Skripsi Daun Reundeu [PDF]

Citation preview

AKTIVITAS PELURUH BATU GINJAL (Antikalkuli) EKSTRAK AIR DAN ETANOL DAUN REUNDEU (Staurogyne longata) SECARA IN VITRO



HASIL PENELITIAN



OLEH : FAUZIAH QURROTA A’YUNI 066116132



PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVESITAS PAKUN BOGOR 2020



HALAMAN PENGESAHAN



JUDUL TUGAS AKHIR : AKTIVITAS PELURUH BATU GINJAL EKSTRAK AIR DAN ETANOL DAUN REUNDEU (Staurogyne longata) SECARA IN VITRO Nama



: FAUZIAH QURROTA A’YUNI



Npm



: 066116132



Program Studi



: FARMASI



Hasil penelitian ini telah diperiksa dan disetujui Bogor,



Pembimbing Pendamping



Pembimbing Utama



Nina Herlina, S.Farm, M.si Apt. Sri Wardatun, M.Farm. Mengetahui, Ketua Program Studi Farmasi



Dra. Ikeu Yulia Wendarlina, M.Farm., Apt.



KATA PENGANTAR Segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmatnya serta memberi kelancaran sehingga penulis dapat menyelesaikan hasil penelitian yang berujudul “Aktivitas Peluruh Batu Ginjal (Antikalkuli) Ekstrak Air Dan Etanol Daun Reundeu (Staurogyne longata) Secara In Vitro”. Hasil penelitian ini ditujukan untuk memenuhi salah satu syarat mendapatkan gelar sarjana Farmasi di Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Pakuan, Bogor. Penulis mengucapkan banyak terimakasih kepada pihak yang telah membantu dalam penulisan usulan pnelitian ini terkhusus penulis ucapkan terimakasih kepada: 1. Kedua orang tua serta kakak dan adik yang telah memberikan do’a, dukungan penuh dan motivasi kepada penulis selama ini. 2. Apt. Sri Wardatun, M.Farm. Selaku pembimbing utama dan Nina Herlina, S.Farm, M.Si. Selaku pembimbing pendamping 3. Dekan Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam serta Ketua Program Studi Farmasi, Universitas Pakuan Bogor. 4. Seluruh dosen dan staf Program Studi Farmasi yang telah memberikan ilmu dan membantu kelancaran slama prkuliahan dan penyelsaian usulan peneliian ini. Penulis menyadari bahwa dalam penulisan usulan peneliian ini masih banyak kekurangan sehingga penulis mengharapkan saran dan kritik yang dapat memperbaiki penulisan ini sehingga dapat bermanfaat bagi banyak pihak. Bogor,



Penulis



RINGKASAN



FAUZIAH QURROTA A’YUNI 066116132. 2020. AKTIVITAS PELURUH BATU GINJAL (Antikalkuli) EKSTRAK AIR DAN ETANOL DAUN REUNDEU(Staurogyne longata) SECARA IN VITRO. Pembimbing: Sri Wardatun dan Nina Herlina Nefrolitiasis atau batu ginjal merupakan suatu gangguan kesehatan dimana terdapat masa keras seperti batu di dalam pelvis atau kaliks ginjal, tersusun atas kristal-kristal yang terdiri dari bahan organik dan anorganik mengendap membentuk agregasi sehingga menjadi batu yang lebih besar. Salah satu tanaman yang dapat digunakan sebagai antikalkuli adalah daun reundeu. Daun reundeu memiliki kandungan senyawa flavonoid, saponin, tanin, dan steroid. Flavonoid dapat melarutkan batu ginjal karena terdapat gugus –OH pada rantai samping struktur induk sehingga flavonoid membentuk ikatan komplek Ca-flavonoid dengan kalsium. Kalium juga berperan penting dalam kelarutan batu ginjal Ionion kalium dapat menjaga keseimbangan elektrolit, batu ginjal dapat terurai oleh kalium karena bergabung dengan kalsium membentuk senyawa garam yang lebih mudah larut dalam air. Tujuan dari pnelitian ini adalah menentukan kadar kalium dan kelarutan kalsium batu ginjal dari ekstrak kering air dan etanol daun reundeu. Metode penelitian meliputi pembuatan simplisia sebuk, pembuatan ekstrak kering air dan etanol daun reundeu, analisis kalium dan kalsium menggunakan alat AAS. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak kering air dan etanol daun reundeu mengandung flavonoid. Ekstrak Air yang paling optimal dalam melarutkan batu ginjal sebesar 1,63 pada konsentrasi 0.5% dan ekstrak etanol yang paling optimal yaitu sebesar 7,3% pada konsentrasi 0,5%. Rata-rata ekstrak air mengandung kadar kalium sebesar 0,58% dan rata-rata ekstrak etanol mengandung kadar kalium sebesar 0,77% Kata kunci: Daun Reundeu, Kalium, Peluruh batu ginjal.



