Jaoac1702-1 en Id [PDF]

Citation preview

Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.com



1702KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 2005



PANGAN PENCEMAR BIOLOGIS



Perbandingan Metode Compact Dry TC dengan Standar Metode Tuang Piring (Metode Resmi AOAC 966.23) untuk Menentukan Jumlah Koloni Aerobik dalam Sampel Makanan Metode Teruji KinerjaSM 2 Peserta



Abstrak



disterilisasi dan mengandung media kultur dan zat pembentuk gel yang larut dalam dingin. Media direhidrasi dengan menginokulasi 1 mL sampel yang diencerkan ke tengah media yang dapat menyebar sendiri dan membiarkan larutan berdifusi melalui aksi kapiler. Piring



METODEAPENULIS: HIDEMASAKODAKA, SHINGOMIZUOCHI, HAJIMETERAMURA, dan TADANOBUNIRAZUKA Nissui Pharmaceutical Co. Ltd., 1075-2, Hokunanmoro, Yuki, Ibaraki 307-0036, Jepang



kemudian dapat diinkubasi dan koloni dihitung tanpa langkah



SPENGIRIMANLABORATORIUM:



tambahan. Metode Compact Dry TC divalidasi dengan 5 daging



Nissui Pharmaceutical Co., Ltd., 3-23-9, Ueno, Taito-ku, Tokyo 110-8736, Jepang



mentah yang berbeda. Tes kinerja dilakukan pada 35- dan 30-C. Dalam semua studi kinerja yang diperlukan, tidak ada perbedaan nyata yang diamati antara metode Compact Dry TC dan metode



SayaTERGANTUNGLABORATORIUM:



Pelat Tuang Standar (Metode Resmi AOAC966.23) untuk deteksi



Layanan Kesehatan Masyarakat Nasional untuk Wales, Laboratorium



tingkat mikroorganisme aerobik. Untuk klaim akurasi (n=60), sebuah



Kesehatan Masyarakat, Rumah Sakit Llandough, Penlan Rd, Penarth, Inggris



korelasi



Raya



faktor dari r2



= 0,9977 (35-C) dan r2



35



= 0,9932 (30-C) bisa jadi



30



ditugaskan, sebagaimana tercantum dalam aplikasi untuk “Metode Uji Kinerja. Studi konsistensi kualitas dan ketahanan penyimpanan, menunjukkan tidak



SM



ada variasi yang signifikan dalam hasil jumlah pelat dengan lot produksi yang berbeda atau pelat dengan usia penyimpanan yang beragam.



1 Lingkup



Pelat penghitung prefabrikasi untuk indikasi jumlah sel mikroba aerobik dalam bahan baku makanan, produk, dan matriks terkait.



1.1 Organisme Sasaran



3 Pendahuluan



3.1 Prinsip Metode pengujian adalah unit jumlah piring yang memfasilitasi penentuan cepat beban bakteri aerobik dalam daging mentah.



3.2 Informasi Umum Estimasi jumlah bakteri aerobik total (unit pembentuk koloni; CFU) adalah praktik yang digunakan secara luas untuk mengukur kesegaran dan status higienis makanan dan produk terkait serta lingkungan produksi, yang diatur dalam beberapa undang-undang pangan nasional.



Sel mikroba aerobik.



Makanan segar secara alami mengandung mikroorganisme yang



1.2 Matriks



diperlakukan dengan pengawet. Selama penyimpanan, sel bakteri dapat



Daging mentah.



