungan senyawa metabolit sekunder flavonoid, alkaloid, saponin, tanin (Nugraha, 2013). Antioksidan pada daun kelor seperti asam askorbat, flavonoid, fenolik, dan karotenoid, tingginya konsentrasi asam askorbat, zat estrogen dan β-sitosterol, besi, kalium, fosfor, tembaga, vitamin A, B, C yang membuat daun kelor memiliki banyak manfaat bagi kesehatan. Kandungan kimia asam amino yang terdapat pada daun kelor berbentuk asam aspartat, asam glutamat, alanin, valin, leusin, isoleusin, histidin, arginin, triptofan, sistein, dan metionin (Makkar and Becker, 1996).



11



2.2



Daun Salam (Syzygium polyanthum wight walp)



2.2.1 Klasifikasi daun salam Taksonomi Daun Salam (Syzygium polyanthum Wight Walp) Klasifikasi: Kingdom



: Plantae ( Tumbuhan)



Subkingdom :Tracheobionta Super Divisi : Spermatophyta (menghasilkan biji) Divisi



: Magnoliophyta (Tumbuhan dengan bunga)



Kelas



: Magnoliopsida (biji berkeping dua atau dikotil)



Sub kelas



: Rosidae



Ordo



: Myrtales



Famili



: Myrtaceae



Genus



: Syzygium



Spesies



: Syzygium polyanthum wigh walp



Gambar 2.2 Daun Salam 2.2.2 Morfologi daun salam Salam merupakan tanaman yang biasanya ditemukan tumbuh liar di hutan dan pegunungan, tetapi bisa ditanam pada pekarangan dan sekitar rumah. Pohon ini dapat ditemukan pada dataran rendah sampai dengan ketinggian 1.800 mdpl. Daun Salam merupakan daun tunggal yang letaknya berhadapan, letaknya seberang-menyeberang pada cabang horizontal. Daunnya berbentuk lonjong, elips atau bulat telur sungsang,



12



pangkalnya lancip, sedangkan ujungnya lancip sampai dengan tumpul, panjangnya sekitar 5-15 cm, lebar 35-36 mm, terdapat 6-10 urat daun lateral, dan pangkal daun 5-12 mm. Daun muda beraroma karena kandungan persentase minyak atsiri dalam tanaman tersebut (Sonchus and Pada, 2012). Bunga keluar dari rantingnya, dan berbau harum. Kelopak bunga berbentuk cangkir yang lebar, ukurannya lebih kurang 1 mm. Mahkota bunga berwarna putih, panjang 2,5-3,5 mm, benang sari terbagi dalam 4 kelompok, panjang 3 mm, berwarna kuning lembayung. Daun salam secara ilmiah bernama (Syzygium polyanthum wight Walp) dan memiliki nama ilmiah lain yaitu (Eugenia polyantha wight) dan (Eugenia lucidula Miq).Tanaman salam termasuk didalam suku (myrtaceae). Tanaman salam merupakan pohon yang memiliki tinggi sekitar 20 meter dan dapat dibudidayakan dengan sangat baik pada daerah dengan ketinggian 51000 meter dari permukaan laut. Pemeliharaan tanaman salam dapat dilakukan dengan mudah tetapi memerlukan lahan yang memiliki jumlah air didalam tanah yang cukup dan dapat tumbuh di daerah terbuka dengan unsur hara yang seimbang (Sudirman, 2014). Farmakope Herbal Indonesia menyebutkan bahwa Syzygium Polyanthum Wight Walp dari suku Myrtacea mengandung flavonoid total tidak kurang dari 0,40% dihitung sebagai kuersetin dengan senyawa identitas adalah kuersitrin. Kuersetin merupakan bentuk non glikosida (aglikon) dari kuersitrin (Sudirman, 2014). 2.2.3 Kandungan senyawa aktif Tanaman salam (Syzygium polyanthum Wight Walp) mengandung banyak senyawa kimia aktif. Bagian tanaman salam yang banyak dimanfaatkan adalah bagian daunnya. Daun salam terdapat kandungan flavonoid (kuersetin, kuersitrin, mirsetin dan mirsitrin), saponin, tanin, minyak atsiri (salamol dan eugenol), seskuiterpen, triterpenoid, fenol, steroid, sitral, lakton dan karbohidrat. Kandungan yang terdapat pada tanaman salam lainnya adalah polifenol dan alkaloid (Adrianto, 2012). Uji



13



fitokimia dari daun salam menunjukkan adanya beberapa senyawa metabolit sekunder yaitu fenolik, dan kumarin (Hermansyah, 2008). 2.2.4 Nama lain daun salam Beberapa nama yang digunakan untuk daun salam, di antaralain ada Di beberapa wilayah Indonesia, daun salam dikenal sebagai salam (Sunda, Jawa, Madura); gowok (Sunda); manting (Jawa); kastolam (kangean, Sumenep); dan meselengan (Sumatera). Selaian di Indonesia disebut juga ubar serai, meselengan (Malaysia); Indonesia Bay leaf, Indonesian laurel, Indian bay leaf (Inggris); Salamblatt (Jerman); dan Indonesische lorbeerblatt (Belanda) (Utami and Puspaningtyas, 2013). 2.2.5 Manfaat lain daun salam A. Potensi menurunkan kadar asam urat. Hasil penelitian (Muchtadi et al., 2010). Berdasarkan pada data uji praklinik antihiperurisemia, ekstrak daun salam dan jinten hitam (Nigella sativa Linn) dan kombinasinya dengan dosis tunggal 200 mg/kgBB terbukti memiliki potensi untuk menurunkan kadar asam urat pada darah mencit putih jantan galur BalbC yang diinduksi menggunakan potassium oksonat dengan prosentase penurunan kadar asam urat berturut-turut adalah 79,35%, 61,29%, dan 72,90%. Sedangkan penurunan oleh allopurinol sebesar 93,55%. Dari hasil standarisasi ekstrak air daun salam adalah parameter kadar fenolat total dalam ekstrak daun salam sebesar 1,08% dan total flavonoid mempunyai kadar 0,196%. Dan hasil esktrak air jinten hitam kadar fenolat total sebesar 0,66% dan kadar flavonoid total sebesar 0,40%. Senyawa identitas dari ekstrak daun salam adalah fluoretin sedangkan ekstrak jinten hitam adalah luteolin. Perbedaan senyawa aktif tersebutlah yang membedakan potensiasi penurunan kadar asam urat darah mencit putih jantan. Dari hasil yang diperoleh lebih poten senyawa fluoretin dari ekstrak daun salam (Muchtadi et al., 2010). B. Manfaat daun salam untuk penyedap masakan Daun salam merupakan daun yang dapat dimanfaatkan sebagai rempah atau bumbu dapur yang memiliki fungsi sebagai pengharum dan penyedap alami beraneka ragam masakan. Di Indonesia daun salam bisa



14



digunakan pada masakan jenis masakan berkuah maupun tidak berkuah dengan menambahkan santan atau tidak bersantan. Cara menggunakan daun salam sangat mudah, pada masakan yaitu mencampurkan dua atau tiga helai daun salam segar atau kering ke dalam masakan misalnya pada ikan, daging, nasi, sayur mayur, tahu, tempe sehingga aroma masakan menjadi lebih harum dan sedap ( Muchtadi et al., 2010). 2.3



Kandungan Kimia Aktif



A. Flavonoid Berdasarkan uji fitokimia pada daun kelor terdapat hasil yang positif mengandung flavonoid (Rohyani et al., 2015). Flavonoid adalah senyawa polifenol yang bersumber dari sayur dan buah dapat digunakan sebagai obat herbal. Sesuai dengan struktur kimianya terdiri dari flavonol, flavon, flavanon, isoflavon, katekin, antosianidin dan kalkon. Flavonoid memiliki kemampuan sebagai antiinflamasi, antitumor, antiviral, antianalergik, antiplatelet, dan antioksidan pada sistem pertahanan tubuh. Flavonoid diketahui disintesis oleh tanaman dalam responnya terhadap infeksi mikroba sehingga efektif (Chusniatun, 2016). Flavonoid didalam tubuh mempunya efek menghambat enzim siklooksigenase yang memiliki peran dalam biosintesis prostaglandin. Flavonoid secara umum terdapat pada hampir semua jenis tumbuhan dan bagian tumbuhan seperti daun, akar, kayu, buah, dan biji. Yang terikat pada gula sebagai glikosida dan aglikon. Senyawa



flavonoid



disebutkan



dapat



mengurangi



pembengkakan,



(Binawati and Amilah, 2013). Pada tumbuhan umumnya flavonoid terdapat dalam dua jenis yaitu aglikon flavonoid dan glikosida flavonoid. Aglikon flavonoid seperti isoflavon, flavanon, flavon maupun flavonol adalah flavonoid tanpa gula terikat sedangkan pada glikosida flavonoid adalah flavonoid yang terikat pada gula (Markham, 1988). Flavonoid sangat mudah terurai disebabkan karena panas, kerja enzim, adanya air dan pH. Flavonoid larut dalam air, metanol, etanol, butanol, aseton, dimetilsulfoksida, dan dimetilformamid (Mursyidi,1990). Ikatan flavonoid dengan gula menyebabkan banyaknya bentuk kombinasi yang dapat terjadi didalam tumbuhan, sehingga



15



flavonoid pada tumbuhan jarang ditemukan dalam keadaan tunggal (Harborne, 1987). Flavonoid



berperan



sebagai



antioksidan



dengan



cara



mendonasikan atom hidrogennya atau melalui kemampuannya mengikat logam, berada dalam bentuk glukosida (mengandung rantai samping glukosa) atau dalam bentuk bebas yang di sebut aglikon (Cuppett, 1954). Efek flavonoid terhadap bermacam-macam organisme sangat banyak macamnya



dan



dapat



menjelaskan



mengapa



tumbuhan



yang



mengandung flavonoid dipakai dalam pengobatan tradisional. Beberapa tipe flavonoid dapat menghambat fosfodiesterase, sedangkan flavonoid lain menghambat aldoreduktase, monoaminoksidase, protein kinase, DNA polimerase dan enzim lipooksigenase. Penghambat siklooksigenase. dapat menimbulkan pengaruh lebih luas karena reaksi siklooksigenase merupakan langkah pertama pada jalur yang menuju ke hormon eikosanoid seperti prostaglandin dan tromboksan (Robinson, 1991).



Gambar 2.3 Struktur dasar Flavonoid (Robinson, 1991). Berdasarkan struktur dasarnya maka dapat dikenal beberapa golongan flavonoid diantaranya: khalkon, auron, flavanon, isoflavon, flavon, 10 dihidroflavonol, flavonol, antosianidin, katekin, (flavan 3-ol), dan proantosiainidin.



16



Gambar 2.4 Struktur dasar beberapa golongan senyawa flavonoid (Indradewi, 2011). B. Alkaloid Alkaloid pada umunya mengandung satu buah atom nitrogen yang memiliki sifat basa dan bagian dari cincin heterosklik.Banyak tumbuhan yang dipergunakan untuk pengobatan yang telah diisolasi berupa senyawa nitrogen heterositik. Senyawa alkaloid merupakan senyawa organik terbanyak ditemukan di alam . Hampir seluruh alkaoid berasal dari tumbuhan dan tersebar pada berbagai jenis tumbuhan (Lutfiana, 2013). Alkaloid adalah golongan metabolit sekunder yang terbesar. Dimana pada manusia alkaoid bersifat racun namun banyak memiliki aktivitas fisiologi yang menonjol sehingga dipergunakan secara luas dalam bidang pengobatan. “Pemeriksaan alkaloid dilakukan dengan cara satu ml ekstrak ditambahkan beberapa tetes pereaksi, dalam penelitian ini pereaksi yang digunakan adalah pereaksi wagner (reaksi positif jika terbentuk endapan coklat) dan pereaksi meyer (reaksi positif jika terbentuk endapan putih) (Putra et al., 2016).



17



C. Saponin Saponin terdapat pada seluruh tanaman dengan konsentrasi tinggi pada bagian-bagian tertentu, dan dipengaruhi oleh varietas tanaman dan tahap pertumbuhan (Putra et al., 2016). Saponin adalah jenis glikosida alami dari sapogenin yang terkait dengan steroid alkaloid atau triterpena. Saponin memiliki aktivitas farmakologi yang cukup luas yaitu imunomodulator,



antitumor,



antiinflamasi,



antivirus,



antijamur,



efek



hipoglikemik, dan efek hipokolesterol (Robinson, 1995). Saponin juga mudah larut dalam air dan alkohol tetapi tidak larut dalam ether mempunyai sifat yang beragam seperti terasa manis, pahit, dapat berbentuk buih, dapat menstabilkan emulsi, dan menyebabkan haemolisis sel darah merah pada konsentrasi yang rendah (Robinson, 1991). Pada larutan yang sangat encer saponin bersifat racun pada hewan berdarah dingin dan dapat digunakan sebagai racun ikan, racun saponin bersifat keras di mana biasa di sebut sapotoksin (Wiesman, 2003). Pemeriksaan saponin (uji busa). Satu ml ekstrak ditambahkan air panas dan dikocok. Reaksi positif jika terbentuk busa yang tahan lama (Putra et al., 2016). Struktur saponin dapat dilihat pada Gambar



Gambar 2.5 Struktur Kimia Saponin (https://en.wikipedia.org/wiki/Saponin) D. Tanin Tanin merupaka senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada tanaman dan disintesis oleh tanaman. Tanin dibagi menjadi 2 kelompok yang pertama tanin yang mudah terhidrolisis merupakan polimer gallic atau ellagic acid yang berikatan ester dengan sebuah molekul gula, sedangkan tanin terkondensasi merupakan polimer senyawa flavonoid 18



dengan ikatan karbon-karbon (Waghorn & McNabb, 2003; Westendarp 2003). Tanin diketahui memiliki beberapa khasiat sebagai antidiare, antioksidan dan antibakteri. Tanin adalah kompononen dari zat organik yang sangat kompleks, terdiri dari senyawa fenolik yang sukar untuk dipisahkan dan sukar mengkristal, mengendapkan protein dari larutan dan bersenyawa dengan protein tersebut (Desmiaty, 2008). Tanin ditemukan pada hampir semua jenis tumbuhan, dimana bisa terdapat pada tumbuhan tingkat tinggi maupun yang tingkat rendah dengan kualitas dan kadar yang berbeda. Tanin memiliki sifat yang dapat larut pada air dan alkohol karena banyak mengandung fenol yang memiliki gugus OH, dapat mengikat logam berat, serta adanya zat yang bersifat antirayap dan antijamur (Carter et al., 1978). Gambar struktur kimia tanin.



Gambar 2.6 Struktur Kimia Tanin https://en.wikipedia.org/wiki/Tannin E. Fenolat Fenolat sebagian besar merupakan antioksidan yang dapat menetralkan reaksi oksidasi dari radikal bebas dimana fenolat ini dapat berperan merusak struktur sel dan berkontribusi terhadap penyakit dan penuaan. Peranan beberapa golongan senyawa fenol sudah diketahui, misalkan senyawa fenolik atau polifenolik merupakan suatu senyawa antioksidan alami yang terdapat pada tumbuhan. Senyawa tersebut memiliki sifat multifungsional dan berperan sebagai antioksidan karena



19



mempunyai kemampuan sebagai pereduksi dan penangkap radikal bebas (Putra et al., 2016). “Uji fenolat dengan menggunakan pereaksi FeCl3 menunjukkan hasil yang positif yang ditunjukkan dengan terjadinya perubahan warna dari warna hijau kecoklatan menjadi warna biru kehitaman dan terkandung senyawa polifenol” (Harborne, 1987 di sitasi Putra et al., 2016)



Gambar 2.7 struktur kimia fenolat (https://id.wikipedia.org/wiki/Fenol) 2.4



Inflamasi



2.4.1 Definisi Inflamasi/radang adalah merupakan suatu respons pertahanan tubuh yang melibatkan sel tubuh, pembuluh darah, serta protein dan mediator lain dengan tujuan mengeliminasi penyebab utama jejas sel, demikian pula sel nekrotik dan jaringan sebagai akibat pengaruh awal , dan memulai proses pemulihan jaringan, tetapi radang itu sendiri bisa mengakibatkan kerusakan jaringan. Dimana Upaya dari radang untuk melakukan proteksi adalah dengan mengencerkan, merusak, atau menetralkan agen berbahaya (misalnya mikroba, toksin). Kemudian akan terjadi mekanisme untuk penyembuhan dan pemulihan daerah yang terkena jejas. Tanpa proses radang infeksi dapat berlanjut tanpa terkendali dan menyebabkan luka tidak akan sembuh. Dalam konteks infeksi, radang merupakan sebuah respon protektif dimana sebagai imunitas sejak lahir (Kumar et al., 2015).



