Modul Praktikum Mikrobiologi TA 2022-2023 [PDF]

Citation preview

KATA PENGANTAR Puji syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Kuasa atas rahmat dan berkat-Nya kami



dapat



menyelesaikan



Modul Mikrobiologi



ini.



Adapun



tujuan



dari



pembuatan



modul ini adalah sebagai panduan bagi para pembaca dalam melakukan kegiatan praktikum



mikrobiologi,



khususnya



mahasiswa



Program



Studi



Sarjana



Terapan



Sanitasi Lingkungan. Semoga modul ini dapat membantu para pembaca yang berminat untuk mengembangkan diri, memperkaya wawasan dan menambah khasanah ilmu pengetahuan. Mikrobiologi



merupakan



cabang



ilmu



dari



biologi



yang



mempelajari



tentang



mikroba. Pada modul praktikum ini mahasiswa dapat mempelajari alat dan bahan yang akan dipakai, cara menggunakan alat dan bahan untuk melihat segala jenis mikroba, melakukan



bentuk



mikroba,



sterilisasi



alat



sifat



mikroba,



dan



bahan,



dan



melakukan



melakukan



kegiatan



simulasi



perkembangbiakan



dalam



mikroba



dan



melakukan identifikasi jenis mikroba. Semoga,



modul



ini



dapat



dipakai



sebagai



acuan/pegangan



oleh



mahasiswa



Program Studi Sarjana Terapan Sanitasi Lingkungan Poltekkes Kemenkes Gorontalo.



Gorontalo, September 2022 Hormat Kami,



Penyusun



ii



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



DAFTAR ISI KATA PENGANTAR ..............................................................................................................ii DAFTAR ISI .......................................................................................................................... iii ATURAN UMUM LABORATORIUM MIKROBIOLOGI LINGKUNGAN .................................. v A. KELENGKAPAN MAHASISWA............................................................................... v B. PERSIAPAN ........................................................................................................... v C. KETERLAMBATAN................................................................................................. v D. ALUR PRAKTIKUM ................................................................................................ v E. PERGANTIAN JADWAL .........................................................................................vi KESEHATAN DAN KESELAMATAN KERJA LABORATORIUM .......................................... vii A. Prosedur K3 Laboratorium secara Umum .............................................................. vii B. Prosedur K3 Laboratorium Mikrobiologi ................................................................. vii MATERI 1 Pengenalan Alat dan Bahan Laboratorium........................................................... 1 A. Tujuan Praktikum .................................................................................................... 1 B. Landasan Teori ....................................................................................................... 1 C. Cara Kerja .............................................................................................................. 4 D. Hasil Praktikum ....................................................................................................... 4 MATERI 2 Disinfeksi dan Sterilisasi Peralatan ...................................................................... 5 A. Tujuan Praktikum .................................................................................................... 5 B. Landasan Teori ....................................................................................................... 5 C. Alat ......................................................................................................................... 6 D. Bahan ..................................................................................................................... 6 E. Metode.................................................................................................................... 6 F. Hasil Praktikum ....................................................................................................... 7 MATERI 3 Pembuatan Media dalam Praktikum Mikrobiologi Lingkungan ............................. 8 A. Tujuan Praktikum .................................................................................................... 8 B. Landasan Teori ....................................................................................................... 8 C. Alat ....................................................................................................................... 10 D. Bahan ................................................................................................................... 10 E. Metode.................................................................................................................. 11 F. Hasil Praktikum ..................................................................................................... 11 MATERI 4 Sampling Mikrobiologi ........................................................................................ 12 A. Tujuan Praktikum .................................................................................................. 12 B. Landasan Teori ..................................................................................................... 12 C. Alat ....................................................................................................................... 13 D. Bahan ................................................................................................................... 13 E. Prosedur Kerja ...................................................................................................... 14 F. Hasil Praktikum ..................................................................................................... 15 MATERI 5 Pemeriksaan Angka Lempeng Total .................................................................. 16 A. Tujuan Praktikum .................................................................................................. 16 B. Landasan Teori ..................................................................................................... 16 iii



C. Alat ....................................................................................................................... 17 D. Bahan ................................................................................................................... 17 E. Prosedur Praktikum .............................................................................................. 17 F.Hasil Praktikum ....................................................................................................... 18



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



MATERI 6 Pemeriksaan Bakteri Salmonella sp................................................................... 19 A. Tujuan Praktikum .................................................................................................. 19 B. Landasan Teori ..................................................................................................... 19 C. Alat ....................................................................................................................... 20 D. Bahan ................................................................................................................... 20 E. Prosedur Praktikum .............................................................................................. 20 F. Hasil Praktikum ..................................................................................................... 22 MATERI 7 Pemeriksaan MPN Bakteri Coliform ................................................................... 23 A. Tujuan Praktikum .................................................................................................. 23 B. Landasan Teori ..................................................................................................... 23 C. Alat ....................................................................................................................... 24 D. Bahan ................................................................................................................... 24 E. Prosedur Praktikum .............................................................................................. 24 F. Hasil Praktikum ..................................................................................................... 25 MATERI 8 Pemeriksaan MPN Bakteri Eschericia Coli......................................................... 26 A. Tujuan Praktikum .................................................................................................. 26 B. Landasan Teori ..................................................................................................... 26 C. Alat ....................................................................................................................... 27 D. Bahan ................................................................................................................... 27 E. Prosedur Praktikum .............................................................................................. 27 F.Hasil Praktikum ....................................................................................................... 28 MATERI 9 Pemeriksaan Bakteri Staphylococcus Aureus .................................................... 29 A. Tujuan Praktikum .................................................................................................. 29 B. Landasan Teori ..................................................................................................... 29 C. Alat ....................................................................................................................... 30 D. Bahan ................................................................................................................... 30 E. Prosedur Praktikum .............................................................................................. 30 F. Hasil Praktikum ..................................................................................................... 31 MATERI 10 Pemeriksaan Jamur Kapang & Khamir ............................................................ 32 A. Tujuan Praktikum .................................................................................................. 32 B. Landasan Teori ..................................................................................................... 32 C. Alat ....................................................................................................................... 33 D. Bahan ................................................................................................................... 33 E. Prosedur Praktikum .............................................................................................. 33 F. Hasil Praktikum ..................................................................................................... 34 DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................................ 35 LAMPIRAN Tugas Pendahuluan ......................................................................................... 38 KONTRAK PENILAIAN PRAKTIKUM ................................................................................. 41



iv



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



ATURAN UMUM LABORATORIUM MIKROBIOLOGI LINGKUNGAN A. KELENGKAPAN MAHASISWA Setiap praktikum mikrobiologi lingkungan, praktikan harus menggunakan ketentuan pakaian sebagai berikut secara lengkap. 1. Seragam mahasiswa sanitasi lingkungan 2. Pin logo Poltekkes Kemenkes Gorontalo 3. Nametag mahasiswa 4. Jas laboratorium 5. Kaos kaki 6. Sepatu yang menutup seluruh bagian kaki 7. Masker 8. Sarung tangan Adapun perlengkapan lain yang harus dibawa praktikan setiap melaksanakan praktikum mikrobiologi lingkungan yaitu: 1. Modul praktikum 2. Alat tulis dan kalkulator 3. Kelengkapan yang telah disampaikan PLP sebelum pertemuan



B. PERSIAPAN Sebelum praktikum dimulai, praktikan harus mempersiapkan diri dengan melakukan hal-hal berikut: 1. Membaca dan memahami modul praktikum 2. Datang tepat waktu 3. Mengisi daftar pengguna laboratorium 4. Meletakkan tas pada titik yang telah ditentukan oleh PLP



C. KETERLAMBATAN 1. Praktikan yang terlambat kurang dari 15 menit dari jadwal praktik masih dapat mengikuti praktikum dengan memperoleh sanksi kedisiplinan dari PLP setelah praktikum selesai. 2. Praktikan yang terlambat lebih dari 15 menit tidak diperkenankan mengikuti praktikum dan mendapat nilai 0 pada mata praktikum tersebut. 3. Praktikan



yang



terlambat



mengumpulkan



laporan



praktikum



akan



mendapat



pengurangan nilai 10% hingga 100% untuk laporan praktikum yang disusun.



D. ALUR PRAKTIKUM 1. Praktikan telah siap menggunakan seluruh kelengkapan measuki laboratorium 2. Praktikan meletakkan tas di tempat yang telah ditentukan oleh PJ Laboratorium 3. Berdoa sebelum praktikum 4. Praktikan mengisi presensi dan peminjaman alat v



5. Praktikan melaksanakan pre-test 6. Pelaksanaan praktikum 7. Praktikan melakukan dokumentasi kegiatan praktikum dengan bimbingan PLP 8. Praktikan melakukan pemeliharaan alat dan mengisi form pemeliharaan



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



9. Penugasan dari PLP 10. Berdoa selesai praktikum



E. PERGANTIAN JADWAL Pelaksanaan praktikum sesuai dengan jadwal yang telah ditentukan oleh pengelola laboratorium. Pergantian jadwal hanya berlaku pada alasan khusus dimana praktikan mengalami sakit atau memiliki urusan mendesak. Adapun prosedur pergantian jadwal dilaksanakan sebagai berikut: 1. Menghubungi PLP terkait materi praktikum maksimal 3 jam sebelum praktikum dimulai 2. Mencari praktikan lainnya yang bersedia bertukar jadwal 3. Jika tidak ada praktikan yang dapat bertukar jadwal, maka praktikan yang mengajukan pergantian jadwal wajib melakukan praktikum pengganti pada waktu yang telah disepakati dengan PLP.



vi



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



KESEHATAN DAN KESELAMATAN KERJA LABORATORIUM A. Prosedur K3 Laboratorium secara Umum 1. Tidak diperkenankan membawa hewan peliharaan, makanan dan minuman ke dalam laboratorium. 2. Gunakan Alat Pelindung Diri dan ketentuan perlengkapan secara lengkap. 3. Ikuti pernyataan kehati-hatian yang disampaikan PLP pada tiap praktikum. 4. Kenali simbol internasional biohazard, jangan membuang limbah hasil praktikum sembarangan. 5. Rapihkan seluruh fasilitas dan peralatan sebelum meninggalkan laboratorium. B. Prosedur K3 Laboratorium Mikrobiologi 1. Lakukan cuci tangan menggunakan sabun sebelum dan sesudah melaksanakan praktikum. 2. Disinfeksi area kerja dengan mengusap meja kerja menggunakan ethanol 70% sebelum dan sesudah melaksanakan praktikum. 3. Jauhkan segala macam bahan yang mudah terbakar saat menyalakan lampu Bunsen. 4. Matikan lampu Bunsen dengan cara ditutup menggunakan penutupnya, bukan ditiup. 5. Jangan menghirup bau bahan kimia / reagen secara sengaja



vii



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



MATERI 1 Pengenalan Alat Laboratorium A. Tujuan Praktikum 1. Praktikan dapat mengetahui peralatan yang digunakan di laboratorium mikrobiologi 2. Praktikan dapat memahami fungsi dari peralatan yang terdapat di laboratorium mikrobiologi 3. Praktikan dapat mengoperasikan peralatan yang ada di laboratorium mikrobiologi B. Landasan Teori Laboratorium mikrobiologi berkaitan dengan pendeteksian, pembiakan, dan identifikasi mikroorganisme seperti: jamur, bakteri, dan virus. Laboratorium ini membutuhkan gedung yang terbangun dengan baik dan dilengkapi oleh komponen penyusun berupa: peralatan praktik dan keamanan yang memadai, sumber daya manusia yang terlatih, sanitasi area kerja, dan pemeliharaan alat yang rutin. Peralatan yang terdapat di laboratorium mikrobiologi dapat dikategorikan menjadi: alat untuk sterilisasi, alat untuk pembiakan dan identifikasi, dan barang pecah belah. 1. Alat untuk Sterilisasi Sterilisasi merupakan sebuah proses dari penghancuran atau penghilangan semua bentuk kehidupan mikroorganisme termasuk sel vegetative, spora, dan virus dari sebuah permukaan, media, atau benda. (Naveena Varghese) Alat yang biasa digunakan untuk melakukan sterilisasi adalah sebagai berikut. a. Autoklaf



= Berfungsi untuk melakukan disinfeksi dan sterilisasi menggunakan metode fisik dengan mengombinasikan uap panas, tekanan, dan waktu.



b. Oven



= Berfungsi untuk melakukan disinfeksi dan sterilisasi melalui sistem konduksi dengan menggunakan suhu yang tinggi pada beberapa jam. Suhu yang tinggi memanaskan permukaan alat dan panas diserap dan dipindah ke bagian tengah alat.