1.3 Ringkasan Klaim Kinerja yang Divalidasi Dalam semua studi kinerja yang diperlukan, tidak ada perbedaan nyata yang diamati antara metode Compact Dry TC dan metode Pelat Tuang Standar (Metode Resmi AOAC966.23) untuk deteksi tingkat mikroorganisme aerobik.



berbeda kecuali produk tersebut disterilkan, dipasteurisasi, atau membelah dan meningkatkan jumlah sel yang layak dalam makanan. Penting untuk menentukan jumlah muatan sel maksimum tertentu untuk makanan, pakan, bahan mentah, dan lingkungan produksi, yang dapat dipantau dengan metode penghitungan pelat spektrum luas. Kami telah mengembangkan Compact Dry TC yang memenuhi syarat sebagai kit metode cepat untuk menentukan jumlah koloni aerobik dalam makanan. Meskipun ada kit metode cepat lainnya di pasaran, mereka menderita berbagai kerugian. Oleh karena itu, pemikiran awal telah dimasukkan ke dalam desain Compact Dry TC untuk mengatasi kelemahan kit komersial yang ada.



Pelat disterilisasi dan mengandung media kultur dan zat Diterima 7 April 2005. Diterima oleh AH 17 Mei 2005. Email penulis yang sesuai: [email protected].



pembentuk gel yang larut dalam dingin. Media direhidrasi dengan menginokulasi 1 mL sampel encer yang diinokulasikan ke tengah media yang dapat menyebar sendiri dan membiarkan larutan berdifusi melalui aksi kapiler. Pelat kemudian dapat diinkubasi dan



Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022



Compact Dry TC memenuhi syarat sebagai kit metode cepat untuk menentukan jumlah koloni aerobik dalam makanan. Pelat



KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 20051703 koloni dihitung tanpa langkah tambahan. Piring dapat ditumpuk, ramping, dan lebih kecil dari cawan Petri standar. Sifat media yang kering dan steril memberikan umur simpan yang lama untuk pelat. Pelat media Compact Dry TC diklaim sebagai alat analisis untuk menunjukkan CFU dari berbagai daging mentah. Oleh karena itu, metode tersebut divalidasi dengan 5 daging mentah yang berbeda.



3.3 Ringkasan Hasil



(4.1.4)Reagen satu.—Pelat Compact Dry TC adalah a media nonselektif yang terdiri dari nutrisi kompleks seperti ekstrak ragi, pepton, dan glukosa, dan buffer fosfat dan dilengkapi dengan magnesium klorida. Medium dilengkapi dengan indikator redoks 2,3,5-trifenil-tetrazolium-klorida (TTC). Media dipadatkan oleh polisakarida alga dan dikeringkan dalam struktur jaring.



4.2 Perlengkapan dan Reagen Tambahan



Laporan ini menjelaskan pengujian ulang Compact Dry TC menurut



(4.2.1)Penyangga pengenceran.—Karena maksimal



protokol AOAC Research Institute (RI) pada tanggal 6 Agustus 2003,



250 koloni dapat diselesaikan dan dihitung pada satu piring



untuk matriks daging mentah yang tereduksi. Sebagian besar laporan



Compact Dry TC dan beberapa matriks makanan dapat menampung hingga 108CFU/g, (desimal-) pengenceran bahan



valid.



sampel diperlukan.



Pelat media Compact Dry TC diklaim sebagai alat analisis untuk menunjukkan CFU dari berbagai daging mentah. Oleh karena itu, metode tersebut divalidasi dengan 5 daging mentah yang berbeda. Untuk Compact Dry TC, dan metode standar, 35-C adalah suhu yang direkomendasikan, sedangkan 30-C adalah suhu yang lebih umum digunakan untuk pengujian jumlah total di Komunitas Eropa (1). Tes kinerja dilakukan pada 35-C serta 30-C.



Untuk tujuan ini, buffer pengenceran steril seperti larutan Butterfield, phosphate-buffered saline (PBS), air pepton, atau larutan Ringer dapat diterapkan. Rak yang telah disterilkan yang diisi dengan buffer pengenceran dan pembuka khusus juga dapat dibeli di pemasok Compact Dry TC: Dilution Rack, Cat. No. Nissui, 01550; HyServe, 1 000 888; Pembuka, Kucing. No. Nissui, 06737; HyServe, 1 000 887.



