Laporan Kfa Kel 1 3d Farmasi [PDF]

Citation preview

LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA FARMASI ANALISIS ANALISIS KUALITATIF SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS Laporan ini diajukan untuk memenuhi salah satu tugas mata kuliah kimia farmasi analisi 1 (KFA1)



Disusun Oleh : 31117151 : AHMAD SODIKIN 31117153 : AMALIA SALSABILA F 31117154 : ANANDA THESA 31117155: ANISA MARLIYANTI 31117156: ASTRIA KUSMAYANTI 31117198 : YUNI MELINDA FARMASI 3D



SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN STIKes BAKTI TUNAS HUSADA TASIKMALAYA



PROGRAM STUDI FARMASI 2019 A. DASAR TEORI Spektrofotometri sesuai dengan namanya adalah alat yang terdiri dari spektrofotometer dan fotometer. Spektrofotometri menghasilkan sinar dan spektrum dengan panjang gelombang dan fotometri adalah alat pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan atau diabsorbsi. Jadi spektrofotometri digunakan untuk mengukur energi secara relatif jika energi tersebut ditransmisikan, direfleksikan atau diemisikan sebagai fungsi dari panjang gelombang (Khopkar, 1990: 325) Spektroskopi UV-Vis adalah teknik analisis spektroskopi yang menggunakan sumber radiasi elektromagnetik ultraviolet dan sinar tampak dengan menggunakan instrumen spektrofotometer. Prinsip dari spektrofotometer UV-Vis adalah penyerapan sinar tampak untuk ultra violet dengan suatu molekul dapat menyebabkan terjadinya eksitasi molekul dari tingkat energi dasar (ground state) ketingkat energi yang paling tinggi (excited stated). Pengabsorbsian sinar ultra violet atau sinar tampak oleh suatu molekul umumnya menghasilkan eksitasi elektron bonding, akibatnya panjang absorbsi maksimum dapat dikolerasikan dengan jenis ikatan yang ada didalam molekul. (Sumar hendayana. 1994 : 155). Spektrofotometer UV-Vis dapat digunakan untuk mengukur serapan cahaya  pada daerah UV (100-200 nm) dan darah sinar tampak (200-700 nm). Prinsip dasar analisis kuantitatif adalah hukum Lambert Beer A=-logT=ε.b.C=a.b.C Keterangan : A =Absorbansi T = Transmitansi ε = Absorptivitas molar, L cm-1. mol-1 (jika konsentrasi dalam satuan mol/Liter) a = Absorptivitas, L cm-1. gram-1 (jika konsentrasi dalam satuan gram/liter) b = Panjang sel, cm c = konsentrasi



Spektrofotometri UV-Vis bisa digunakan untuk uji kuantitatif dan kualitatif. Dalam setiap analisis kuantitatif perlu dilakukan langkah langkah utama dan baku yaitu: 1. Pembentukan warna (untuk pengukuran dengan sinar tampak) dan zat yang tidak berwarna atau warnanya kurang kuat 2. Penentuan panjang gelombang maksimum 3. Pembuatan kurva kalibrasi Komponen-komponen UV-Vis terdiri dari sumber radiasi yang stabil dan berkelanjutan (kontinyu); sistem lensa, cermin dan celah untuk membatasi, membuat  paralel dan memfokuskan berkas sinar; monokromator untuk menyeleksi sinar menjadi lamda tertentu (sinar monokromatis); kontainer atau tempat sampel yang transparan biasa disebut dengan sel atau kuvet; detektor yang dirangkaikan dengan readout atau piranti baca untuk menangkap sinyal dari sinar yang masuk sesuai dengan intensitas cahayanya dan ditampilkan pada layar readout



Komponen-komponen peralatan spektrofotometer UV-Vis dijelaskan secara garis besar sebagai berikut: 1. Sumber Cahaya Sebagai sumber radiasi UV digunakan lampu Hidrogen (H) atau lampu Deutirium (D). Sedangkan sumber radiasi tampak yang juga menghasilkan sinar Infra Merah (IR) dekat menggunakan lampu filament tungsten yang dapat menghasilkan tenaga radiasi 350-3500 nm 2. Monokromator Radiasi yang diperoleh dari berbagai sumber radiasi adalah sinar polikromatis (banyak panjang gelombang). Monokromator berfungsi untuk mengurai