1



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



2. Alat untuk Pembiakan dan Identifikasi Pembiakan merupakan kegiatan untuk menumbuhkan populasi bakteri dalam media pertumbuhan yang ada di laboratorium. Kegiatan ini bertujuan untuk mempermudah proses identifikasi jenis bakteri, sebab ukurannya sangat kecil dan harus dibiakkan koloninya terlebih dahulu untuk dapat diamati. Seluruh tahapan dalam kegiatan pembiakan dan identifikasi mikroorganisme harus dilaksanakan secara aseptis (Milne Library). Adapun peralatan yang paling sering berperan dalam kegiatan ini adalah: a. Neraca Analitik



= Berfungsi untuk mengukur berat / masa bahan yang ditimbang.



b. Biologycal



Safety



(BSC)



Cabinet = Berfungsi



untuk



menyediakan



personil,



produk, dan perlindungan lingkungan saat melaksanakan



pemeriksaan



laboratorium



yang berkaitan dengan mikroorganisme . c. Lampu Bunsen



= Lampu yang menyediakan api dari gas terbuka dan berfungsi untuk pemanasan, sterilisasi, dan pembakaran.



d. Centrifuge



= Berfungsi untuk memisahkan cairan / fluida berdasarkan densitasnya.



e. Colony Counter



= Instrumen yang berfungsi untuk menghitung koloni bakteri atau mikroorganisme lainnya yang tumbuh pada media agar.



f. Hotplate



= Kompor



listrik



yang



permukaannya



dilengkapi oleh elemen pemanas tanpa menghasilkan api terbuka. g. Inkubator



= Perangkat



terisolasi



dan



tertutup



yang



menyediakan kondisi suhu, kelembaban, dan kondisi lingkungan lain yang optimal untuk



keperluan



pertumbuhan



mikroorganisme. Alat ini dapat digunakan untuk



membudidayakan



organisme



uniseluler dan multiseluler. h. Mikroskop



= Sebuah alat yang mampu melihat benda dengan ukuran sangat kecil dan tidak



2



terdeteksi oleh mata manusia dengan cara memperbesar objek sehingga bisa diamati.



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



i. Mikropipet



= Jenis pipet untuk mengambil suatu zat cair dengan volume yang sangat kecil dalam skala mikroliter dengan nilai akurasi dan presisi tinggi.



j. pH meter



= Alat



yang



digunakan



untuk



mengukur



konsentrasi ion hidrogen dalam bahan atau larutan dan menyatakan derajat keasaman darinya. k. Vortex Mixer



= Berfungsi untuk mencampur larutan yang ada dalam tabung reaksi.



l. Water Bath



= Berfungsi untuk mengkondisikan suhu yang konstan



untuk



menggunakan



keperluan tabung



inkubasi



reaksi



pada



pemeriksaan mikrobiologi. m. Jarum Ose



= Merupakan jarum inoculum yang terbuat dari kawat



nichrome



atau



platinum



dan



digunakan untuk menginokulasi mikrobia dari suatu media ke media lainnya. n. Pipet Filler



= Pipet yang terbuat dari karet dan berfungsi untuk mentransfer sejumlah cairan yang terukur dari pipet ukur.



3. Barang Pecah Belah a. Beaker Glass



= Berfungsi untuk menampung berbagai media secara sementara maupun, tempat penyimpanan akuades, dll.



b. Cawan Petri



= Cawan kaca transparan yang dangkal dan digunakan sebagai wadah media untuk menumbuhkan koloni mikroba dan jamur.



c. Pipet Ukur



= Berfungsi untuk memindahkan cairan dengan volume yang diketahui.



d. Gelas Ukur



= Berfungsi untuk mengukur volume suatu benda atau cairan.



e. Drugalsky



= Berfungsi untuk meratakan cairan / sampel pada media agar.



f. Tabung reaksi



3



= Berfungsi untuk mencampurkan cairan dan penumbuhan mikroba yang diinkubasikan di dalam water bath.



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



g. Erlenmeyer



= Berfungsi sebagai wadah untuk membuat, mencampur, dan memanaskan senyawa kimia.



h. Mortar & Pestle



= Berfungsi untuk menyiapkan bahan atau zat dengan menghancurkan dan menggilingnya menjadi pasta atau bubuk halus.



C. Cara Kerja 1. Pranata Laboratorium Pendidikan (PLP) menyiapkan seluruh peralatan mulai dari alat sterilisasi, alat identifikasi, dan perlengkapan kaca. 2. Pranata Laboratorium Pendidikan (PLP) menjelaskan fungsi, prinsip kerja, dan cara penggunaan alat kepada praktikan. 3. Praktikan memperhatikan, mencatat, dan mengambil gambar alat untuk kelengkapan pada laporan praktikum.



D. Hasil Praktikum



No.



Nama Alat



Fungsi



Prinsip dan Cara Kerja



1. 2. 3. 4. 5. 6. dst.



4



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



MATERI 2 Disinfeksi dan Sterilisasi Peralatan A. Tujuan Praktikum 1. Mahasiswa dapat mengetahui berbagai metode disinfeksi dan sterilisasi peralatan dilaboratorium mikrobiologi. 2. Mahasiswa dapat melakukan disinfeksi dan sterlisasi yang biasa dilakukan pada peralatan di laboratorium mikrobiologi.



B. Landasan Teori Disinfeksi dan sterilisasi merupakan bagian dari kegiatan dekontaminasi. Proses ini sangat esensial untuk memastikan bahwa peralatan di laboratorium terbebas dari kontaminasi mikroorganisme pathogen. Dekontaminasi merupakan seluruh proses penghilangan mikroorganisme atau bisa juga diartikan dengan penghilangan dan netralisasi dari bahan kimia dan bahan radioaktif. Disinfeksi adalah sebuah proses yang mengeliminasi sebagian besar atau keseluruhan mikroorganisme (kecuali spora bakteri) yang ada pada benda mati. Sterilisasi adalah sebuah proses yang dapat mematikan dan/ atau menghilangkan seluruh tingkatan mikroorganisme dan spora. Disinfeksi dan sterilisasi di laboratorium mikrobiologi menunjukkan proses yang dilaksanakan pada persiapan pembiakan media, reagen, dan alat-alat yang harus memiliki kondisi steril. Ada banyak cara yang dilakukan untuk proses sterilisasi yaitu: metode fisika, kimia, dan gabungan antara keduanya. Metode Disinfeksi / Sterilisasi



Metode Kimia



Metode Fisik Matahari Kering • • • • •



Red Heat Flaming Insenerasi Oven Inframerah



Panas



Radiasi



Basah • T < 100°C • T = 100°C • T > 100°C



Filtrasi



Getaran



• Non-Ionisasi • Ionisasi • Elektromagnetik • Partikulat



Fisika – Kimia



Cairan Alkohol, Aldehid, Phenol, Halogen, Logam Berat, dll.



Gas Formaldehid, Etilen Oksida, Ion Plasma



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



5



C. Alat 1. Oven 2. Autoklaf 3. Alat yang disterilisasi 4. Lampu Bunsen 5. Korek Api D. Bahan 1. Kertas payung 2. Karet / Benang 3. Alkohol 70% 4. Akuades 5. Spirtus E. Metode 1. Panas Basah a. Bungkus peralatan menggunakan kertas payung dan ikat. b. Cek air pada penyimpanan alat, pastikan bahwa volume berada di batas yang disarankan. c. Pasang steker autoclave pada stopkontak d. Tekan tombol power on untuk menyalakan alat dan tunggu hingga layar monitor menunjukkan tulisan “OPEN” sebagai tanda bahwa autoklaf sudah siap digunakan. e. Buka pintu autoklaf dengan menggeser gagang ke arah tulisan “OPEN” f. Masukkan alat yang akan disterilisasi g. Tutup pintu autoklaf h. Atur suhu hingga 121°C dan waktu 15 menit i.



Klik tombol “START”



j.



Tunggu hingga autoklaf memberi petunjuk bahwa pintu sudah siap untuk dibuka.



2. Panas Kering a. Bungkus peralatan menggunakan kertas payung dan ikat. b. Tancapkan steker pada sumber listrik. c. Nyalakan oven dengan menekan tombol PUSH / TURN yang merupakan tombol ON / OFF dari oven dan berada pada bagian ujung kiri atas oven hingga muncul display pada oven.



6



d. Atur suhu dengan cara menekan tombol SET secara berbarengan dengan memutar knob PUSH / TURN. (Arah kanan untuk menaikkan suhu dan arah kiri untuk menurunkan suhu) Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



e. Atur pertukaran udara di dalam oven dengan cara menggeser tombol air valve. (Arah maksimum untuk membuka lubang udara dan arah minimum untuk menutup lubang udara) f. Apabila display temperature sudah menunjukkan suhu yang diinginkan, masukkan alat yang akan disterilisasi ke dalam oven. g. Setting waktu dilakukan dengan menekan tombol SET selama tiga detik, kemudian lepas dan putar knob PUSH / TURN ke kanan atau kiri dan pilih TIME OPERATION. h. Tekan knob PUSH / TURN untuk mematikan oven 3. Red Heat & Flamming a. Buka penutup lampu Bunsen, isi dengan menggunakan spirtus b. Atur sumbu dan nyalakan menggunakan korek api c. Ambil jarum ose yang akan disterilisasi, paparkan ke lampu Bunsen hingga ujung jarum berwarna merah membara. F. Hasil Praktikum



No.



Metode Sterilisasi



Penggunaan yang Tepat



Keunggulan



Kelemahan



1. 2. 3. 4. 5.



7



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



MATERI 3 Pembuatan Media dalam Praktikum Mikrobiologi Lingkungan A. Tujuan Praktikum 1. Praktikan dapat mengetahui berbagai media yang digunakan dalam pembiakan mikroorganisme dalam praktikum mikrobiologi. 2. Praktikan dapat memahami berbagai metode dalam preparasi media untuk pembiakan mikroorganisme dalam praktikum mikrobiologi. 3. Praktikan dapat membuat media untuk pembiakan mikroorganisme dalam praktikum mikrobiologi. B. Landasan Teori Bakteri dan jamur merupakan organisme yang sesuai untuk penelitian terkait genetika, fisiologi, sitologi, dan biokimia karena pertumbuhannya yang sangat cepat1. Hal penting yang perlu diperhatikan dalam pembiakan mikroorganisme ini adalah pengondisian lingkungan dan nutrisi yang sesuai dengan kondisi pada habitat mereka. Sebagian besar media pembiakan memiliki kandungan air, sumber karbon & energi, sumber nitrogen, dan faktor penumbuh. Selain itu, pH optimum, ketegangan oksigen, dan osmolaritas juga perlu dijaga2. Koloni merupakan sekelompok mikroorganisme yang berkumpul dan dapat terlihat oleh mata manusia dan tersusun dari sebuah sel induk yang sama. Koloni ini dapat dilihat mata manusia setelah milyaran satuan mikroorganisme terproduksi. Karena seluruh penyusun koloni bakteri berasal dari sel induk yang sama, maka karakteristik dari koloni tersebut seluruhnya sama. Mikroorganisme dengan jenis yang berbeda memiliki karakter spesifik tertentu. Oleh sebab itu, pengidentifikasian karakter koloni bakteri menjadi kunci utama dari proses identifikasi mikroorganisme3. Mikroorganisme dapat tumbuh pada media cair (liquid medium), media padat (solid medium), atau media semipadat (semisolid medium), media bifasik (biphasic media), dan agen padatan lainnya2. 1. Media Cair (Liquid Medium) Media cair merupakan media yang berbentuk seperti kuah dan digunakan untuk pertumbuhan mikroorganisme dalam jumlah yang besar3. Mikroba yang hidup dalam media ini terdeteksi dengan adanya kekeruhan, dan udara pada media. Kekurangan penggunaan media ini adalah sifat mikroba yang tidak terlihat dan eksistensi jenis mikroba lain yang tumbuh tidak dapat terdeteksi2.