DAFTAR ISI



Halaman HALAMAN PENGESAHAN................................................................................ii KATA PENGANTAR..........................................................................................iii RINGKASAN........................................................................................................iv DAFTAR ISI...........................................................................................................v BAB I PENDAHULUAN.......................................................................................1 1.1 Latar Belakang....................................................................................1 1.2 Tujuan Penelitian................................................................................2 1.3 Hipotesis.............................................................................................2 BAB II TINJAUAN PUSTAKA............................................................................3 2.1 Deskripsi Tanaman Reundeu..............................................................3 2.2 Manfaat dan Kandungan Reundeu......................................................3 2.3 Ekstraksi.............................................................................................4 2.4 Patofisiologi dan Klasifikasi Batu Ginjal...........................................5 2.5 Spektrofotometer Serapan Atom........................................................5 BAB III METODE PENELITIAN.......................................................................8 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian.............................................................8 3.2 Bahan dan Alat...................................................................................8 3.2.1Bahan..........................................................................................8 3.2.2Alat.............................................................................................8 3.3 Metode Penelitian...............................................................................8 3.3.1 Pengumpulan Bahan Baku dan Determinasi Tanaman......................8 3.3.2 Pembuatan Simplisia Tanaman.........................................................8



3.3.3 Penetapan Kadar Air.........................................................................9 3.3.4 Penetapan Kadar Abu........................................................................9 3.3.5 Uji Fitokimia...................................................................................10 3.3.6 Pembuatan Ekstrak..........................................................................10 3.3.7 Analisis Kadar Kalium....................................................................11 3.3.8 Inkubasi Batu Ginjal.......................................................................12 3.3.9 Analisis Kadar Kalsium..................................................................12



BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN.............................................................14 4.1 Hasil Determinasi Tanaman Daun Reundeu.....................................14 4.2 Hasil Simplisia Serbuk Daun Reundeu.............................................14 4.3 Hasil Ekstrak Kering Daun Reundeu................................................15 4.4 Hasil uji Fitokimia Ekstrak kering daun reundeu.............................17 4.5 Hasil analisis kadar kalium Ekstrak kering daun reundeu................17 4.6 Hasil analisis kadar kalsium ekstrak kering daun reundeu...............18 BAB V KESIMPULAN.......................................................................................22 DAFTAR PUSTAKA...........................................................................................23



DAFTAR GAMBAR



Gambar 1 Tanaman reundeu (Staurogyne longata).................................................3 Gambar 2 Serbuk simplisia daun reundeu.............................................................14 Gambar 3 Ekstrak kering air daun reundeu...........................................................15 Gambar 4 Ekstrak kering etanol daun reundeu......................................................15 Gambar 5. Histogram rata-rata kelarutan kalsium dalam ekstrak kering air daun reundeu dan ekstrak kering etanol daun reundeu...................................................19



DAFTAR TABEL



Tabel 1. Hasil Rendemen, Kadar Air dan Kadar Abu Ekstrak Daun Reundeu.....16 Tabel 2. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Kering Daun Reundeu................................17 Tabel 3. Hasil Kadar Kalium Ekstrak Kering Daun Reundeu...............................18 Tabel 4. Hasil Kadar Kalsium Terlarut Dalam Ekstrak Kering Daun Reundeu....19



DAFTAR LAMPIRAN



Lampiran 1 Alur Penelitian....................................................................................28 Lampiran 2 Hasil Determinasi Tanaman...............................................................29 Lampiran 3 Hasil Rendemen Daun Reundeu.........................................................30 Lampiran 4 Hasil Penetapan Kadar Air.................................................................31 Lampiran 5 Hasil Penetapan Kadar Abu................................................................33 Lampiran 6 Hasil Penetapan Kadar Kalium Dan Kalsium....................................35 Lampiran 7. Hasil Analisis Data Statistik Kelarutan Kalsium...............................36 Lampiran 8. Alat Penelitian...................................................................................37



BAB I PENDAHULUAN 1.1



Latar Belakang Nefrolitiasis merupakan suatu gangguan kesehatan dimana terdapat masa



keras seperti batu di dalam pelvis atau kaliks ginjal, tersusun atas kristal-kristal yang terdiri dari bahan organik dan anorganik mengendap membentuk agregasi sehingga menjadi batu yang lebih besar (Fauzi & Putra, 2016). Prevalensi batu ginjal di Indonesia sebesar 0,6% (Kemenkes, 2013). Nefrolitiasis yang sering terbentuk adalah batu kalsium oksalat sekitar 80% (SY Yetti, 2018). Upaya medis dalam pengobatan saat ini dapat dengan pemberian obat sintesis berupa kalium sitrat atau dengan tindakan operasi yang menimbulkan bekas sayatan besar dan beresiko tinggi serta teknologi modern yaitu Extracorporeal Shockwave Lithotripsy (ESWL) dan endoskopi. Metode ESWL ini terbatas hanya dapat untuk beberapa jenis batu dan beberapa ukuran batu saja. Dalam praktiknya kedua metode tersebut memerlukan biaya yang relatif mahal sehingga masyarakat tidak dapat medapatkannya. Terapi alternatif menjadi pilihan dalam menangani batu ginjal dengan menggunakan tanaman obat antikalkuli karena aktivitasnya dapat menghambat atau melarutkan komponen batu ginjal pada saluran urinari (Fikriani & Wardhana, 2018) Noviandi (2014) menyatakan bahwa masyarakat menggunakan daun reundeu sebagai obat batu ginjal. Reundeu juga digunakan masyarakat sebagai obat nyeri sendi, reumatik dan susah kencing dengan cara pengolahan dilalap atau direbus (Handayani, 2015). Reundeu memiliki kandungan senyawa flavonoid, saponin, tannin, steroid dan fenol (Mariani, 2014). Salah satu senyawa antikalkuli adalah flavonoid, ekstrak daun kembang bulan terbukti dapat melarutkan batu ginjal dengan adanya senyawa flavonoid (Triyasmono dan Suhartono, 2015). Flavonoid dapat melarutkan batu ginjal karena terdapat gugus –OH pada rantai samping struktur induk sehingga flavonoid membentuk ikatan komplek dengan kalsium yaitu Ca-flavonoid senyawa tersebut lebih mudah larut dalam air sehingga batu ginjal dapat dikeluarkan bersama dengan urin (Anas et al., 2016). 1



