Xpert Hiv-1 Viral Load [PDF]

Citation preview

Xpert Assay: - Xpert® HIV1-VL



Pokok Bahasan



HIV



XPERT ASSAY : XPERT HIV-1 VL



INTERPRETASI HASIL TES



HIV



Mekanisme Infeksi HIV



Xpert® HIV1-VL



Penggunaan Xpert HIV1-VL merupakan IVD test yang menggunakan metode Reverse Transcriptase PCR (RT-PCR) untuk mengkuantifikasi jumlah HIV tipe 1 (HIV1) dari pasien yang telah terinfeksi HIV-1. Xpert HIV-1 VL digunakan sebagai penunjang untuk prognosis dan sebagai alat bantu untuk monitoring respon pasien terhadap pengobatan ART yang ditandai dengan perubahan pada nilai RNA HIV-1. • Spesimen: Plasma yang menggunakan EDTA (PPT) atau tabung ACD • Deteksi HIV-1 Grup M, N, dan O



Sampel •



Tabung yang dapat digunakan: •



Tabung ACD



• Tabung EDTA atau EDTA-PPT • Plasma harus dipisahkan dari whole blood. • Minimum 1 mL plasma yang diperlukan untuk tes HIV-1 VL Assay. Jika menggunakan transfer pipet yang sudah include di dalam kit, minimum 1.2 mL plasma yang diperlukan.



Sampel Stabilitas Sampel Temperatur



Whole Blood



Plasma



15-30ºC



8 jam



24 jam



2-8ºC



72 jam



6 hari



≤-18ºC or ≤-70ºC



__



6 minggu



• Plasma stabil hingga 3 kali siklus beku-cair (Freeze-thaw cycle)



Sistem & Reagen yang diperlukan GeneXpert Systems • GeneXpert DX Software V4.6a or higher



Test Kits (CE-IVD) • GXHIV-VL-CE-10



Koleksi Sampel • Whole blood yang dikoleksi dengan tabung EDTA, EDTA-PPT, ACD



Material yang diperlukan • • • •



Vortex mixer Centrifuge Bleach 70% ethanol



Xpert HIV-1 VL Kit Xpert HIV-1 Viral Load Assay Catalogue Number



GXHIV-VL-CE-10



Tests Per Kit



10



Cartridge Contents



Reagent beads Liquid Reagent Assay Definition File (ADF)



Kit CD



Assay Import Instructions



Package Insert (PDF) Transfer Pipettes



10 (1mL)



Storage



2- 28 °C



Internal Quantitative Standards (IQS) Assay



HIV



•



IQS



Low Level



High Level



Point of Addition



Armored RNA



103 copies/bead (1,000 copies/mL)



106 copies/bead (1,000,000 copies/mL)



Lysis



Armored RNAs® yang non-spesifik terhadap HIV, dan dalam bentuk dry bead.



•



Dikalibrasi terhadap WHO 3rd International Standard.



•



Mendeteksi specimen-associated inhibition pada reaksi RT-PCR.



•



Non-analyte untuk menghindari kompetisi



•



IQS-H dan IQS-L pass jika memenuhi kriteria validasi yang diterima.



Penyimpanan & Penanganan Reagen •



Simpan test kits pada suhu 2-28ºC. Jangan menggunakan cartridge yang expired.



•



Satu cartridge digunakan untuk memproses satu pemeriksaan.



•



Jangan membuka cartridge hingga siap untuk digunakan.



•



Hindari kontaminasi silang selama proses penanganan sampel.



• Jangan menggunakan cartridge yang telah jatuh setelah sampel dimasukkan. Hal ini dapat memicu hasil invalid. • Jangan menggunakan cartridge yang telah rusak bagian ekornya (PCR tube).



Limitasi Xpert Assay HIV-1 VL • Tidak diperuntukkan sebagai donor screening test. • Performa reagen yang divalidasi yaitu menggunakan plasma yang diperlakukan sebagaimana yang tertera pada package insert. • Kesalahan dalam melakukan prosedur dapat menyebabkan hasil error atau invalid.



• Inhibitor yang terdapat pada sampel dapat menyebabkan hasil invalid.



Langkah Mempersiapkan Spesimen



Interpretasi Hasil Tes HIV1-VL



Algoritma Deteksi Pada Cartridge



HIV-1 Terdeteksi & Terkuantifikasi HIV-1 DETECTED XX



copies/mL* • HIV-1 RNA memiliki nilai



kuantitatif dalam rentang pengukuran analitis.



• IQS-H dan IQS-L—PASS. • Probe Check—PASS; semua hasil probe check pass. •



Software dapat mengkonversi hasil dari copies/ ml menjadi IU/ml. Silakan lihat Manual GeneXpert DX Sistem Operator atau Manual GeneXpert Infinity Sistem Operator untuk petunjuk tentang cara mengubah pengaturan ini . Faktor konversi untuk HIV-1 VL Assay adalah 1 copy - 1,72 IU.



HIV-1 Terdeteksi & Terkuantifikasi HIV-1 DETECTED