Sgot SGPT [PDF]

Citation preview

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA KLINIK



Disusun Oleh Kelompok 2 : 31119002



Della Chyntia Nurul Islami



31119038



Anis Khoerunnisa



31119039



Dema Aditia



31119045



Delis Suryani



31119048



Azi Ilham Firdaus Farmasi 3A



PROGRAM STUDI S1 FARMASI STIKES BAKTI TUNAS HUSADA TASIKMALAYA 2021



PRAKTIKUM X-XI ENZIM HATI PEMERIKSAAN SGOT/AST DAN SGPT/ALT DALAM DARAH Hari/tanggal : kamis, 25 November 2021 A. Tujuan Percobaan Menentukan kadar SGOT/AST dan SGPT/ALT dalam darah dan menginterpretasikan hasil serta menghubungkan dengan keadaan patologi klinik. B. Landasan teori Enzim transaminase atau disebut juga enzim aminotransferase adalah enzim yang mengkatalisis reaksi transaminasi. Terdapat dua jenis enzim



serum



transaminase



yaitu



serum



glutamat



oksaloasetat



transaminase (SGOT) dan serum glutamat piruvat transaminase (SGPT). Pemeriksaan SGPT adalah indikator yang lebih sensitif terhadap kerusakan hati dibanding SGOT. Hal ini dikarenakan enzim SGPT sumber utamanya di hati, sedangkan enzim SGOT banyak terdapat pada jaringan terutama jantung, otot rangka, ginjal dan otak. Enzim aspartat aminotransferase (AST) disebut juga serum glutamat oksaloasetat transaminase (SGOT) merupakan enzim mitokondria yang berfungsi mengkatalisis pemindahan bolak-balik gugus amino dari asam aspartat ke asam α-oksaloasetat membentuk asam glutamat dan oksaloasetat. Dalam kondisi normal enzim yang dihasilkan oleh sel hepar konsentrasinya rendah. Nilai normal kadar SGOT < 35 U/L dan SGPT < 41 U/L. Enzim SGOT dan SGPT mencerminkan keutuhan atau intergrasi sel-sel hati. Adanya peningkatan enzim hati tersebut dapat mencerminkan tingkat kerusakan selsel hati. Makin tinggi peningkatan kadar enzim SGOT dan SGPT, semakin tinggi tingkat kerusakan sel-sel hati. Kerusakan membran sel menyebabkan enzim Glutamat Oksaloasetat Transaminase (GOT) keluar dari sitoplasma sel yang rusak, dan jumlahnya meningkat di dalam



darah. Sehingga dapat dijadikan indikator kerusakan hati. 1 internasional unit (1U/L atau mU/mL) adalah aktivitas enzim yang dapat mengkatalisis 1 µmol substrat dalam satu menit dengan persyaratan kondisi yang seoptimal mungkin. 1 unit katal adalah aktivitas enzim yang dapat mengkatalisis 1 mol substrat dalam 1 detik.1 internasional unit (U) = 16,67 x 10-3 katal. Hati adalah organ kelenjar terbesar dengan berat kira-kira 12001500 gram. Terletak di abdomen kuadrat kanan atas menyatu dengan saluran bilier dan kandung empedu. Hati menerima pendarahan dari sirkulasi sistemik melalui arteri hepatika dan menampung aliran darah dari sistem porta yang mengandung zat makanan yang diabsorbsi usus Secara mikroskopis, hati tersusun oleh banyak lobulus dengan struktur serupa yang terdiri dari hepatosit, saluran sinusoid yang dikelilingi oleh endotel vaskuler



dan sel kupffer



yang merupakan



bagian



dari sistem



retikuloendotelial. Hati memiliki peran sangat penting dalam metabolisme glukosa dan lipid membantu proses pencernaan, absorbsi lemak dan vitamin yang larut dalam lemak, serta detoksifikasi tubuh terhadap zat toksik. Interpretasi hasil pemeriksaan uji fungsi hati tidak dapat menggunakan hanya satu parameter tetapi menggunakan gabungan beberapa hasil pemeriksaan, karena keutuhan sel hati dipengaruhi juga faktor ekstrahepatik, 2 Pemeriksaan fungsi hati diindikasikan untuk penapisan atau deteksi adanya kelainan atau penyakit hati, membantu menengakkan diagnosis, memperkirakan beratnya penyakit, membantu mencari etiologi suatu penyakit, menilai hasil pengobatan, membantu mengarahkan upaya diagnostik selanjutnya serta menilai prognosis penyakit dan disfungsi hati. Jenis uji fungsi hati dapat dibagi menjadi 3 besar yaitu penilaian fungsi hati, mengukur aktivitas enzim, dan mencari etiologi penyakit. Pada penilaian fungsi hati diperiksa fungsi sintesis hati, eksresi, dan detoksifikasi. 1 internasional unit (1U/L atau mU/mL) adalah aktivitas enzim yang dapat mengkatalisis 1 μmol substrat dalam satu menit dengan persyaratan kondisi yang seoptimal mungkin. 1 unit katal adalah aktivitas