Selain flavonoid kalium juga berperan penting dalam kelarutan batu ginjal (Nisma, 2011). Ion-ion kalium dapat menjaga keseimbangan elektrolit, batu ginjal dapat terurai oleh kalium karena bergabung dengan kalsium oksalat membentuk senyawa garam yang lebih mudah larut dalam air sehingga perlahan-lahan batu ginjal akan terbawa oleh urin, daun seledri terbukti dapat melarutkan batu ginjal karena kadar kalium yang tinggi (Dewi et al., 2016). Penelitian tentang aktivitas daun reundeu sebagai peluruh batu ginjal belum ditemukan maka penelitian ini akan melakukan uji aktivitas daun reundeu sebagai peluruh batu ginjal secara in vitro. Instrumen yang digunakan adalah spektrofotometri serapan atom metode ini digunakan karena memiliki keuntungan dalam kecepatan analisis, dan dapat mengukur kadar logam dalam jumlah kecil serta spesifik untuk setiap logam tanpa pemisahan (Nia et al., 2016). Dengan merendam kalsium batu ginjal dalam ekstrak daun reundeu (Staurogyne longata) diharapkan dapat melarutkan batu ginjal sehingga dapat digunakan sebagai antikalkuli.



1.2



Tujuan Penelitian 1. Menentukan kadar kalsium yang terlarut pada ekstrak air dan etanol daun reundeu (Staurogyne longata). 2. Menentukan kadar kalium dalam ekstrak daun reundeu (Staurogyne longata).



1.3



Hipotesis 1. Ekstrak air dan etanol daun reundeu (Staurogyne longata) dapat melarutkan kalsium secara in vitro. 2. Ekstrak air dan etanol daun reundeu (Staurogyne longata) mengandung kalium.



BAB II TINJAUAN PUSTAKA



2.1



Deskripsi Tanaman Reundeu Reundeu (Staurogyne longata) adalah herba tegak atau memanjat dan



dapat tumbuh sampai tingginya 60 cm, daunnya berbentuk lonjong sampai lonjong bulat telur dengan ukuran 6-15cm × 25 cm, berambut halus, panjang tangkai daun 2-6 cm, perbungaan tandan 7-30 cm, panjang mahkota 2 cm, dengan warna putih kemerahmudaan, berbunga sepanjang tahun, ramping, sering kali bercabang di dasar, rachis berwarna merah tua. Buahnya berbentuk bulat kecil dan bijinya banyak dengan ukuran kecil. Tanaman reundeu banyak tumbuh di daerah Jawa dan Sumatera (Maulani et al., 2014). Dapat dilihat pada Gambar 1.



Gambar 1 Tanaman reundeu (Staurogyne longata) Sumber: Pribadi, 2020



2.2



Manfaat dan Kandungan Reundeu Reundeu merupakan tanaman yang banyak ditemukan di pegunungan atau



daerah tropis di Indonesia. Daun reundeu banyak terdapat di daerah sunda, masyarakat sering menggunakannya untuk dikonsumsi sebagai lalapan ataupun sebagai obat tradisional untuk peluruh kecing. Daun reundeu memiliki kandungan 3



senyawa flavonoid, saponin, tannin, steroid dan fenol. Selain dapat sebagai peluruh air kencing daun reundeu pun memiliki aktivitas antioksidan (Mariani, 2014). Daun reundeu juga berkhasiat sebagai antidiare karena memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococus aureus dan Echericin coli (Maulani et al., 2014). Senyawa flavonoid merupakan suatu metabolit sekunder yang memiliki struktur inti C 6−C 3−C 6 yaitu dua cincin aromatik yang dihubungkan dengan 3 atom C, biasanya berikatan dengan atom O berupa ikatan oksigen heterosiklik. Senyawa ini mengandung dua atau lebih gugus hidroksil maka dapat dimasukkan sebagai senyawa polifenol. Senyawa ini bersifat polar karena pada umumnya flavonoid berikatan dengan gula membentuk glikosida maka lebih mudah larut dalam pelarut seperti metanol, etanol, butanol, etil asetat. Dalam bentuk aglikon flavonoid kurang bersifat polar maka lebih cocok menggunakan pelarut seperti kloroform dan eter (Hanani, 2015). 2.3



Ekstraksi Metode ekstraksi yang digunakan pada penelitian ini adalah maserasi dan



infus dimana maserasi merupakan metode ekstraksi dengan cara merendam dalam pelarut pada suhu kamar untuk meminimalisir kerusakan atau degradasi metabolit. Pada metode maserasi diperlukan penggantian pelarut secara berulang karena pada prinsipnya terjadi proses keseimbangan konsentrasi antara larutan di luar dan di dalam sel. Maserasi kinetik cara kerjanya sama dengan maserasi sederhana yaitu dengan pengadukan, sedangkan digesti cara maserasi dengan suhu lebih tinggi yaitu 40-60℃ (Hanani, 2015). Sedangkan infusa adalah metode ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur 96-98℃ selama waktu 15-20 menit (dihitung setelah suhu 96℃ tercapai) menggunakan bejana atau panci yang tercelup dalam penangas air. Metode infusa ini cocok untuk simplisia yang bersifat lunak (Hanani, 2015). Kelebihan dari metode ini yaitu peralatan yang digunakan sederhana dapat



menyari simplisia dengan pelarut air serta penyarian lebih sempurna namun eksrak hasil dari metode ini kurang stabil maka tidak boleh disimpan lebih dari 24 jam (Adliah, 2017).