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



8



2. Media Padat (Solid Medium) Media padat (solid medium) adalah media yang tersusun dari 1,5% - 2,5% agar dan berfungsi untuk mempelajari karakteristik dari koloni bakteri, isolasi pembiakan alami, dan menyediakan pembiakan dalam waktu yang singkat3. Media padat memiliki kesulitan untuk mendeteksi koloni yang jumlahnya rendah. Oleh sebab itu, biasanya penggunaan media padat disertai dengan tahapan pengayaan mikroba terlebih dahulu. Saat melakukan isolasi pembiakan, inoculum harus disebarkan menggunakan jarum ose steril4. 3. Media Semipadat (Semisolid Medium) Media semipadat merupakan media yang berisi agen pemadatan tertentu yang dicampurkan dengan cairan. Media semipadat ini berbentuk padat pada suhu 40°C dan berbentuk cair pada suhu 100°C. Media ini berfungsi untuk mengetahui motilitas mikroba3. 4. Media Bifasik (Biphasic Media) Media bifasik terbentuk ketika sebuah kultur terdiri atas media padat dan media cair dalam botol yang sama. Media ini biasa digunakan dalam kultur darah untuk meminimalisasi pembukaan wadah media sehingga memperkecil kemungkinan kontaminasi2. Ada tiga tipe media yang biasa digunakan dalam pembiakan mikroorganisme diantaranya sebagai berikut. 1. Media Nutrien, media ini memiliki bahan kimia khusus yang mengandung nutrisi dan mineral untuk pertumbuhan mikroorganisme secara umum. Bahan dasar untuk pertumbuhan mikroba dan zat-zat tertentu yang ditambahkan seperti serum, kuning telur, dan lain-lain. 2. Media Selektif, media ini mengandung nutrisi untuk mikroorganisme tertentu, bahkan kandungan



dalam



media



selektif



menjadi



penghambat



pertumbuhan



bagi



mikroorganisme yang bukan sasarannya. 3. Media Diferensial, media ini berfungsi untuk mengenali mikroorganisme secara spesifik. Media ini memanfaatkan berbagai reaksi biokimia untuk mendeteksi keberadaan mikroorganisme, contohnya adalah dengan perubahan warna.



9



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



Jenis media dan fungsinya dapat dilihat pada tabel berikut: Jenis Cair



Nama Lactose Broth (LB)



Fungsi Mendeteksi adanya coliform pada air dan menyediakan nutrisi untuk pengayaan Salmonella pada tahap pre-enrichment.



Brilliant Green Lactose Broth



Menghambat pertumbuhan bakteri



(BGLB)



gram positif dan menggiatkan pertumbuhan Coliform.



Padat



Plate Count Agar (PCA)



Media tumbuh mikroba pada pemeriksaan Total Plate Count (TPC).



Triple Sugar Iron Agar (TSIA)



Melihat kemampuan mikroorganisme untuk memfermentasikan gula.



Salmonella Shigella Agar (SSA)



Memisahkan bakteri Salmonella dan Shigella.



Manitol Salt Agar (MSA)



Media untuk mengisolasi bakteri Staphylococcus sp.(2-10)



Potato Dextrose Agar (PDA)



Identifikasi, pembiakan, dan enumerasi ragi (khamir) dan jamur. (2-9)



Semipadat Sulphur Indole Motility (SIM)



Diferensiasi Enterobacteriaceae berdasarkan kemampuannya untuk menghasilkan Hidrogen Sulfida (H2S).



C. Alat 1. Neraca Analitik 2. Gelas Ukur 3. Erlenmeyer 4. Tabung Reaksi 5. Pipet 6. Batang Pengaduk 7. Krustang 8. Hotplate / Kompor Listrik D. Bahan 10



1. Plate Count Agar (PCA) 2. Akuades 3. Alkohol 70%



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



E. Metode 1. Timbang media sesuai dengan takaran yang tertera pada kemasan. 2. Masukkan media secara berhati-hati ke dalam Erlenmeyer. 3. Tambahkan akuades dengan volume yang sesuai dengan takaran media, aduk sampai merata menggunakan batang pengaduk. 4. Panaskan media dalam Erlenmeyer menggunakan kompor listrik hingga homogen (tidak ada gumpalan dan jernih). 5. Tutup Erlenmeyer menggunakan Alumunium Foil 6. Sterilisasikan media menggunakan Autoklaf pada suhu 121°C pada tekanan 1 atm selama 15 menit. F. Hasil Praktikum Volume



:



PCA yang ditimbang



:



Sterilisasi



:



11



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



MATERI 4 Sampling Mikrobiologi A. Tujuan Praktikum 1. Mahasiswa memahami konsep pengambilan sampel untuk pemeriksaan parameter mikrobiologi. 2. Mahasiswa dapat melakukan pengambilan sampel untuk pemeriksaan parameter mikrobiologi pada makanan, minuman, dan swab permukaan. B. Landasan Teori Pemantauan lingkungan merupakan kegiatan yang sangat penting untuk memastikan bahwa perangkat medis atau hal yang kita konsumsi dan gunakan terbebas dari cemaran agen penyakit dalam seluruh tahapan produksinya. Sampling dan pemeriksaan parameter mikrobiologi merupakan kunci dari kegiatan pemantauan lingkungan untuk mengurangi risiko cemaran mikroorganisme. Sampling mikrobiologi untuk tujuan tertentu dan tidak dilakukan secara rutin harus memperhatikan hal berikut. 1. Protokol tertulis untuk pengumpulan sampel dan pembiakan mikroorganisme. 2. Analisis dan interpretasi hasil menggunakan dasar yang ilmiah. 3. Tindak lanjut harus berdasarkan hasil yang diperoleh. Sampling mikrobiologi yang baik harus memastikan bahwa hasil analisis nantinya dapat merepresentasikan kontaminasi. Selain itu, teknik yang dilakukan dalam kegiatan ini harus sesuai dengan tujuan pengambilan sampelnya. Saat melakukan sampling mikrobiologi, hal yang harus diperhatikan adalah mempertahankan kondisi sampel yang siap untuk diperiksa di laboratorium agar tetap sama dengan saat pengambilan. Oleh karenanya, sampling membutuhkan peralatan yang steril dan membutuhkan pendingin saat membawa sampel ke laboratorium5. Sebelum melakukan sampling, seorang petugas pengambilan sampel harus memahami informasi terkait hal-hal berikut. 1. Jenis sampling (Grab / Composite / dst.) 2. Parameter yang akan diperiksa. 3. Potensi gangguan termasuk kondisi lingkungan dan dampak cuaca. 4. Jumlah sampel lapangan yang akan dikumpulkan. 5. Jumlah bahan yang dibutuhkan untuk pengambilan tiap sampel. 6. Lokasi dan frekuensi pengambilan sampel 12



7. Pengawetan sampel dan persyaratan waktu pena hanan 8. Pengemasan sampel 9. Kelengkapan dokumentasi 10. Prosedur dan teknik pengambilan sampel Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



11. Alat yang dibutuhkan untuk pengambilan sampel 12. Tipe dan ukuran wadah sampel.



C. Alat 1. Pisau 2. Gunting 3. Sendok 4. Swab Steril 5. Lampu Bunsen 6. Cool Box 7. Ice Tube 8. Botol Sampel Steril 9. Termometer 10. pH meter 11. Korek Api 12. Templat untuk Swab (10 x 10 cm2) 13. Tabung Reaksi dan Rak Tabung Reaksi6 D. Bahan 1. Kertas Label 2. Plastik Sampel 3. Larutan Buffer Phosphat 4. Alkohol 70% 5. Kapas 6. Lidi Kapas Steril 7. Bolpoin



13



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



E. Prosedur Kerja 1. Sampling Makanan dan Minuman a) Lakukan cuci tangan sebelum mengambil sampel / basahi tangan menggunakan alkohol 70% b) Makanan kemasan yang tertutup (botol, kaleng, karton, dll.) dipilih secara random dan dibawa beserta wadahnya ke laboratorium. c) Makanan dengan ukuran sedang yang dapat masuk ke plastik sampel langsung dimasukkan ke dalam plastik. d) Makanan berukuran besar dipotong bagian sampel dengan menggunakan alat tajam steril (pisau / gunting) dan dimasukkan ke dalam plastik sampel. e) Minuman dengan volume yang besar diciduk menggunakan sendok steril dan dimasukkan ke dalam botol sampel steril sebanyak 100 - 200 ml. f) Beri label pada wadah sampel yang telah terisi. g) Masukkan sampel makanan / minuman telah diberi label ke dalam cool box yang berisi ice tube. Saat membuka cool box, cukup buka sedikit bagian saja dan setelah sampel masuk langsung ditutup kembali. h) Segera bawa sampel ke laboratorium6. 2. Sampling Air a) Pilih keran yang mudah diakses dan biasa digunakan untuk keperluan masyarakat sehari-hari untuk mengambil sampel. b) Ukur suhu dan pH dari air yang akan diambil sampelnya. c) Lakukan cuci tangan sebelum mengambil sampel / basahi tangan menggunakan alkohol 70%. d) Lakukan sterilisasi pada mulut kran air dengan cara mengusapnya menggunakan kapas yang dibasahi alkohol kemudian kontakkan dengan api. Jangan kontakkan dengan api jika mulut keran terbuat dari plastik. e) Nyalakan keran untuk suhu air normal, biarkan air mengalir selama 3-5 menit. f) Atur aliran keran agar mengalir dengan lembut sehingga tidak menimbulkan percikan dalam pengambilan sampel. g) Buka tutup botol dengan berhati-hati dan pegang tutup botol selama pengambilan sampel. h) Alirkan air ke dalam botol hingga terisi sekitar 2/3 volume botol. i) Kontakkan api pada mulut botol sampling, pasang kembali tutup botol dan kencangkan7.



14



j) Pasang label pada bagian luar botol sampel.



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



k) Masukkan botol sampel yang telah diberi label ke dalam cool box yang berisi ice tube. Saat membuka cool box, cukup buka sedikit bagian saja dan setelah sampel masuk langsung ditutup kembali. 3. Swab Permukaan a) Lakukan cuci tangan sebelum mengambil sampel / basahi tangan menggunakan alkohol 70%. b) Ambil dan nyalakan Lampu Bunsen, letakkan di dekat permukaan yang akan diusap c) Ambil templat steril untuk memastikan luas permukaan area yang akan diusap. d) Letakkan templat steril pada permukaan area yang akan diusap. e) Ambil lidi kapas dan tabung reaksi yang berisi larutan Buffered Phosphate. Masukkan lidi kapas ke tabung reaksi hingga seluruh bagian kapas terbasahi oleh larutan. Tekan lidi kapas pada dinding tabung untuk mengurangi tetesan larutan saat melakukan swab alat. f) Usap seluruh area yang ada di dalam templat menggunakan lidi kapas yang berisi larutan Buffered Phosphate dengan cara memutar. Lakukan kembali pengusapan mulai dari titik awal gerakan lidi kapas. g) Masukkan lidi kapas ked alam tabung reaksi dan patahkan sisa lidi yang telah kita pegang, tutup kembali tabung menggunakan kapas. h) Beri label pada tabung reaksi. i) Masukkan tabung reaksi ke dalam cool box dan segera kirim ke laboratorium5. F. Hasil Praktikum



15



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



MATERI 5 Pemeriksaan Angka Lempeng Total A. Tujuan Praktikum 1. Mahasiswa dapat memahami prinsip dan prosedur pemeriksaan Angka Lempeng Total (ALT). 2. Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan Angka Lempeng Total (ALT). B. Landasan Teori Penghitungan mikroorganisme dengan Angka Lempeng Total (ALT) atau biasa juga dikenal dengan analisis Total Plate Count (TPC) adalah salah satu metode yang paling umum digunakan untuk menunjukkan kualitas mikrobiologis dalam makanan dengan kondisi suhu umum: 30 - 35°C dan masa inkubasi selama 48 - 72 jam. Angka Lempeng Total (ALT) juga disebut Aerobic Plate Count, Standard Plate Count (SPC), Total Viable Count (TVC). Satuan dari perhitungan ini dinyatakan dalam CFU/ml atau CFU/gram8. ALT dapat dipergunakan sebagai indikator proses higine sanitasi produk,analisis mikroba lingkungan pada produk jadi, indikator proses pengawasan, dan digunakan sebagai dasar kecurigaan dapat atau tidak diterimanya suatu produk berdasarkan kualitas mikrobiologinya9. Mikroorganisme yang dinyatakan dengan ALT secara umum merupakan bakteri, kapang, dan khamir yang tumbuh pada media mikrobiologi non spesifik8.



