Biofar Print Resume [PDF]

Citation preview

RESUME JURNAL IN VITRO PERMEATION OF MICRONIZED & NANONIZED ALAPTIDE FROM SEMISOLID FORMULATIONS Disusun untuk memenuhi tugas mata kuliah Biofarmasetika dengan dosen pengampu Ebta Narasukma A., S.Farm., Apt.



Disusun Oleh : Dhista Levian H. Indah Putri Laila Zulfiyah Lintang Maharani Martanti Gunawan Nala Ghassani Rima Noermastuti



1041411164 1041411170 1041411171 1041411172 1041411174 1041411177 1041411178



PROGRAM STUDI S-1 FARMASI SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI - YAYASAN PHARMASI SEMARANG 2014 – 2015 IN VITRO PERMEATION OF MICRONIZED & NANONIZED



ALAPTIDE FROM SEMISOLID FORMULATIONS Telah



diketahui bahwa kerusakan atau defisit kulit dan mukosa, seperti



cedera, luka, morsus, melepuh, terbakar, pengentalan, cedera radiasi, radiasi ultraviolet, cedera listrik, luka trauma, luka kulit, luka baring, dan penyakit kulit bulosa, menyebabkan degeneratif pengelupasan kulit, nekrosis, apoptosis, atau kematian sel apoptosis seperti jaringan penyusun sel-sel kulit atau jaringan penyusun sel mukosa. Metode yang efektif untuk pencegahan atau terapi penyakit yang disebabkan oleh kerusakan mekanis atau fisik atau cacat jaringan kulit atau jaringan mukosa, adalah dengan mengaplikasikan obat yang dapat meregenerasi dan atau merekonstruksi jaringan kulit, jaringan mukosa, dan menyusun sel. (S)-8-Methyl-6,9diazaspiro [4.5] decan-7,10-dione atau alaptide dapat dianggap sebagai kulit atau mukosa promotor regenerasi jaringan yang dirancang sebagai analog dari MIF (melanocyte-stimulating hormone release-inhibiting factor). Alaptide adalah senyawa putih kristal, umumnya kurang larut, stabil di bawah sinar matahari, dan dapat disimpan pada suhu kamar. Pengaruh alaptide pada regenarasi epidermis diuji dalam berbagai pengujian.



Struktur (S)-alaptide Berdasarkan latar belakang di atas, dapat disimpulkan bahwa alaptide menunjukkan potensi besar untuk aplikasi lokal pengobatan dan atau regenerasi kulit atau mukosa yang terluka. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi tingkat perembesan atau permeasi alaptide melalui membran biologis. Penetrasi atau perembesan senyawa melalui membran ini penting untuk diketahui terutama pada pemakaian lokal, micronized dan bentuk nanonized dari (S)alaptide yang memiliki perlakuan berbeda. Perembesan kedua bentuk alaptide



melalui membran dievaluasi menggunakan teknik PAMPA (paralel membran buatan uji permeabilitas). PENGUJIAN FORMULASI SEMIPADAT 1. Komposisi gel dengan alaptide 1% (w/w) adalah sebagai berikut: alaptide 1 g, salep karboksimetilselulosa (karboksimetilselulosa natrium 5 g, 10 g Macrogol 300, propilen glikol 2,5 g, 0,2 g methylparaben, propylparaben 0,2 g, dan air murni 87,3 g) hingga 100 g. 2. Komposisi krim dengan alaptide 1% (w/w) adalah sebagai berikut: alaptide 1 g, cremor neoaquasorb 95 g, dan propilen glikol hingga 100 g. 3. Komposisi salep dengan alaptide 1% (w/w) adalah sebagai berikut: alaptide 1 g, cera lanae hydrosa 75 g, 20 g vaselin kuning, dan parafin cair 100 g. UJI IN-VITRO PAMPA Permeabilitas micronized dan nanonized alaptide dievaluasi secara in-vitro, menggunakan PAMPA vertikal (sejajar membran buatan uji permeabilitas) sistem (BD gentest precoated sistem pelat PAMPA, 96 sumur). Sistem PAMPA merupakan membran lipofilik, yang permukaan dilapisi oleh fosfolipid yang mensimulasikan dinding usus. Alaptide micronized (10 mg) atau jumlah nanosuspension sesuai dengan 10 mg alaptide ditimbang. Sampel donor disiapkan dengan melarutkan sampel yang diuji di 40 mL 0,01 M HCl dan setelah 15 menit pH diatur sampai pH 6 menggunakan penyangga bikarbonat. Garam penyangga karbonat (larutan fisiologis) dengan pH 7,4 digunakan sebagai fase reseptor. Sekitar 0,5 jam sebelum percobaan, sistem PAMPA diambil dari freezer dan dipanaskan sampai suhu lingkungan. Tahap reseptor (200 µL/sumur) dipipet ke dalam sumur atas. Tahap donor dipipet ke dalam sumur yang lebih rendah (300 µL/sumur). Setelah waktu inkubasi (5 jam) 10 µL fase akseptor diambil dan dicampur dengan larutan fisiologis (990 µL). Analisis sampel untuk konten alaptide dilakukan menggunakan sistem HPLC, dilengkapi dengan sistem diode array detection (DAD). Akuisisi data dilakukan dengan menggunakan software kromatografi ChemStation. Digunakan sebuah kolom kromatografi. Campuran MeCN (HPLC grade, 50,0%) dan H2O (HPLC-Mili-Q Grade, 50,0%) digunakan sebagai fase gerak. Total aliran kolom adalah 0,5 mL /