2.4



Patofisiologi dan Klasifikasi Batu Ginjal Batu ginjal terbentuk pada tubuli ginjal kemudian berada di kaliks,



infundibulum, pelvis ginjal, dan bahkan bisa mengisi pelvis serta seluruh kaliks ginjal. Batu ini akan terlihat menyerupai tanduk rusa jika batu mengisi pileum dan lebih dari dua kaliks ginjal yang disebut staghron. Kelainan atau penyempitan pada sistem pelvikalises ginjal maka akan mempermudah terjadinya batu saluran kemih. Batu yang tidak terlalu besar akan terdorong oleh gerakan peristaltik otot sistem pelvikalises dan turun menuju ureter sehingga menjadi batu ureter (Purnomo, 2016). Klasifikasi



batu



ginjal



menurut



Purnomo



(2016)



berdasarkan



komposisinya yaitu yang petama batu kalsium, kandungan batu jenis ini terdiri dari kalsium fosfat atau campuran dari kedua unsur tersebut, faktor terjadinya batu kalsium adalah hiperkalsiuri, hiperosaluri, hiperurikosuria, hipositraturia, dan hipomagnesuria. Kedua yaitu batu struvit, Batu ini terbentuk karena infeksi saluran kemih yang diakibatkan oleh bakteri yang dapat menghidrolisis urea menjadi ammonia dan menjadikan suasana basa sehingga garam-garam mudah mengendap dan membentuk batu. Ketiga batu asam urat, Asam urat tidak larut dalam urin sehingga dalam keadaan tertentu mengakibatkan terbentuknya batu ginjal, penyakit batu asam urat banyak diderita oleh pasien – pasien gout factor yang menyebabkan asam urat adalah urin yang terlalu asam, dehidrasi, kadar asam urat yang tinggi. Dan terdapat batu jenis lain yaitu batu sistin, batu xanthin, batu triamterene dan batu silikat. Batu sistin disebabkan adanya kelainan metabolisme dan absorbs santin di muosa usus. Batu xanthin disebabkan karena defisiensi



enzim xanthin. Timbulnya batu silikat dapat disebabkan karena pnggunaan antasida yang mengandung silikat dalam jangka waktu lama.



2.5



Spektrofotometer Serapan Atom Alat spektrofotometer yang secara khusus mengukur konsentrasi bahan



kimia berupa atom bukan senyawa disebut spektofometer nyala (flame spectrophotometer) yang memakai obyek nyala api pembakar. Prinsip kerjanya sampel berupa molekul yang akan diuraikan menjadi atom-atom di dalam nyala api pada alat spektrofotometer serapan atom, atom menyerap energi sehingga elektron-elektronnya mengalami eksitasi. Energi eksitasi tersebut berasal dari pancaran sinar sebuah sumber cahaya lampu, dimana energi yang terserap sama dengan selisih energi antara dua nivo energi. Peralihan dari posisi dasar ke posisi eksitasi yang pertama disebut garis resonansi. Absorpsi tiap elemen dalam sampel akan menyerap sinar dengan jumlah jarak gelombang yang terbatas dalam kawasan spektrum yang sempit. Berdasarkan spektrum serapan ini akan dapat diperoleh data-data mengenai zat sampel (Sari, 2010). Beberapa komponen utama pada instrumentasi spektrofotometer serapan atom adalah sebagai berikut: a.



Sumber cahaya Jenis lampu yang digunakan adalah katoda dengan spektrum garis, lampu



katoda terdiri atas sebuah katoda berongga berbentuk tabung dan berhadapan dengan anoda dari kawat wolfram, keduanya terbungkus dengan bahan gelas. Lampu ini diisi dengan gas mulia seperti Argon, Neon, Helium atau Crypton sampai tekanan maksimal 1 cmHg. b.



Monokromator Monokromator merupakan alat yang diletakkan diantara nyala dan



detektor pada suatu rangkaian instrumentasi spektrofotometer serapan atom.



Terdapat dua jenis monokromator yang digunakan yaitu monokromator celah dan kisi difraksi. c.



Gas dan alat pembakar Terdapat dua jenis gas pembakar yang bersifat oksidasi dan bahan bakar.



Gas pengoksidasi misalnya udara atau campuran udara dengan N 2 O, sedangkan sebagai bahan bakar adalah gas alam, propane, butane, asetilen dan H 2. Gas pembakar dapat pula berupa campuran udara dengan propane, udara dengan asetilen dan N 2 O dengan asetilen. Alat pembakar untuk mendapatkan nyala api juga harus diperhatikan. d.



Detektor Detektor berfungsi sebagai alat penguat dari spektrum cahaya yang telah



melewati sampel. Syarat yang harus dipenuhi oleh sebuah detektor adalah memiliki respon yang linear terhadap energi sinar dalam kawasan spektrum yang bersangkutan detektor yang digunakan adalah Detektor Tabung Pengadaan (Photon Multiplier Tube Deterctor/PMTD) (Sari, 2010).



BAB III METODE PENELITIAN



3.1



Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian dilaksanakan pada bulan Agustus sampai Oktober 2020 di



Laboratorium Farmasi Univesitas Pakuan Bogor dan Laboratorium Kimia Balai Penelitian Ternak Ciawi Bogor.