Metode TPC merupakan metode yang paling sensitif dalam menentukan jumlah mikroorganisme karena memiliki kelebihan-kelebihan sebagai berikut 10: 1. Hanya sel yang masih hidup yang dihitung. 2. Beberapa jenis mikroba dapat dihitung sekaligus.



3. Dapat digunakan untuk isolasi dan identifikasi mikroba karena koloni yang terbentuk berasal dari satu sel mikroba dengan penampakan mikroba yang spesifik. Selain kelebihan-kelebihan tersebut, metode TPC juga mempunyai beberapa kekurangan seperti: 1. Hasil perhitungan percobaan tidak menunjukkan jumlah sel mikroba yang sebenarnya karena beberapa sel yang terdekat kemungkinan membentuk satu sel koloni.



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



16



2. Faktor persiapan medium dan inkubasi yang tidak sama dapat menghasilkan



jumlah mikroba yang berbeda. 3. Mikroba yang ditumbuhkan harus dapat tumbuh pada medium padat dan membentuk koloni yang kompak, jelas dan tidak menyebar. 4. Diperlukan waktu untuk beberapa tahap persiapan dan inkubasi yang lama sehingga koloni mikroba dapat tumbuh dan dihitung.



C. Alat 1. Cawan Petri 2. Erlenmeyer 3. Gelas Ukur 4. Tabung Reaksi 5. Rak Tabung Reaksi 6. Pipet Ukur 7. Colony Counter 8. Gunting 9. Pinset 10. Vortex 11. Lampu Bunsen 12. Timbangan Analitik 13. Inkubator 14. Korek Api 15. Mortar dan Pestle



D. Bahan 1. Plate Count Agar (PCA) 2. Akuades 3. Alkohol 70%



E. Prosedur Praktikum 1. Lumatkan sampel padat menggunakan mortar dan pestle steril 2. Timbang sampel padat maupun semi padat sebanyak 10 gram atau untuk sampel 17



cair ukur sebanyak 10 ml secara aseptik, kemudian masukkan ke Erlenmeyer. 3. Tambahkan 90 ml akuades ke dalam Erlenmeyer yang berisis sampel untuk mendapatkan pengenceran 10-1.



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



4. Ambil 1 ml suspensi menggunakan pipet steril, masukkan ke tabung reaksi dan tambahkan akuades 9 ml untuk mendapatkan pengenceran 10-2. Lakukan hal yang sama untuk membuat pengenceran 10-3. 5. Masukkan sebanyak 1 ml suspensi dari setiap pengenceran ke dalam cawan petri. 6. Tambahkan 15-20 ml PCA yang sudah hangat-hangat kuku sekitar 45°C pada masing-masing cawan yang sudah terisi suspensi. 7. Homogenkan suspensi dan media dengan menggerakkan cawan petri mengikuti pola angka “0” atau angka “8”. Tunggu hingga media mengeras. Tutup cawan petri menggunakan kertas payung dan beri label. 8. Inkubasikan pada temperature 34°C-36°C selama 24-48 jam secara terbalik. Adapun produk susu, suhu inkubasi adalah 32°C ± 1°C. 9. Keluarkan cawan hasil inkubasi, lakukan perhitungan koloni menggunakan Colony Counter. 10. Interpretasikan hasil perhitungan dengan menggunakan rumus11:



Keterangan: N



= Jumlah koloni / ml atau mg sampel (CFU/ml atau CFU/mg)



C



= Koloni di cawan petri yang terhitung



n1



= Jumlah cawan petri pada pengenceran 1



n2



= Jumlah cawan petri pada pengenceran 2



d



= Pengenceran yang dimasukkan sebagai n1 → 10-2



F. Hasil Praktikum



18



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



MATERI 6 Pemeriksaan Bakteri Salmonella sp. A. Tujuan Praktikum 1. Mahasiswa dapat memahami prinsip dan prosedur pemeriksaan Salmonella sp. 2. Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan Salmonella sp. B. Landasan Teori Salmonellosis dianggap sebagai infeksi melalui media makanan yang menyerang saluran cerna manusia. Agen penyebab penyakit ini adalah bakteri Salmonella sp. Bakteri ini merupakan bakteri gram negative yang bergerak menggunakan flagella. Bakteri Salmonella ditularkan melalui makanan dan minuman yang terkontaminasi oleh kotoran atau tinja dari seseorang penderita12. Bakteri ini akan masuk melalui mulut bersama makanan dan minuman kemudian hanyut ke saluran pencernaan. Apabila bakteri masuk ke dalam tubuh manusia, tubuh akan berusaha untuk mengeliminasinya. Tetapi bila bakteri dapat bertahan dan jumlah yang masuk cukup banyak, maka bakteri akan berhasil mencapai usus halus. Kemudian bakteri berusaha masuk ke dalam tubuh yang akhirnya dapat merangsang sel darah putih untuk menghasilkan interleukin yang merangsang terjadinya gejala demam, perasaan



lemah,



sakit



kepala,



nafsu



makan



berkurang13.



Salmonella



dapat



diklasifikasikan sebagai berikut: Kingdom



= Bacteria



Filum



= Proteobacteria



Kelas



= Gamma Proteobakteria



Ordo



= Enterobakteriales



Famili



= Enterobacteriaceae



Genus



= Salmonella



Bakteri Salmonella diketahui dapat bertahan dalam waktu yang lama pada produk makanan dengan kadar air rendah, dengan demikian bakteri ini termasuk bersifat anaerobic fakultatif. Bakteri ini berbentuk batang lurus dengan ukuran 0,7-1,5 x 2,0-5,0 µm. Bakteri ini memiliki sekitar 2500 sterotip yang dikenali dan jumlahnya selalu bertambah tiap tahun dan beberapa tidak dapat terdeteksi oleh pemeriksaan biokimia12. Salmonella dapat berada pada berbagai jenis makanan dan 68% diantaranya merupakan makanan yang berasal dari peternakan. Adapun makanan selain dari peternakan yang dapat mengandung bakteri Salmonella yaitu: bawang merah, ikan, buah campuran, dll. Sebenarnya, tanaman tidak mengandung bakteri Salmonella secara natural, akan tetapi dalam beberapa masa terakhir, berbagai organ dari bakteri ini Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



19



berubah. Salmonella mampu memproduksi enzim periplasmic yang memiliki kemampuan untuk menghancurkan pertahanan tumbuhan12. C. Alat 1. Cawan Petri 2. Erlenmeyer 3. Gelas Ukur 4. Tabung Reaksi 5. Rak Tabung Reaksi 6. Pipet Ukur 7. Batang Pengaduk 8. Gunting 9. Pinset 10. Spreader Glass / Drugalsky 11. Lampu Bunsen 12. Timbangan Analitik 13. Inkubator 14. Korek Api 15. Mortar dan Pestle D. Bahan 1. Lactose Broth (LB) 2. Selenite Broth (SB) 3. Salmonella Shigella Agar (SSA) 4. Triple Sugar Iron Agar 5. Urease Agar (UA) 6. Akuades 7. Alkohol 70% 8. Alumunium Foil 9. Kapas



E. Prosedur Praktikum Pra-Enrichment 1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol 20



2. Nyalakan lampu Bunsen



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



3. Timbang 5 gram sampel dan haluskan sampel menggunakan mortar dan masukkan ke dalam Erlenmeyer. Untuk media semipadat, ambil sebanyak 5 ml dan masukkan ke dalam Erlenmeyer. 4. Tambahkan 45 ml media Lactose Broth (LB) ke dalam Erlenmeyer secara aseptis, dan homogenkan dengan cara mengaduknya menggunakan batang pengaduk. 5. Tutup Erlenmeyer menggunakan Alumunium Foil, Beri label 6. Inkubasikan selama 24 jam dengan suhu 35°C. Enrichment 1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol 2. Nyalakan lampu Bunsen 3. Siapkan 9 ml media Selenite Broth 4. Siapkan sampel yang telah selesai diinkubasikan pada tahap Pra-Enrichment 5. Masukkan 1 ml sampel yang ada di media Lactose Broth ke dalam Media Selenite Broth menggunakan pipet ukur steril. 6. Beri label pada tabung reaksi dan Inkubasikan media Selenite Broth yang berisi sampel selama 24 jam 35°C. Seleksi 1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol 2. Nyalakan lampu Bunsen 3. Siapkan media Salmonella Shigella Agar (SSA) yang sudah siap pada cawan petri steril. 4. Siapkan sampel yang telah selesai diinkubasikan pada tahap Enrichment 5. Ambil 1 ml suspensi dari media Selenite Broth, tuangkan pada permukaan media Salmonella Shigella Agar (SSA) yang ada di cawan petri. 6. Sebar suspense ke seluruh permukaan Salmonella Shigella Agar (SSA) dengan menggunakan Spreader. 7. Bungkus kembali media Salmonella Shigella Agar (SSA) yang telah diberi suspensi sampel. 8. Beri label dan inkubasikan pada suhu 35◦C selama 24 jam. 9. Keberadaan Koloni Salmonella ditandai dengan adanya bercak hitam pada media Identifikasi 1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol 2. Nyalakan lampu Bunsen 3. Siapkan media Triple Sugar Iron Agar (TSIA) pada tabung reaksi.



21



4. Siapkan media Urease Agar (UA) pada cawan petri. 5. Siapkan sampel yang telah selesai diinkubasikan pada tahap Seleksi



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



6. Sterilkan Jarum Ose, goreskan jarum ose ke koloni Salmonella yang terdapat pada media SSA. 7. Inokulasikan jarum ose secara zig-zag pada media Triple Sugar Iron Agar (TSIA). Beri label pada tabung reaksi. 8. Lakukan hal yang sama dan inokulasikan pada media Urease Agar (UA) yang ada pada cawan petri. 9. Bungkus kembali media Urease Agar (UA), yang telah diberi inokulasi sampel, beri label pada pembungkus media Urease Agar (UA). 10. Inkubasikan pada suhu 35◦C selama 24 jam.



F. Hasil Praktikum Tabel Pengamatan Tahap Pemeriksaan



Bentuk Media



Salmonella (+ / -)



Pra-Enrichment Enrichment Seleksi Identifikasi



22



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



MATERI 7 Pemeriksaan MPN Bakteri Coliform A. Tujuan Praktikum 1. Mahasiswa dapat memahami prinsip dan prosedur pemeriksaan MPN Bakteri Coliform 2. Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan MPN Bakteri Coliform B. Landasan Teori Bakteri patogen yang menyebabkan penyakit serius sulit dideteksi dalam air bersih karena memiliki prosedur pengujian yang panjang dan kompleks. Oleh karenanya, pemeriksaan kualitas mikroorganisme air biasanya menggunakan organisme indikator. Organisme indikator mungkin tidak patogen tetapi hadir ketika patogen ada dan tidak ada ketika patogen tidak ada14. Bakteri Coliform merupakan bakteri indikator keberadaan bakteri patogenik dan masuk dalam golongan mikroorganisme yang lazim digunakan sebagai indikator, dimana bakteri ini dapat menjadi sinyal untuk menentukan suatu sumber air telah terkontaminasi oleh bakteri patogen atau tidak15. Bakteri Coliform adalah golongan bakteri intestinal yang hidup dalam saluran pencernaan manusia. Bakteri Coliform memiliki bentuk seperti batang, tidak memiliki spora, gram negatif, dan termasuk kedalam mikroorganisme aerobik dan anaerobik fakultatif16. Bakteri ini mampu memfermentasikan Lactose Broth (LB) dengan menghasilkan asam dan gas dalam waktu 24 jam pada suhu 37°C dan menunjukkan hasil positif dengan menghasilkan gas pada media BGLB dalam waktu 24 jam15. Metode yang sering digunakan untuk mengetahui keberadaan Bakteri Coliform adalah MPN (Most Probable Number). Metode ini dilakukan untuk menyatakan secara kualitatif dan kuantitatif adanya Coliform16. Pemeriksaan dengan MPN menggunakan seri 3-3-3, 5-1-1, dan 5-5-5. Secara lengkap, metode ini terdiri atas 4 tahapan yaitu: 1. Uji Perkiraan (Presumtive test) 2. Uji Penegasan (Convirmative test) 3. Uji Pelengkap (Completed test) 4. Uji Identifikasi (Identification test). (7-2) Uji perkiraan dan penegasan dapat menginterpretasikan keberadaan Bakteri Coliform secara kualitatif. Adapun uji pelengkap dan identifikasi berguna untuk mengetahui apakah jenis bakteri Coliform merupakan faecal coliform atau sebaliknya dan untuk mengetahui visualisasi bakteri sebagai gram negatif. Uji perkiraan dilakukan dengan menginokulasikan sampel ke dalam Lactose Broth. Jika dalam tabung durham timbul gas setelah diinkubasikan dengan suhu 35 – 37°C, maka dilanjutkan ke tahap uji Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