20



Radang dapat membantu menghilangkan infeksi dan stimulus yang membahayakan lainnya dan memulai proses penyembuhan jaringan, reaksi



radang



dan



proses



penyembuhan



jaringan



dapat



juga



mengakibatkan kerugian. Dimana komponen dari reaksi radang yang dapat merusak dan mengeliminasi mikroba dan juga jaringan mati dapat mengakibatkan terjadinya jejas pada jaringan normal. Karena itu jejas dapat disertai dengan reaksi radang normal yang dapat menguntungkan, dimana kerusakan bisa menjadi dominan apa bila terjadi reaksi yang berlebihan misalnya pada (infeksi yang berat) yang berkepanjangan (misalnya, agen yang kebal eradikasi) atau tidak apabila tertuju pada antigen diri sendiri pada penyakit autoimun atau juga melawan antigen lingkungan yang biasanya tidak berbahaya misanya pada (kelainan alergi) dimana. Beberapa jenis dari penyakit manusia merupakan kelainan yang diakibatkan oleh radang yang tidak sesuai pada tempatnya, seringkali kronik. Sehingga, proses radang merupakan dasar untuk semua ilmu kodokteran klinis (Kumar et al., 2015). 2.4.2 Tipe inflamasi Pada umumnya inflamasi di bagi menjadi: 1. Inflamasi akut terjadi cepat dan memakan waktu yang singkat, dimana berlangsung mulai dari beberapa menit samapai dengan beberapa hari, dan dapat memeberikan gambaran yang khas timbul nya cairan, eksudasi protein plasma dan juga akumulasi leukosit netrofil yang banyak 2. Radang kronik terjadi secara bertahap, dalam waktu yang berlangsung lebih lama (hitungan hari hingga tahun), dan dapat di tandai dengan penimbunan limfosit dan makrofag seperti poliferasi vaskular dan fibrosis (jaringan parut) (Kumar et al., 2015). Karakteristik utama dari inflamasi akut dan kronis, dimana dapat di bedakan pada jenis eksudat dan variabel morfologi : 1) Inflamasi serosa, dimana merupakan inflamasi yang ditandai dengan adanya cairan encer yang berlimpah, dimana hal ini bergantung pada daerah luka dimana dapat berasal dari serum



21



darah atau sekresi sel mesotel yang terhubung pada peritoneum, perikardium dan pleura 2) Inflamasi Fibrosa, dimana merupakan inflamasi yang ditandai dengan memproduksi eksudat protein plasma dalam jumlah yang besar, termasuk fibrin dan fibrinogen. Karakteristik dari repson inflamasi itu melibatkan rongga-rongga tubuh seperti perikardium, peritoneum dan pleura. Contoh : Karditis rheumatika, pneumonia 3) Inflamasi Kataral, merupakan inflamasi permukaan yang ditandai dengan terjadinya peningkatan sekresi mukus , pada mukosa terutama pada saluran pernafasan. Inflamasi ini dimana tampak pada penyakit flu dan berbagai bentuk kolitis. 4) Inflamasi Purulenta / supuratif, dimana merupan inflamasi yang ditandai dengan adanya produksi nanah dalam jumlah yang cukup banyak atau eksuda purulen, umumnya terjadi pada infeksi bakteri piogenik. Contohnya : Peritonitis supuratif, pleuritis supuratif. 5) Ulser, merupakan sebuah defek lokal terdapat pada permukaan organ atau jaringan, yang dihasilkan karena terkelupasnya jaringan nekrotik yang terinflamasi (Robbins et al., 2007). 2.4.3 Tanda-tanda inflamasi Inflamasi ditandai dengan adanya vasodilatasi pembuluh darah lokal yang menyebabkan terjadinya aliran darah setempat yang berlebihan, peningkatan permeabilitas kapiler. Inflamasi mengakibatkan terjadinya pembekuan cairan di dalam ruang interstisial yang disebabkan oleh fibrinogen dan protein lainnya yang bocor dari kapiler dengan jumlah yang cukup besar. Inflamasi juga dapat menyebabkan migrasi sebagian besar granulosit dan monosit ke dalam jaringan, pembengkakan sel jaringan (Kumar et al., 2015). Manifestasi eksternal dari radang, seringkali disebut sebagai tanda kardinal, adalah panas (kalor), warna kemerahan (rubor), bengkak (tumor), nyeri (dolor), dan hilangnya fungsi (functio laesia)



22



1) Panas (Kalor) Panas pada daerah inflamasi bisa disebabkan karena bertambah banyaknya



pengumpulan



darah



dan



mungkin



juga



bisa



disebabkan oleh pirogen yang menganggu pusat pengatur panas pada hipotalamus 2) Kemerahan (Rubor) Kemerahan terjadi pada fase awal dari inflamasi. Disebabkan karena terjadinya pelebaran pembuluh darah pada jaringan yang mengalami gangguan yang menyebabkan darah akan berkumpul pada daerah cedera jaringan akibat dari pelepasan mediator kimia tubuh. Histamin mendilatasi arteriol 3) Bengkak (Tumor) Pembengkakan merupakan fase ke 2 dari inflamasi. Dimana plasma akan merembes ke dalam jaringan intestisial pada tempat cedera. Kinin akan mendilatasi arteriol untuk meningkatkan permeabilitas kapiler. 4) Nyeri (Dolor) Nyeri di awali dengan terjadinya pembengkakan dan pelepasan dari mediator-mediator kimia diantaranya prostaglandin, bradikinin 5) Hilangnya fungsi (Functio laesa) kenyataan adanya perubahan, gangguan, kegagalan fungsi telah diketahui, pada daerah yang bengkak dan sakit disertai adanya sirkulasi yang abnormal akibat penumpukan dan aliran darah yang meningkat juga menghasilkan lingkungan lokal yang abnormal sehingga tentu saja jaringan yang terinflamasi tersebut tidak berfungsi secara normal (Price and Wilson, 2005). 2.4.4 Respon inflamasi akut Respon inflamasi akut ialah dimana terkumpulnya leukosit dan protein plasma di tempat jejas. Setelah sampai di tempat tersebut leukosit akan memusnahkan agen penyebab dan memulai proses pencernaan dan pembersihan jaringan nikrotik. Radang akut memiliki dua komponen utama.



23



Perubahan vaskular: merupakan perubahan pada rongga kaliber pembuluh yang dapat menyebabkan bertambahnya aliraan darah (vasodilatasi)



dan



perubahan



pada



dinding



pembuluh



yang



memungkinkan protein plasma keluar dari pembuluh darah (peningkatan permeabilitas vaskular). Dan juga dapat terjadi pengaktifan sel endotel, yang menyebabkan perlekatan leukosit meningkat dan migrasi leukosit melalui dinding pembuluh. Akibat pada sel: terjadi migrasi leukosit keluar dari sirkulasi dan akumulasi pada tempat cedera, dibarengi oleh pengaktifan leukosit, untuk mengeliminasi agen yang dapat merugikan. Leukosit utama dari radang akut (Kumar et al., 2015). 2.4.5 Stimulus radang akut Reaksi radang akut dapat di picu oleh beberapa stimulus : 1. Infeksi (bakteri, jamur, parasit, virus) merupakan penyebab radang tersering dan terpenting dalam klinis. 2. Benda asing (kotoran, serpihan, kotoran, jahitan, deposit kristal). 3. Nekrosis



jaringan



termasuk



iskemia



(seperti



pada



infark



miokardium) dan jejas fisis dan kimia. 4. Trauma (tajam atau tumpul) dan agen fisis dan kimia (misalnya jejas ternal, seperti luka bakar atau luka pembekuan; radiasi; toksisitas akibat pengaruh kimia lingkungan) akan mencedrai sel tubuh dan akan memicu reaksi radang. 5. Reaksi imun (juga disebut reaksi hipersensitif ) terhadap substansi lingkungan atau terhadap jaringan “sendiri”. Karena stimulus untuk respons radang ini tidak dapat dieliminasi atau dicegah, maka reaksi tersebut cendrung menetap, dengan gambaran reaksi radang kronik. Istilah “penyakit radang akibat reaksi imun” dipergunakan untuk kelompok kelainan ini (Kumar et al., 2015). 2.5



Obat Antiinflamasi



Dimana secara umum obat inflamasi dibagi menjadi 2 golongan yaitu: Obat antiinflamsi non-steroid dan Obat antiinflamsi steroid.



24



2.5.1 Obat anti-inflamsi non-steroid (OAINS) Silsilat dan obat serupa yang digunakan untuk mengobati penyakit rematik



memiliki



kemampuan



untuk



menekan



gejala



dan



tanda



peradangan. Obat-obat ini juga memiliki efek antipiretik dan analgesik, tetapi memiliki sifat anti-inflamasi yang menyebabkan golongan obat ini paling bermanfaat dalam penanganan penyakit nyeri yang berkaiatan dengan intensitas proses peradangan. (Katzung et al., 2012). Oleh karena itu Aspirin, OAINS orisinal, memiliki beberapa efek samping, dikembangkan banyak OAINS lainnya dalam upaya untuk mengurangi toksisitas aspirin (Katzung et al., 2012) 2.5.2 Kimia & farmakokinetika OAINS dikelompokan dalam beberapa kelas kimia. Keberagaman kimiawi



menghasilkan



keberagaman



karakteristik



farmakokinetik,



meskipun banyak perbedan dalam obat ini tetapi secara umum sifatnya sama, semua OAINS adalah asam organik lemah kecuali nabumeton merupakan prodrug keton yang dimetabolisasi menjadi obat aktif yang bersifat asam (Katzung et al., 2012). Sebagaian besar obat ini diserap dengan baik, tetapi makanan yang tidak substansial dapat mengubah ketersedian-hayati nya, dimana kebanyakan OAINS dimetabolisasi secara ekstensif sebagian oleh mekanisme fase I lalu diikuti oleh fase II kemudian diikuti oleh glukuronidasi langsung (fase II). Metabolisme OAINS berlanjut, pada umumya melalui family enzime P450 CYP3A atau CYP2C dihati. Ekskresi di ginjal merupakan rute terpenting eliminasi akhir, hampir semua obat mengalami ekskresi dan reabsobsi di empedu (sirkulasi enthero hepatik) dengan derajat yang bervariasi, kebanyakan OAINS terikat oleh protein (sekitar 98%), biasanya ke albumin. (Katzung et al., 2012). 2.5.3 Farmakodinamika Aktivitas anti-inflamasi OAINS terutama diperantarai oleh inhibisi biosintesis prostaglandin berbagai OAINS mungkin memiliki kerja tamabahan, termasuk inhibisi kemotaksis, penekanan produksi interleukin1, penekanan produksi radikal bebas dan superoksida, dan menggangu



25



proses-proses intra sel yang diperantarai oleh kalsium. Aspirin secara ireversibel mengasetilisasi dan menghambat siklo-oksigenase trombosit, sementara OAINS non-selektif-COX adalah inhibitor reversibel (Katzung et al., 2012). Untuk OAINS yang lebih lama, selektif untuk COX-1 versus COX2 bervariasi dan inkomplit, tetapi telah disintesis inhibitor selektif COX-2. Pada dosis biasa inhibitor COX-2 selektif tidak mempengaruhi fungsi trombosit. Dalam menguji darah lengkap manusia, aspirin, ibuprofen, indometasin, piroksikam, lebih efektif dalam menghambat COX-1. Efikasi obat-obat selektif COX-2 setara dengan OAINS lama, sementara keamanan saluran cerna meningkat. Di pihak lain, inhibitor selktif COX-2 mungkin meningkatkan insiden edema dan hipertensi (Katzung et al., 2012). OAINS mengurangi sensitivitas pembuluh terhadap bradikinin dan histamin, mempengaruhi produksi limfokin oleh limfosit T, dan memulihan vasodilatasi pada peradangan. Dengan derajat yang bervariasi, semua OAINS baru bersifat analgesik, anti-inflamasi, antipiretik dmana semuanya (kecuali obat selektif COX-2 dan silisilat non-asetilasi) menghamabat agregasi



trombosit.



OAINS



adalah



iritan



lambung



yang



dapat



menyebabkan tukak dan perdarahan saluran cerna, meskipun dalam golongan obat-obat baru cenderung lebih sedikit menyebabkan iritasi gastro intestinal dibandingkan aspirin, semua OAINS dapat menyebabkan hepatotoksisitas. Meskipun secara efektif menghambat peradangan, tidak terdapat bukti bahwa nerneda dengan obat seperti metotreksat dan DMARD lainya (Katzung et al., 2012). OAINS memiliki sejumlah kesamaan, meskipun tidak semua OAINS disetujui oleh FDA untuk seluruh ragam penyakit rematik, dimana sebagaian besar mungkin efektif pada rematoid artritis, spondiloartropati seronegatif (misalnya artritis psoriasis dan artritis yang berkaitan dengan inflamatory bowel deseas), osteoartritis, sindrom muskuloskletal lokal (misalnya keseleo, tegang/tertarik, nyeri punggung bawah), dan gout



26



(kecuali tolmetin, yang tampaknya tidak efektif pada gout) (Katzung et al.,2012). 2.5.4 Efek samping umum semua OAINS 1. Susunan saraf pusat : Nyeri kepala, tinitus, dan pusing bergoyang. 2. Kardiovaskular : Hipertensi, edema, retensi cairan dan meskipun jarang, infark miokardium, dan gagal jantung kongestif. 3. Saluran cerna : Nyeri abdomen, displasia, mual, muntah, dan meskipun jarang, tukak atau peradanagan. 4. Hematologik : Meskipun jarang, trombositopenia, neutropenia, atau bahkan anemia aplastik. 5. Ginjal



: Insufisiensi



ginjal, gagal



ginjal, hiperkalemia,



dan



proteinuria. 6. Hati : Kelainan tes fungsi hati dan jarang gagal hati. 7. Kulit : Ruam, semua jenis gatal. 8. Paru : Asma 2.5.5 Obat antiinflamasi steroid Golongan steroid bekerja dengan cara menghambat pelepasan prostaglandin melalui penghambatan metabolisme asam arakhidonat. Umumnya kortikosteroid dibedakan menjadi 2 golongan besar, yaitu mineralokortikoid dan glukokortikoid. Efek terapeutik glukokortikoid yang paling penting adalah memiliki kemampuan dalam mengurangi respon peradangan secara deramatis. Diman efek ini diperoleh dari proses penurunan dan penghambatan limfosit serta makrofag perifer A2 secara tidak langsung yang menghambat pelepasan dari prekusor prostaglandin, leukotrien dan asam arakidonat (Mycek, 2001) Setelah pemberian dosis tunggal glukokortikoid akan bekerja singkat dengan konsentrasi neutrofil meningkat yang menyebabkan penurunan dari jumlah sel pada daerah peradangan (Mycek, 2001). 2.6



Obat Standar



2.6.1 Aspirin Pemakiannya yang telah lama dan ketersediaannya tanpa resep menyebabkan aspirin mulai kehilangan ke populerannya di bandingkan



27



dengan OAINS yang lebih baru. Aspirin kini jarang digunakan sebagai obat antiinflamasi. Farmakokinetika asam salisilat adalah suatu asam organik sederhana dengan pK a 3,5. Salisilat cepat di serap di lambung dan usus halus bagian atas menghasilkan kadar salisilat plasma puncak dalam 1-2 jam. Aspirin di serap secara utuh dan cepat dihidrolisis (waktu-paruh serum 15 menit ) menjadi asam asetat dan salisilat oleh esterase di jaringan dan darah. Salisilat terikat secara non-linier ke albumin. Alkalinisasi urin meningkatkan laju ekskresi salisilat bebas dan konjugatkonjugatnya yang larut air (Katzung et al., 2012). Mekanisme kerja aspirin secara ireversibel menghambat COX sedemikian sehingga efek anti-trombosit aspirin menetap 8-10 hari. Di jaringan lain, sintesis COX baru mengantikan enzim yang inaktif sehingga dosisi bisa menghasilkan lama kerja 6-12jam.Pemakian klinis studi-studi epidimiologik menyarankan bahwa pemakian jangka panjang aspirin pada dosis rendah menyebabkan penurunan insidens kangker kolon, mungkin berkaitan dengan efeknya dalam menghambat COX (Katzung et al., 2012). Efek samping secara umum berupa : 1. Susunan saraf pusat : Nyeri kepala, tinitus dan pusing bergoyang 2. Kardiovaskular : Retensi cairan, hipertensi, edema, dan meskipun jarang, infark miokardium, dan gagal jantung kongestif 3. Saluran cerna : Nyeri abdomen, displasia, mual, muntah, dan, meskipun jarang tukak atau perdarahan. 4. Hematologik : Meskipun jarang, trombositopenia, neutropenia, atau bahkan anemia aplastik. 5. Hati : Kelainan tes fungsi hati dan, jarang gagal hati. 6. Paru : Asma. 7. Kulit : Ruam,semua jenis, gatal. 8. Ginjal : Insufisiensi ginjal, gagal ginjal, hiperkalemia, dan proteinuria