3.2



Bahan dan Alat



3.2.1 Bahan Bahan yang digunakan yaitu batu ginjal (kalsium karbonat), daun reundeu (Staurogyne longata), batugin® yang beredar di pasaran, akua demineralisasi, akuades, etanol 96% food grade, magnesium, asam klorida 5M, asam klorida 2N, FeCl 3 1%, gelatin, kalium klorida, asam nitrat dan natrium.



3.2.2 Alat Peralatan yang digunakan adalah alat-alat gelas, ayakan (mesh 40), kertas saring, timbangan digital, rak tabung, kurs platina, tanur ( Ney ®), oven, grinder, waterbath, vacuum dryer (Ogawa® ), dan spektrofotometer serapan atom.



3.3



Metode Penelitian



3.3.1 Pengumpulan Bahan Baku dan Determinasi Tanaman Daun reundeu diperoleh dari daerah Sukabumi Jawa Barat dan dideterminasi di Herbarium Bogoriense, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI), Kebun Raya Bogor. 8



3.3.2 Pembuatan Simplisia Tanaman Daun reundeu dalam keadaan segar sebanyak 2 kg disortasi basah dengan memisahkan



bagian



yang



tidak



diinginkan,



lalu



dilakukan



pencucian



menggunakan air mengalir daun yang telah bersih selanjutnya dikeringkan di bawah sinar matahari, kemudian disortasi kering untuk menghilangkan pengotor yang mungkin terbawa, simplisia kering dihaluskan dengan menggunakan penggiling selanjutnya simplisia serbuk disimpan dalam wadah tertutup rapat dan kedap udara (Mariani, 2014). Rendemen simplisia =



Bobot simplisia serbuk yang diperoleh × 100 % Bobot simplisiaawal



3.3.3 Penetapan Kadar Air Penetapan kadar air menggunakan metode gravimetri yaitu dengan cara cawan kosong dikeringkan dalam oven dengan suhu 105℃ selama 15 menit. Kemudian sampel ditimbang sebanyak 2 g selanjutnya dimasukkan ke dalam cawan yang telah ditara dan diketahui bobot awalnya kemudian ditimbang. Selanjutnya penimbangan setelah pengeringan berturut-turut tidak lebih dari 0,25%. Syarat kadar air tidak lebih dari 10% (Depkes RI, 2013). % kadar air:



Berat isi sebelum dipanaskan−berat isi setelah dipanaskan ×100 % Berat serbuk



3.3.4 Penetapan Kadar Abu Bahan uji yang telah dihaluskan ditimbang seksama 2 sampai 3 g lalu dimasukan ke dalam kurs silikat yang telah dipijar dan ditara, sampel dipijarkan hingga arang habis, setelah habis selanjutnya didinginkan dan ditimbang. Jika dengan cara ini arang tidak dapat dihilangkan, air dipanaskan lalu diaduk dan disaring melalui kertas saring bebas abu. Kertas saring beserta sisa penyaringan dipijarkan dalam kurs yang sama. Filtrat dimasukkan ke dalam kurs, diuapkan dan



dipijarkan hingga bobot tetap. Syarat kadar abu tidak lebih dari 10 %. (Depkes RI, 2011) Kadar Abu (%) =



Berat abu yang diperoleh ×100 % Berat awal simplisia



3.3.5 Uji Fitokimia a. Uji Flavonoid Sampel sebanyak 0,5 g ditambahkan dengan etanol sebanyak 2 sampai 3 tetes, kemudian selanjutnya ditambahkan serbuk Mg dan beberapa tetes asam klorida 5M. Sebuk Mg dapat diganti dengan serbuk Zn, adanya flavonoid ditandai dengan timbulnya warna merah hingga merah lembayung (Hanani, 2015). b. Saponin Ekstrak kering sebanyak 0,5 g dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambahkan 10 mL air panas, dinginkan dan kocok kuat selama 10 detik adanya saponin ditandai dengan terbentuk buih selama tidak kurang 10 menit setinggi 1 cm sampai 10 cm dan setelah penambahan 1 tetes asam klorida 2N buih tidak hilang (Malik dkk, 2014). c. Steroid dan Terpenoid Serbuk simplisia sebanyak 0,5 g dilarutkan dengan 0,5 mL kloroform, ditambahkan 0,5 mL asam asetat anhidrat selanjutnya ditambahkan 2 mL asam sulfat pekat melalui dinding tabung, adanya senyawa triterpenoid ditandai dengan terbentuknya cincin kecoklatan atau violet pada pembatas larutan akan terbentuk cincin biru kehijauan bila tedapat senyawa steroid (Cahyani dkk, 2019) d. Tanin Sebanyak 1 g serbuk simplisia ditambahkan 100 ml aqua demineralisasi dididihkan selama 15 menit, kemudian disaring. Selanjutnya diambil sebanyak 5 ml ditambahkan dengan larutan Fecl 3 1%. Hasil positif ditandai dengan perubahan warna menjadi hijau violet dan selanjutnya diambil 5 ml filtrat kemudian



ditambahkan dengan larutan gelatin hasil positif ditandai dengan adanya endapan berwarna putih (Mariani, 2014).