23



penegasan. Namun, jika tidak terbentuk gas, maka uji tidak perlu dilanjut ke tahapan berikutnya17. C. Alat 1. Gelas Ukur 2. Tabung Reaksi 3. Tabung Durham 4. Rak Tabung Reaksi 5. Pipet Ukur 6. Gunting 7. Lampu Bunsen 8. Timbangan Analitik 9. Inkubator 10. Korek Api D. Bahan 1. Lactose Broth (LB) 2. Brilliant Green Lactose Bile Broth (BGLBB) 3. Akuades 4. Alkohol 70% 5. Kapas E. Prosedur Praktikum Uji Perkiraan 1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol 2. Nyalakan lampu Bunsen 3. Timbang 5 gram sampel dan haluskan sampel menggunakan mortar dan masukkan ke dalam Erlenmeyer. Untuk media semipadat, ambil sebanyak 5 ml dan masukkan ke dalam Erlenmeyer. 4. Tambahkan 45 ml Buffered Peptone Water (BPW) ke dalam Erlenmeyer secara aseptis, dan homogenkan dengan cara mengaduknya menggunakan batang pengaduk. 5. Pindahkan 1 ml suspensi pengenceran tersebut menggunakan pipet steril ke dalam 3 seri tabung berisi Media Lactose Broth yang telah dipasang Tabung Durham. 6. Beri label, Inkubasikan pada temperatur 35◦C selama 24-48 jam. 24



7. Setelah selesai masa inkubasi, perhatikan Tabung Durham. Jika terdapat gas, maka lanjutkan ke Uji Penegasan.



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



Uji Penegasan 1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol 2. Nyalakan lampu Bunsen 3. Sterilkan jarum ose menggunakan lampu bunsen 4. Pindahkan biakan positif dari media LB menggunakan jarum ose dan inokulasikan ke dalam tabung berisi media BGLBB yang telah dipasang tabung durham. 5. Beri label pada tabung media BGLBB berisi sampel, inkubasikan pada temperatur 35◦C selama 24-48 jam. 6. Setelah selesai masa inkubasi, perhatikan Tabung Durham. Jika terdapat gas, berarti sampel postif mengandung Coliform. 7. Gunakan tabel Most Probable Number (MPN) untuk menentukan nilai MPN per milliliter atau per gram. F. Hasil Praktikum



25



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



MATERI 8 Pemeriksaan MPN Bakteri Eschericia Coli A. Tujuan Praktikum 1. Mahasiswa dapat memahami prinsip dan prosedur pemeriksaan MPN Bakteri Eschericia Coli. 2. Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan MPN Bakteri Eschericia Coli. B. Landasan Teori Kualitas air dapat diketahui dengan mengidentifikasi berbagai bakteri berbeda yang terkandung di dalamnya. Meski demikian, hal ini dapat menghabiskan biaya yang cukup tinggi. Terlebih lagi, keberadaan bakteri pathogen biasanya berjumlah sedikit sehingga dapat saja menghilang selama proses identifikasi. Metode yang mudah untuk mengecek kualitasi air adalah dengan mengidentifikasi adanya Bakteri Coliform sebagai indikator18. Berdasarkan rekomendasi dari WHO, pemantauan kualitas mikrobiologi air dilakukan dengan mengukur keberadaan Bakteri Eschericia Coli yang menunjukkan adanya cemaran feses pada air yang dapat menimbulkan penyakit pada manusia19. Bakteri Eschericia Coli yang dikenal sebagai E.Coli merupakan bakteri Gramnegatif berbentuk batang. Bakteri ini masuk ke dalam genus Eschericia yang biasa ditemukan pada usus bagian bawah organisme berdarah panas (endotermis). Bentuk sel dari bakteri ini mirip dengan bentuk batang yang memiliki panjang sekitar 2,0 µm, diameter 0,25 – 1,0 µm dan volume sel 0,6-0,7 µm3,20. Bakteri ini bersifat anaerob fakultatif, dia tidak dapat dihilangkan dengan proses pendinginan atau pembekuan. Meski demikian, bakteri ini dapat hilang karena adanya pemberian antibiotik, Sinar Ultraviolet (UV), atau pemanasan dengan suhu >100°C21. Manusia dapat terinfeksi bakteri E.Coli bukan hanya akibat dari konsumsi air yang memiliki kualitas buruk, melainkan dapat juga disebabkan oleh kontak langsung dengan organisme yang terkena infeksi, atau mengonsumsi media lainnya yang mengandung E.Coli. Media makanan yang dapat mengandung E.Coli diantaranya: daging, buah, sayur yang terkontaminasi, dan susu yang belum dipasteurisasi. Selain itu, pupuk kendang yang digunakan untuk membantu kesuburan tanah juga dapat berperan dalam penyebaran bakteri ini. Saar pupuk digunakan, maka bakteri dapat mencemari tumbuhan yang ada di tanah tersebut22. Ada berbagai metode yang digunakan dalam mengidentifikasi Escherichia Coli, diantaranya adalah Metode MPN dan Membran Filter. Prinsip Metode MPN adalah mengencerkan sampel hingga tingkat tertentu yang sesuai dan menunjukkan pertumbuhan pada tabung reaksi dengan ditandai adanya gas pada tabung Durham. Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



26



Metode membran filter dilakukan dengan menyaring sampel menggunakan kertas membran, kemudian diletakkan pada Media Emdo Agar23. C. Alat 1. Gelas Ukur 2. Tabung Reaksi 3. Tabung Durham 4. Rak Tabung Reaksi 5. Pipet Ukur 6. Gunting 7. Lampu Bunsen 8. Timbangan Analitik 9. Inkubator 10. Korek Api D. Bahan 1. Lactose Broth (LB) 2. Escherichia Coli Broth (ECB) 3. Akuades 4. Alkohol 70% 5. Kapas E. Prosedur Praktikum Uji Perkiraan 1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol 2. Nyalakan lampu Bunsen 3. Timbang 5 gram sampel dan haluskan sampel menggunakan mortar dan masukkan ke dalam Erlenmeyer. Untuk media semipadat, ambil sebanyak 5 ml dan masukkan ke dalam Erlenmeyer. 4. Tambahkan 45 ml Buffered Peptone Water (BPW) ke dalam Erlenmeyer secara aseptis, dan homogenkan dengan cara mengaduknya menggunakan batang pengaduk. 5. Pindahkan 1 ml suspensi pengenceran tersebut menggunakan pipet steril ke dalam 3 seri tabung berisi Media Lactose Broth yang telah dipasang Tabung Durham. 6. Beri label, Inkubasikan pada temperatur 35◦C selama 24-48 jam. 7. Setelah selesai masa inkubasi, perhatikan Tabung Durham. Jika terdapat gas, maka lanjutkan ke Uji Penegasan.



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



27



Uji Penegasan 1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol 2. Nyalakan lampu Bunsen 3. Sterilkan jarum ose menggunakan lampu bunsen 4. Pindahkan biakan positif dari media LB menggunakan jarum ose dan inokulasikan ke dalam tabung berisi media Eschericia Coli Broth (ECB) yang telah dipasang tabung durham. 5. Beri label pada tabung media Eschericia Coli Broth (ECB) berisi sampel, inkubasikan pada temperatur 45,5◦C selama 24 jam, jika hasilnya negative, inkubasikan kembali selama 48 jam. 6. Setelah selesai masa inkubasi, perhatikan Tabung Durham. Jika terdapat gas, berarti sampel postif mengandung Coliform. 7. Gunakan tabel Most Probable Number (MPN) untuk menentukan nilai MPN per milliliter atau per gram. F. Hasil Praktikum



28



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



MATERI 9 Pemeriksaan Bakteri Staphylococcus Aureus A. Tujuan Praktikum 1. Mahasiswa



dapat



memahami



prinsip



dan



prosedur



pemeriksaan



Bakteri



Staphylococcus Aureus. 2. Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan Bakteri Staphylococcus Aureus. B. Landasan Teori Staphylococcus Aureus merupakan salah satu agen bakti yang paling banyak mengakibatkan penyakit bawaan makanan pada manusia24. Klasifikasi taksonomi dari bakteri ini adalah sebagai berikut: Kingdom



: Bacteria



Divisi



: Firmicutes



Kelas



: Cocci



Ordo



: Bacillales



Familia



: Staphylococcaceae



Genus



: Staphylococcus



Spesies



: Staphylococcus Aureus25



Staphylococcus Aureus termasuk bakteri Gram-positif yang tidak menimbulkan spora dan tidak motil26. Bakteri ini memiliki sifat anaerobik fakultatif sehingga perkembangbiakannya menggunakan respirasi aerob dan fermentasi27. Pada umumnya, bakteri ini tumbuh berpasangan atau berkelompok dengan diameter sekitar 0,8 – 1,0 µm26.



Dinding sel dari bakteri dilapiasi oleh mantel pelindung yang berbentuk tidak



beraturan dengan ketebalan sekitar 40 nm. Pertumbuhan bakteri ini tergantung pada kemampuan sel untuk menyesuaikan diri terhadap lingkungan27. Bakteri



Staphylococcus



Aureus



dapat



menyebabkan



penyakit



karena



kemampuannya untuk berkembang biak menyebar luas dalam jaringan tubuh dan produksi enterotoksin. Manusia biasanya dapat menjadi pembawa S.Aureus dengan enterotoksin tanpa merasakan gejala apapun. Bakteri ini biasanya bersarang pada hidung, tenggorokan, dan kulit. Oleh sebab itu, penjamah makanan merupakan salah satu titik kritis yang harus diawasi dalam mencegah penyakit bawaan makanan24. Enterotoksin yang dihasilkan oleh bakteri ini bersifat tahan panas dan jika toksin terkonsumsi oleh manusia akan mengakibatkan gejala berupa: mual, muntah, dan diare27.



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



29



C. Alat 1. Cawan Petri 2. Erlenmeyer 3. Gelas Ukur 4. Tabung Reaksi 5. Rak Tabung Reaksi 6. Pipet Ukur 7. Colony Counter 8. Gunting 9. Pinset 10. Lampu Bunsen 11. Timbangan Analitik 12. Inkubator 13. Korek Api 14. Mortar dan Pestle D. Bahan 1. Mannitol Salt Agar (MSA) 2. Akuades 3. Alkohol 70% 4. Kapas E. Prosedur Praktikum 1. Lumatkan sampel padat menggunakan mortar dan pestle steril 2. Timbang sampel padat maupun semi padat sebanyak 10 gram atau untuk sampel cair ukur sebanyak 10 ml secara aseptik, kemudian masukkan ke Erlenmeyer. 3. Tambahkan 90 ml akuades ke dalam Erlenmeyer yang berisis sampel untuk mendapatkan pengenceran 10-1. 4. Sterilkan jarum ose, ambil suspense sampel dengan cara menggoreskan jarum ose ke sampel yang tidak diencerkan. 5. Inokulasikan suspensi sampel yang ada di jarum ose ke media Mannitol Salt Agar (MSA) yang ada di cawan petri 1. 6. Lakukan hal yang sama pada sampel yang sudah dicairkan 10-1 dan inokulasikan pada media Mannitol Salt Agar (MSA) yang ada di cawan petri 2. 5. Beri label, Inkubasikan pada temperature 37°C selama 24-48 jam.