28



2.7



Karagenin Karagenin merupakan iritan yang umum digunakan untuk pengujian



efek antiinflamasi yang beragam jenisnya dimana salah satunya karagenin. Karagenin merupakan polisakarida berasal dari ekstraksi tanaman rumput laut (dari family Gigartina, Eucheuma, Chondrus. Bentuknya dapat berupa serbuk yang warna putih hingga kuning kecoklatan, dimana bentuknya juga ada yang berupa butiran kasar samapai dengan serbuk yang halus baiasanya terasa berlendir di lidah dan tidak berbau (Wattimena et al., 1991). Karagenin merupakan suatu polisakarida sulfat dengan molekul besar sebagai induktor inflamasi, karagenin dapat dibagi menjadi 3 jenis yaitu iota karagenin, lamda karagenin dan kappa karaginan sifat nya larut dengan air dengan suhu 80c. Karagenin yang digunakan paling sering adalah jenis kappa karagenin karena mudah ditemukan dan dapat menyababkan edema yang berarti, walaupun melarutkannya membutuhkan waktu yang lebih lama dibandingkan lamda karagenin (Corsini et al., 2005). Karagenin digunakan sebagai penginduksi radang karena karagenin memiliki beberapa keuntungan



seperti



tidak



menimbulkan



kerusakan



jaringan



dan



memberikan respon, tidak meninggalkan bekas dan lebih peka terhadap obat antiinflamasi dibandingkan dengan senyawa iritan lainnya (Siswanto and Nurulita, 2005). Pada proses pembentukan edema terdapat tiga fase. Fase yang pertama merupakan pelepasan dari histamin dan serotonin selama 90 menit. Fase ke dua pelepasan dari beradikinin yang berlangsung 1,5 sampai dengan 2,5 jam setelah induksi. Fase ke tiga terjadi pelepasan prostaglandin yang berlangsung 3 jam setelah induksi. Karagenin akan menginduksi cedera sel dengan melepaskan mediator-mediator yang mengawali terjadinya proses inflamasi. Edema yang diakibatkan oleh induksi dari karagenin efek nya dapat bertahan selama kurang lebih 6 jam dan berangsur–angsur berkurang dalam kurun waktu 24 jam. Edema yang diakibatkan oleh injeksi karagen diperkuat oleh mediator inflamasi terutama PGE1 dan PGE2 dengan cara meningkatkan permeabilitas



29



vaskuler. Bila terjadi peningkatan dari permeabilitas vaskuler maka 18 protein-protein plasma akan menuju ke jaringan yang luka sehingga akan terjadilah edema (Corsini et al., 2005). 2.8



Tinjauan Tentang Tikus



2.8.1 Kasifikasi tikus putih (Rattus norvegicus)



Gambar 2.8 Tikus rattus norvegicus Galur Wistar (Robirukmana, 2012) 2.8.2 Taksonomi Sistematika



taksonomi



hewan



pada,



Rattus



norvegicus



ditaksonomikan sebagai berikut: Kingdom



: Animalia



Filum



: Chordata



Kelas



: Mamalia



Ordo



: Rodentia



Sub-ordo



: Myomorpha



Famili



: Muridae



Genus



: Rattus



Spesies



: Rattus norvegicus



2.8.3 Morfologi Tikus putih (Rattus norvegicus) sering digunakan sebagai hewan percobaan karena memiliki beberapa keunggulan dibandingkan hewan percobaan lain, yaitu (Smith and Mangkoewijojo, 1988): 1. Siklus reproduksinya berlangsung sangat singkat sehingga hasil uji cepat diketahui



30



2. Masa aktivasi reproduksinya sangat panjang 3. Mudah untuk diberi perlakuan dan harganya relatif murah 4. Reaksi-reaksi di dalam tubuhnya mirip dengan manusia 5. Ukurannya seragam dan mudah dikawinkan 6. Darah yang dapat diambil cukup banyak 7. Data biologinya sudah banyak yang dipublikasikan sehingga dapat digunakan sebagai bahan acuan Tikus putih (Rattus norvegicus) galur Wistar memiliki ciri spesifik dan bebas dari penyakit menular manusia. Ciri-ciri tikus putih (Rattus norvegicus) Galur Wistar adalah ukurannya lebih kecil, berat badannya lebih ringan yaitu 150-200 gram untuk tikus dewasa (Sharp and Regina, 1998). Penampakan fisik secara umumnya adalah berbulu di seluruh tubuh, kecuali bagian telinga, bulu ekor lebih pendek dari pada bulu di daerah kepala dan tubuhnya. Rata-rata ukuran panjang tubuh dari hidung sampai ujung ekor adalah 399 mm dengan panjang ekor 187 mm (Sharp and Regina, 1998).



31



BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL DAN HIPOTESIS 3.1



Kerangka Konseptual



Tikus putih jantan GALUR WISTAR Rangsangan



EKSTRAK Daun kelor (moringa oleifera) & Daun Salam (Syzygium polyanthum wight walp)



Gangguan membran sel



Flavanoid Saponin



Fosfolipid



Fosfolipase A2 Asam arakidonat Siklooksige nase



Lipoksigenase



Leukotrien Leukotrien Prostaglandin



LTB44



LCT44/D /E4 4 4



Atraksi/ Aktivasi fagosit



Tromboksan



Modulasi leukosit



Perubahan permeabilitas vaskuler, kontriksi bronchial, peningkatan sekresi.



Inflamasi Keterangan:



Prostasiklin



Bronkospasme, kongesti, penyumbatan mukus



Menghambat



32



Inflamasi



3.2



Penjelasan Kerangka Konseptual Induksi karagenin agar menyebabkan edema dilakukan pada kaki



hewan uji, dalam hal ini tikus yang disuntikkan suspensi karagenin secara subplantar. Volume edema kaki diukur dengan menggunakan alat plestismometer. Aktivitas antiinflamasi yang ditunjukkan oleh kemampuan kombinasi ekstrak etanol daun kelor dan daun salam dalam mengurangi udem yang di induksi pada telapak kaki tikus. Inflamasi dimulai saat sel mast berdegranulasi dan melepaskan histamin, serotonin, bradikinin, prostaglandin dan bahan kimia lainya. Histamin merupakan mediator kimia pertama yang di lepaskan dari sekian banyak mediator lainnya, dilepaskan oleh basofil dan trombosit. Pelepasan hisatamin ini mengakibatkan vasodilatasi pembuluh darah sehingga mengakibatkan peningkatan aliran darah dan terjadinya peningkatan permeabilitas kapiler pada awal inflamasi. Bradikinin dan kalidin bereaksi lokal menimbulkan rasa sakit, vasodilatasi, meningkatkan permeabilitas kapiler dan berperan meningkatkan potensi prostaglandin (Arief, 1999). Mediator yang dilepaskan saat inflamasi adalah faktor kemotaktik neutrofil dan eusinofil, dilepaskan oleh leukosit (neutrofil dan eusinofil) yang dapat menarik sel-sel ke daerah cedera. Prostaglandin juga dilepaskan terutama seri E (Corwin, 2008). Membran sel mengalami kerusakan, fosfolipid akan diubah menjadi asam arakidonat dikatalisis oleh fosfolipase A 2, dimana obat kortikosteroid dapat menghambat fosfolipase A 2. Asamarakidonat ini selanjutnya akan dimetabolisme oleh lipooksigenase dan siklooksigenase (COX). Pada jalur siklooksigenase inilah prostaglandin disintesis. Prostaglandin dapat meningkatkan permeabiltas kapiler dan merangsang reseptor nyeri. Sintesis prostaglandin ini dapat dihambat oleh golongan obat AINS dan juga oleh daun kelor dan daun salam yang mengandung dua komonen aktif yaitu flavonoid dan saponin yang berperan dalam menghambat arakidonat



enzim menjadi



siklooksigenase prostaglandin,



sehingga prostasiklin,



perubahan dan



asam



tromboksan



terganggu. Leukotrien merupakan produk akhir dari metabolisme asam



33



arakidonat pada jalur lipooksigenase. Senyawa ini dapat meningkatkan permeabilitas kapiler dan meningkatkan adhesi leukosit pada pembuluh kapiler selama cedera atau infeksi. 3.3



Hipotesis



H0



: Ekstrak daun kelor (Moringa oliefera L) dan daun salam



(Syzygium polyanthum wight walp) tidak berpengaruh terhadap edema kaki tikus putih jantan galur wistar (Rattus norvegicus) yang di induksi karagenin. H1



: Ekstrak daun kelor (Moringa oliefera L) dan daun salam



(Syzygium polyanthum wight walp) berpengaruh terhadap edema kaki tikus putih jantan galur wistar (Rattus norvegicus) yang di induksi karagenin.



34



BAB 4 METODE PENELITIAN 4.1



Rancangan Penelitian



4.1.1 Desain penelitian Desain penelitian ini adalah rancangan penelitian eksperimental laboratorik dengan metode penelitian yang digunakan adalah metode Rat hind paw edema atau pembentukan radang buatan pada telapak kaki tikus putih jantan galur wistar, yang bertujuan mengetahui pengaruh pemberian kombinasi ekstrak daun salam dan daun kelor dalam menurunkan peradangan pada tikus putih jantan galur wistar sehat yang mengalami peradangan. 4.1.2 Metode penelitian Pada metode penelitian ini digunakan 5 kelompok tikus putih jantan galur Wistar, yaitu: kelompok 1 adalah kelompok kontrol negatif (P1). Kelompok 2 dengan kontrol positif (P2). Kelompok perlakuan 1 (P3). Kelompok perlakuan 2 (P4) dan kelompok perlakuan 3 (P5).



P



S



R



P1



O P1



P2



O P2



P3



O P3



P4



O P4



P5



O P5



Gambar 4.1 Rancangan Penelitian Keterangan :



35



P



= Populasi



S



= Sampel tikus



R



= Randomisasi



O



= Observasi



P1



= Kelompok kontrol negatif yang diberi karagenin 1% 1 ml subplantar dan di berikan CMC-Na 1%.



P2



= Kelompok kontrol positif yang diberi karagenin 1% 1 ml subplantar dan diberikan aspirin 100 mg/KgBB



P3



= Kelompok perlakuan yang diberi karagenin 1% 1 ml subplantar dan diberikan kombinasi ekstrak daun salam dan daun kelor konsentrasi 300 mg



P4



= Kelompok perlakuan yang diberi karagenin 1% 1 ml subplantar dan diberikan kombinasi ekstrak daun salam dan daun kelor konsentrasi 600 mg



P5



= Kelompok perlakuan yang diberi karagenin 1% 1 ml subplantar dan diberikan kombinasi ekstrak daun salam dan daun kelor konsentrasi 750 mg



4.2



Populasi, Sampel, Besar Sampel dan Teknik Pengambilan



Sampel 4.2.1 Populasi Populasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus putih (Rattus norvegicus) jantan galur Wistar 4.2.2 Sampel Sampel yang digunakan adalah tikus putih jantan galur wistar berumur 2-3 bulan dengan berat badan antar 150-200 gram sebanyak 30 ekor yang diperoleh dari Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Univesitas Hang Tuah Surabaya.



36



4.2.3 Besar sampel Sampel penelitian ini ditentukan menurut rumus (Federer, 1966). untuk uji eksperimental, yaitu: (k-1) (n-1) ≥ 15 dimana (k) adalah jumlah kelompok perlakuan, dan (n) adalah jumlah sampel perkelompok perlakuan (k - 1) (n - 1) ≥ 15 (5 – 1) (n – 1) ≥ 15 4 (n – 1) ≥ 15 4n – 4 ≥ 15 4n ≥ 19 N ≥ 4,75 n~5 Untuk mengatasi resiko sample drop out, maka jumlah sampel setiap kelompok ditambah 10%, sehingga n = 5+10% x 5 n= 5 + 0.5 n = 5,5 n=6 Dalam penelitian ini, tikus dibagi dalam dua kelompok kontrol perlakuan dan tiga kelompok perlakuan, dan jumlah sampel per kelompok 6 ekor, sehingga didapat jumlah sampel 30 ekor tikus. 4.2.4 Teknik pengambilan sampel Teknik Pengambilan sample penelitian secara acak dengan menggunakan metode Simpel Random Sampling atau rancangan acak sederhana. Yang dimaksudkan dengan pengambilan sampel acak sederhana adalah pengambilan sampel sedemikian rupa sehingga setiap individu mempunyai kesempatan yang sama untuk diambil sebagai sampel. Cara ini merupakan cara paling sederhana (Budiarto, 2004). Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus putih (Rattus norvegicus) jantan dewasa yang masuk dalam 3 kriteria:



37



1.Kriteria Inklusi A.Jenis tikus putih (Rattus norvegicus) B.Umur ± 10-12 minggu C.Berat badan 150-200 gram D.Jenis kelamin jantan E.Kondisi fisik sehat baik selama masa adaptasi maupun selama masa penelitian yang ditandai dengan mata jernih, bulu mengkilap, nafsu makan baik, gerakan aktif 2.Kriteria eksklusi A.Tikus tampak sakit sebelum perlakuan (gerakan tidak aktif) B.Tampak kelainan anatomi atau cacat 3.Kriteria drop out A.Sakit , cacat , atau mati dalam masa penelitian / perlakuan B.Menderita penyakit lain, disamping yang disebabkan oleh perlakuan 4.3



Variabel Penelitian



4.3.1 Klasifikasi variabel Variabel Bebas : Kombinasi ekstrak etanol daun kelor dan daun salam Variabel terikat



: Edema kaki tikus



Variabel kendali : 1. Diet hewan coba 2. Jenis hewan coba 3. Jenis kelamin,berat badan hewan coba 4. Kesehatan fisik hewan coba 5. Kandang hewan coba 6. Waktu



yang



perlakuan



38



digunakan



untuk



pemberian



4.3.2 Definisi operasional variabel No 1



Tabel 4.1 Definisi operasional Variable Skala Volume edema Rasio



keterangan edema  adalah



Volume



pembengkakan



yang



ukuran



diakibatkan



oleh



akumulasi cairan didalam jaringan yang menyebabkan



pergelangan



membengkak. Pengukuran edema 2



Ekstrak daun salam



Rasio



dan daun kelor



yang



diukur



kaki



besar



volume



menggunakan



platismometer Merupakan ekstrak dari daun kelor (moringa oliefera L) dan daun salam polyanthum



wight



Walp)



yang



(Syzygium nantinya



diberikan kepada hewan coba secara peroral dengan dosis 300 mg/kgBB, 600 mg/kgBB dan 750 mg/kgBB 3



Aspirin



Rasio



Aspirin adalah obat yang umum digunakan untuk mengatasi rasa sakit, menurunkan demam, atau peradangan. Pemberian aspirin



4.4



peroral dengan sonde Bahan Dan Instrumen Penelitian



4.4.1 Bahan penelitian a. Kombinasi ekstrak etanol daun salam 50% dan daun kelor 50% (daun dari daerah badung Bali) b. Aspirin merek PT Brataco c. Suspensi karagen 1% dalam larutan salin normal d. Aquades steril e. CMC-NA f. Salin normal 4.4.2 Alat penelitian a. Kandang tikus b. Sonde lambung c. Dispossible syringe 39



d. Stopwatch e. Beaker glass f. Timbangan g. Spidol h. Pletismometer air raksa 4.5



Lokasi Dan Waktu Penelitian



4.5.1 Lokasi penelitian Penelitian dilakukan di Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas Hang Tuah Surabaya. 4.5.2 Waktu penelitian Waktu penelitian dilaksanakan dalam 6 bulan dari bulan agustus 2018 sampai bulan desember 2018, dimulai dari studi pustaka untuk dasar teori, pelaksanaan penelitian, analisis data sampai penulisan laporan penelitian. 4.6



Prosedur Penelitian



4.6.1 Tahapan persiapan 4.6.1.1 Persiapan hewan coba Dimulai dengan pemilihan hewan coba yang sesuai dengan kriteria penelitian. Selanjutnya hewan coba diadaptasikan pada lingkungan yang relatif sama deangan pemberian pakan standar dan minimum. Kandang yang digunakan memiliki ukuran panjang 40cm, lebar 30cm dan tinggi 15cm. Kandang tidak boleh sempit agar tidak membatasi pergerakan hewan coba ini dan menambah stress hewan coba. Kandang ditempatkan pada ruangan yang cukup udara dan cahaya agar tidak lembab, jauh dari kebisingan dan paparan matahari secara langsung. Hewan coba yang telah terpilih secara acak dikelompokan menjadi 5 kelompok, yaitu kelompok kontrol negatif dan kelompok kontrol positif,



dan perlakuan.