3.3.6 Pembuatan Ekstrak a. Maserasi Sebanyak 100 g serbuk simplisia ditimbang lalu dimasukkan ke dalam botol maserator dan ditambahkan 350 ml etanol 96%, perendaman pertama direndam selama 6 jam sambil sesekali diaduk, lalu didiamkan selama 18 jam. Setelah itu disaring, filtrat yang dihasilkan ditampung dan residu ekstraksi pertama diekstraksi kembali dengan etanol 96% sebanyak 350 mL dengan perlakuan yang sama. Residu dari ekstrasi kedua kembali diekstraksi dengan etanol 96% sebanyak 300 mL. Hasil filtrat dikumpulkan yang selanjutnya diuapkan menngunakan alat vaccum dryer sehingga didapatkan ekstrak kering (Depkes, 2011). b. Infus Sebanyak 100 g serbuk simplisia herba reundeu dimasukkan kedalam panci dan ditambah air sebanyak 1000 mL lalu dipanaskan di atas penangas air selama 15 menit terhitung saat suhu telah mencapai 90℃ dengan sesekali diaduk (maksimal sebanyak 4 kali). Infus yang diperoleh kemudian diserkai dengan kain batis selagi panas dan dilewati akuades hingga diperoleh volume yang diinginkan (Yuliani & Dienina, 2015). Hasil filtrat yang diperoleh selanjutnya diuapkan dengan alat vaccum dryer



dengan suhu 60℃ agar diperoleh ekstrak kering



(Adliah, 2017).



3.3.7 Analisis Kadar Kalium a. Pembuatan Larutan Standar Serbuk KCl Sebanyak 1,9067 g dilarutkan dengan 10 mL HCl pekat dalam labu 1000 mL kemudian diencerkan dengan akuades hingga 1 L, lalu dikocok hingga homogen. Kadar larutan standar yaitu 1000 ppm.



b. Pembuatan Kurva Standar Kalium Standar kalium 1000 ppm dipipet masing-masing sebanyak 0, 5, 10, 20, 30, 40 mL dimasukan ke dalam 6 buah labu ukur dengan ukuran 100 mL ditambahakn 3 mL HCl pekat kemudian larutan diencerkan dengan akuades sehingga 1000 mL, didapatkan deret standar masing-masing 0, 50, 100, 200, 300, 400 ppm, masing-masing diukur emisinya dengan panjang gelombang 770,6 nm. Lalu dibuat kurva kalibrasi antara konsentrasi dan absorban. c. Penetapan Kadar Kalium Ekstrak Daun Reundeu Sebanyak 2 g sampel ditimbang dari masing-masing ekstrak dimasukkan ke dalam labu 100 mL ditambahkan 25 mL HCl 1:3 dikocok, kemudian dipanaskan di atas penangas air sambil ditambahkan 2 tetes HNO3 pekat, kemudian larutan dimasukkan ke dalam labu 200 mL dan diencerkan dengan akuades hingga tanda batas dikocok, dipipet 0,5 mL ditambahkan 17,5 mL akuades ditambah 2 mL Na lalu dikocok hingga homogen, selanjutnya diukur dengan spketrofotometer serapan atom dengan panjang gelombang 770,6 nm.



3.3.8 Inkubasi Batu Ginjal Ekstrak kering air dan etanol masing-masing dibuat konsentrasi larutan sebesar 0,125%, 0,25%, dan 0,5% kemudian ditambahkan serbuk kalsium karbonat sebanyak 100 mg. Perendaman dilakukan selama 5 jam pada suhu 37℃ dengan pengocokan setiap 15 menit kemudian disaring dengan kertas saring, sejumlah tertentu filtrat diambil untuk pengukuran kadar. Kontrol positif digunakan batugin eliksir dan kontrol negatif digunakan akua demineralisasi dengan perlakuan yang sama seperti sampel (Effendi dan Wardatun, 2012).



3.3.9 Analisis Kadar Kalsium a. Pembuatan Kurva Standar Kalsium



Serbuk Ca sebanyak 1,9067 g dilarutkan dengan akuades sampai 1 L, kemudian larutan dikocok sampai homogen. Kadar larutan yang didapat yaitu 1000 ppm. Selanjutnya larutan standar kalsium dipipet masing-masing sebanyak 0, 5, 10, 20, 30, dan 40 mL pada 6 buah labu ukur dengan ukuran 100 mL, sehingga didapat deret standar 0, 50, 100, 200, 300, dan 400 ppm dari larutan standar 1000 ppm, lalu diencerkan sampai tanda batas dan dikocok. Masingmasing diukur emisinya pada panjang gelombang 422,7 nm, lalu dibuat kurva kalibrasi antara konsentrasi dan absorban. b. Pengukuran Kadar Kalsium Ekstrak Daun Reundeu Filtrat hasil penyaringan dari perendaman batu ginjal diambil sebanyak 2 g dimasukkan ke dalam 100 mL labu ukur lalu ditambahkan 25 mL HCl 1:3 dipanaskan di atas penangas air dengan penambahan asam nitrat ( HNO3) pekat sebanyak 2 tetes, larutan dimasukkan ke labu 200 mL dan diencerkan dengan akuades hingga tanda batas kemudian dikocok, dipipet 0,5 mL ditambahkan dengan akuades 17,5 mL dan ditambah 2 mL larutan Na lalu dikocok hingga homogen. Larutan diukur dengan spektrofotometer serapan atom dengan panjang gelombang 422,7 nm.



BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN



4.1



Hasil Determinasi Tanaman Daun Reundeu Determinasi dilakukan untuk memastikan identitas dari tanaman yang



akan digunakan, determinasi dilakukan di pusat Konservasi dan Tumbuhan Kebun Raya Bogor Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI). Hasil menunjukan bahwa bahan penelitian yang digunakan adalah tanaman reundeu yang termasuk kedalam suku Acanthaceae dengan jenis Staurogyne longata Kuntze. Hasil determinasi dapat dilihat pada Lampiran 2.