menit, injeksi 10 mL, suhu kolom 24°C, dan sampel suhu 10°C. Deteksi panjang gelombang 204 nm; waktu analisis adalah 10 menit. Waktu retensi dari alaptide adalah 3,1±0,05 menit, batas deteksi (LOD) adalah 6,8 ng/mL, dan batas kuantifikasi (LOQ) adalah 23,0 ng/mL. UJI IN-VITRO PERMEASI TRANSDERMAL Sampel kulit diperoleh dari telinga babi. Kulit punggung dipotong dan disimpan pada suhu -20 °C sampai digunakan. Sampel kulit perlahan-lahan dicairkan (pada suhu 4 °C semalam dan kemudian pada suhu lingkungan). Perembesan melalui kulit alaptide micronized (1 mL suspensi dengan konsentrasi alaptide dari 1%), nanonized alaptide sendiri (dalam jumlah yang sesuai dengan konsentrasi 1% dari alaptide micronized), dan kedua bentuk alaptide dicampurkan ke dalam salep, krim, atau gel dievaluasi secara in vitro, menggunakan difusi sel Franz, dengan luas permukaan donor dari 63,585 mm2 dan volume reseptor 5,2 mL. Kulit dipasang antara kompartemen donor dan reseptor dari Franz difusi sel dengan epidermis sisi atas. Untuk bagian donor dari Franz difusi sel dengan volume 1 mL sampel diterapkan dalam bentuk larutan, suspensi, emulsi, gel, krim, atau salep, dan kemudian kompartemen donor sel ditutupi oleh paraffin. Kompartemen reseptor dipenuhi dengan fosfat buffered saline (pH 7,4) dan dipertahankan pada saat menggunakan. Isi kompartemen reseptor terus diaduk menggunakan pengadukan bar magnet. Kulit disimpan dalam kontak dengan fase reseptor selama 0,5 jam sebelum percobaan. Sampel (0,5 mL) dari fase reseptor ditarik pada enam interval waktu yang telah ditentukan selama 24 jam (0,5, 1, 2, 4, 6, dan 24 jam), dan sel diisi ulang dengan jumlah yang setara dengan larutan buffer segar. Minimal lima Penentuan dilakukan dengan menggunakan fragmen kulit dari minimal 2 hewan untuk masing-masing senyawa. Sampel segera dianalisis dengan metode HPLC menggunakan kondisi yang sama seperti yang dijelaskan sebelumnya. HASIL DAN PEMBAHASAN UJI IN-VITRO PAMPA Pemutaran awal permeabilitas micronized dan nanonized alaptide, yang diperoleh dengan proses penggilingan dengan manik-manik kaca, dilakukan dengan