Dalam semua studi kinerja yang diperlukan, tidak ada perbedaan nyata yang diamati antara metode Compact Dry TC dan metode Pelat Tuang Standar (Metode Resmi AOAC966.23) untuk deteksi tingkat mikroorganisme aerobik. Untuk klaim akurasi, korelasi dari 2 metode enumerasi diselidiki. Untuk semua yang dikumpulkan



pakan, dll.) lingkungan produksi, sistem swab steril dapat



contoh data (n=60), faktor korelasi r2 (35-C) dan r2



= 0,9977



35



= 0,9932 (30-C) dapat ditetapkan, seperti yang dinyatakan dalam



30



aplikasi untuk "Metode Uji Kinerja"SM.” Konsistensi kualitas dan ketahanan penyimpanan pelat film dehidrasi ditunjukkan menggunakan matriks makanan yang diklaim. Tidak ada variasi signifikan dalam hasil jumlah pelat yang diamati dengan lot produksi yang berbeda atau pelat dengan usia penyimpanan yang berbeda (tanggal kedaluwarsa setelah 2, 12, dan 15 bulan, dan satu sudah 22 bulan melewati tanggal kedaluwarsa). Pelat Compact Dry TC dapat digunakan untuk jumlah bakteri aerob total untuk spektrum luas daging mentah, namun, karena fisiologi mikroba, parameter inkubasi optimal yang direkomendasikan dari suhu tetap dan periode 48 jam harus dijaga konstan. Volume inokulasi yang menyimpang sebesar -20% dapat ditoleransi jika hasilnya dinormalisasi menjadi 1,0 mL untuk perhitungan.



4 Bahan dan Metode



4.1 Informasi Test Kit (4.1.1)Nama perangkat.—Kompak Kering TC.



(4.1.2)Kucing. Tidak.—Nissui 06740 (40 piring), 06741 (240



piring); HyServe 1 000 166 (40 piring), 1 000 167 (240 piring), 1 002 877 (880 piring). (4.1.3)Meminta informasi.—Nissui Pharmaeutical Co., Ltd., 3-23-9, Ueno, Taito-ku, Tokyo 110-8736, Jepang, Telp: +81 (0) 3-5846-5611, Faks: +81 (0) 3-5846-5619 ; HyServe, Seeshaupter Str. 27, 82393 Iffeldorf, Jerman, Telp: + 49 (0) 8856 8020588, Faks: +49 (0) 8856 8020339.



(4.2.2)Penyeka permukaan.—Untuk menguji permukaan (makanan,



digunakan. Usap kering ditempatkan dalam wadah sekali pakai. Setelah pengambilan sampel, swab dibilas dalam PBS yang disimpan dalam perangkat dan suspensi dapat diterapkan (sudah dengan volume yang tepat) ke pelat Compact Dry TC.



Aksesori ini juga dapat dibeli di pemasok Compact Dry TC: Swab for Compact Dry TC, Cat. No. Nissui, 06738 (200 tabung); HyServe, 1 002 953 (40 tabung), 1 002 952 (240 tabung).



4.3 Aparatur Inkubator.—Satu-satunya peralatan yang diperlukan untuk metode pengujian jumlah pelat dengan Compact Dry TC adalah inkubator. Peralatan yang tersedia secara komersial yang menjaga suhu yang dapat diatur -1-C dari suhu target (30-–35-C) dapat diterapkan.



4.4 Bahan Referensi Standar Compact Dry TC diuji dengan 67 galur ATCC Grampositif dan -negatif yang berbeda dan hasilnya ditunjukkan dalam brosur produk. Produk ini memiliki spesifikasi kinerja dengan jenis berikut:Bacillus subtilis ATCC 6633; Escherichia coliATCC 8739;Klebsiella pneumoniaeATCC 13883;Pseudomonas aeruginosaATCC 9027; dan Stafilokokus aureusATCC6538. Pertumbuhan yang baik harus diamati setelah inkubasi pada 35-C selama 44-48 jam.