Mereka ditempatkan pada kandang yang terpisah. 4.6.1.2 Pembuatan kombinasi ekstrak etanol daun kelor (moringa oliefera) dan daun salam (Syzygium polyanthum wight Walp) Pembuatan kombinasi ekstrak etanol daun kelor dan daun salam dengan daun kelor sebanyak 3 kg dan daun salam 3kg, dicuci dengan air



40



bersih yang mengalir dan selanjutnya dilakukan sortasi basah untuk memisahkan daun yang masih segar. Daun kelor dan daun salam kemudian ditiriskan dan disimpan dalam wadah tertutup. Daun kelor dan daun salam dikeringkan di dalam oven pada suhu 40⁰C sampai kering dan kemudian diukur kadar airnya dengan alat moisture balance. Simplisia daun kelor dan daun salam kering diblender dan diayak menggunakan ayakan no 40 Mesh. Serbuk yang diperoleh selanjutnya digunakan untuk pembuatan ektrak etanol daun kelor dan daun salam. Proses maserasi simplisia daun kelor dan daun salam dilakukan dengan merendam serbuk kombinasi daun kelor dan daun salam dengan etanol absolute dalam bejana maserasi. Bejana maserasi ditutup dan dibiarkan selama 3-5 hari serta diletakkan pada tempat yang terlindung dari sinar matahari langsung. Selama proses perendaman, rendaman diaduk beberapa kali dengan tujuan untuk meningkatkan efektifitas proses difusi senyawa terlarut ke dalam cairan penyari. Campuran simplisia dan cairan penyari disaring dan diperas hingga diperoleh hasil maserat pertama. Ampas yang sudah diperas direndam kembali dengan etanol selama tiga hari hingga diperoleh maserat kedua. Maserat kedua kemudian digabungkan dengan maserat pertama. Maserat yang diperoleh didiamkan selama semalam dan diendapkan. Maserat dipekatkan dengan menggunakan rotarry evaporator pada suhu 40⁰C sehingga diperoleh kombinasi ekstrak daun kelor dan daun salam kental. 4.6.1.3 Pembuatan sediaan karagenin Sediaan karagenin yang akan digunakan yaitu karagenin 1% yang dibuat dengan cara mencampurkan 1 g karagenin dengan larutan normal saline sampai volumenya 100 ml. 4.6.1.4 Pembuatan larutan CMC-Na 1% Sebanyak 1 g CMC-Na diberi air panas sebanyak 5 ml, biarkan selama 30 menit hingga diperoleh massa yang transparan, digerus lalu diencerkan dengan air sampai dengan volumenya 100 ml.



41



4.6.1.5 Pembuatan sediaan aspirin Cara membuat larutan aspirin: 100 mg aspirin digerus sampai homogen lalu diberi CMC-Na1% sampai dengan volume seluruhnya 10 ml. 4.6.1.6 Penghitungan dosis Dosis aspirin 100 mg/kgBB (Risna et al., 2015). Dan suspensi ekstrak kombinasi etanol daun salam dan daun kelor yang akan dibuat adalah 300 mg/kgBB, 600 mg/kgBB dan 750 mg/kgBB (Presty 2016). a. Cara pembuatan suspensi ekstrak kombinasi etanol daun salam dan daun kelor : Timbang 300 mg, 600 mg, dan 750 mg ekstrak kombinasi etanol daun salam dan daun kelor, masing-masing dilarutkan sampai dengan volume 8 ml suspensi CMC-Na 1% (Ritschel, 1974). b. Berapa volume suspensi ekstrak kombinasi etanol daun salam dan daun kelor (KEEDKDDS) yang akan diberikan pada Tikus ? Berat Tikus = 200 g =



200 g x 100 mg = 20 mg 1000 g



Jumlah KEEDKDDS dosis 300 mg/kg bb =



200 g x 300 mg = 60 mg 1000 g



Jumlah KEEDKDDS dosis 600 mg/kg bb =



200 g x 600 mg = 120 mg 1000 g



Jumlah KEEDKDDS dosis 750 mg/kg bb =



200 g x 750 mg = 150 mg 1000 g



Jumlah Aspirin dosis 100 mg/kg bb



42



4.7



Tahap pelaksanaan penelitian 



Mula-mula semua hewan uji dipuasakan 12-18 jam. Pengosongan lambung bermanfaat terhadap proses absorbs obat. Keberadaan makanan dalam gastric seringkali mengganggu proses absorbsi, sehingga terjadi manipulasi efek obat.



 Salah satu kaki belakang tikus diberi tanda dengan spidol, kemudian diukur volumenya dengan cara mencelupkannya ke dalam tabung air raksa pada alat platismometer sampai dengan batas tanda tersebut kemudian diukur volume awal (V0) 



Tikus dimasukkan ke dalam 5 kelompok  Kelompok 1 (6 ekor tikus) sebagai kontrol negatif di suntikan karagenin 1% pada telapak kaki belakang tikus secara subplantar sebanyak 1 ml di diamkan selama 90 menit lalu diberikan CMC-Na 1%.  Kelompok 2 (6 ekor tikus) sebagai kontrol positif disuntikan karagenin 1% pada telapak kaki belakang tikus secara subplantar sebanyak 1 ml di diamkan selama 90 menit lalu diberikan aspirin 100 mg/kgBB tikus putih  Kelompok 3 (6 ekor tikus) sebagai kelompok perlakuan 1 di suntikan karagenin 1% pada telapak kaki belakang tikus secara subplantar sebanyak 1 ml di diamkan selama 90 menit lalu diberikan kombinasi ekstrak daun salam dan daun kelor 300 mg/kgBB tikus putih  Kelompok 4 (6 ekor tikus) sebagai kelompok perlakuan 2 di suntikan karagenin 1% pada telapak kaki belakang tikus secara subplantar sebanyak 1 ml di diamkan selama 90 menit lalu diberikan kombinasi ekstrak daun salam dan daun kelor 600 mg/ kgBB tikus putih 



Kelompok 5 (6 ekor tikus) sebagai kelompok perlakuan 3 di suntikan karagenin 1% pada telapak kaki belakang tikus secara subplantar sebanyak 1 ml di diamkan selama 90



43



menit lalu diberikan kombinasi ekstrak daun salam dan daun kelor 750 mg/ kgBB tikus putih 



Pada menit 60, 120, 180 dan 240 volume kaki belakang tikus diukur menggunakan plestismometer air raksa dengan cara mencelupkan telapak kaki belakang tikus ke dalam alat tersebut sampai tanda yang telah dibuat dan hasilnya dicatat.



4.7.1 Terminasi Setelah penelitian selesai, hewan coba di euthanasia pada hari ke – 7 dan dilakukan terminasi. Hal ini harus dilakukan karena setelah penelitian hewan coba dapat mengalami kecacatan. Hewan coba di euthanasia



menggunakan



Ketamine



HCl,



kemudian



dilakukan



pengambilan kulit. Sisa tubuh hewan coba dikirim ke incinerator Rumah Sakit Angkatan Laut Dr. Ramelan Surabaya untuk terminasi. 4.8



Tahap Analisis Data Data yang diperoleh dari pengukuran volume edema telapak kaki



tikus setiap waktu pengamatan pada semua kelompok ditabulasi. Ada atau tidaknya efek antiinflamasi. Menghitung persentase penghambatan edema dengan rumus (Mogosan and Munteanu 2008): % penghambatan edema = (1 –



X Substance ) x 100 % X Control



Keterangan : X substance = volume rerata telapak kaki tikus dalam kelompok kontrol (ml) X control X substance = X control



volume



rerata



telapak



kaki



tikus



dalam



kelompok



perlakuan(ml) Dari hasil perhitungan tersebut data akan dibandingkan dengan uji statistik. Sebelum melakukan uji statistik, terlebih dahulu dilakukan uji normalitas



Kolmogorov-Smirnov



untuk



mengetahui



data



tersebut



berdistribusi normal atau tidak, serta uji homogenitas Levene test untuk mengetahui apakah data memiliki varian yang homogen dan berasal dari varian yang sama. Data terdistribusi normal dan homogen( P>0,05) maka



44



dilanjutkan dengan uji statistik parametrik One Way Anova dengan tingkat kepercayaan (95%), dan dilanjutkan dengan uji LSD untuk mengetahui manakah diantara rata-rata perlakuan tersebut yang berbeda nyata satu dengan yang lain. 4.9



Kerangka Operasional Penelitian 30 Ekor Tikus Putih



Tikus di puasakan 12-18 jam



Diukur volume awal kaki tikus



Suntikan Karagenin 1%



Tunggu 90 menit



Diukur volume bengkak kaki tikus



Kelompok III Kelompok I Kontrol (-) diberi CMC-NA 1%



Kelompok II



Suspensi



Kontrol (+)



Kombinasi



Suspensi



ekstrak



Aspirin



etanol daun



100



salam dan



mg/kgBB



daun kelor



Kelompok IV Suspensi Suspensi Kombinasi Kombinasi ekstrak ekstrak etanol etanol daun daun salam dan daun daun kelor kelor 600 600 mg/kgBB mg/kgBB



300 mg/kgBB



Pengukuran volume kaki pada menit ke 60, 120, 180, 240 setelah di induksi karagenin



45 Data Analisa



Kelompok Kelompok V V Suspensi Kombinasi ekstrak ekstrak etanol etanol daun daun salam salam dan dan daun daun kelor kelor 750mg /kgBB



46



BAB 5 HASIL PENELITIAN Penelitian



ini



dilakukan



di



Laboratorium



Biokimia



Fakultas



Kedokteran Universitas Hang Tuah Surabaya, menggunakan sampel 30 ekor tikus putih (Rattus norvegicus) jantan galur Wistar berumur 2-3 bulan, pengukuran volume edema kaki dilakukan 6 kali yaitu sebelum diinduksi karagenin, 90 menit sesudah diinduksi karagenin, 90+60 menit, 90+120 menit, 90+180 menit, dan 90+240 menit sesudah diinduksi karegenin, sedangkan kelompok perlakuan dibagi menjadi 5 kelompok, yaitu: 1. Kelompok kontrol negatif: Kelompok kontrol negatif yang diberi karagenin 1% 1ml subplantar dan diberikan CMC-NA 1%. 2. Kelompok kontrol positif: Kelompok kontrol positif yang diberi karagenin 1% 1ml subplantar dan diberikan aspirin 100 mg/kgBB. 3. Kelompok perlakuan 1: Kelompok perlakuan yang diberi karagenin 1% 1ml subplantar dan diberikan kombinasi ekstrak daun salam dan daun kelor konsentrasi 300 mg/kgBB 4. Kelompok perlakuan 2: Kelompok perlakuan yang diberi karagenin 1% 1ml subplantar dan diberikan kombinasi ekstrak daun salam dan daun kelor konsentrasi 600 mg/kgBB 5. Kelompok perlakuan 3: Kelompok perlakuan yang diberi karagenin 1% 1ml subplantar dan diberikan kombinasi ekstrak daun salam dan daun kelor konsentrasi 750mg/kgBB



47



5.1 Hasil Volume Edema Pada Hewan Coba Yang Diberi Beberapa Kelompok Perlakuan Tabel 5.1 Volume edema hewan coba Kelompok perlakuan Tikus



Sebelum diinduksi karagenin



Volume Udema Pada Kaki Tikus 90 menit Setelah



90 + 60



90 + 120



90 + 180



90 + 240



Induksi



menit



menit



menit



menit



karagenin



Rata – rata Kontrol



0,027



0,046



0,045



0,042



0,042



0,04



0,027



0,047



0,04



0,036



0,034



0,031



0,023



0,047



0,043



0,039



0,034



0,029



0,032



0,044



0,041



0,042



0,037



0,035



0,029



0,052



0,046



0,047



0,037



0,033



negatif Rata – rata Kontrol positif Rata – rata Perlakuan 1 Rata – rata Perlakuan 2 Rata – rata Perlakuan 3



Berdasarkan tabel 5.1 dapat diketahui rerata volume edema sebelum diinduksi karagenin pada kelompok kontrol negatif sebesar 0,027, volume edema 90 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,046, volume edema 90+60 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,045, volume edema 90+120 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,042, volume edema 90+180 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,042, dan volume edema 90+240 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,04. Sedangkan rerata volume edema sebelum diinduksi karagenin pada kelompok kontrol positif sebesar 0,027, volume edema 90 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,047, volume edema 90+60 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,04, volume edema 90+120 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,036, volume edema 90+180 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,034, dan volume edema 90+240 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,031.



48



Dan rerata volume edema sebelum diinduksi karagenin pada kelompok perlakuan 1 sebesar 0,023, volume edema 90 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,047, volume edema 90+60 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,043, volume edema 90+120 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,039, volume edema 90+180 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,034, dan volume edema 90+240 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,029. Dan rerata volume edema sebelum diinduksi karagenin pada kelompok perlakuan 2 sebesar 0,032, volume edema 90 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,044, volume edema 90+60 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,041, volume edema 90+120 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,042, volume edema 90+180 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,037, dan volume edema 90+240 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,035. Dan rerata volume edema sebelum diinduksi karagenin pada kelompok perlakuan 3 sebesar 0,029, volume edema 90 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,052, volume edema 90+60 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,046, volume edema 90+120 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,047, volume edema 90+180 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,037, dan volume edema 90+240 menit setelah diinduksi karagenin sebesar 0,033. Untuk hasil yang lebih jelas rerata volume edema kaki tikus sebelum diinduksi karagenin, 90 menit setelah diinduksi karagenin, 90+60 menit setelah diinduksi, 90+120 menit setelah diinduksi, 90+180 menit setelah diinduksi, dan 90+240 menit setelah diinduksi karagenin terhadap pemberian ekstrak etanol daun kelor (moringa oleifera) dandaun salam (sygium polyanthumsyz) pada kelompok kontrol negatif, kontrol positif,



49



perlakuan 1, perlakuan 2, dan prlakuan 3 dapat dilihat pada Grafik 5.1.



0.055 0.050 0.045 0.040 kontrol negatif kontrol positif perlakuan 1 perlakuan 2 perlakuan 3



0.035 0.030 0.025 0.020 awal



90 menit setelah induksi karegenin



90 + 60 menit setelah induksi



90 + 120 menit setelah induksi



90 + 180 menit setelah induksi



90 + 240 menit setelah induksi



Gambar 5.1 Grafik Rerata volume edema kaki kelompok perlakuan terhadap waktu setelah diinduksi karagenin Keterangan : 1. Kelompok kontrol negatif: Kelompok kontrol negatif yang diberi karagenin 1% 1ml subplantar dan diberikan CMC-NA 1%.. 2. Kelompok kontrol positif: Kelompok kontrol positif yang diberi karagenin 1% 1ml subplantar dan diberikan aspirin 100 mg/kgBB. 3. Kelompok perlakuan 1: Kelompok perlakuan yang diberi karagenin 1% 1ml subplantar dan diberikan kombinasi ekstrak daun salam dan daun kelor konsentrasi 300 mg/kgBB. 4. Kelompok perlakuan 2: Kelompok perlakuan yang diberi karagenin 1% 1ml subplantar dan diberikan kombinasi ekstrak daun salam dan daun kelor konsentrasi 600 mg/kgBB. 5. Kelompok perlakuan 3: Kelompok perlakuan yang diberi karagenin 1% 1ml subplantar dan diberikan kombinasi ekstrak daun salam dan daun kelor konsentrasi 750 mg /kgBB.