4.2



Hasil Simplisia Serbuk Daun Reundeu Proses pembuatan simplisia diawali dengan pengambilan bahan baku.



Bahan simplisia diperoleh dari daerah Kabupaten Sukabumi Jawa Barat. Sebanyak 8,1 Kg simplisia segar yang telah disortasi basah dikumpulkan kemudian dicuci bersih dengan air mengalir untuk menghilangkan pengotor, setelah itu dikeringkan dengan cara dikering anginkan, proses ini bertujuan untuk mengurangi kadar air agar tidak ditumbuhi jamur sehingga simplisia akan lebih tahan lama. Setelah itu dilakukan sortasi kering tujuannya untuk memisahkan benda asing dan pengotor yang terdapat dalam simplisia (Krisyanella, 2011). Selanjutnya dilakukan penggilingan untuk memperkecil ukuran partikel kemudian diayak dengan mesh 40, tujuannya agar partikel simplisia lebih seragam sehingga proses ekstraksi akan lebih efektif dan efisien. Hasil dapat dilihat pada Gambar 2.



14



Gambar 2 Serbuk simplisia daun reundeu Sumber: Pribadi, 2020 Hasil dari proses pengeringan diperoleh simplisia serbuk dengan pemerian serbuk berwarna hijau tua, tekstur agak kasar, bau khas aromatik dan rasa pahit. sebesar 1,195 kg. Perhitungan rendemen dilakukan agar mengetahui presentase hasil jumlah bahan setelah proses pengeringan dan mengetahui tingkat keefektifan dari proses yang dilakukan (Senduk dkk, 2020). Hasil dapat dilihat pada Lampiran 3.



4.3



Hasil Ekstrak Kering Daun Reundeu Metode ekstraksi yang digunakan pada penelitian ini yaitu metode



maserasi menggunakan pelarut etanol 96%



dan metode infus menggunakan



pelarut air. Simplisia yang diekstraksi sebanyak 500 gram dalam 5000 L pelarut. Eksrak cair yang diperoleh dikeringkan dengan vaccum dryer. Hasil ekstrak kering dapat dilihat pada Gambar 3 dan Gambar 4.



Gambar 3 Ekstrak kering air daun reundeu Sumber: Pribadi, 2020



Gambar 4 Ekstrak kering etanol daun reundeu Sumber: Pribadi, 2020 Tabel 1. Hasil Rendemen, Kadar Air dan Kadar Abu Ekstrak Daun Reundeu Ekstrak



Rendemen (%)



Kadar Air (%)



Kadar Abu (%)



Air



7,7643



4,0723



3,1003



Etanol



13,7521



2,7412



2,7412



Hasil rendemen tersebut tidak jauh berbeda dengan penelitian Mariani (2014) yang menyatakan bahwa rendemen ekstrak daun reundeu adalah sebesar 6,872%. Hasil menunjukkan bahwa metode infus menghasilkan rendemen lebih tinggi dibandingkan metode maserasi. Menurut Nurhasnawati (2017) menyatakan bahwa dengan adanya suhu tinggi gerakan molekul semakin cepat dan adanya sirkulasi pelarut serta meningkatnya perusakan sel dengan demikian kontak pelarut dan zat terlarut akan lebih sering sehingga ekstrak yang dihasilkan dengan metode pemanasan akan lebih maksimal. Hasil perhitungan dapat dilihat pada Lampiran 3. Penetapan kadar air ekstrak perlu dilakukan untuk memberikan batasan maksimal kandungan air di dalam ekstrak, karena jumlah air yang tinggi dapat menjadi media tumbuhnya bakteri dan jamur yang dapat merusak senyawa dan kualitas ekstrak (Anggraeni, 2019). Hasil kadar air tersebut sesuai dengan persyaratan Depkes (2013) yaitu tidak lebih dari 10%. Penelitian Mariani (2014) memperoleh hasil kadar air sebesar 10% perbedaan hasil tersebut karena ekstrak yang digunakan berupa ekstrak kental. Hasil dapat dilihat pada Lampiran 4.



Penetapan kadar abu dilakukan bertujuan untuk mendapatkan gambaran umum terkait kandungan mineral internal dan eksternal yang terdapat dalam ekstrak (Depkes RI, 2000) Hasil kadar abu yang diperoleh memenuhi syarat secara umum yaitu tidak lebih dari 10% (Depkes RI, 2011). Sedangkan penelitian Mariani (2014) yaitu sebesar 14,80% perbedaan tersebut dikarenakan ekstrak yang digunakan pada penelitian tersebut ekstrak kental. Hasil dapat dilihat pada Lampiran 5.



4.4



Hasil uji Fitokimia Ekstrak kering daun reundeu Uji fitokimia dilakukan untuk memberi gambaran senyawa metabolit



sekunder yang tekandung dalam ekstrak yang digunakan. Pengujian dilakukan terhadap ekstrak kering daun reundeu untuk mengetahui senyawa yang terkendung yaitu flavonoid, saponin, seteroid, dan tanin. Hasil uji fitokimia dapat dilihat pada Tabel 2 Tabel 2. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Kering Daun Reundeu Parameter



Ekstrak Air



Ekstrak Etanol



Mg



Merah lembayung



+



+



Zn



Merah lembayung



+



+



2



Saponin



Terbentuk busa



+



+



3



Steroid



Cincin biru kehijauan



-



-



4



Terpenoid



cincin cokelat/violet



+



+



5



Tanin Fecl 3 1%



Hijau violet



+



+



Gelatin



Endapan putih



+



+



No



Identifikasi



1



Flavonoid



Keterangan: (+): Mengandung senyawa fitokimia, (-): Tidak mengandung senyawa fitokimia



Berdasarkan penelitian Mariani (2014) menyatakan bahwa ekstrak daun reundeu mengandung senyawa flavonoid, saponin, steroid dan tanin. Hasil uji fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak kering air dan etanol daun reundeu mengandung senyawa flavonoid, saponin, steroid dan tanin maka hasil tersebut sesuai dengan penelitian sebelumnya.