30



6. Keluarkan cawan hasil inkubasi, lakukan perhitungan koloni menggunakan Colony Counter.



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



7. Hasil positif menunjukkan perubahan warna pada medium dari warna merah menjadi kuning dan hasil negatif tidak terjadi perubahan warna. F. Hasil Praktikum



31



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



MATERI 10 Pemeriksaan Jamur Kapang & Khamir A. Tujuan Praktikum 1. Mahasiswa dapat memahami prinsip dan prosedur pemeriksaan Jamur Kapang dan Khamir. 2. Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan Kapang dan Khamir. B. Landasan Teori Kapang dan Khamir (fungi / jamur) merupakan bawaan makanan mikroskopis yang memiliki ratusan spesies. Organisme ini mampu menyerang banyak makanan karena dapat hidup dalam berbagai kondisi lingkungan yang bebeda. Sebagian besar Kapang dan Khamir bersifat aerob obligat (membutuhkan oksigen bebas untuk pertumbuhan). Rentang pH yang dibutuhkan untuk kehidupannya berkisas antara 2 sampai di atas pH 9 dan rentang suhu hidup antara 10-35°C28. Meskipun memiliki banyak karakteristik yang sama, Kapang dan Khamir sebenarnya memiliki beberapa perbedaan. Kapang merupakan jenis jamur yang tumbuh secara pada filamen multiseluler yang disebut hifa. Cabang-cabang tubular ini memiliki banyak inti yang identik secara genetik, namun membentuk satu organisme, yang dikenal sebagai koloni. Sebaliknya, Khamir adalah jenis jamur yang tumbuh sebagai sel tunggal. Selain itu, ada banyak faktor yang bisa digunakan untuk membedakan kedua jamur ini. Banyak studi yang telah membahas bahwa jamur sebagai mikroorganisme berperan atas kontaminasi dan kerusakan makanan. Hal ini berdampak buruk secara ekonomi dan kesehatan. Jamur mampu menghasilkan mikotoksin yang disimpan dalam makanan dan berisiko menimbulkan penyakit. Agen utama jamur yang berperan membentuk racun ini diantaranya termasuk dalam genre Fusarium, Penicillium, dan Aspergillus29. Angka Kapang dan Khamir yang lebih dari 103 CFU/ml memiliki probabilitas tinggi untuk pertumbuhan genre jamur yang dapat meracuni tubuh30. Mikotoksin merupakan metabolit sekunder yang beracun untuk manusia dan hewan. Pertumbuhan jamur yang tidak diinginkan dapat menyebabkan penyakit bawaan makanan yang berdampak serius. Kontaminasi produk makanan oleh Kapang dan Khamir biasanya disebabkan oleh peralatan yang tidak bersih. Kontaminasi ini dapat dikendalikan dengan perbaikan manufaktur dan penggunaan teknik aseptik saat memproduksi makanan.



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



32



C. Alat 1. Cawan Petri 2. Erlenmeyer 3. Gelas Ukur 4. Pipet Ukur 5. Colony Counter 6. Gunting 7. Pinset 8. Lampu Bunsen 9. Timbangan Analitik 10. Inkubator 11. Korek Api 12. Mortar dan Pestle D. Bahan 1. Potato Dextrose Agar (PDA) 2. Kloramfenikol 3. Buffered Peptone Water (BPW) 4. Alkohol 70% E. Prosedur Praktikum 1. Lumatkan sampel padat menggunakan mortar dan pestle steril 2. Timbang sampel padat maupun semi padat sebanyak 10 gram atau untuk sampel cair ukur sebanyak 10 ml secara aseptik, kemudian masukkan ke Erlenmeyer. 3. Tambahkan 90 ml Buffered Peptone Water (BPW) ke dalam Erlenmeyer yang berisis sampel untuk mendapatkan pengenceran 10-1. 4. Ambil 1 ml suspensi menggunakan pipet steril, masukkan ke tabung reaksi dan tambahkan akuades 9 ml untuk mendapatkan pengenceran 10-2. Lakukan hal yang sama untuk membuat pengenceran 10-3. 5. Masukkan sebanyak 1 ml suspensi dari setiap pengenceran ke dalam cawan petri. 5. Tambahkan 15-20 ml Potato Dextrose Agar (PDA) yang sudah hangat-hangat kuku sekitar 45°C pada masing-masing cawan yang sudah terisi suspensi. 6. Homogenkan suspensi dan media dengan menggerakkan cawan petri mengikuti pola angka “0” atau angka “8”. Tunggu hingga media mengeras. Tutup cawan petri menggunakan kertas payung dan beri label.



33



7. Beri label, Inkubasikan pada temperature 25◦C selama 5 hari. 8. Keluarkan cawan hasil inkubasi, lakukan perhitungan koloni menggunakan Colony Counter. Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



9. Interpretasikan hasil perhitungan dengan menggunakan rumus:



Keterangan: N



= Jumlah koloni / ml atau mg sampel (CFU/ml atau CFU/mg)



C



= Koloni di cawan petri yang terhitung



n1



= Jumlah cawan petri pada pengenceran 1



n2



= Jumlah cawan petri pada pengenceran 2



d



= Pengenceran yang dimasukkan sebagai n1 → 10-2



F. Hasil Praktikum



34



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



DAFTAR PUSTAKA 1. Hausman GJ. Techniques for studying adipocytes. Biotech Histochem. 1981;56(3):149–54. 2. Dascanio JJ. Bacterial Culture. Equine Reprod Proced. 2021;519–20. 3. Mikrobiology F. Objectives : Principles : :1–23. 4. UK SMIs. UK Standards for Microbiology Investigations Inoculation of culture media for bacteriology. Public Heal Engl [Internet]. 2017;(2):1–22. Tersedia pada: https://assets.publishing.service.gov.uk/government/uploads/system/uploads/a ttachment_data/file/583859/Q_5i2.pdf 5. Willis C, Nye K, Aird H, Lamph D, Fox A. Examining food, water and environmental samples from healthcare environments - Microbiological Guidelines. 2013;19–25. Tersedia pada: https://assets.publishing.service.gov.uk/government/uploads/system/ uploads/attachment_data/file/865369/Hospital_F_W_E_Microbiology_Guidelin es_Issue_3_February_2020__1_.pdf%0Ahttp://www.gov.uk/phe 6. Kumar D. Sampling for. 2021;(11014). 7. Central C. How to collect a water sample for microbiology examination 1. US Geol Surv [Internet]. 2020;Handbooks(book 9):11–2. Tersedia pada: http://water.usgs.gov/owq/FieldManual/chapter4/pdf/Chap4_v2.pdf 8. NFI-PTM. Microbiological Analysis NFI-PTM 01-2019: Total Plate Count (CFU/g) in Freeze Dried Chicken. Profic Test. 2019;01(January). 9. Nelly Puspandari AI. Di AS, Produsen Tarik Susu ber-Sakazakii. Yayasan Lemb Konsum Indones [Internet]. 2011;5(2):106–12. Tersedia pada: http://ylki.or.id/2011/06/di-as-produsen-tarik-susu-ber-sakazakii/ 10. Anggraini RD. Hubungan Higiene Sanitasi Penjamah Makanan Dengan Jumlah Bakteri Pada Minuman Nira Aren Di Mojokerto Sebagai Sumber Belajar Biologi. Skripsi Univ Muhammadiyah Malang. 2019;2:1–51. 11. Maturin, Larry; Peeler JT. BAM Chapter 3: Aerobic Plate Count | FDA. FDA Gov [Internet]. 2020;3(January 2001):1–11. Tersedia pada: https://www.fda.gov/food/laboratory-methods-food/bam-chapter-3-aerobicplate-count 12. Ehuwa O, Jaiswal AK, Jaiswal S. Salmonella, food safety and food handling practices. Foods. 2021;10(5):1–16. 13. MULYA RR. PEMERIKSAAN BAKTERI Escherichia coli DAN BAKTERI Salmonella typhi PADA MINUMAN ES CINCAU DI KOTA MEDAN. 2019. 1–54 hal. 14. HACH. MEL MPN Total Coliform Laboratory Procedures Manual. Prosedure Manual. 2018. 15. Andrianary M, Antoine P. Analisa Bakteri Coliform dengan Metode Most Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



35



Probable Number pada Air Minum Isi Ulang di Jalan Purwosari. Vol. 2. Medan: Politeknik Kesehatan Medan; 2019. 89 hal. 16. Mursalin, Syahidah. Analysis of Most Probable Number (mpn) of Coliform Bacteria and Fecal Coli on Coconut Ice Sold in Makassar. Int J Sci Basic Appl Res. 2017;36(7):101–7. 17. Sunarti RN. Uji Kualitas Air Sumur Dengan Menggunakan Metode MPN (Most Probable Numbers). Biolimi J Pendidik. 2015;1(1):30–4. 18. Youssry MA, Radwan AM, Gebreel MA, Patel TA. Prevalence of maternal anemia in pregnancy: the effect of maternal hemoglobin level on pregnancy and neonatal outcome. Open J Obstet Gynecol. 2018;08(07):676–87. 19. Sandar S, Phyo M, Yu SS, Saing KM. Bacteriological Examination of Bottled Drinking Water by MPN Method Bacteriological Examination of Bottled Drinking Water by MPN Method. Biomed Serv. 2019;6221(August):227–32. 20. Panchangam SC. ENGINEERING & SCIENCE FOCUS :: AITK A monthly academic bulletin Article : Eng Sci Focus AITK. 2015;(September):1–4. 21. Amallia HT. Monitoring Number Of Colifom and Escherichia Coli on Drinking Water Refill as Pollution Bioindicator. J Biota. 2020;6(1):30–6. 22. Sartika RAD, Indrawani YM, Sudiarti T. Pada Hasil Olahan Hewan Sapi Dalam Proses Produksinya. 2005;9(1):23–8. 23. Rizki Z, Mudatsir, Samingan. Perbandingan Metode Tabung Ganda Dan Membran Filter Terhadap Kandungan Escherichia Coli Pada Air Minum Isi Ulang. J Kedokt Syiah Kuala. 2013;13(1):6–12. 24. Gutiérrez D, Delgado S, Vázquez-Sánchez D, Martínez B, Cabo ML, Rodríguez A, et al. Incidence of staphylococcus aureus and analysis of associated bacterial communities on food industry surfaces. Appl Environ Microbiol. 2012;78(24):8547–54. 25. Alifia M. Gambaran Bakteri Staphylococcus Aureus pada Handphone Mahasiswa: Sistematic Review. Vol. 7. Medan: Politeknik Kesehatan Medan; 2021. 6 hal. 26. Rahmawati R, Apriliana E, Agus A. Identifikasi Staphylococcus aureus pada Daging Ayam yang Dijual di Pasar Besar Kota Palangka Raya. Borneo J Med Lab Technol. 2019;1(1):13–6. 27. Harris LG, Foster SJ, Richards RG, Lambert P, Stickler D, Eley A. An introduction to Staphylococcus aureus, and techniques for identifyingand quantifying S. aureus adhesins in relation to adhesion to biomaterials:Review. Eur Cells Mater. 2002;4:39–60. 28. Valerie Tournas; Michael E.Stack PBMHAKRB. BAM Chapter 18: Yeasts, Molds and Mycotoxins. Bacteriol Anal Man [Internet]. 2022;18(September):1– 14. Tersedia pada: https://www.fda.gov/food/laboratory-methods-food/bamchapter-18-yeasts-molds-and-mycotoxins 29. de Freitas J, Pereira Neto LM, da Silva TIB, de Oliveira TFL, da Rocha JHL, Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



36



Souza MD, et al. Counting and identification of molds and yeasts in dry salted shrimp commercialized in Rio Branco, Acre, Brazil. Food Sci Technol. 2021;41(June):284–9. 30. Monita K, Sari AN, Nurhayati. Pemeriksaan Angka Kuman , Kapang / Khamir dan Identifikasi Bakteri Patogen Pada Jamu Beras Kencur di Pasar Tradisional Kota Surakarta. Indones J Med Sci. 2021;8(2):142–6.



37



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



LAMPIRAN Tugas Pendahuluan Tugas Pendahuluan praktikum mikrobiologi yang harus dikumpulkan sebelum praktikum adalah membuat Draft Laporan Praktikum dengan isi sebagai berikut. 1. Latar Belakang (lihat poin yang diperlukan pada tabel 11.1) 2. Tujuan Praktikum (diambil dari modul praktikum) 3. Landasan Teori (lihat poin yang diperlukan pada tabel 11.1) 4. Alat (diambil dari modul praktikum) 5. Bahan (diambil dari modul praktikum) 6. Prosedur Kerja (diambil dari modul praktikum) Tabel 11.1 Konten Latar Belakang dan Landasan Teori pada Tugas Pendahuluan Materi



Konten Latar Belakang • Pentingnya pemeriksaan parameter mikrobiologi lingkungan.



1.



• Pentingnya mengetahui peralatan laboratorium sebelum praktikum.



Konten Landasan Teori • Definisi Laboratorium Mikrobiologi. • Kategori peralatan yang ada di Laboratorium Mikrobiologi. • Contoh peralatan pada masingmasing kategori dan fungsinya.