4.5 Solusi Standar Tidak ada.



4.6 Persiapan Umum Tidak ada.



Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022



dan data asli yang dikeluarkan pada tanggal 19 Desember 2002 adalah



1704KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 2005



4.7 Persiapan Sampel Sampel untuk inokulasi harus disiapkan mengikuti standar nasional dan internasional khusus untuk teknik pencacahan, misalnya ISO 7218: Mikrobiologi—Pedoman umum untuk pemeriksaan mikrobiologi; ISO 6887: Mikrobiologi—Panduan umum untuk persiapan pengenceran untuk pemeriksaan mikroba. Sampel yang diproses untuk uji penyaringan dan pemeriksaan lainnya harus diambil sesteril mungkin, dihancurkan dalam cairan pengenceran steril dan diencerkan dalam larutan standar seperti pengencer fosfat buffer Butterfield, PBS, air pepton, atau larutan Ringer.



Setiap media, reagen, dan bahan harus disterilkan secara kimia atau dengan autoklaf setelah digunakan, dan kemudian dibuang sebagai limbah industri sesuai dengan peraturan nasional tentang pembuangan



1,25 mL - 1 LH2HAItujuan; pengenceran autoklaf.



PBS.—NaCl, 9,0 g/L; NaHPO4, 0,0785 g/L; KH2PO4, 0,0127 g/L; pH, 6,8–7,3; autoklaf. air pepton.—Kasein pepton, 0,1%; NaCl, 0,85%; pH, 6.9–7.1; autoklaf.



6 Ringkasan Hasil Studi validasi internal dilakukan di laboratorium Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.



Solusi dering.—NaCl, 9,0 g/L; KCl, 0,42 g/L; CaCl2, 0,24 g/L; NaHCO3, 0,20 g/L; pengenceran untuk digunakan, 1:4 dengan H2HAItujuan; pengenceran autoklaf.



Prosedur persiapan sampel untuk tes ulang ini sepenuhnya mengikuti Metode Resmi AOAC966.23.



4.8 Analisis



6.1 Studi Perbandingan Studi perbandingan dilakukan sesuai dengan protokol AOAC RI pada tanggal 6 Agustus 2003, untuk 4 jenis daging mentah yang umum di Jepang: daging babi giling mentah, babi mentah, domba mentah, dan daging sapi mentah. Metode referensi adalah Metode Resmi AOAC966.23 menggunakan agar-agar metode standar dengan pelat tuang.



(4.8.1)Inokulasi pelat TC Kering Kompak.-Menghapus



(6.1.1)Metodologi.—Prosedur persiapan sampel



tutup dari pelat dan sebarkan 1 mL spesimen di tengah pelat Compact Dry TC. Cairan termasuk bakteri berdifusi secara otomatis dan merata di atas lembaran (total media 20 cm2) untuk mengubah lembaran kering menjadi gel dalam hitungan detik. diperlukan pada bagian memorandum. Tempatkan piring tertutup Kering



dengan menggunakan blender Cell Master CM-100 (AZ One Corp., Nishiku, Osaka, Jepang). Timbang 50 g sampel uji ke dalam tabung blender berkecepatan tinggi yang steril. Tambahkan 450 mL pengencer



Pasang kembali tutup pada pelat, dan catat informasi yang



dari kompak



sepenuhnya mengikuti Metode Resmi AOAC966.23. Siapkan sampel



TC



piring.—Waktu inkubasi dan suhu yang direkomendasikan adalah 48 jam; 35-C. Kondisi inkubasi lain (misalnya, 30-C) juga memungkinkan dan dapat diadopsi ke dalam peraturan analisis pangan nasional.



4.9 Interpretasi dan Laporan Hasil Tes Hitung jumlah koloni berwarna yang muncul di media dari bagian belakang piring. Kertas putih yang ditempatkan di bawah piring membantu menghitung koloni. Karena beberapa mikroorganisme mungkin tidak mereduksi TTC dan oleh karena itu mengembangkan koloni berwarna merah/merah muda, Compact Dry TC juga dapat menunjukkan koloni dalam warna lain.