4.5



Hasil Analisis Kadar Kalium Ekstrak Kering Daun Reundeu Kadar kalium dalam ekstrak kering air dan etanol daun reundeu diketahui



dengan mengukur kadarnya menggunakan spektrofotometer serapan atom. Hasil dapat dilihat pada Tabel 3. Tabel 3. Hasil Kadar Kalium Ekstrak Kering Daun Reundeu Ekstrak Air Etanol



1 0,63 0,78



Kadar Kalium (%) 2 0,53 0,76



Rata-rata 0,58 0,77



Berdasarkan hasil analisis diperoleh bahwa ekstrak air dan etanol mengandung kalium. Kalium adalah salah satu faktor yang berperan dalam melarutkan kalsium karena kalium dapat menjaga kesimbangan elektrolit pada ginjal dan memecah kalsium dengan cara mengikat kalsium sehingga menjadi garam yang mudah larut dalam air sehingga dengan perlahan batu kalsium akan terbawa oleh urin. Hasil pengukuran kadar dapat dilihat pada Lampiran 6



4.6



Hasil analisis kadar kalsium ekstrak kering daun reundeu Penelitian ini dilakukan bertujuan untuk mengetahui kadar kalsium yang



larut dalam ekstrak kering daun reundeu dengan konsentrasi yang berbeda. Konsentrasi ekstrak air dan etanol dibuat menjadi 0,125%, 0,25%, dan 0,5% variasi tersebut dibuat untuk mendapatkan konsentrasi yang optimal. Batugin elixir yang beredar di pasaran digunakan sebagai kontrol positif dan akuades



digunakan sebagai kontrol negatif untuk melihat kemugkinan larutnya kalsium karena perlakuan selama perendaman dan pengocokkan. Proses inkubasi dilakukkan pada suhu 37℃ selama 5 jam kemudian dihomogenkan dengan cara dikocok setiap 10 menit, perlakuan tersebut dimaksudkan agar kondisi percobaan dapat dibuat sama dengan kondisi di dalam tubuh. Alasan suhu inkubasi 37℃ dikarenakan umumnya manusia memiliki suhu tubuh 37℃. Waktu inkubasi yang optimal adalah 5 jam sehingga digunakan waku 5 jam untuk proses inkubasi. Adapun maksud dari proses pengocokan setiap 10 menit adalah untuk mendapatkan hasil yang optimal seperti yang terjadi di dalam tubuh saat batu ginjal mengalami pergerakkan. Batu ginjal dalam tubuh mengalami pergerakan karena adanya aliran urin dan pegerakan dari aktivitas tubuh manusia (Effendi dan Wardatun, 2012). Sebelum dilakukan pengukuran kadar, sampel terlebih dahulu didestruksi untuk menghilangkan senyawa-senyawa organik yang terkandung dalam larutan dengan penambahan asam klorida dan asam nitrat (1:3). Hal tersebut bertujuan untuk membantu mengoksidasi sema karbon dan sisa asam dihilangkan dengan cara dipanaskan di atas penangas air (Zulkifli dan Usman, 2016). Pemilihan spektrofotometer serapan atom sebagai alat ukur karena mampu mengukur kadar logam dengan ketepatan tinggi dan batas deteksi yang rendah sehingga dapat mengukur logam dengan konsentrasi rendah (Kristianingsih, 2015). Hasil data dapat dilihat pada Tabel 4 Tabel 4. Hasil Kadar Kalsium Terlarut Dalam Ekstrak Kering Daun Reundeu Konsentrasi 0,125% 0,25% 0,5% 100 mL 100 mL



Air 0,74 0,68 1,63 -



Rata-rata kelarutan Kalsium (%) Kontrol Kontrol Etanol positif positif 0,675 5,45 7,3 2,65 0,70



Kadar Kalsium



8.00% 7.00% 6.00% 5.00% 4.00% 3.00% 2.00% 1.00% 0.00%



7.30% Ekstrak Kering Air Daun Reundeu



5.45%



1.63% 0.74% 0.68% 0.13%



0.68% 0.25%



Ekstrak Kering Etanol Daun Reundeu



0.50%



Konsentrasi



Gambar 5. Histogram rata-rata kelarutan kalsium dalam ekstrak kering air daun reundeu dan ekstrak kering etanol daun reundeu Berdasarkan tabel dan histogram di atas menunjukkan bahwa semakin besar konsentrasi ekstrak kering daun reundeu yang digunakan dalam perendaman maka semakin tinggi potensinya dalam melarutkan kalsium. Hasil kelarutan kalsium dalam ekstrak air daun reundeu yang paling optimal yaitu sebesar 1,63% pada konsentrasi 0,5%, dan kadar kalsium ekstrak kering etanol daun rundeu yang paling optimal yaitu sebesar 7,30% pada konsentrasi 0,5%. Hasil analisis statistik diperlukan untuk melihat perbedaan pengaruh pemberian ekstrak dengan berbagai konsentrasi, data yang diperoleh dianalisis menggunakan metode ANOVA dengan uji lanjut Duncan. Perbedaan dikatakan siginifikan jika p