sinar tersebut menjadi monokromatis sesuai yang diinginkan. Monokromator terbuat dari bahan optic yang berbentuk prisma. 3. Tempat Sampel Dalam bahasa sehari-hari tempat sampel (sel penyerap) dikenal dengan istilah kuvet. Kuvet ada yang berbentuk tabung (silinder) tapi ada juga yang  berbentuk kotak. Syarat bahan yang dapat dijadikan kuvet adalah tidak menyerap sinar yang dilewatkan sebagai sumber radiasi dan tidak bereaksi dengan sampel dan pelarut. 4. Detektor Detektor berfungsi untuk mengubah tenaga radiasi menjadi arus listrik atau peubah panas lainnya dan biasanya terintegrasi dengan pencatat (printer). Tenaga cahaya yang diubah menjadi tenaga listrik akan mencatat secara kuantitatif tenaga cahaya tersebut. (Sitorus, 2009). Kelebihan spektrofotometri dibandingkan fotometer adalah panjang gelombang dan sinar putih dapat terseleksi dan ini diperoleh dengan alat pengurai seperti prisma, glatung, ataupun celah optis. Pada spektrofotometri panjang gelombang yang benar-benar terseleksi dapat diperoleh dengan bantuan alat pengurai cahaya seperti prisma suatu spektrofotometer tersususn dari sumber spektrum tampak yang kontinyu. Monokromator sel pengabsorbsian untuk mengukur perbedaan absorpsi antara sampel dan blanko ataupun pembanding (Khopkar, 1990: 225  226). Spektrofotometri ultravoilet dan cahaya tampak berguna pada penentuan struktur molekul organik dan pada analisa kuantitatif. Spektrum elektron suatu molekul adalah hasil transmisi antara dua tingkat energi elektron pada molekul tersebut (Creswell, 2005: 26). Spektroskopi UV-VIS adalah tekhnik analisis spektroskopi yang menggunakan sumber radiasi elektromagnetik dan sinar tampak dengan mengunakan instrumen. Spektrofotometri adalah penyerapan sinar tampak untuk ultraviolet dengan suatu molekul yang dapat menyebabkan eksitasi molekul dan tingkat dasar ke tingkat energi yang paling tinggi (Sumar, 1994:135). Panjang gelombang cahaya UV-VIS dan sinar tampak jauh lebih pendek dari  pada panjang gelombang radiaatsi inframerah. Satuan yang digunakan untuk menentukan panjang gelombang ini adalah monokromator (1 nm = 10 -7cm). Spektrum tampak sekitar 400 nm (ungu) sampai 750 nm (merah) sedangkan spektrum UV adalah 100  –  400 nm (Day and Underwood, 2002:788).



Radiasi ultraviolet maupun radiasi cahaya tampak berenergi lebih tinggi dripada radiai inframerah absorbsi cahaya UV atau visibel mengakibatkan transmisi elektromagnetik yaitu promosi elektron-elektron dan orbital keadaan dasar yang  berenergi rendah ke orbital keadaan terdesitasi berenergi lebih tinggi transisi ini memerlukan 40 –  300 kkal/mol. Energi yang terserap selanjutnya terbuang sebagai cahaya atau tersalurkan melalui reaksi kimia misalnya isomerisasi atau reaksi –  reaksi radiasi lain (Day and Underwood, 2002: 189) B. ALAT DAN BAHAN Alat NO



Alat



1.



Spektrofotometer



2.



Micro pipet



3.



Vial



4.



Tip kuning dan biru



Gambar



5.



Labu ukur



6.



Sentrifugator



7.



Neraca digital



8.



Pipet tetes



9.



Gelas ukur



10.



Kuvet



11.



Gelas kimia



Bahan : 1. 2. 3. 4. 5.



Sampel Aquadest Etanol Metanol p.a NaOH



C. Prosedur 1. Uji organoleptic



sampel bentuk



warna



rasa



bau



2. Isolasi



sampel Larutkan, sentrifugasi



air



metanol



etanol



Lakukan pengenceran



Spektrofotomete



NaOH



D. HASIL PENGAMATAN



292 1,679



AMOXILIN CAFFEIN CLORAMPE IBUPROFE INH LUMINAL METPRED PCT VITB12 VITB6 VITC MET3DK1 MET3DK1 MET3DK1



361 0,341



276 0,841



261 1,076



0,6



292 0,091



0,9



278 0,172



1,2



248 1,7



243 1,635 243 0,741



217 1,179



1,5



213 0,466



Absorbance



1,8



207 1,095 209 1,372



2,4



248 0,938



226 1,662 228 2,043 230 2,028



2,7



2,1



261 2,405



NO SAMPEL : 48 DUGAAN : METHYPREDNISOLON



0,3 0 -0,3 200



220



240



260



280



300



320



340



360



380



400



W avelength [nm]



Gambar kurva



1.



2 METPRED AIR3DK1



1,8



Abs



Pelarut



248 1,7



No



Air



pelarut 244 0,197



metpred 248 1,7



Metanol



243 0,741



248 1,7



Etanol



247 0,454



248 1,7



NaOH



260 0,039



248 1,7



λ



1,6



Absorbance



1,4 1,2 1



244 0,197



0,8 0,6 0,4 0,2 0 200



220



240



260



280



300



320



340



360



380



400



2.