50



5.1.1 Volume edema sebelum diinduksi karagenin hewan coba antar kelompok perlakuan



Rerata Volume Edema Sebelum diinduksi karagenin K (-)



0.03



K (+)



0.03



P1



0.02



P2



0.03



P3



0.03



Gambar 5.2 Grafik Rerata volume edema sebelum diinduksi karagenin antar kelompok perlakuan Dari grafik 5.2 dapat diketahui bahwa rerata volume edema sebelum diinduksi karagenin sebelum diinduksi karagenin pada kelompok kontrol negatif (diinduksi CMC-Na 1%) adalah 0,0273, pada kelompok kontrol positif (diinduksi karagenin dan aspirin 100 mg/kgBB) sebesar 0,0268, pada kelompok perlakuan 1 (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 300 mg/kgBB) sebesar 0,0232, pada kelompok perlakuan 2 (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 600 mg/kgBB) sebesar 0,0315, dan pada kelompok perlakuan (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 750 mg/kgBB) sebesar 0,0293.



51



5.1.2 Volume edema 90 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok



Rerata Volume Edema 90 Menit Setelah Diinduksi Karagenin K (-)



0.05



0.05



K (+)



P1



0.05



P2



0.04



P3



0.05



Gambar 5.3 Grafik Rerata volume edema 90 menit setelah diinduksi karagenin Dari grafik 5.3 dapat diketahui bahwa rerata volume edema 90 menit setelah diinduksi karagenin pada kelompok kontrol negatif (diinduksi CMC-Na 1%) adalah 0,046, pada kelompok kontrol positif (diinduksi karagenin dan aspirin 100 mg/kgBB) sebesar 0,047, pada kelompok perlakuan 1 (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 300 mg/kgBB) sebesar 0,047, pada kelompok perlakuan 2 (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 600 mg/kgBB) sebesar 0,044, dan pada kelompok perlakuan (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 750 mg/kgBB) sebesar 0,052.



52



5.1.3 Volume edema 90 + 60 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok



Rerata Volume Edema 90 + 60 Menit Setelah Diinduksi Karagenin K (-)



0.05



0.04



K (+)



P1



0.04



P2



0.04



P3



0.05



Gambar 5.4 Grafik Rerata volume edema 90 + 60 menit setelah diinduksi karagenin Dari grafik 5.4 dapat diketahui bahwa rerata volume edema 90 + 60 menit setelah diinduksi karagenin pada kelompok kontrol negatif (diinduksi CMC-Na 1%) adalah 0,045, pada kelompok kontrol positif (diinduksi karagenin dan aspirin 100 mg/kgBB) sebesar 0,04, pada kelompok perlakuan 1 (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 300 mg/kgBB) sebesar 0,043, pada kelompok perlakuan 2 (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 600 mg/kgBB) sebesar 0,041, dan pada kelompok perlakuan (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 750 mg/kgBB) sebesar 0,046.



53



5.1.4 Volume edema 90 + 120 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok



Rerata Volume Edema 90 + 120 Menit Setelah Diinduksi Karagenin K (-)



0.04



0.04



K (+)



P1



0.04



P2



0.04



P3



0.05



Gambar 5.5 Grafik Rerata volume edema 90 + 120 menit setelah diinduksi karagenin Dari grafik 5.5 dapat diketahui bahwa rerata volume edema 90 + 120 menit setelah diinduksi karagenin pada kelompok kontrol negatif (diinduksi CMC-Na 1%) adalah 0,042, pada kelompok kontrol positif (diinduksi karagenin dan aspirin 100 mg/kgBB) sebesar 0,036, pada kelompok perlakuan 1 (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 300 mg/kgBB ) sebesar 0,039, pada kelompok perlakuan 2 (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 600 mg/kgBB) sebesar 0,042, dan pada kelompok perlakuan (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 750 mg/kgBB) sebesar 0,047.



54



5.1.5 Volume edema 90 + 180 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok



Rerata Volume Edema 90 + 180 Menit Setelah Diinduksi Karagenin K (-)



0.04



0.03



K (+)



P1



0.03



P2



0.04



P3



0.04



Gambar 5.6 Grafik Rerata volume edema 90 + 180 menit setelah diinduksi karagenin Dari grafik 5.6 dapat diketahui bahwa rerata volume edema 90 + 180 menit setelah diinduksi karagenin pada kelompok kontrol negatif (diinduksi CMC-Na 1%) adalah 0,042, pada kelompok kontrol positif (diinduksi karagenin dan aspirin 100 mg/kgBB) sebesar 0,034, pada kelompok perlakuan 1 (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 300 mg/kgBB) sebesar 0,034, pada kelompok perlakuan 2 (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 600 mg/kgBB) sebesar 0,037, dan pada kelompok perlakuan (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 750 mg/kgBB) sebesar 0,037.



55



5.1.6 Volume edema 90 + 240 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok



Rerata Volume Edema 90 + 240 Menit Setelah Diinduksi Karagenin K (-)



0.04



0.03



K (+)



P1



0.03



P2



P3



0.04



0.03



Gambar 5.7 Grafik Rerata volume edema 90 + 240 menit setelah diinduksi karagenin Dari grafik 5.7 dapat diketahui bahwa rerata volume edema 90 + 240 menit setelah diinduksi karagenin pada kelompok kontrol negatif (diinduksi CMC-Na 1%) adalah 0,04, pada kelompok kontrol positif (diinduksi karagenin dan aspirin 100 mg/kgBB) sebesar 0,031, pada kelompok perlakuan 1 (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 300 mg/kgBB) sebesar 0,029, pada kelompok perlakuan 2 (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 600 mg/kgBB) sebesar 0,035, dan pada kelompok perlakuan (diberi karagenin dan ekstrak kombinasi daun salam dan daun kelor 750 mg/kgBB) sebesar 0,033. 5.1.7 Persentase penghambatan edema Perhitungan persentase penghambatan edema rata-rata yang terjadi pada kelompok uji dapat dihitung dengan menggunakan rumus sebagai berikut: Presentase penghambatan edema = (1-



a−x ) x100% b− y



Keterangan : a = volume rata-rata kaki tikus setelah diinduksi pada tikus yang diberi bahan uji



56



x = volume rata-rata kaki tikus sebelum diinduksi pada tikus yang diberi bahan uji b = volume rata-rata kaki tikus setelah diinduksi pada tikus yang tidak diberi bahan uji (kontrol negatif) y = volume rata-rata kaki tikus sebelum diinduksi pada tikus yang tidak diberi bahan uji (kontrol negatif) Tabel 5.2 persentase hambatan edema kaki tikus setiap menit tertentu Kelompok Persentase hambatan edema kaki tikus tiap menit ke- (%) 90 -5,3 -26,3 36,8 -21,1



perlakuan K (+) P1 P2 P3



90 + 60 12 -11,1 50 5,5



90 + 120 40 -6,7 33,3 -20



90 + 180 53,3 27 67 46,7



90 + 240 69,3 53,9 76,9 69,2



Gambar 5.8 Grafik Persentase hambatan edema kaki tikus setiap jam 100 76.9



80



69.3



60



53.9



53.3 40



40



50 36.8



27 20



46.7 33.3



12



0 -5.3



69.2



67



5.5 k (+)



-20



P1



P2



-6.7



P3



-11.1



-21.1



-26.3



-20



-40 90 menit



90 + 60 menit



90 + 120 menit



57



90 + 180 menit



90 + 240 menit



Gambar 5.9 Grafik Persentase hambatan edema kaki tikus setiap jam



PERSENTASE HAMBATAN EDEMA KAKI TIAP MENIT PERSENTASE HAMBATAN



100 80 60 40 20 0 90 Menit



90 + 60 Menit



90 + 120 Menit 90 + 180 Menit



90 + 240 Menit



-20 -40



Berdasarkan tabel 5.2 dan gambar grafik 5.8 dapat diketahui bahwa pada kelompok kontrol positif memiliki persentase hambatan terbesar pada 90+240 menit sebesar 69,3%. Sedangkan pada kelompok perlakuan 1 reaksi hambatan baru terjadi pada 90 + 180 menit dengan persentase sebesar 27% dan pada 90 + 240 menit sebesar 53,9%. Sedangkan pada kelompok perlakuan 2 reaksi hambatan edema sudah dapat dilihat pada 90 menit setelah pemberian perlakuan dengan persentase 36,8%, dan pada kelompok perlakuan 2 ini persentase hambatan terbesar terjadi pada 90+240 menit setelah diinduksi dengan persentase sebesar 76,9%. Dan pada kelompok perlakuan 3 tidak terdapat reaksi hambatan pada menit ke-90 dan 90+120 menit, dan untuk persentase hambatan terbesar terjadi pada 90+240 menit setelah diinduksi dengan persentase sebesar 69,2% dan persentase hambatan terkecil



pada



90+60



menit setelah



diinduksi



karagenein



dengan



persentase sebesar 5,5%. 5.2



Uji Normalitas Dan Homogenitas Varian Sebelum melakukan uji One-Way Anova, terlebih dahulu dilakukan



uji normalitas dan uji homogenitas varian pada setiap kelompok, karena persyaratan dari uji One Way Anova adalah data harus berdistribusi normal dan memiliki varian yang homogen. Ada dua macam uji normalitas



58



yaitu uji Kolmogorov-Smirnov jika sampelnya lebih dari 50 dan uji ShapiroWilk jika sampelnya kurang dari 50 dan pada uji homogenitas varian menggunakan uji Lavene. Pada penelitian ini menggunakan parameter Shapiro-Wilk karena jumlah sampel dalam penelitian ini kurang dari 50 ekor. Keterangan pengujian Saphiro-Wilk dan uji Laveneadalah jika signifikansi p > 0,05, maka distribusi data normal dan varian data homogen namun jika signifikasi p < 0.05, maka distribusi data tidak normal dan varian data tidak homogen. Tabel 5.3 Uji normalitas volume edema sebelum diinduksi karagenin antar kelompok perlakuan dapat diketahui bahwa nilai signifikansi Saphiro Wilk dari volume edema sebelum diinduksi karagenin pada kelompok kontrol negatif, kontrol positif, perlakuan 1, dan perlakuan 3 memiliki signifikansi (p) > 0,05 yang berarti berdistribusi normal, namun pada kelomok perlakuan 2 memiliki signifikansi (p) < 0,05 atau data tidak berdistribusi normal. Karena pada volume edema sebelum diinduksi tidak memenuhi syarat uji One Way Anova yang harus berdistribusi normal, maka untuk mengetahui perbedaan volume edema sebelum diinduksi karagenin pada beberapa kelompok perlakuan dilakukan uji Kruskall Walis. Pada uji Saphiro Wilk volume edema 90 menit setelah diinduksi karagenin semua kelompok menunjukkan signifikansi (p) > 0,05 yang berarti



berdistribusi



normal.



Dan



pada



uji



homogenitas



varian



menggunakan uji Lavene menujukkan signifikansi 0,552 atau p > 0,05 yang berarti data memiliki varian homogen. Karena data volume edema 90 menit setelah diinduksi karagenin berdistribusi normal dan memiliki varian yang homogen maka volume edema 90 menit setelah diinduksi karagenin memenuhi syarat uji One Way Anova. Pada uji Saphiro Wilk volume edema 90 + 60 menit setelah diinduksi karagenin semua kelompok menunjukkan signifikansi (p) > 0,05 yang berarti berdistribusi normal. Dan pada uji homogenitas varian menggunakan uji Lavene menujukkan signifikansi 0,475 atau p > 0,05



59



yang berarti data memiliki varian homogen. Karena data volume edema 90 + 60 menit setelah diinduksi karagenin berdistribusi normal dan memiliki varian yang homogen maka volume edema 90 + 60 menit setelah diinduksi karagenin memenuhi syarat uji One Way Anova. Pada uji Saphiro Wilk volume edema 90 + 120 menit setelah diinduksi karagenin semua kelompok menunjukkan signifikansi (p) > 0,05 yang berarti berdistribusi normal. Dan pada uji homogenitas varian menggunakan uji Lavene menujukkan signifikansi 0,070 atau p > 0,05 yang berarti data memiliki varian homogen. Karena data volume edema 90 + 120 menit setelah diinduksi karagenin berdistribusi normal dan memiliki varian yang homogen maka volume edema 90 + 120 menit setelah diinduksi karagenin memenuhi syarat uji One Way Anova. Pada uji Saphiro Wilk volume edema 90 + 180 menit setelah diinduksi karagenin semua kelompok menunjukkan signifikansi (p) > 0,05 yang berarti berdistribusi normal. Dan pada uji homogenitas varian menggunakan uji Lavene menujukkan signifikansi 0,049 atau p < 0,05 yang berarti data tidak memiliki varian yang homogen. Karena data volume edema 90 + 180 menit setelah diinduksi karagenin berdistribusi normal tetapi tidak memiliki varian yang homogen maka volume edema 90 + 180 menit setelah diinduksi karagenin tidak memenuhi syarat uji One Way Anova sehingga untuk mengetahui perbedaan volume edema 90+180 menit setelah diinduksi karagenin pada beberapa kelompok perlakuan dilakukan uji Kruskall Walis. Pada uji Saphiro Wilk volume edema 90 + 240 menit setelah diinduksi karagenin semua kelompok menunjukkan signifikansi (p) > 0,05 yang berarti berdistribusi normal. Dan pada uji homogenitas varian menggunakan uji Lavene menujukkan signifikansi 0,0001 atau p < 0,05 yang berarti data tidak memiliki varian yang homogen. Karena data volume edema 90 + 240 menit setelah diinduksi karagenin berdistribusi normal tetapi tidak memiliki varian yang homogen maka volume edema 90 + 240 menit setelah diinduksi karagenin tidak memenuhi syarat uji One Way Anova sehingga untuk mengetahui perbedaan volume edema 90 +



60



240 menit setelah diinduksi karagenin pada beberapa kelompok perlakuan dilakukan uji Kruskall Walis. 5.3



Analisis Hasil Statistik Dalam menganalisa hasil penelitian ini peneliti menggunakan SPSS



versi 2.3 dimana nilai signifikansi (α) sebesar 0,05. Analisa data statistika ini bertujuan untuk mengambil kesimpulan atau mendeskripsikan data. Uji yang ideal dilakukan dalam analisa statistik ini menggunakan One Way Anova. Untuk uji ini memiliki beberapa syarat, yaitu: data harus berdistribusi normal dan memiliki varian data yang homogen. Apabila data tidak berdistribusi normal dan/atau varian tidak homogen menggunakan uji Kruskall Walis dan dilanjutkan dengan uji Wilcoxon Mann Whitney. Apabila pada uji One Way Anova signifikansi > 0,05 menunjukkan tidak terdapat perbedaan pada kelompok tersebut dan apabila signifikansi < 0,05 maka terdapat perbedaan antara kelompok tersebut yang dilanjutkan dengan uji Post Hoc LSD untuk mengetahui letak perbedaan tersebut. Apabila pada uji Kuskall Walis signifikansi > 0,05 menunjukkan tidak terdapat perbedaan pada kelompok tersebut dan apabila signifikansi < 0,05 maka terdapat perbedaan antara kelompok tersebut yang dilanjutkan dengan uji Wilcoxon Mann Whitney untuk mengetahui letak perbedaan tersebut. Pada tabel 5.4 dapat diketahui pada volume edema sebelum diinduksi karagenin yang menggunakan uji kruskall walis memiliki nilai signifikansi sebesar 0,009 atau p < α (α = 0,05) atau dapat diartikan terdapat perbedaan volume sebelum diinduksi karagenin antar beberapa kelompok perlakuan.Untuk mengetahui letak perbedaan maka dilakukan uji Wilcoxon. Pada uji wilcoxon yang memiliki perbedaan yang signifikan atau p < 0,05 adalah kelompok perlakuan 1 terhadap kelompok perlakuan 2 dan kelompok perlakuan 2 teradap kelompok perlakuan 3. Dan pada volume edema 90 menit setelah diinduksi karagein yang menggnakan uji anova menunjukkan signifikansi sebesar 0,329 atau p > α (α = 0,05), sehingga dapat diartikan bahwa tidak ada perbedaan yang



61



signifikan antara volume edema 90 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok perlakuan. Pada volume edema 90 + 60 menit setelah diinduksi karagenin yang menggunakan uji One Way Anova menunjukkan signifikansi sebesar 0,287 atau p > α (α = 0,05), sehingga dapat diartikan bahwa tidak ada perbedaan yang signifikan antara volume edema 90 + 60 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok perlakuan. Pada volume edema 90 + 120 menit setelah diinduksi karagenin yang menggunakan uji One Way Anova menunjukkan signifikansi sebesar 0,018 atau p < α (α = 0,05), sehingga dapat diartikan bahwa ada perbedaan yang signifikan antara volume edema 90 + 120 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok perlakuan. Untuk mengetahui letak perbedaan kelompok tersebut dilakukan uji Post Hoc dengan LSD. Pada uji Post Hoc dengan LSD Terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kontrol negatif terhadap kontrol positif, kelompok kontrol negatif terhadap kelompok perlakuan 1, dan kelompok kontrol negatif terhadap kelompok perlakuan 3. Pada volume edema 90 + 180 menit menggunakan uji kruskall walis memiliki nilai signifikansi sebesar 0,072 atau p > α (α = 0,05) atau dapat diartikan tidak terdapat perbedaan volume edema 90 + 180 menit setelah induksi karagenin antar beberapa kelompok perlakuan. Pada volume edema 90 + 240 menit setelah diinduksi karagenin menggunakan uji kruskall walis memiliki nilai signifikansi sebesar 0,001 atau p < α (α = 0,05) atau dapat diartikan terdapat perbedaan volume edema pada 90 + 240 menit setelah diinduksi karagenin antar beberapa kelompok perlakuan. Untuk mengetahui letak perbedaan maka dilakukan uji Wilcoxon. Pada uji wilcoxon yang memiliki perbedaan yang signifikan atau p < 0,05 adalah kelompok kontrol negatif terhadap kelompok kontrol positif, kelompok kontrol negatif terhadap kelompok perlakuan 1, kelompok kontrol positif terhadap kelompok perlakuan 2, kelompok



62



perlakuan 1 terhadap kelompok perlakuan 2 dan kelompok perlakuan 1 terhadap kelompok perlakuan 3.