• Pentingnya disinfeksi dan sterilisasi dalam praktikum laboratorium. 2.



• Dampak negatif jika disinfeksi dan sterilisasi tidak dilakukan di laboratorium. • Pentingnya pembiakan mikroba dalam



3.



• Definisi Disinfeksi • Definisi Sterilisasi • Fungsi Disinfeksi dan Sterilisasi • Macam-Macam Teknik Disinfeksi dan Sterilisasi • Definisi Pembiakan Mikroorganisme



pemeriksaan parameter mikrobiologi.



• Fungsi Pembiakan Mikroorganisme



• Pentingnya memilih media yang tepat



• Jenis Media yang digunakan dalam



untuk pembiakan mikroba.



pembiakan mikroorganisme • Berbagai teknik penanaman mikroorganisme pada media.



• Akibat dari kesalahan prosedur sampling dalam pemeriksaan 4.



mikrobiologi • Pentingnya metode sampling yang tepat dalam praktikum mikrobiologi.



• Definisi sampling untuk pemeriksaan parameter mikrobiologi. • Prinsip pengambilan sampel pada



38



makanan dan minuman, air, dan usap alat.



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



• Label yang perlu dicantumkan pada pengambilan sampel untuk pemeriksaan mikrobiologi. • Kasus penyakit yang ditimbulkan tingginya ALT. 5.



• Pentingnya pemeriksaan ALT



• Definisi ALT • Penyakit yang ditimbulkan oleh ALT yang melebihi standar • Berbagai Metode Pemeriksaan ALT • Prinsip Pemeriksaan ALT.



• Kasus penyakit yang ditimbulkan tingginya Salmonella sp. 6.



• Pentingnya pemeriksaan Salmonella sp.



• Definisi Salmonella sp. • Penyakit yang ditimbulkan oleh Salmonella sp.yang melebihi standar • Berbagai Metode Pemeriksaan Salmonella sp. • Prinsip Pemeriksaan Salmonella sp..



• Kasus penyakit yang ditimbulkan tingginya Coliform. 7.



• Pentingnya pemeriksaan Coliform



• Definisi MPN Coliform • Penyakit yang ditimbulkan oleh Coliform yang melebihi standar • Berbagai Metode Pemeriksaan Coliform • Prinsip Pemeriksaan MPN Coliform.



• Kasus penyakit yang ditimbulkan tingginya E.Coli. 8.



• Pentingnya pemeriksaan E.Coli



• Definisi MPN e.Coli • Penyakit yang ditimbulkan oleh E.Coli yang melebihi standar • Berbagai Metode Pemeriksaan E.Coli • Prinsip Pemeriksaan MPN E.Coli.



• Kasus penyakit yang ditimbulkan tingginya Staphylococcus Aureus. • Pentingnya pemeriksaan 9.



Staphylococcus Aureus



• Definisi Staphylococcus Aureus • Penyakit yang ditimbulkan oleh Staphylococcus Aureus yang melebihi standar • Berbagai Metode Pemeriksaan Staphylococcus Aureus. • Prinsip Pemeriksaan Staphylococcus Aureus.



10.



• Kasus penyakit yang ditimbulkan



• Definisi kapang



tingginya kapang dan khamir.



• Definisi khamir



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



39



|



• Pentingnya pemeriksaan kapang dan khamir.



• Peran kapang dan khamir dalam aktivitas sehari-hari. • Penyakit yang ditimbulkan oleh kapang dan khamir yang melebihi standar • Berbagai Metode Pemeriksaan kapang dan khamir. • Prinsip Pemeriksaan kapang dan khamir.



40



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



KONTRAK PENILAIAN PRAKTIKUM A. KRITERIA PENILAIAN Bobot penilaian praktikum matakuliah Mikrobiologi adalah 35% dari nilai total bobot penilaian pada matakuliah Mikrobiologi. Mahasiswa harus aktif (hadir) dalam pelaksanaan praktikum di laboratorium mikrobiologi (100%) sebagai bukti adalah daftar hadir praktikan. Adapun yang menjadi patokan penilaian dalam praktikum adalah: 1. Kedisiplinan mengumpulkan tugas pendahuluan (15%) 2. Kedisiplinan dan ketepatan melakukan responsi (post-test) (15%) 3. Ketepatan penyelesaian laporan praktikum (35%) 4. Ketuntasan Ujian Akhir Praktikum (35%)



B. SANKSI-SANKSI Sanksi diberikan kepada mahasiswa berupa pembatalan tugas yang berakibat tidak lulusnya peserta apabila peserta melakukan: a. Melanggar kontrak praktikum. b. Melanggar tata tertib laboratotium. c. Tidak aktif (hadir) selama kegiatan praktikum. d. Melakukan duplikasi laporan.



C. KONTRAK PRAKTIKUM Praktikum pada pemeriksaan mikrobiologi bersifat wajib dilakukan bagi setiap mahasiswa(i)



peserta



mata



kuliah



Mikrobiologi.



Praktikum



dilakukan



secara



berkelompok, dengan penyusunan tugas pendahuluan (lihat Borang 1), responsi (pre dan/atau post-test) dan laporan dilakukan secara perorangan (lihat borang 2). Setiap mahasiswa(i) yang akan memasuki ruang laboratorium wajib membawa peralatan yang dibutuhkan dan mengisi daftar hadir (lihat borang 4 Kartu Praktikum)



D. KARTU MONITORING Kartu monitoring digunakan sebagai lembar monitoring dan evaluasi selama pelaksanaan praktikum, penyusunan dan pengumpulan laporan agar sesuai dengan tujuan praktik yang diharapkan. Kartu Monitoring terdiri dari Kartu Praktikum dan Lembar Bimbingan dapat dilihat pada format yang telah tersedia (Lihat Borang 3). 41 E. PENILAIAN LAPORAN PRAKTIKUM Penilaian



laporan



praktikum



terdiri



dari



serangkaian



kegiatan



dimulai



dari



bimbingan/konsultasi selama penyusunan laporan hingga pengumpulan laporan. Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



1.



Konsultasi bimbingan laporan praktikum dilakukan sebanyak minimal 1 kali dan maksimal 3kali. Jika tidak melakukan minimal 1 kali maka prosentase nilai berkurang sebesar 10 - 100 %. Namun jika laporan dianggap sudah benar dan tepat pada bimbingan pertama maka tidak ada pengurangan prosentase nilai.



2.



Jika waktu pengumpulan laporan tidak sesuai batas waktu yang telah ditentukan maka praktikan akan mendapat pengurangan nilai 10% hingga 100% untuk laporan praktikum yang disusun. i. Kurang dari 24 jam berkurang 10% ii. Lewat sehari berkurang 20% iii. Lewat dua hari berkurang 40% iv. Lewat tiga hari sampai dengan satu minggu berkurang 60% v. Lebih dari satu minggu berkurang 80% vi. Tidak mengumpulkan laporan hingga jadwal penginputan nilai berkurang 100%.



42



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



BORANG 1 FORMAT TUGAS PENDAHULUAN



43



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



Tabel Rencana Penugasan Terstruktur Tugas Pendahuluan Program Studi Sarjana Terapan Sanitasi Lingkungan Jurusan Sanitasi Lingkungan Politeknik Kesehatan Kemenkes Gorontalo RENCANA PENUGASAN TERSTRUKTUR MATA KULIAH Mikrobiologi KODE DOSEN PENGAMPU



KL.B.1.01 SKS 2 SEMESTER Marhamah Yudin, SKM., M.Kes Yazmin Armin Abdullah, SKM, M.Kes Atyaf Umi Faizah, S.Tr.Kes



1



PRANATA LABORATORIUM PENDIDIKAN (PLP) BENTUK TUGAS WAKTU PENGERJAAN TUGAS Individu 1-3 hari (disesuaikan jadwal praktikum) JUDUL TUGAS Tugas Pendahuluan: Menyusun Draft Laporan Praktikum CAPAIAN PEMBELAJARAN MATA KULIAH CPMK 3. Mahasiswa mampu memahami dan melakukan cara desinfeksi, cara pengambilan, dan pemeriksaan secara sistematis, logis, mandiri, dan bertanggung jawab. DESKRIPSI TUGAS Susunlah Draft Laporan Praktikum berdasarkan topik yang telah ditentukan. METODE PENGERJAAN TUGAS A. Mahasiswa menyusun tugas pendahuluan berupa draft laporan praktikum sebanyak topik/materi praktikum, yaitu: 1. Pengenalan Alat dan Bahan Praktikum 2. Disinfeksi dan Sterilisasi Peralatan 3. Pembuatan Media dalam Praktikum Mikrobiologi Lingkungan 4. Sampling Mikrobiologi 5. Pemeriksaan Angka Lempeng Total 6. Pemeriksaan Bakteri Salmonella sp. 7. Pemeriksaan MPN Bakteri Coliform 8. Pemeriksaan MPN Bakteri Eschericia coli 9. Pemeriksaan Bakteri Staphylococcus aureus 10. Pemeriksaan Jamur Kapang & Khamir B. Tugas pendahuluan disusun menggunakan kertas A4, jenis huruf Arial, ukuran huruf 12, ukuran margin (atas 4 cm, bawah 3 cm, kiri 4 cm, kanan 3 cm), spasi 1.5, rata kiri-kanan (justify). C. Sistematika format penyusunan draft laporan praktikum/tugas pendahuluan terdiri atas: (lihat Borang 1) - Sampul - Pembahasan yang terdiri dari: 1. Latar Belakang (lihat poin yang diperlukan pada tabel 11.1 pada modul ptaktikum) 2. Tujuan Praktikum (diambil dari modul praktikum) 3. Landasan Teori (lihat poin yang diperlukan pada tabel 11.1 pada modul ptaktikum) 4. Alat (diambil dari modul praktikum) 5. Bahan (diambil dari modul praktikum) 6. Prosedur Kerja (diambil dari modul praktikum) - Daftar Pustaka Gunakan referensi 10 tahun terakhir (tahun 2012 sampai dengan 2022) BENTUK DAN FORMAT LUARAN Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



44



|



a. Objek Garapan: Penyusunan tugas pendahuluan mencakup 10 topik/materi (lihat bagian metode pengerjaan tugas poin A)



b. Bentuk Luaran : Tugas Pendahuluan Praktikum (draft laporan praktikum) dikumpulkan dalam bentuk softcopy file dengan format ekstensi (*.docx), sistematika nama file TP1_Nama_NIM_KelasA/B_Nama Lengkap.docx yang diunggah pada Link: https://bit.ly/Upload-TPP_Mikling Contoh: TP1_7513351220000_Kelas A_Jonathan (Untuk Tugas Pendahuluan Topik 1) TP2_7513351220000_Kelas A_Jonathan (Untuk Tugas Pendahuluan Topik 2) …….. Dst. INDIKATOR, KRETERIA DAN BOBOT PENILAIAN Indikator dan kriteria penilaian sesuai dengan rubrik penilaian (lihat Borang 4); Bobot penilaian tugas pendahuluan 1-10 adalah 15% dari 100% penilaian praktikum. JADWAL PELAKSANAAN 16 September 2022 24 September 2022 LAIN-LAIN Mahasiswa tidak diperkenankan melakukan duplikasi (plagiat) tugas pendahuluan. DAFTAR RUJUKAN Modul Praktikum Mikrobiologi



45



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



Margin atas 4 cm



TUGAS PENDAHULUAN I “PENGENALAN ALAT DAN BAHAN PRAKTIKUM”



Menyesuaikan topik/materi



Logo Poltekkes Kemenkes Gorontalo ukuran 5 × 5 cm



Margin kanan 3 cm



Margin kiri 4 cm



DISUSUN OLEH: NAMA MAHASISWA NIM KELOMPOK 1/2/3



Pilih salah satu



KELAS A/B



KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES GORONTALO JURUSAN SANITASI LINGKUNGAN PROGRAM STUDI SARJANA TERAPAN SANITASI LINGKUNGAN 46



TA. 2022/2023 “PENGENALAN ALAT DAN BAHAN PRAKTIKUM”



Margin bawah 3 cm



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



A. Latar Belakang Lengkapi sesuai konten latar belakang topik/materi 1.



B. Tujuan Praktikum Isi sesuai dengan tujuan praktikum topik/materi 1.



C. Landasan Teori Lengkapi sesuai konten latar belakang topik/materi 1.



D. Alat Isi sesuai dengan alat yang digunakan pada praktikum topik/materi 1.



E. Bahan Isi sesuai dengan bahan yang digunakan pada praktikum topik/materi 1.



F. Prosedur Kerja Isi sesuai dengan prosedur kerja praktikum topik/materi 1.



G. Daftar Pustaka -



Isi sesuai dengan referensi/artikel yang digunakan dalam penyusunan latar belakang dan landasan teori pada praktikum topik/materi 1 (10 tahun terakhir 2012-2022).