Ketika jumlah koloni tinggi, akan lebih mudah untuk menggunakan kisi-kisi yang diukir di bagian belakang wadah yang terdiri dari kotak 11 cm, atau 0,5 0,5 cm. Hitung koloni satu persegi dan kalikan masing-masing dengan 20 atau 80. 5 Tindakan Pencegahan Keamanan



5.1 Tindakan Pencegahan untuk Bahaya



Ketika media atau reagen terkena mata atau mulut, segera cuci dengan banyak air, dan konsultasikan dengan a



buffer fosfat Butterfield steril, dan campurkan selama 2 menit.



Karena tingkat kontaminasi bakteri pada daging sapi mentah cukup rendah (mendekati 0 CFU/g),E. coliuntuk ATCC 11775 sebagai bakteri perwakilan dibubuhi tingkat kontaminasi bakteri sekitar 102, 104, atau 106CFU/g, dan didinginkan selama 3 hari sebelum pengujian. Untuk daging babi giling mentah, babi mentah, dan domba mentah, siapkan sampel dengan tingkat kontaminasi rendah dan tinggi. Untuk prosedur lainnya, ikuti Metode Resmi AOAC966.23dan instruksi masing-masing pada sisipan paket Compact Dry TC.



(6.1.2)Hasil.—Analisis varians satu arah (ANOVA) untuk data 3 level pada daging babi giling mentah menunjukkan hasil yang sama (P>0,05) untuk kedua metode (Tabel 1), dan r2sebagai koefisien korelasi untuk kedua metode adalah 0,9997 (Gambar 1), menunjukkan korelasi yang baik. Data ANOVA satu arah pada 3 level pada daging babi mentah menunjukkan hasil yang sama (P>0,05) untuk kedua metode (Tabel 2) dan r2 sebagai koefisien korelasi untuk kedua metode adalah 0,9973 (Gambar 2) menunjukkan korelasi yang baik. ANOVA satu arah untuk data pada 3 level pada domba mentah menunjukkan hasil yang sama (P>0,05) untuk kedua metode (Tabel 3) dan r2sebagai koefisien korelasi untuk kedua metode adalah 0,9992 (Gambar 3), menunjukkan korelasi yang baik. ANOVA satu arah untuk data pada 4 level dalam daging sapi mentah menunjukkan hasil yang sama (P> 0,05) untuk kedua metode (Tabel 4), dan r2sebagai koefisien korelasi untuk kedua metode adalah 0,9974 (Gambar 4) menunjukkan korelasi yang baik.



Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022



34,0 gram; 1,0M NaOH, kira-kira 175 mL; pH, 7,2; pengenceran untuk digunakan, stok



(4.8.2)Inkubasi



5.2 Tindakan Pencegahan untuk Pembuangan Limbah



limbah laboratorium.



Pengencer fosfat buffered Butterfield.—KH2PO4,



di inkubator.



dokter. Manipulasi dengan mikroorganisme selalu melibatkan risiko tertentu dari infeksi yang didapat di laboratorium. Manipulasi harus dilakukan di bawah pengawasan spesialis kunci bersama dengan langkah-langkah perlindungan biohazard. Setiap peralatan laboratorium dan media yang menyentuh spesimen harus dianggap menular.



KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 20051705 Tabel 1.