63



BAB 6 PEMBAHASAN 6.1



Hasil Hambata Edema Berdasarkana hasil penelitian yg di lakukan dapat diketahui pada



tabel 5.2 dan grafik 5.7 bahwa pada kelompok kontrol positif memiliki ratarata persentase hambatan serbesar 33,86% selama 4 jam. Sedangkan pada kelompok perlakuan 1 memiliki rata-rata reaksi hambatan dengan persentase sebesar 7,36% selama 4 jam. Sedangkan pada kelompok perlakuan 2 rata-rata reaksi hambatan edema setelah pemberian perlakuan sampai dengan 4 jam memiliki persentase sebesar 52,8%, dan pada kelompok perlakuan 3 rata-rata reaksi hambatan setelah diinduksi sampai dengan 4 jam memiliki persentase sebesar 16,06 %.. 6.2



Hasil Uji Statistik. Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan, dapat diketahui pada



volume edema sebelum diinduksi karagenin yang menggunakan uji kruskall walis memiliki nilai signifikansi sebesar 0,009 atau p < α (α = 0,05) atau dapat diartikan terdapat perbedaan volume sebelum diinduksi karagenin antar beberapa kelompok perlakuan. Untuk mengetahui letak perbedaan maka dilakukan uji Wilcoxon. Pada uji wilcoxon yang memiliki perbedaan yang signifikan atau p < 0,05 adalah kelompok perlakuan 1 terhadap kelompok perlakuan 2 dan kelompok perlakuan 2 teradap kelompok perlakuan 3. Dan pada volume edema 90 menit setelah diinduksi karagein yang menggnakan uji anova menunjukkan signifikansi sebesar 0,329 atau p > α (α = 0,05), sehingga dapat diartikan bahwa tidak ada perbedaan yang signifikan antara volume edema 90 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok perlakuan. Pada volume edema 90 + 60 menit setelah diinduksi karagenin yang menggunakan uji One Way Anova menunjukkan signifikansi sebesar 0,287 atau p > α (α = 0,05), sehingga dapat diartikan bahwa tidak ada perbedaan yang signifikan antara volume edema 90 + 60 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok perlakuan.



64



Pada volume edema 90 + 120 menit setelah diinduksi karagenin yang menggunakan uji One Way Anova menunjukkan signifikansi sebesar 0,018 atau p < α (α = 0,05), sehingga dapat diartikan bahwa ada perbedaan yang signifikan antara volume edema 90 + 120 menit setelah diinduksi karagenin antar kelompok perlakuan. Untuk mengetahui letak perbedaan kelompok tersebut dilakukan uji Post Hoc dengan LSD. Pada uji Post Hoc dengan LSD Terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kontrol negatif terhadap kontrol positif, kelompok kontrol negatif terhadap kelompok perlakuan 1, dan kelompok kontrol negatif terhadap kelompok perlakuan 3. Pada volume edema 90 + 180 menit menggunakan uji kruskall walis memiliki nilai signifikansi sebesar 0,072 atau p > α (α = 0,05) atau dapat diartikan tidak terdapat perbedaan volume edema 90 + 180 menit setelah induksi karWagenin antar beberapa kelompok perlakuan. Pada volume edema 90 + 240 menit setelah diinduksi karagenin menggunakan uji kruskall walis memiliki nilai signifikansi sebesar 0,001 atau p < α (α = 0,05) atau dapat diartikan terdapat perbedaan volume edema pada 90 + 240 menit setelah diinduksi karagenin antar beberapa kelompok perlakuan. Untuk mengetahui letak perbedaan maka dilakukan uji Wilcoxon. Pada uji wilcoxon yang memiliki perbedaan yang signifikan atau p < 0,05 adalah kelompok kontrol negatif terhadap kelompok kontrol positif, kelompok kontrol negatif terhadap kelompok perlakuan 1, kelompok kontrol positif terhadap kelompok perlakuan 2, kelompok perlakuan 1 terhadap kelompok perlakuan 2 dan kelompok perlakuan 1 terhadap kelompok perlakuan 3. 6.3



Pembahasan Berdasarkan hasil penelitaian pada pemberian suspensi ekstrak



etanol daun kelor dan daun salam dengan 3 konsentrasi yaitu 300mg, 600mg, dan 750mg, pada kontrol negatif tidak di berikan apa-apa dan sebagai pembanding/kontrol positif digunakan suspensi aspirin 100mg. Pengukuran pertama volume telapak kaki tikus ini merupakan pengukuran



65



pada telapak kaki tikus normal, pengukuran kedua dilakukan setelah diinduksi karagenin secara subplantar pada telapak kaki tikus sebanyak 1ml. Induksi ini bertujuan untuk meningkatkan volume telapak kaki tikus. Seletah



itu



dilakukan



pengukuran



menggunakan



plestismometer,



pengujian suspensi ekstrak etanol daun kelor dan daun salam dengan konsentrasi 300 mg, 600 mg, dan 750 mg, kemudian dilakukan pengukuran telapak kaki tikus setiap selang waktu 60 menit selama 4 jam. Berdasarkan hasil penelitian pada pemberian aspirin dengan dosis 100mg pada kelompok kontrol positif yang dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif yang tidak diberi apa didapat rata-rata penghambatan edema kelompok kontrol positif dalam 4 jam sebesar 33,86%. Berdasarkan hasil penelitian pada pemberian ekstrak etanol daun kelor dan daun salam kelompok perlakuan 1 dengan dosis 300mg yang dibandingkan dengan kontrol negatif yang tidak di beri apa didapat ratarata penghambatan edema dalam 4 jam 7,36%, pada kelompok perlakuan 2 yang diberi ekstrak etanol daun kelor dan daun salam 600mg rata-rata penghambatan edema dalam 4 jam 52,8%, pada kelompok perlakuan 3 yang diberi ekstrak etanol daun kelor dan daun salam 750mg rata-rata penghambatan edema dalam 4 jam 16,06%. daya hambat edem pada kelompok kontrol positif mengalami peningkatan secara bertahap, sedangkan pada kelompok perlakuan 2 dengan dosis 600mg memiliki daya hambat yang lebih besar di bandingkan dengan kelompok kontrol positif tetapi pada menit 90+120 terdapat penurunan penghambatan edema, sehingga tidak meningkat secara bertahap, sedangkan pada kelompok perlakuan 1 dengan dosis 300mg, daya hambat edam baru terjadi pada menit ke 90+180, dan kelompok perlakuan 3 dengan dosis 750mg, terdapat pembengkakan kembali pada menit 90+120, sehingga kurang memiliki daya hambat yang besar di bandingkan dengan kelompok kontrol positif dan kelompok perlakuan 2. Kelompok kontrol negatif proses radang masih berlangsung sampai jam ke-4 yang ditandai oleh persentase radang yang masih jauh dari awal.



66



Inflamasi/radang adalah merupakan suatu respons pertahanan tubuh yang melibatkan sel tubuh, pembuluh darah, serta protein dan mediator lain dengan tujuan mengeliminasi penyebab utama jejas sel, demikian pula sel nekrotik dan jaringan sebagai akibat pengaruh awal , dan memulai proses pemulihan jaringan, tetapi radang itu sendiri bisa mengakibatkan keruskan jaringan. Dimana Upaya dari radang untuk melakukan proteksi adalah dengan mengencerkan, merusak, atau menetralkan agen berbahaya (misalnya mikroba, toksin), yang ditandai oleh beberapa gejala yaitu rubor (kemerahan), panas (calor), nyeri (dolor), bengkak (tumor) dan daya gerak berkurang (functio laesa),(Kumar et al., 2015). Karagenin di gunakan sebagai penginduksi radang karena karagenin memiliki beberapa keuntungan seperti tidak menimbulkan kerusakan jaringan dan memberikan respon, tidak meninggalkan bekas dan lebih peka terhadap obat antiinflamasi dibandingkan dengan senyawa iritan lainnya (Siswanto and Nurulita, 2005). Pada proses pembentukan dari edema terdapat tiga fase. Fase yang pertama merupakan pelepasan dari histamin dan serotonin selama 90 menit. Fase ke dua pelepasan dari beradikini yang berlangsung 1,5 sampai dengan 2,5 jam setelah induksi. Fase ke tiga terjadi pelepasan prostaglandin yang berlangsung 3 jam setelah induksi. karagenin akan menginduksi cedera sel dengan melepaskan



mediator-mediator



yang



mengawali



terjadinya



proses



inflamasi. Edema yang diakibatkan oleh induksi dari karagenin efek nya dapat bertahan selama kurang lebih 6 jam dan berangsur–angsur berkurang dalam kurun waktu 24 jam. Edema yang diakibatkan oleh injeksi karagen diperkuat oleh mediator inflamasi terutama PGE1 dan PGE2 dengan cara peningkatan permeabilitas vaskuler. Bila terjadi peningkatan dari permeabilitas vaskuler maka18 protein-protein plasma akan menuju ke jaringan yang luka sehingga akan terjadilah edema (Corsini et al., 2005). Kemungkinan yang terjadi pada kelompok perlakuan 1 yang di beri ekstrak etanol daun kelor dan daun salam dengan suspensi 300 mg



67



adalah dosis dari ekstrak yang kurang sehingga pada dosis ini kurang adekuat untuk melawan karagenin yang memiliki 3 fase pelepasan mediator dan akhirnya tidak terjadi penghambatan volume edema pada menit awal, menit 90+60, 90+120, dapat juga di sebabkan oleh intensitas ekstrak belum mengikat reseptor sepenuhnya dimana Intensitas ekstrak mencapai maksimal bila seluruh reseptor diduduki. Kemungkinan terjadi pada kelompok perlakuan 2 yang di beri ekstrak etanol daun kelor dan daun salam dengan suspensi 600mg dan kelompok perlakuan 3 yang di beri ekstrak etanol daun kelor dan daun salam dengan suspensi 750mg pada menit ke 90+120 terjadi nya pelepasan fase ke 2 yaitu bradikinin dan fase ke 3 yaitu prostaglandin, sehingga terjadi penurunan daya hambat edema pada menit tersebut, dan pada kelompok perlakuan 3 terjadi pembengkakan kembali pada menit 90+120. Kelompok yang memiliki efek antiinflamsi paling baik pada kelompok perlakuan 2 yang di beri ekstra etanol daun kelor dan daun salam 600mg, di bandingkan kelompok kontrol positif yang di beri aspirin 100mg, sedangkan pada kelompok kontrol positif dengan kelompok perlakuan 1 yang di beri ekstra etanol daun kelor dan daun salam 300mg dan kelompok perlakuan 3 yang di beri ekstra etanol daun kelor dan daun salam 750mg, terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok tersebut, sehingga ekstra etanol daun kelor dan daun salam 300mg dan 750mg tidak memiliki kemiripan yang artinya memiliki efek antiinflamsi yang sedikit di bandingkan dengan kontrol positif yaitu aspirin 100 mg. Hal ini diduga karena pada kelompok perlakuan 1 dan kelompok perlakuan 3 kurangnya konsentrasi atau jumlah ekstrak yang dapat berikatan dengan reseptor sehingga belum memberikan efek antiinflamasi yang berarti. Sedangkan pada kelompok perlakuan 2 ekstrak etanol daun kelor dan daun salam 600mg, mempunyai efek antiinflamasi yang berbeda. Hal ini menunjukkan bahwa ektrak etanol daun kelor dan daun salam 600mg merupakan konsentrasi yang efektif untuk berikatan dengan reseptor menurut (Katzung et al., 2002).



68



intensitas efek obat berbanding lurus dengan reseptor yang diduduki atau yang diikatnya. Intensitas efek mencapai maksimal bila seluruh reseptor diduduki oleh obat. Oleh karena itu penurunan dan peningkatan



dosis



tidak



memberikan



peningkatan



terhadap



efek



antiinflamasi. Kelompok perlakuan 2 ekstrak etanol daun kelor dan daun salam 600 mg/KgBB memberikan efek antiinflamasi yang berbeda signifikan dibandingkan dengan kelompok kontrol positif aspirin pada metode pengukuran menggunakan pletismometer. Hal ini menunjukkan efek antiinflamasi ekstrak etanol daun kelor dan daun salam 600 mg/KgBB lebih baik dibandingkan aspirin. Efek farmakologis yang dimiliki oleh kelor dan salam diantaranya antiinflamasi, antipiretik, dan antiskorbut. Ekstrak daun kelor mengandung antioksi dan berupa flavonoid yang dapat digunakan sebagai antiinflamasi (Hanif, 2007). Dari penelitian ini terlihat bahwa ekstrak etanol daun kelor dan daun salam memiliki potensi antiinflamasi diduga karena aktivitas metabolit sekunder yang terdapat dalam ekstrak daun kelor dan daun salam yaitu flavonoid, saponin. Hal ini didukung dengan hasil uji fitokimia yang menunjukkan adanya golongan senyawa tersebut. Flavonoid yang terkandung di dalam daun kelor dan salam yang dapat menghambat akumulasi leukosit di daerah inflamasi. Pada kondisi normal leukosit bergerak bebas sepanjang dinding sel endotel, tetapi selama inflamasi, berbagai mediator radang menunjukan adhesi leukosit ke dinding endotel sehingga menyebabkan leukosit menjadi immobil



dan menstimulasi



degranulasi netrofil. Dapat bertindak menghambat enzim siklooksigenase (COX) dan lipooksigenase yang berperan dalam biosintesis leukotrien (Robinson, 1995).



Selain menghambat metabolisme asam arakidonat



sehingga produksi prostaglandin dapat berkurang. Flavonoid juga menghambat sekresi enzim lisosom yang merupakan mediator inflamasi. Penghambatan mediator inflamasi ini dapat menghambat proliferasi dari proses radang (Robinson, 1995). Penelitian ini telah dilakukan juga oleh (Singh et al. 2012). Telah dilaporkan bahwa ekstrak etanol daun kelor memiliki efek antiinflamasi



69



pada dosis 500 mg/kgBB. Namun pada penelitian tersebut hanya menggunakan dua dosis perlakuan. Menurut (Danim, 2002). Penelitian harus menggunakan kelompok kontrol sebagai garis dasar untuk dibandingkan dengan kelompok yang dikenai perlakuan eksperimental, menggunakan sedikitnya tiga kelompok, harus mempertimbangkan kesahihan ke dalam (internal validity) dan harus mempertimbangkan kesahihan keluar (external validity). Penelitian



ini



telah



dilakukan



juga



oleh



(Presty,



2016).