248 1,7



Wavelength [nm]



2 METPRED MET3DK1



1,8 1,6



1,2



243 0,741



Absorbance



1,4



1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 200



220



240



260



280



300



320



340



360



380



400



3.



248 1,7



Wavelength [nm]



2 METPRED ETOH3DK1



1,8 1,6



1,2 1



247 0,454



210 0,637



Absorbance



1,4



0,8 0,6 0,4 0,2 0 200



220



240



260



280



300



320



340



360



380



400



4.



248 1,7



Wavelength [nm]



2 1,8



METPRED NAOH3DK1



1,6 1,4



1 0,8



0,2 0 -0,2 200



220



240



260



280



300 Wavelength [nm]



320



340



360



380



400



712 0,003



641 0,005



572 0,006



542 0,007



481 0,008



358 0,016



307 0,021



0,4



419 0,016



0,6 260 0,039



Absorbance



1,2



E. PEMBAHASAN Praktikum kali ini membahas tentang pengenalan instrument spektrofotometri UVVis, kalibrasi dan pengukuran panjang gelombang maksimum. Tujuan dari percobaan ini adalah untuk memahami prinsip kerja alat spektrofotometri UV-Visible, mengetahui cara mengkalibrasi alat spektrofotometer UV-Visible, dan mengetahui cara menentukan nilai λ maks (panjang gelombang



maksimum)



sebagai



parameter



penting



dalam



analisa



spektrofotometri UV-Vis. Prinsip kerja spektrofotometer adalah menggunakan instrumen obat atau molekul dengan radiasi elektromagnetik, yang energinya sesuai. Interaksi tersebut akan meningkatkan energi potensi elektron pada tingkat aksitan. Apabila pada molekul yang sederhana tadi hanya terjadi transisi elektronik pada suatu macam gugus maka akan terjadi suatu absorbsi yang merupakan garis spektrum. Spektrofotometri merupakan salah satu metode dalam kimia analisis yang digunakan untuk menentukan komposisi suatu sampel baik secara kuantitatif dan kualitatif yang didasarkan pada interaksi antara materi dengan cahaya. Cahaya yang dimaksud dapat berupa cahaya visibel, UV dan inframerah, sedangkan materi dapat berupa atom dan molekul namun yang lebih berperan adalah elektron valensi. Cara



kerja



darispektrofoto



sumber cahaya polikromatis masuk ke dalam monokromator (terjadi



meterpertama penyebaran



cahaya)



dari monokromator kemudian keluar menuju ke sel sampel, pada sel sampel ini terjadi proses penyerapan cahaya oleh zat yang ada dalam sel sampel (dimana cahaya yang masuk lebih terang dibandingkan cahaya setelah keluar). Selanjutnya cahaya ditangkap oleh detektor dan mengubahnya menjadi arus listrik.Pada prosedur pertama identifikasi sediaan secara organoleptik didapatkan hasil bentuk padat berupa serbuk hablur , warna merah muda, rasa pahit tidak berbau setelah uji organoleptik sampel diduga adalah methylprednisolone, vitamin B12, Vitamin B6 dan caffeine. Setelah itu sampel ditimbang sebanyak 0,25g kemudian dilakukan isolasi terhadap pelarut air, etanol, methanol, larutan asam dan basa dalam tabung sentifugasi, lakukan vortek kurang lebih 30 detik, sentifugasi pada 3000 rpm selama 15 menit bertujuan untuk memisahkan dari matriks dan memperluas permukaan molekul analit agar mudah teidentifikasi. Setelah terisolasi kemudian lakukan pengenceran di berbagai rpm kemudian add 10 ml dan lakukan spektrofotometri pada panjang gelombang 200-800 nm amati puncak



panjang gelombang yang dihasilkan. Lakukan terhadap sampel standar murni untuk pembanding penentuan panjang gelombang. Diperoleh hasil panjang gelombang pada pengujian sampel dengan pelarut air dan etanol terdapat puncak pada panjang gelombang yang mendekati sampel standar yaitu methylprednisolone dan caffein. Berikut hasil kromatogram : 1.1



2,4



2



2



kromatogram pelarut air



1,6



1,2



1,4 1,2



0,4 0,2



0,6



0



0,4



247 0,454



1 0,8



-0,2 200



210 0,637



Absorbance



1



0,6



METPRED ETOH3DK1



1,8



1,4



0,2



220



240



260



280



300



0 200



220



240



320



Wavelength [nm]