Perbandingan metode AOAC (babi giling mentah) Bakteri aerob TC Kering Kompak



Tingkat



Paku, CFU/g



Sekitar 102CFU/g Lot 1



0sebuah



CFU/g



Mengulangi



525



2.72



500



2.70



2



680



2.83



670



2.83



3



430



2.63



415



2.62



4



635



2.80



635



2.80



5



365



2.56



355



2.55



Berarti



527



2.71



515



2.70



sr



133



0.11



136



25.2



0sebuah



4.18



26,5



0.12 4.37



1



78000



4.89



70500



4.85



2



80000



4.90



76000



4.88



3



77000



4.89



78000



4.89



4



99000



5.00



96000



4.98



5



55000



4.74



42500



4.63



Berarti



77800



4.88



72600



4.85



sr



15600



0,09



400



20.1



RSDr, % Sekitar 106CFU/g Lot 3



catatan10CFU/g



1.87



0.13 26.7



2.72



1



6400000



6.81



5850000



6.77



2



9100000



6.96



8850000



6.95



3



9350000



6.97



9150000



6.96



4



6800000



6.83



6400000



6.81



5



9300000



6.97



8250000



6.92



Berarti



8190000



6.91



7700000



6.88



sr



1460000



0,08



1490000



RSDr, %



17.8



1.17



19.3



0,09 1.27



sebuahSampel yang terkontaminasi secara alami.



6.2 Studi Pengulangan Studi pengulangan dilakukan dengan 18 matriks makanan yang berbeda dari daftar dengan 15 kelompok jenis makanan. Sampel disiapkan dan diencerkan ke 4 tingkat yang berbeda (CFU/mL) dari



pengenceran dalam pengencer Butterfield disiapkan dan masingmasing 1 mL diterapkan ke pusat perangkat Compact Dry TC. Dua seri inkubasi dengan 10 paralel dari setiap matriks, pada 30- dan 35C, dilakukan.



bakteri asli (50%. Memeriksa sampel makanan dengan beban mikroba asli yang rendah (bubuk telur kering, cokelat susu, adonan pizza) menghasilkan nilai hitungan sekitar/di bawah 101. Karena sifat metode penghitungan pelat dalam kisaran desimal ini, persentase deviasi yang jauh lebih tinggi dimungkinkan. Untuk



jenis makanan (sosis, bubuk telur kering, jus apel, dan pewarna makanan merah (Tabel 5) Pengamatan ini konsisten dengan semua 4 lot Compact Dry TC dan piring tuang yang berbeda. Variasi dari lot ke lot 4% juga ditunjukkan pada Tabel 5. Matriks tersebut mengandung populasi bakteri alami marginal (0–100 CFU/ g) dan hanya menghasilkan jumlah koloni dengan salah satu lot makanan. Oleh karena itu, perhitungan statistik jatuh kembali pada kumpulan data yang dikurangi dengan konsekuensi variasi yang lebih tinggi.



Peningkatan variabilitas jumlah dengan sampel cokelat susu 1, terutama jumlah Lot 3907 yang lebih rendah (data tidak ditampilkan) dipertanyakan tetapi tidak dapat direproduksi dengan sampel cokelat susu 2. CFU/g matriks ini sedikit lebih rendah ketika diinkubasi pada 30-C. Ini mungkin karena efek pemilihan suhu pada spesies bakteri yang tumbuh tetapi tidak signifikan dengan semua sampel yang diuji dari jenis makanan ini. Jumlah cokelat yang tinggi lemak dan kesulitan yang dihasilkan untuk homogenisasi yang cukup mungkin juga mempengaruhi variabilitas hasil tes. Tidak ada penyimpangan yang jelas antara metode Compact Dry



matriks ini nilai normalisasi dari 0,8 dan 1,2 mL inokulasi juga sebanding dengan yang diperoleh dengan volume inokulasi standar 1,0 mL.



Bahan sampel “udang mentah” menunjukkan pada 1 dari 4 sampel paralel, deviasi >50% dibandingkan dengan nilai inokulasi standar 1,0 mL. Ini mungkin karena prosedur preparasi sampel yang tidak memadai dan dapat dinilai sebagai pelarian karena 3 sampel lainnya menghasilkan nilai yang dapat diterima untuk inokulasi 0,8 dan 1,2 mL yang dinormalisasi. Memvariasikan suhu inkubasi antara 30-, 35-, dan 37-C menghasilkan tingkat jumlah pelat aerobik (CFU) yang berbeda. Karena mikroorganisme menunjukkan suhu pertumbuhan optimum yang spesifik, populasi mikroba yang berbeda diamati pada suhu yang berbeda. Fenomena ini terjadi terutama pada jenis makanan segar (ayam, babi giling, udang mentah, dan ikan mentah). Produk makanan untuk penyimpanan lebih lama (telur bubuk kering, oregano, tepung terigu, mie, coklat susu, makanan kucing kering, dan adonan pizza) menghasilkan tingkat hitungan yang rendah tetapi serupa pada 3 suhu. Ini mungkin menunjukkan flora (kontaminasi) dengan spektrum suhu yang luas. Eksperimen suhu ini mengkonfirmasi pentingnya menggunakan pelat Compact Dry