menggunakan polyvinylidene fluoride (PVDF), yaitu menggunakan PAMPA. Permeabilitas nanoalaptide melalui PAMPA setelah 5 jam (0,6 mg ± 0,01) adalah 2 kali lipat lebih tinggi dari alaptide micronized (0,3 mg ± 0,01). Kedua nilai permeabilitas dinyatakan sebagai mean ± SD (percobaan). Hasil percobaan PAMPA dan pengujian di sel Franz menyatakan bahwa perembesan micronized dan nanonized alaptide paling signifikan dipengaruhi oleh penggunaan kulit yang nyata sebagai penghalang dalam sel Franz dan membran PVDF buatan di PAMPA. Kelemahan utama dari teknik PAMPA adalah bahwa ia hanya dapat memprediksi difusi pasif dan tidak dapat menghasilkan deskripsi lengkap dari proses permeabilitas pada kulit yang nyata. Di sisi lain, PAMPA adalah alat yang sangat baik untuk cepat memprediksi permeabilitas pasif melalui saluran pencernaan dengan efisiensi throughput yang tinggi, seperti yang disebutkan di atas. Parameter lain yang dapat mempengaruhi hasil kelarutan, sifat superassembly supramolekul dari nanonized alaptide, dan sifat nanopartikel stabilizer. UJI IN-VITRO TRANSDERMAL Tujuan utama dalam penelitian adalah pengujian nanonized dan micronized alaptide perembesan melalui kulit telinga babi. Pertama, kedua bentuk alaptide dievaluasi menggunakan buffer fosfat (pH 7,4) kemudian dimasukkan ke dalam formulasi semipadat. Sediaan disiapkan dalam bentuk salep, krim, dan gel dengan kandungan alaptide konsentrasi 1% (b/b). Alaptide yang digunakan dalam bentuk mikrokristalin atau dalam bentuk nanopartikel. Kulit telinga babi dipilih untuk evaluasi awal dari perembesan, karena jaringan ini cocok dengan model kulit manusia. Percobaan permeasi kulit dilakukan dengan menggunakan static Franz sel difusi hasil transdermal perembesan disajikan dari micronized dan nanonized alaptide dan data yang diperoleh dengan menggunakan metode PAMPA berbeda. Perbedaan utama adalah karena sifat yang berbeda dari transportasi "membran;" diafragma PAMPA adalah model buatan dari sel lipid bilayer "simulasi" dinding usus, sedangkan kulit telinga babi merupakan penghalang alami yang dibangun jauh lebih kompleks.



Hasil secara umum menunjukkan bahwa alaptide micronized meresap secara signifikan lebih dari nanonized alaptide. Jumlah nanonized alaptide yang meresap melalui kulit adalah sekitar 2 kali lipat kurang dari jumlah meresap alaptide micronized. Alaptide dalam formulasi semipadat dengan pengamatan secara in-vitro (permeasi transdermal) lebih tinggi gel dan krim daripada buffer. Secara umum dapat dinyatakan bahwa formulasi semipadat hidrofilik memiliki daya perembesan lebih tinggi dibandingkan dengan salep, karena terhubung dengan efek pelembab pada stratum korneum dan adanya propilen glikol. Perembesan kedua bentuk alaptide melalui kulit dari salep sangat minim namun alaptide meresap dari salep 1 jam lebih cepat dari buffer. Hal itu menunjukkan bahwa formulasi kental mengurangi koefisien difusi molekul, sehingga memperlambat penyerapan. Pemilihan bentuk micronized atau nanonized dari alaptide dan jenis formulasi dapat mempengaruhi kedalaman dan tingkat permeasi untuk kulit, yaitu efek kuratif. Komposisi farmasi seperti mengandung alaptide dapat digunakan untuk perumusan alaptide sendiri atau untuk kombinasi alaptide dengan obat lain dan dapat diterapkan untuk perawatan kulit dan mukosa lesi, misalnya luka bakar. KESIMPULAN Berdasarkan uraian diatas dapat disimpulkan bahwa nanonized alaptide meresap melalui PAMPA lebih baik dari bentuk micronized. Pengamatan yang berbeda diperoleh untuk permeasi melalui kulit, di mana alaptide micronized meresap 2 kali lipat lebih banyak dari buffer dan komposisi farmasi semipadat selain bentuk nanonize. Media hidrofilik dan hidrofobik secara signifikan mempengaruhi perembesan alaptide. Kedua bentuk alaptide meresap lebih efektif dalam bentuk gel hidrofilik dan krim, dan juga transdermal dengan penambahan propilen glikol dari buffer. Perembesan kedua bentuk alaptide melalui kulit dari sediaan salep sangat minim. Hal ini disebabkan karena konstitusi salep tidak mendukung perembesan alaptide.



Sumber : Opatrilova, R., Et Al. 2013. In Vitro Permeation of Micronized and Nanonized Alaptide from Semisolid Formulations. Scientific Journal. Palackeho : University of Veterinary and Pharmaceutical Sciences.