260



280



300



340 320



360 340



380 360



380



400 400



Wavelength [nm]



2,6 2,4 CAFFEIN AIR3DK~1



2,2 2



243 1,635



242 2,065



1.2 Hasil kromatogram caffein pada pelarut air



1,8 1,6 Absorbance



Absorbance



1,6



0,8



248 1,7



1,8



Hasil



AMOXILIN CAFFEIN IBUPROFE INH METPRED PCT VITB12 VITB6 VITC AIR3DK1



2,2



1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 200



220



240



260



280



300 W avelength [nm]



320



340



360



380



400



1.3 Hasil kromatogram methylprednisolone pelarut



248 1,7



air



2 1,8



METPRED AIR3DK1



1,6



Absorbance



1,4 1,2 1



244 0,197



0,8 0,6 0,4 0,2 0 200



1.4



220



240



260



280



300



320



Wavelength [nm]



340



360



380



400



Hasil kromatogram methylprednisolon



pelarut etanol



Berdasarkan hasil pengamatan pertama terdapat puncak kromatogram pada pelarut air dan methanol menunjukan panjang gelombang uji yang sama yaitu 243 nm dan diduga adalah cafein sedangkan panjang gelombang secara literaturnya adalah 272 nm sedangkan pada pengamatan kedua yaitu terdapat kromatogram pada pelarut air dan etanol yaitu menunjukan panjang gelombang uji 210 – 248 nm yang diduga adalah methylprednisolon dan untuk panjang gelombang literaturnya 243 -246. Pada pengujian spektrofotometri ini terdapat perbedaan panjang gelombang yang diberikan sampel di setiap jenis pelarut yang digunakan, pada sampel ini membuktikan bahwa memberikan panjang gelombang maksimum terdapat pada pelarut etanol dan air saja, tidak pada pelarut metanol asam dan basa. Maka dapat disimpulkan bahwa sampel no 48 adalah methylprednisolone. Methylprednisolon merupan obat golongan kortikosteroid berupa serbuk hablur putih tidak berbbau praktis tidak larut dalam air, agak sukar larut dalam etanol.



1.5 Struktur Methlyprednisolon



Pada komponen spektofotometer terdapat monokromator yang diperoleh dari berbagai sumber radiasi adalah sinar polikromatis, mookromator berfungsi untuk mengurai sinar menjadi monokromatis, monokromator terbuat dari bahan optik yang berbentuk prisma kemudian sampel dalam kuvet akan tereksitasi melalui gugus kromofor atau ausokrom Mengapa gugus kromofor karena gugus kromofor (chromophore) adalah bagian dari pigmen yang paling sensitive terhadap rangsangan cahaya. Kromofor berfungsi sebagai antena, alat penangkap gelombang elektro magnetik pada panjang gelombang tertentu dengan adanya ikatan REM ( Radiasi Elektomagnetik) dengan analit seehingga energy yang diserap akan sama dengan energy yang dilepaskan setelah itu detector akan merubahnya menjadi arus listrik.



F. Kesimpulan Dapat disimpulkan bahwa pada sampel nomer 48 adalah Metyhl Prednisolon G. DAFTAR PUSTAKA Cresswell, Clifford.J. 2005. Analisis Spektrum Senyawa Organik. Bandung: ITB. Dirjen POM. 1979.  Farmakope Edisi III . Jakarta: Depkes RI. Gandjar, I.G. & A. Rohman. 2007.  Kimia Farmasi AnalisisYogyakarta: PustakaPelajar.



Ghalib, Ibnu Ganjar Dan Abdul Rahman. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Belajar. Khopkar, S. M. 1990. Konsep Dasar Kimia Analitik . Jakarta: UI Press.  Nurlaeli, Novie. 2013. R.A.Day, Dr Jan Dan Al - Underwood. 2002. Analitik Kimia Kuantitatif. Jakarta:Erlangga. Setiarso,



Pirim



dkk.



2016.



Petunjuk



Praktikum



Kimia



Analitik



III..Surabaya:Unesa Press. Sitorus,



M.



2009.



Spektroskopi



Elusidasi



Struktur



Molekul



Organik



Edisi



Pertama.Yogyakarta: Graha Ilmu. Sumar, Hendayana. 1994. Kimia Analisis Farmasi. Jakarta: UI Press. Cairns, D. 2009. Intisari Kimia Farmasi Edisi Kedua. Buku Kedokteran EGC. DN. Jakarta. Gandajar, I. B. dan Rohman, A. 2007. Kimia Analisis Kuantitatif. Erlangga, Jakarta EE. Triyati, E. 1985. Spektrofotometer Ultra-Violet dan Sinar Tampak Serta Aplikasinya dalam Osenologi, Jurnal Oseanografi. Jakarta