TC dan metode pelat tuang yang dapat ditetapkan untuk matriks



TC pada suhu yang ditentukan untuk estimasi jumlah aerobik total



apa pun. Hal ini diamati dengan suhu pertumbuhan 30- dan 35-C



guna mendapatkan data uji yang konsisten untuk bahan makanan.



(Tabel 5).



Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022



15.74b



(6.5.2)Hasil.—Membandingkan titik data dari 3 volume inokulasi yang berbeda, pertama jumlah CFU



KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 20051711 Tabel 6.



Perbandingan metode (data laboratorium independen) Bakteri aerob TC Kering Kompak



Tingkat



Paku, CFU/g



Sekitar 104CFU/g Lot 1



0sebuah



CFU/g



Mengulangi



15300



4.18



25400



4.40



9600



3.98



24650



4.39



3



10900



4.04



2020



4.31



4



11100



4.05



27950



4.45



5



10600



4.03



20700



4.32



Berarti



11500



4.06



23780



4.37



0,08



3280



2200



13.8



0,06 1.38



1



1590000



6.20



1300000



6.11



2



1660000



6.22



1335000



6.13



3



1870000



6.27



1780000



6.25



4



1110000



6.05



980000



5,99



5



1850000



6.27



1680000



6.23



Berarti



1616000



6.20



1415000



6.14



0,09



321000



sr



0sebuah



1.89



307000



19.0



1.49



22,7



0,10 1.68



1



93000000



7.97



86500000



7.94



2



125000000



8.10



111500000



8.05



3



164000000



8.21



128000000



8.11



4



120000000



8.08



104000000



8.02



5



19000000



8.28



158500000



8.20



Berarti



13840000



8.13



11770000



8.06



0.12



27250000



sr RSDr, %



3840000



27.7



1.50



23.2



0,10 1.22



sebuahSampel yang terkontaminasi secara alami.



Penentuan CFU pada kondisi standar (35-C, 1,0 mL inokulum) dari semua jenis makanan yang diuji dihitung setelah 8 periode waktu inkubasi berturut-turut: 18, 24, 27, 42, 48, 51, 66, dan 72 jam. Menyusun nilai CFU yang dihasilkan dalam kurva waktu, dengan sebagian besar jenis makanan yang diuji, angka saturasi yang khas dapat diperoleh. Setelah 48 ha, nilai dataran tinggi yang stabil tercapai. Untuk beberapa matriks makanan (sampel oregano 2, sampel cokelat susu 2, dan adonan pizza) hal ini diamati setelah 24 atau 42 jam (sampel bubuk telur kering 2, tepung terigu, mie, sampel cokelat susu 4, dan makanan kucing kering), masingmasing . Setelah inkubasi lebih lanjut (66 atau 72 jam) produk laut segar (sampel udang mentah 1 dan ikan mentah) serta sampel mie 1 dan sampel makanan kucing kering 1 menunjukkan peningkatan kedua nilai CFU. Ini mungkin karena populasi bakteri menggunakan produk metabolisme dari flora awal sebagai substrat. Pengamatan tersebut sangat menunjukkan titik optimal untuk membaca hasil setelah inkubasi 48 jam. Pada titik ini semua jenis makanan yang diuji telah mencapai CFU maksimumnya tetapi efek sekundernya belum dimulai. Untuk meringkas, dapat dikatakan bahwa pelat TC Compact Dry dapat digunakan untuk memperkirakan jumlah koloni total untuk area yang luas



spektrum matriks makanan. Suhu inkubasi 35-C dan waktu inkubasi 48 jam harus dijaga konstan karena fisiologi mikroba. Volume inokulasi yang menyimpang dari - 20% dapat ditoleransi jika hasilnya dinormalisasi menjadi 1,0 mL untuk perhitungan. Namun, bahkan untuk parameter ini, nilai yang disarankan dari 1,0 mL inokulum cair harus dipertahankan, karena jumlah ini dioptimalkan untuk rehidrasi media.