Kesimpulannya ekstrak etanol daun kelor memberikan efek antiinflamasi terhadap kaki tikus yang diinduksi oleh karagenan. Baik dari dosis 300, 450, 600 dan 750 mg/kgBB. Pada dosis 450 mg/kgBB



memiliki efek



antiinflamasi yang sama dengan Na-Diklofenak, dan pada dosis 600 mg/kgBB dan 750 mg/kg bb memberikan efek antiinflamasi yang lebih baik dari Na-Diklofenak. Penelitian ini telah dilakukan juga oleh (Risna et al.,2015). Kesimpulan ekstrak etanol daun salam dosis 50 mg/kgBB, 150 mg/kgBB dan 250 mg/kgBB memiliki aktivitas antiinflamasi pada tikus putih yang diinduksi karagenan, dimana volume radang yang terjadi mengalami penurunan pada jam keempat.



70



BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN 7.1



Kesimpulan Berdasarkan penelitian uji efek antiinflamasi kombinasi ekstrak



etanol



daun



kelor



(moringa



oleifera)



dan



daun



salam



(sygium



polyanthumsyz) terhadap edema kaki tikus putih (rattus novergicus) jantan galur wistar di induksi karagenin maka dapat disimpulkan bahwa: 1. Kombinasi ekstrak etanol daun kelor (moringa oleifera) dan daun salam (sygium polyanthumsyz) 300 mg/KgBB memiliki daya antiinflamasi sebesar 7,36%, ekstrak etanol daun kelor dan daun salam 600 mg/KgBB memiliki daya antiinflamasi sebesar 52,8%, ekstrak etanol daun kelor dan daun salam 750 mg/KgBB memiliki daya antiinflamasi sebesar 16,06%. Hal ini menunjukan bahwa daun kelor dan daun salam memiliki efek antiinflamasi. 2. Kombinasi ekstrak etanol daun kelor (moringa oleifera) dan daun salam (sygium polyanthumsyz) 300 mg/kgbb dan dosis 750 mg/kgbb memiliki efek antiinflamasi, namun masih berada di bawah aspirin. Sedangkan pada kombinasi ekstrak etanol daun kelor dan daun dalam 600 mg/kgbb memberikan efek lebih baik dari pada aspirin. 7.2



Saran Penelitian tentang kombinasi daun kelor dan daun salam sebagai



antiinflamasi merupakan peneliian yang relatif baru sehingga terdapat banyak sekali keterbatasan terutama pada refrensi. Kombinasi daun kelor dan daun salam maka saran yang dapat diberikan penulis setelah melakukan penelitian ini adalah sebagai berikut: 1. Sebaiknya dilakukan penelitain lanjutan dengan menggunkan alat pengukuran plestismometer digital agar mendapatkan hasil yang lebih akurat. 2. Perlu dilakukan penelitian lanjutan pada kombinasi ekstrak etanol daun kelor (moringa oleifera) dan daun salam (sygium polyanthumsyz) dalam jangka waktu yang lebih lama.



71



3. Perlu dilakukan penelitian lanjutan dengan menggunakan variasi dosis ekstrak daun kelor (moringa oleifera)



dan daun salam (sygium



polyanthumsyz) sehingga dapat diketahui dosis minimal yang efektif. 4. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui mekanisme kerja dan zat aktif yang berperan sebagai antiinflamasi. 5. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai metode peradangan lainnya seperti kasus OA (Osteoarthritis), dan kasus inflamasi lainnya. 6. Perlu dilakukan penelitian lanjutan mengenai uji toksisitas pada kombinasi ekstrak etanol daun kelor dan daun salam sebagai anti inflamasi.



72



DAFTAR PUSTAKA Adrianto, A, W. 2012. “Uji Daya Antibakteri Ekstrak Daun Salam ( Eugenia Polyantha Wight) Dalam Pasta Gigi Terhadap Pertumbuhan Streptococcus Mutans.” Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember. Agustina, R., D.t Indrawati, and M.a Masruhin. 2015. “Aktivitas Ekstrak Daun Salam (.” : 120–23. Agustina, Risna., Dewi Tita. Indrawati, and Muhammad Amir. Masruhin. 2015. “Aktivitas Ekstrak Daun Salam.” Laboratorium Penelitian dan Pengembangan FARMAKA TROPIS Fakultas Farmasi Universitas Mulawarman, Samarinda, Kalimantan Timur: 120–23. Binawati, D. K., and S. Amilah. 2013. “Effect of Cherry Leaf (Muntingia Calabura L.) Bioinsecticides Extract Towards Mortality of Worm Soil (Agrotis Ipsilon) and Armyworm (Spodoptera Exiqua) on Plant Leek (Allium Fistolum).” Wahana, 61(2):51-57. Carter, F. L., Carlo., A. M., and Stanley., J. B. 1978. “Termiticidal Components OfWood Extracts : 7-Methyljuglone from Diospyros Virginia.” Journal AgricultureFood Chemistry. 26(4): 869-873. Chusniatun, Harismah kun. 2016. “Pemanfaatan Daun Salam (Eugenia Polyantha) Sebagai Obat Herbal Dan Rempah Penyedap Makanan.” 19(2): 110–18. Corsini, E. et al. 2005. “Lung, Increased Carrageenan-Induced Acute Inflammation in Old Rats.” Immunology, 115 (2):253-61. Corwin, Elizabeth J. 2008. Handbook of Pathophysiology. 3rd ed. Philadephia: Lippincort Williams & wilkins. Cuppett, S., M. Schrepf and C. Hall III. 1954. “Natural Antioxidant – Are TheyReality.” Dalam Foreidoon Shahidi: Natural Antioxidants, Chemistry, Health Effect and Applications, AOCS Press, Champaign, Illinois: 12-24. Danim, Sudarwan. 2002. “Menjadi Peneliti Kualitatif.” Bandung : Pustaka Setia. Desmiaty, Y.; Ratih H.; Dewi M.A.; Agustin R. 2008. “Penentuan Jumlah Tanin Total Pada Daun Jati Belanda (Guazuma Ulmifolia Lamk) Dan Daun Sambang Darah (Excoecaria Bicolor Hassk.) Secara Kolorimetri Dengan Pereaksi Biru Prusia.” Ortocarpus. 2008. 8, 106-109. Fahey, J.W. 2005. “Moringa Oleifera.” A Review of the Medical Evidence for ItsNutritional, Therapeutic, and Prophylactic Properties. Part 1. Fuglie, L.J. 2001. 2001. “The Miracle of Tree (The Atribute of Moringa).” Senegal: CWS Dakar. Gunawan, Gan Sulistia. 2007. Jakarta: Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, p.207-20. Farmakologi Dan Terapi. 5th ed. eds. Setiabudy Rianto and Nafrialdi. jakarta: Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Hanif, H. 2007. “Tumbuhan Obat Dan Khasiatnya Seri 2.” 25-26, Cetakan 3.



Penebar Swadaya, Jakarta. Harborne, J.B. 1987. “Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Penerbit ITB. Bandung.” Hermansyah. 2008. “Isolasi Dan Karakterisasi Flavonoid Dari Daun Salam (Polyanthi Folium), Skripsi,.” Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Andalas, Padang.



73



Kasolo, JN. et al. 2010. “Phytochemicals and Uses of Moringa Oleifera Leaves in Uganda Rural Communities,.” Journal of Medical Plant Research; 4(9): 753-757. Katzung, MD, PhD Bertram G., PhD Susan. Masters, and PhD Anthony J. Trevor. 2012. Basic & Clinical Pharmacology. 12th ed. ed. PhD Bertram G. Katzung, MD. indonesia: McGraw-Hill Education and EGC Medical Publisher. Katzung, B.G., and A.J. Trevor. 2002. Farmakologi Dasar Dan Klinik. III. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. Krisnadi, A Dudi. 2013. “E-Book Kelor Super Nutrisi.” Blora: KELORINA.COM. Krisnadi A, Dudi. 2014. “Kelor Super Nutrisi.” Pusat Informasi Dan Pengembangan Tanaman Kelor Indonesia. Kumar, Vinay, Abul K Abbas, and Jon C. Aster. 2015. Buku Ajar Patologi Robbins Edisi 9. 9th ed. eds. I Made Nasar and Santoso Cornain. Singapura: Elsevier Saunders. Lutfiana. 2013. “UJI AKTIVITAS ANTIINFLAMASI EKSTRAK DAUN KELOR (Moringa Oleifera Lam.) DENGAN METODE STABILISASI MEMBRAN SEL DARAH MERAH SECARA IN VITRO.” (September). Madhavi P et al. 2012. “Evaluation of Anti-Inflammatory Activity of Citrullus Ianatus Seed Oil by In-Vivo and In-Vitro Models.” International Research Journal Of Pharmaceutical and Applied Sciences 2(4); 104-108. Makkar., and Becker. 1996. “Nutrient and Anti-Quality Factors in Different Morphological Parts of the Moringa Oleifera Tree.J. Agri. Sci. Cambirdge.” J. Agri. Sci. Cambirdge. Mardiana, L. 2013. . “. Daun Ajaib Tumpas Penyakit.” Daun Ajaib Tumpas Penyakit. Jakarta: Penebar Swadaya. Halaman 55.: 55. Markham, K.R. 1988. “Cara Mengidentifikasi Flavonoid.” diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata, 15, Penerbit ITB, Bandung. Mogosan, C, and MF Munteanu. 2008. “Comparative Study on Antiinflammatory Effect of The Tinctures from Melampyrum Bihariense Kern and Melampyrum Cristatum L.” (Scrophulariaceae). Farmacia. LVI(4): 389-92. Muchtadi, T. R., F. Ayustaningwarno, and Sugiyono. 2010. “Ilmu Pengetahuan Bahan Pangan.” Penerbit Alfabeta. Bandung. Mursyidi, A. 1990. “Analisis Metabolit Sekunder.” Pusat Antar Universitas UGM. Yogyakarta, hal : 1-4. Mycek, Mary J. 2001. “Farmakologi Ulasan Bergambar.” Jakrta: Widya Medika. p 280-409. Narvie S, and Steve c. 2010. “Weed Risk Assessment, Horseradish Tree(Moringa Oleifera).” Queensland Government. Nugraha, Aditya. 2013. Denpasar: Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Udayana. “‘Bioaktivitas Ekstrak Daun Kelor (Moringa Oleifera) Terhadap Eschericia Coli Penyebab Kolibasilosis Pada Babi’.”



74



Nugroho, I.A. 2010. “Tanaman Obat Indonesia. Lokakarya Nasional Tanaman Obat Indonesia.” Balitbang Kehutanan. Bogor. Presty, Sipayung. 2016. “Uji Aktivitas Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Kelor (.” Universitas Sumatera utara. Price, and Wilson. 2005. Patofisiologi: Konsep Klinis Prosesproses Penyakit,. 6th, vol2 ed. eds. B. U., H. Hartanto, P. Wulansari, and D. A. Mahanani. jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta. Putra, I Wayan Dwika Pratama, Anak Agung Gde Dharmayudha, and Luh Made Sudimartini. 2016. “Identifikasi Senyawa Kimia Ekstrak Etanol Daun Kelor ( Moringa Oleifera L ) Di Bali.” Indonesia Medicus Veterinus 5(5): 464–73. Robbins, Stanley L., Vinay. Kumar, and Ramzi S. Cotran. 2007. Buku Ajar Patologi Edisi 7 Volume 1. 7 volume1. jakarta: EGC. Robinson, T. 1995. “Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi,.” Edisi VI, Hal 191-216, Diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata, ITB, Bandung. Robinson, T. 1991. “Kandungan Senyawa Organik Tumbuhan Tinggi.” Diterjemahkan oleh Prof. Dr. Kosasih Padmawinata. Penerbit: ITB. Bandung. Robirukmana. 2012. “Pengaruh Pemberian Yogurt Terhadap Pertumbuhan Gigi Tikus Putih.” (Rattus norvegicus galur Wistar). Rohyani,Immy Suci, Dkk. 2015. “Kandungan Fitokimia Beberapa Jenis Tumbuhan Lokal Yang Sering Dimanfaatkan Sebagai Bahan Baku Obat Di Pulau Lombok.” Pros Sem Nas Masy Biodiv Indon. Vol.1 N0.2. Sashidhara KV et al. 2009. “Rare Dipeptide and Urea Derivates From Roots of Moringa Oliefera as Potential Anti-Inflammatory and Antinociceptive Agents,European.” journal of Medicinal Chemistry, 44(1); 432-436. Sharp., P.E, and MC La Regina. 1998. “The Laboratory Rat.” CRC, Press, Boca, Ratan, Florida 1. Singh,G P., G Rakesh, Sudeep B,S., and S Kumar. 2012. “AntiInflammatory Evaluation of Leaf Extract of Moringa Oliefera.” Journal of Pharmaceutical and Scientific Innovation,1(1);22-24. Siswanto, A., and N.A. Nurulita. 2005. “Daya Antiinflamasi Infus Daun Mahkota Dewa (Phaleria Macrocarpa Scheff. Boerl) Pada Tikus Putih (Rattus Norvegicus) Jantan.” Prossiding Seminar Nasional TOI XXVII, 177 – 181, Batu 15 – 16 Maret 2005. Smith, J.B., and S. Mangkoewijojo. 1988. “Pemeliharaan, Pembiakan, Dan Penggunaan Hewan Laboratorium Di Daerah Tropis,.” Pemeliharaan, Pembiakan, dan Penggunaan Hewan Laboratorium di Daerah Tropis, Cetakan 1. UI Press, Jakarta. Sonchus, Tempuyung, and L Pada. 2012. “Efek Antiinflamasi Kombinasi Ekstrak Air Daun Salam.” Sudirman Azhari, T. 2014. “Uji Efektifitas Ekstrak Daun Salam (Eugenia Polyantha) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus Aureus Secara in Vitro.” Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas



75



Hasanudidin,Makasar. Tilong, AD. 2012. “Ternyata, Kelor Penakluk Diabetes.” Jogjakarta: DIVA Press. Tjokronegoro., and Baziad. 1992. “Etika Penelitian Obat Tradisional.” Fakultas Kedokteran, Universitas Indonesia, Jakarta. Toripah SS, Abidjulu J, Wehantouw F. 2014. “Aktivitas Antioksidan Dan Kandungan Total Fenolik Ekstrak Daun Kelor (Moringa Oleifera Lam).” Pharmacon 3(4): 37-43. Utami,P., and Puspaningtyas. 2013. “The Miracle of Herbs.” AgroMedia Pustaka. Hal 61-63. Waghorn & McNabb, 2003; Westendarp, 2006). 2003. “Consequences of Plant Phenolic Compounds for Productivity and Health of Ruminants.” Proc. Nutr. Soc. 62: 383-392. Wattimena. et al. 1991. “Makologi Dan Terapi Antibiotik.” Yogyakarta: Gajah Mada University Press. p 45. Wiesman Z, Chapagain BP. 2003. “Laboratory Evaluation of Natural Saponin as a Bioactive Agent against Aedes Aegypti and Culex Pipiens.” Dengue Bulletin 27:168-173. Yulianti, R. 2008. “Pembuatan Minuman Jeli Daun Kelor (Moringa Oleifera Lam) Sebagai Sumber Vitamin C Dan Beta Karoten.” IPB, Bogor.