-



Daftar Pustaka disusun secara sistematis berdasarkan urutan abjad (A-Z).



-



Tidak



diperbolehkan



menggunakan



referensi



bersumber



dari



WordPress dan Blogspot.



Catatan: Judul Menyesuaikan topik/materi praktikum



47



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



BORANG 2 FORMAT LAPORAN PRAKTIKUM



48



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



Tabel Rencana Penugasan Terstruktur Penyusunan Laporan Praktikum Program Studi Sarjana Terapan Sanitasi Lingkungan Jurusan Sanitasi Lingkungan Politeknik Kesehatan Kemenkes Gorontalo RENCANA PENUGASAN TERSTRUKTUR MATA KULIAH Mikrobiologi KODE DOSEN PENGAMPU



KL.B.1.01 SKS 2 SEMESTER Marhamah Yudin, SKM., M.Kes Yazmin Armin Abdullah, SKM, M.Kes Atyaf Umi Faizah, S.Tr.Kes



1



PRANATA LABORATORIUM PENDIDIKAN (PLP) BENTUK TUGAS WAKTU PENGERJAAN TUGAS Individu 1-3 hari (disesuaikan jadwal praktikum) JUDUL TUGAS Laporan: Menyusun Laporan Praktikum Mikrobiologi CAPAIAN PEMBELAJARAN MATA KULIAH CPMK 3. Mahasiswa mampu memahami dan melakukan cara desinfeksi, cara pengambilan, dan pemeriksaan secara sistematis, logis, mandiri, dan bertanggung jawab. DESKRIPSI TUGAS Susunlah Laporan Praktikum berdasarkan hasil kegiatan praktikum di laboratorium mikrobiologi. METODE PENGERJAAN TUGAS A. Mahasiswa menyusun laporan praktikum menggunakan kertas A4, jenis huruf Arial, ukuran huruf 12, ukuran margin (atas 4 cm, bawah 3 cm, kiri 4 cm, kanan 3 cm), spasi 1.5. B. Sistematika format penyusunan laporan praktikum harus memuat (lihat Borang 2): 1. Sampul 2. Lembar Pengesahan 3. Kata Pengantar 4. Daftar Isi 5. Praktikum 1 “Pengenalan Alat dan Bahan Praktikum” 6. Praktikum 2 “Disinfeksi dan Sterilisasi Peralatan” 7. Praktikum 3 “Pembuatan Media dalam Praktikum Mikrobiologi Lingkungan” 8. Praktikum 4 “Sampling Mikrobiologi” 9. Praktikum 5 “Pemeriksaan Angka Lempeng Total” 10. Praktikum 6 “Pemeriksaan Bakteri Salmonella sp.” 11. Praktikum 7 “Pemeriksaan MPN Bakteri Coliform” 12. Praktikum 8 “Pemeriksaan MPN Bakteri Eschericia Coli” 13. Praktikum 9 “Pemeriksaan Bakteri Staphylococcus Aureus” 14. Praktikum 10 “Pemeriksaan Jamur Kapang & Khamir” C. Penulisan nomor halaman pada metode pengerjaan tugas poin B nomor 1-4 menggunakan format i, ii, iii, … dst, sedangkan untuk nomor 5-14 menggunakan format angka 1, 2, 3, …. dst.



49



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



BENTUK DAN FORMAT LUARAN A.Objek Garapan: Penyusunan laporan mencakup 10 topik/materi praktikum yakni: 1. Pengenalan Alat dan Bahan Praktikum 2. Disinfeksi dan Sterilisasi Peralatan 3. Pembuatan Media dalam Praktikum Mikrobiologi Lingkungan 4. Sampling Mikrobiologi 5. Pemeriksaan Angka Lempeng Total 6. Pemeriksaan Bakteri Salmonella sp. 7. Pemeriksaan MPN Bakteri Coliform 8. Pemeriksaan MPN Bakteri Eschericia coli 9. Pemeriksaan Bakteri Staphylococcus aureus 10. Pemeriksaan Jamur Kapang & Khamir B.Bentuk Luaran : Laporan Praktikum dikumpulkan dalam bentuk: 1) Softcopy file dengan format ekstensi (*.docx), sistematika nama file LPMIKRO _NIM_KelasA/B_Nama Lengkap.docx yang diunggah pada Link: https://bit.ly/Upload-LP_Mikling Contoh: LPMIKRO _7513351220000_Kelas A_Jonathan 2) Hardcopy file / print out / dicetak pada kertas A4, dijilid biasa, dengan cover (depan: plastik; belakang: kertas) berwarna hijau muda INDIKATOR, KRITERIA DAN BOBOT PENILAIAN Indikator dan kriteria penilaian sesuai dengan rubrik penilaian (lihat Borang 4); Bobot penilaian laporan praktikum adalah 35% dari 100% penilaian praktikum. JADWAL PELAKSANAAN Akan diumumkan LAIN-LAIN Mahasiswa dihimbau untuk memasukkan laporan praktikum sesuai jadwal yang telah ditentukan DAFTAR RUJUKAN Modul Praktikum Mikrobiologi.



50



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



Margin atas 4 cm



LAPORAN PRAKTIKUM MATA KULIAH MIKROBIOLOGI



Logo Poltekkes Kemenkes Gorontalo ukuran 5 × 5 cm



Margin Margin kanan kanan 3 cm 3 cm



Margin Margin kiri 4 cm kiri 4 cm



DISUSUN OLEH: NAMA MAHASISWA NIM KELOMPOK 1/2/3



Pilih salah satu



KELAS A/B



KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES GORONTALO JURUSAN SANITASI LINGKUNGAN PROGRAM STUDI SARJANA TERAPAN SANITASI LINGKUNGAN 51



TA. 2022/2023



Margin bawah 3 cm



Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan



|



LEMBAR PENGESAHAN LAPORAN PRAKTIKUM MATA KULIAH MIKROBIOLOGI



DISUSUN OLEH:



NAMA MAHASISWA KELOMPOK 1/2/3



Pilih salah satu



KELAS A/B



Gorontalo, Tanggal Bulan Tahun



Mengetahui, Dosen Pembimbing



Instruktur



Nama Lengkap beserta Gelar



Nama Lengkap beserta Gelar



NIP. …………………..



NIP. …………………..



Menyetujui, Koordinator Mata Kuliah



Nama Lengkap beserta Gelar NIP. …………………..



ii



KATA PENGANTAR …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………….



Gorontalo,



Bulan 2022



Penyusun



Nama Mahasiswa NIM.



iii



DAFTAR ISI



Halaman SAMPUL ..................................................................................................



i



LEMBAR PENGESAHAN ........................................................................



i



KATA PENGANTAR ................................................................................



i



DAFTAR ISI .............................................................................................



i



Praktikum 1 Pengenalan Alat dan Bahan Praktikum ................................



1



Praktikum 2 Disinfeksi dan Sterilisasi Peralatan ......................................



1



Praktikum 3 Pembuatan Media dalam Praktikum Mikrobiologi Lingkungan ........................................................................



1



Praktikum 4 Sampling Mikrobiologi ..........................................................



1



Praktikum 5 Pemeriksaan Angka Lempeng Total.....................................



1



Praktikum 6 Pemeriksaan Bakteri Salmonella sp. ....................................



1



Praktikum 7 Pemeriksaan MPN Bakteri Coliform .....................................



1



Praktikum 8 Pemeriksaan MPN Bakteri Eschericia coli ............................



1



Praktikum 9 Pemeriksaan Bakteri Staphylococcus aureus.......................



1



Praktikum 10 Pemeriksaan Jamur Kapang & Khamir ...............................



1



KARTU MONITORING ............................................................................



1



iv



PRAKTIKUM 1 “PENGENALAN ALAT DAN BAHAN PRAKTIKUM” Catatan: Khusus lembar ini menggunakan kertas berwarna hijau muda



1



BAB I PENDAHULUAN



A. Latar Belakang …………… (dapat menggunakan hasil kerja pada tugas pendahuluan)



B. Tujuan Praktikum ………….. (dapat menggunakan hasil kerja pada tugas pendahuluan)



2



BAB II LANDASAN TEORI ………………………………………………………………………………….… ……………………………………………………………………………… (dapat menggunakan hasil kerja pada tugas pendahuluan).



3



BAB III METODE PRAKTIKUM



A. Alat ………. (dapat menggunakan hasil kerja pada tugas pendahuluan)



B. Bahan ………. (dapat menggunakan hasil kerja pada tugas pendahuluan)



C. Prosedur Kerja ………. (dapat menggunakan hasil kerja pada tugas pendahuluan)



4



BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN



A. Hasil ………. (Disesuaikan berdasarkan hasil praktikum)



B. Pembahasan ………. (menguraikan hasil praktikum yang dibandingkan dengan teori/hasil penelitian-penelitian sebelumnya).



5



BAB V PENUTUP



A. Kesimpulan ……….



B. Saran ……..



6



DAFTAR PUSTAKA



Disusun berdasarkan urutan abjad A-Z Contoh: Dwidjoseputro, D. 2003. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta. Djambatan. Jawetz, Melnick, Adelberg’s. 2005. Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta. Salemba Medika. Lim, D. 1998. Microbiology 2nd Edition. United of States America. McGraw Hill. Pelczar, M., E.C.S. Chan. 2005. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Penerbit Universitas Indonesia. Jakarta.



7



DOKUMENTASI



GAMBAR 1



GAMBAR 2



Keterangan gambar



Keterangan gambar



GAMBAR 3



GAMBAR 4



Keterangan gambar



Keterangan gambar



GAMBAR 5



GAMBAR 6



Keterangan gambar



Keterangan gambar



GAMBAR 7



GAMBAR 8



Keterangan gambar



Keterangan gambar



BORANG 3 FORMAT KARTU MONITORING



KARTU PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI SEMESTER I TA. 2022/2023 PROGRAM STUDI SARJANA TERAPAN SANITASI LINGKUNGAN JURUSAN SANITASI LINGKUNGAN POLTEKKES KEMENKES GORONTALO Nama



:



NIM



:



Kelas



:



A. Daftar Hadir dan Pelaksanaan Praktikum Di Laboratorium No



Aspek Penilaian



Jadwal Praktikum 16/9/22 19/9/22 20/9/22 21/9/22 22/9/22 23/9/22 24/9/22



1



Kehadiran



2



Tugas Pendahuluan (PT) TP 1 TP 2 TP 3 TP 4 TP 5 TP 6 TP 7 TP 8 TP 9 TP 10



3



Responsi (Post-Test)/PT PT 1 PT 2 PT 3 PT 4 PT 5 PT 6 PT 7 PT 8 PT 9 PT 10



Masing-masing kotak diparaf oleh PLP/Instruktur/dosen pembimbing di laboratorium



LEMBAR BIMBINGAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI SEMESTER I TA. 2022/2023 PROGRAM STUDI SARJANA TERAPAN SANITASI LINGKUNGAN JURUSAN SANITASI LINGKUNGAN POLTEKKES KEMENKES GORONTALO Nama



:



NIM



:



Kelas



:



NO



HARI / TANGGAL



TANGGAPAN & ARAHAN



PARAF



1



2



3



Gorontalo, .......................2022 Mengetahui, Dosen Pembimbing



Instruktur



(…………………………) NIP:.................................



(…………………………) NIP:............................... Menyetujui, Koordinator MK (………………………………..) NIP.



KET



BORANG 4 INDIKATOR DAN KRITERIA PENILAIAN



INDIKATOR DAN KRITERIA PENILAIAN TUGAS PENDAHULUAN



Indikator



: Ketepatan menjelaskan cara disinfeksi, cara pengambilan, dan pemeriksaan mikrobiologi secara sistematis, logis, mandiri, dan bertanggung jawab.



A. Aspek Kognitif (Ko) dan Psikomotor (Ps) Skala Kriteria Penilaian Kurang (D) Cukup (C) (21 – 40) (41 – 60)



No



Aspek / Dimensi Yang Dinilai



Sangat Kurang (E) (Skor