6.6 Studi Validasi Independen Studi validasi dilakukan oleh National Public Health Service for Wales di bawah tanggung jawab Richard Meldrum dan arahan dari AOAC RI. (6.6.1)Studi pengulangan.—Sebuah studi tentang pengulangan pada



daging giling mentah dilakukan di laboratorium independen. Metode referensi adalah Metode Resmi AOAC 966.23(tuang piring), dilakukan persis seperti yang ditentukan, tanpa penyimpangan atau perubahan.



(6.6.1.1)Metodologi.—Sampel dibekukan, mentah



daging giling yang dibeli dari supermarket lokal. Tiga paket dari batch yang sama (merek yang sama, ukuran paket yang sama, sama



Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022



19.1



RSDr, % Sekitar 108CFU/g Lot 3



Catatan10CFU/g



2



sr



0sebuah



CFU/g



1



RSDr, % Sekitar 106CFU/g Lot 2



Catatan10CFU/g



AOAC966.23bakteri aerob



1712KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 2005 untuk 3 level (4 level untuk daging sapi mentah) dari 5 jenis daging mentah (n=



Gambar 7.



Korelasi antara Compact Dry TC dan



AOAC 966.23 untuk bakteri aerob pada daging giling mentah.



sama. Sampel diangkut segera ke laboratorium dalam keadaan beku, dan pada penerimaan di laboratorium ditempatkan langsung ke dalam freezer untuk penyimpanan. Untuk mencapai jumlah koloni aerobik yang diperlukan, 3 sampel disiapkan sebagai berikut:angkatan 1.-Diinkubasi belum dibuka dari beku pada 22-C selama 28 jam, dan kemudian diperiksa. Level hitungan yang diharapkan adalah 108CFU/g.Angkatan 2.-Diinkubasi belum dibuka dari beku pada 22-C selama 19 jam, dan kemudian diperiksa. Level hitungan yang diharapkan adalah 106CFU/g.angkatan 3.—Diperiksa langsung dari beku. Tingkat hitungan yang diharapkan adalah 10 CFU/g.



Persiapan sampel dan pemeriksaan untuk uji ulangan dilakukan sebagai berikut: Setiap ulangan diberi kode identifikasi unik yang memungkinkan sampel dilacak tetapi tidak dapat mengidentifikasi sampel dalam hal jumlah yang diharapkan. Setiap ulangan diperiksa dalam rangkap dua menggunakan metode yang disebutkan di atas, tanpa penyimpangan atau perubahan. Pelat diinkubasi pada 35-C selama 48 jam. Pelat dihitung dalam kisaran 30-300 CFU. Prosedur persiapan sampel lainnya sepenuhnya mengikuti Metode Resmi AOAC966.23.



Prosedur lainnya mengikuti Metode Resmi AOAC966.23 dan instruksi masing-masing pada sisipan paket Compact Dry TC. (6.6.1.2)Hasil.—Seperti pada Tabel 6, nilai yang sebanding dari



Analisis Compact Dry TC dan Metode Resmi AOAC966.23 berada dalam rentang desimal yang sama. Nilai standar deviasi serupa pada 3 level dengan kedua metode. Mengenai nilai terukur, hanya nilai level terendah antara Metode Resmi Compact Dry TC dan AOAC966.23berbeda satu sama lain lebih dari kisaran standar deviasi, dan juga dengan ANOVA satu arah (P