76



LAMPIRAN Lampiran 1 Jadwal Pelaksanaan No



1 2



3 4 5



6 7 8



9



Pelaksanaan Persiapan Mencari referensi dan kepustakaan Menyusun proposal Mengurus perizinan Pengadaan alat dan bahan Pelaksanaan penelitian Pengambilan data Analisis data dan pembahasan Penyusunan laporan



Apr



Mei



Jun



Jul



Ags



X



X



X



X



X



X



X



X



X



X



77



Sep



X



X



X



X



X



X



Okt



Nov



X



X



X



X



X



X



X



X



Des



X



Lampiran 2 Sertifikat Uji Etik Penelitian



78



Lampiran 3 Taksonomi Daun Kelor



79



Lampiran 4 Taksonomi Daun salam



80



Lampiran 5 Sertifikat Hewan Coba



81



LAMPIRAN 6 Hasil penelitian & Hasil Uji Statistik 6.1Hasil penelitian Volume Udema Pada Kaki Tikus Kelompok perlakuan Tikus



Kontrol negatif



Sebelum diinduksi karagenin



90 menit Setelah Induksi karagenin



90 + 60 menit



90 + 120 menit



90 + 180 menit



90 + 240 menit



1



0,026



0,051



0,050



0,049



0,048



0,046



2



0,032



0,058



0,057



0,054



0,052



0,052



3



0,032



0,043



0,043



0,040



0,039



0,037



4



0,028



0,048



0,044



0,042



0,041



0,039



5



0,022



0,037



0,037



0,036



0,036



0,034



6



0,024



0,037



0,037



0,035



0,034



0,034



0,164



0,274



0,268



0,256



0,250



0,242



Total Rata – rata



Kontrol positif



0,027



0,046



0,045



0,042



0,042



0,04



1



0,022



0,038



0,034



0,030



0,030



0,027



2



0,022



0,045



0,037



0,035



0,030



0,029



3



0,029



0,048



0,037



0,036



0,036



0,034



4



0,028



0,050



0,044



0,043



0,038



0,034



5



0,031



0,050



0,039



0,034



0,033



0,031



6



0,029



0,051



0,049



0,040



0,035



0,032



Total



0,161



0,282



0,240



0,218



0,202



0,187



Rata – rata



0,027



0,047



0,04



0,036



0,034



0,031



1



0,024



0,049



0,041



0,036



0,032



0,029



2



0,022



0,056



0,050



0,045



0,038



0,029



3



0,024



0,050



0,047



0,046



0,034



0,030



4



0,023



0,046



0,044



0,042



0,034



0,029



5



0,025



0,038



0,037



0,034



0,030



0,028



6



0,021



0,043



0,039



0,036



0,035



0,030



Total



0,139



0,282



0,258



0,239



0,203



0,175



Rata – rata



0,023



0,047



0,043



0,039



0,034



0,029



1



0,030



0,037



0,035



0,034



0,033



0,033



2



0,030



0,039



0,038



0,036



0,035



0,032



3



0,030



0,045



0,039



0,037



0,037



0,036



4



0,032



0,047



0,043



0,038



0,035



0,033



5



0,030



0,044



0,042



0,042



0,041



0,035



6



P1



P2



0,037



0,051



0,049



0,047



0,040



0,038



Total



0,189



0,263



0,246



0,234



0,221



0,208



Rata – rata



0,032



0,044



0,041



0,042



0,037



0,035



1



0,033



0,047



0,046



0,043



0,037



0,033



2



0,031



0,066



0,049



0,047



0,042



0,031



3



0,030



0,047



0,042



0,039



0,037



0,031



4



0,026



0,046



0,044



0,039



0033



0,033



5



0,030



0,050



0,045



0,043



0,034



0,034



6



0,026



0,055



0,052



0,046



0,036



0,034



Total



0,176



0,311



0,278



0,257



0,219



0,196



Rata – rata



0,029



0,052



0,046



0,047



0,037



0,033



P3



82



6.2 Statistik Deskriptif volume edema awal Descriptive Statistics volume edema awal N



Minimum



Maximum



Mean



Std. Deviation



kontrol negatif



6



,022



,032



,02733



,004131



kontrol positif



6



,022



,031



,02683



,003869



perlakuan 1



6



,021



,025



,02317



,001472



perlakuan 2



6



,030



,037



,03150



,002811



perlakuan 3



6



,026



,033



,02933



,002805



Valid N (listwise)



6



Descriptive Statistics volume edema 90 menit setelah diinduksi karagenin N



Minimum



Maximum



Mean



Std. Deviation



kontrol negatif



6



.037



.058



.04567



.008287



kontrol positif



6



.038



.051



.04700



.004899



perlakuan 1



6



.038



.056



.04700



.006197



perlakuan 2



6



.037



.051



.04383



.005154



perlakuan 3



6



.046



.066



.05183



.007679



Valid N (listwise)



6



Descriptive Statistics 90 + 60 menit N



Minimum



Maximum



Mean



Std. Deviation



kontrol negatif



6



.037



.057



.04467



.007763



kontrol positif



6



.034



.049



.04000



.005514



perlakuan 1



6



.037



.050



.04300



.004940



perlakuan 2



6



.035



.049



.04100



.004858



perlakuan 3



6



.042



.052



.04633



.003615



Valid N (listwise)



6



Descriptive Statistics 90 + 120 menit N



Minimum



Maximum



Mean



Std. Deviation



kontrol negatif



6



.035



.054



.04267



.007474



kontrol positif



6



.030



.043



.03633



.004590



perlakuan 1



6



.034



.046



.03983



.005154



perlakuan 2



6



.034



.047



.03900



.004733



perlakuan 3



6



.039



.047



.04283



.003371



Valid N (listwise)



6



83



Descriptive Statistics 90 + 180 menit N



Minimum



Maximum



Mean



Std. Deviation



kontrol negatif



6



.034



.052



.04167



.007005



kontrol positif



6



.030



.038



.03367



.003266



perlakuan 1



6



.030



.038



.03383



.002714



perlakuan 2



6



.033



.041



.03683



.003125



perlakuan 3



6



.033



.042



.03650



.003146



Valid N (listwise)



6



Descriptive Statistics 90 + 240 menit N



Minimum



Maximum



Mean



Std. Deviation



kontrol negatif



6



.034



.052



.04033



.007230



kontrol positif



6



.027



.034



.03117



.002787



perlakuan 1



6



.028



.030



.02917



.000753



perlakuan 2



6



.033



.038



.03467



.002066



perlakuan 3



6



.031



.034



.03272



.001386



Valid N (listwise)



6



Tes Normalitas volume edema awal Tests of Normality volume edema awal Kolmogorov-Smirnova Statistic



df



Shapiro-Wilk



Sig.



Statistic



df



Sig.



*



,918



6



,493



kontrol negatif



,204



6



,200



kontrol positif



,285



6



,139



,821



6



,091



*



,958



6



,804



perlakuan 1



,214



6



,200



perlakuan 2



,370



6



,010



,649



6



,002



6



*



,886



6



,299



perlakuan 3



,261



,200



*. This is a lower bound of the true significance. a. Lilliefors Significance Correction Tests of Normality volume edema 90 menit Kolmogorov-Smirnova Statistic kontrol negatif kontrol positif perlakuan 1 perlakuan 2 perlakuan 3



,186 ,248 ,147 ,180 ,261



df



Shapiro-Wilk



Sig.



Statistic



df



Sig.



6



,200*



,930



6



,584



6



,200



*



,823



6



,094



,200



*



,992



6



,994



,200



*



,967



6



,874



,200



*



,801



6



,060



6 6 6



84



*. This is a lower bound of the true significance. a. Lilliefors Significance Correction



Tests of Normality volume edema 90 + 60 menit Kolmogorov-Smirnova Statistic kontrol negatif kontrol positif perlakuan 1 perlakuan 2 perlakuan 3



df



,201 ,239 ,157



Sig.



df



Sig.



,200*



,914



6



,464



6



,200



*



,914



6



,462



,200



*



,968



6



,881



,200



*



,965



6



,856



,200



*



,960



6



,823



6



,203



Statistic



6 6



,174



Shapiro-Wilk



6



*. This is a lower bound of the true significance. a. Lilliefors Significance Correction



Tests of Normality volume edema 90 + 120 menit Kolmogorov-Smirnova Statistic kontrol negatif



df



,202



Shapiro-Wilk



Sig. 6



Statistic



df



Sig.



,200



*



,921



6



,515



*



,974



6



,921



kontrol positif



,196



6



,200



perlakuan 1



,271



6



,190



,873



6



,240



6



,200



*



,916



6



,480



,200



*



,889



6



,314



perlakuan 2 perlakuan 3



,250 ,206



6



*. This is a lower bound of the true significance. a. Lilliefors Significance Correction Tests of Normality volume edema 90 + 180 menit Kolmogorov-Smirnova Statistic kontrol negatif kontrol positif perlakuan 1



,205 ,203 ,191



df



Shapiro-Wilk



Sig.



Statistic



df



Sig.



6



,200*



,932



6



,593



6



,200



*



,920



6



,505



,200



*



,973



6



,911



*



,926



6



,548



,912



6



,446



6



perlakuan 2



,221



6



,200



perlakuan 3



,270



6



,195



*. This is a lower bound of the true significance. a. Lilliefors Significance Correction



85



Tests of Normality volume edema 90 + 240 menit Kolmogorov-Smirnova Statistic kontrol negatif kontrol positif



df



,240 ,179



Shapiro-Wilk



Sig.



Statistic



df



Sig.



6



,200*



,875



6



,245



6



,200



*



,925



6



,540



*



,866



6



,212



perlakuan 1



,254



6



,200



perlakuan 2



,290



6



,125



,840



6



,131



6



*



,815



6



,079



perlakuan 3



,248



,200



*. This is a lower bound of the true significance. a. Lilliefors Significance Correction



6.3 Uji Homogenitas Varian Volume Edema Setelah Induksi Karagenin Antar Kelompok Perlakuan Test of Homogeneity of Variances volume edema 90 menit Levene Statistic



df1



,774



df2 4



Sig. 25



,552



Test of Homogeneity of Variances volume edema 90 + 60 menit Levene Statistic



df1



,906



df2 4



Sig. 25



,475



Test of Homogeneity of Variances Vedema_90+120 menit Levene Statistic



df1



df2



1,431



4



Sig. 25



,253



Test of Homogeneity of Variances volume edema 90 + 180 menit Levene Statistic 2,779



df1



df2 4



86



Sig. 25



,049



Test of Homogeneity of Variances volume edema 90 + 240 menit Levene Statistic



df1



df2



8,005



4



Sig. 25



,000



6.4 Analisis Hasil Statistik Test Statisticsa,b volume awal edema Chi-Square



13,417



Df



4



Asymp. Sig.



,009



a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: kelompok ANOVA Vedema_ind Sum of Squares



df



Mean Square



Between Groups



,000



4



,000



Within Groups



,001



25



,000



Total



,001



29



F 1,217



Sig. ,329



ANOVA Vedema_90 + 60 Sum of Squares



df



Mean Square



Between Groups



,000



4



,000



Within Groups



,001



25



,000



Total



,001



29



ANOVA Vedema_90 + 120



87



F 1,329



Sig. ,287



Sum of Squares



df



Mean Square



Between Groups



,000



4



,000



Within Groups



,000



25



,000



Total



,001



29



F



Sig.



3,626



,018



Test Statisticsa,b Vedema_90 +180 Chi-Square



8,592



Df



4



Asymp. Sig.



,072



a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: kelompok Test Statisticsa,b volume edema 90+240 Chi-Square



19,464



df



4



Asymp. Sig.



,001



a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: kelompok



Test Statisticsa



Z Asymp. Sig. (2tailed)



V0 K+ -



V0 P1 -



V0 P2 -



V0 P3 -



V0 P1 -



V0 P2 -



V0 P3 -



V0 P2 -



V0 P3 -



V0 P3 -



V0 K-



V0 K-



V0 K-



V0 K-



V0 K+



V0 K+



V0 K+



V0 P1



V0 P1



V0 P2



-,135b



-1,682b



-1,581c



-,742c



-1,761b



-1,913c



-,420c



-2,207c



-2,214c



-,730b



,893



,093



,114



,458



,078



,056



,674



,027



,027



,465



a. Wilcoxon Signed Ranks Test b. Based on positive ranks. c. Based on negative ranks.



Multiple Comparisons Dependent Variable: Vedema_90 +120



88



LSD 95% Confidence Interval



Mean Difference (I) kelompok



(J) kelompok



kontrol negatif



kontrol positif



kontrol positif



perlakuan 1



perlakuan 2



perlakuan 3



(I-J)



Std. Error



Sig.



Lower Bound



Upper Bound



.008000*



.002405



,003



.00305



.01295



perlakuan 1



*



.007833



.002405



,003



.00288



.01279



perlakuan 2



.004833



.002405



,055



-.00012



.00979



perlakuan 3



*



.005167



.002405



,042



.00021



.01012



kontrol negatif



-.008000*



.002405



,003



-.01295



-.00305



perlakuan 1



-.000167



.002405



,945



-.00512



.00479



perlakuan 2



-.003167



.002405



,200



-.00812



.00179



perlakuan 3



-.002833



.002405



,250



-.00779



.00212



kontrol negatif



-.007833*



.002405



,003



-.01279



-.00288



kontrol positif



.000167



.002405



,945



-.00479



.00512



perlakuan 2



-.003000



.002405



,224



-.00795



.00195



perlakuan 3



-.002667



.002405



,278



-.00762



.00229



kontrol negatif



-.004833



.002405



,055



-.00979



.00012



kontrol positif



.003167



.002405



,200



-.00179



.00812



perlakuan 1



.003000



.002405



,224



-.00195



.00795



perlakuan 3



.000333



.002405



,891



-.00462



.00529



kontrol negatif



-.005167*



.002405



,042



-.01012



-.00021



kontrol positif



.002833



.002405



,250



-.00212



.00779



perlakuan 1



.002667



.002405



,278



-.00229



.00762



perlakuan 2



-.000333



.002405



,891



-.00529



.00462



*. The mean difference is significant at the 0.05 level.



Test Statisticsa



Z Asymp. Sig. (2tailed)



V5 K+ -



V5 P1 -



V5 P2 -



V5 P3 -



V5 P1 -



V5 P2 -



V5 P3 -



V5 P2 -



V5 P3 -



V5 P3 -



V5 K-



V5 K-



V5 K-



V5 K-



V5 K+



V5 K+



V5 K+



V5 P1



V5 P1



V5 P2



-2,207b



-2,201b



-1,261b



-1,826b



-1,625b



-2,003c



-1,054c



-2,226c



-2,207c



-1,753b



,027



,028



,207



,068



,104



,045



,292



,026



,027



,080



a. Wilcoxon Signed Ranks Test b. Based on positive ranks. c. Based on negative ranks.



Tabel 5.3 Uji normalitas volume edema sebelum diinduksi karagenin antar kelompok perlakuan



89



Kelom pok hewan coba K(-) K(+) P1 P2 P3



Sebelum diinduksi Sap Lav hiro ene wilk , 493 , 091 , 804 , 002 , 299



90 menit Sap hiro wilk , 584 , 094 , 994 , 874 , 060



Laven e



,552



90 + 60 menit Sap hiro wilk , 464 , 462 , 881 , 856 , 823



Laven e



,475



90 + 120 menit Saphir o wilk



Lav ene



90 + 180 menit Saphir o wilk



,515



,593



,921



,505



,240



, 070



,911



,480



,548



,314



,446



Lav ene



,049



90 + 240 menit Sap Lav hiro ene wilk , 245 , 540 , 0,00 212 01 , 131 , 079



Tabel 5.4 Hasil analisis statistik karagenin antar kelompok perlakuan Kelo mpo k hew an coba



K(-) dan K(+) K (-) dan P1 K (-) dan P2 K(-) dan P3 K (+) dan P1 K (+) dan P2K (+) dan P3 P1 dan P2 P1 dan P3 P2 dan P3



Sebelum diinduksi Kru Wilco skal xon l Mann wali Whitn s ey



90 menit One Wa y Ano va



Post Hoc LSD



90 + 60 menit One Way Anov a



Post Hoc LSD



90 + 120 menit One Way Anov a



Post Hoc LSD



90 + 180 menit Kru Wilco skal xon l Mann Wal Whitn is ey



90 + 240 menit Krusk all Walis



Wilco xon Mann Whitn ey



,893



-



-



,003



-



,027



,093



-



-



,003



-



,028



,114



-



-



,055



-



,207



,458



-



-



,042



-



,068



,078



-



-



,945



-



,104



,009



,329



,287



,018



,072



,001



,056



-



-



,200



-



,045



,674



-



-



,250



-



,292



,027



-



-



,224



-



,026



,027



-



-



,278



-



,027



,456



-



-



,891



-



,080



90



Keterangan : : Berbeda secara signifikan (p0,05) K (-)



: Kelompok kontrol negatif



K (+)



: Kelompok kontrol positif (diberi aspirin 100 mg)



P1



: Kelompok perlakuan 1 (diberi ekstrak daun kelor dan daun salam 300 mg)



P2



: Kelompok perlakuan 2 (diberi ekstrak daun kelor dan daun salam 600 mg)



P3



: Kelompok Perlakuan 3 (diberi ekstrak daun kelor dan daun salam 750 mg)



Lampiran 7 Dokumentasi Penelitian



91



7.1 Kombinasi ekstrak etanol



7.2 CMC-NA 1%



daun salam (Syzygium polyanthum wight Walp) kelor (Moringa Oleifera)



7.3 Karagenin



92



7.4 Tikus putih (Rattus norvegicus)



7.5 Induksi Karagenin



jantan galur Wistar



7.6 Penyondean kombinasi ekstrak



7.8 pengukuran edema dengan



etanol daun salam (Syzygium



plestismometer



polyanthum wight Walp) kelor (Moringa Oleifera)



7.9 Instrumen penelitian A



B



93



C



D



A



B



8.0 Terminasi hewan coba



94



95