enzim yang dapat mengkatalisis 1 mol substrat dalam 1 detik. 1 internasional unit (U) = 16,67 x 10-3 katal. C. Prinsip Percobaan 1. SGOT/AST ASAT L-aspartat + 2-oxoglutarat ------------------- L-glutamat + oxaloacetat MDH Oxaloacetat + NADH + H+ ------------------- L-malat + NAD+ 2. SGPT/ALT ALAT L-alanin + 2-oxoglutarat ------------------- L-glutamat + Pyruvat LDH Pyruvat + NADH + H+ ------------------- L-lactat + NAD+ D. Alat dan Bahan Alat 1. Spektrofotometer/Fotometer 2. Micropipet (ukuran 10μL dan 1000μL) 3. Tabung reaksi 4. Tip kuning dan biru 5. Ependorf/kuvet 6. Sentrifugator 7. Timer 8. Kapas alkohol 9. Tissue 10. Spuit (3 ml) Bahan 1. Sampel serum 2. Reagen SGOT/ AST dan Reagen SGPT/ALT 4. Aquadest



E. Prosedur Percobaan 1. SGOT/AST



PEMBUATAN MONOREAGEN



R1 (4 BAGIAN)



R1 (1 BAGIAN)



m/20ml L- Aspartat MDH



m/5ml 2-Oxyglutamat NADH



SAMPEL STANDAR, MONOREAGEN



SAMPEL 50 υL 500 υL



UKUR ABSORBANSI PADA PANJANG GELOMBANG 340 nm DENGAN FAKTOR = 1745



2. SGPT/ALT



STANDAR 50 υL 500 υL



SIAPKAN LARUTAN BLANKO,STANDAR, DAN SAMPEL



INTERPRETASI HASIL PEREMPUAN < 31 υL LAKI LAKI < 35 υL



PEMBUATAN MONOREAGEN



R1 (4 BAGIAN)



R1 (1 BAGIAN)



m/20ml L- Alanin LDH



m/5ml 2-Oxyglutamat NADH



SAMPEL STANDAR, MONOREAGEN



SAMPEL 50 υL 500 υL



STANDAR 50 υL 500 υL



UKUR ABSORBANSI PADA PANJANG GELOMBANG 340 nm DENGAN FAKTOR = 1745



SIAPKAN LARUTAN BLANKO,STANDAR, DAN SAMPEL



INTERPRETASI HASIL PEREMPUAN < 31 υL LAKI LAKI < 35 υL



F. Hasil Pengamatan 1. SGOT/AST Faktor



: 1745



Absorbansi



: -0.012



ALT



: 20.41 U/L



2. SGPT/ALT Faktor



: 1745



Absorbansi



: -0.007



AST



: 12.90 U/L



G. Pembahasan Pada praktikum kali ini yaitu mengenai pemeriksaan kadar SGOT/AST dan SGPT/ALT dalam darah yang bertujuan untuk mengetahui kadar SGOT dan SGPT dalam sampel serum yang diperiksa.



Dimana kadar SGOT dan SGPT dalam darah tersebut dapat dijadikan suatu indikasi ada tidaknya kerusakan jaringan dalam tubuh terutama hati. Interpretasi hasil pemeriksaan kadar SGOT dan SGPT yang telah dilakukan



dengan



mengukur



kadar



SGOT



dan



SGPT



dengan



menggunakan alat fotometer dengan mengukur absorbansi sampel pada panjang gelombang 340 nm. Pada pemeriksaan SGPT serta SGOT dapat dihubungkan dengan adanya kerusakan jaringan dimana, sebagai respon terhadap kerusakan pada hati maka konsentrasi enzim dalam darah akan meningkat. Alanine aminotransferase (ALT) atau Serum Glutamic Pyruvic transaminase (SGPT) dan Aspartate aminotransferase (AST) atau Serum Glutamic Oxsaloasetic transaminase (SGOT), merupakan enzim yang keberadaan dan kadarnya dalam darah dijadikan penanda terjadinya gangguan fungsi hati. Enzim tersebut normalnya berada pada sel-sel hati. Kerusakan pada hati akan menyebabkan enzim-enzim hati tersebut lepas ke dalam aliran darah sehingga kadarnya dalam darah meningkat dan menandakan adanya gangguan fungsi hati (Tsani RA dkk, 2017). SGPT/ALT adalah enzim yang spesifik untuk hati yang hanya memberikan hasil yang signifikan terhadap adanya peningkatan penyakit hepatobilliary di hati. SGOT/AST adalah enzim yang tidak spesifik hanya terdapat di dalam hati tetapi juga dapat di temukan di sel darah, sel jantung dan sel otot, oleh karena itu peningkatan SGOT tidak selalu menunjukkan adanya kelainan di sel hati. Kadar SGPT serum dapat lebih tinggi dari kadar sekelompok transferase lainnya (transminase), aminotransferase aspartat (aspartate aminotransferase) AST / serum glutamic oxatoacetic transminase (SGOT), dalam kasus hepatitis akut serta kerusakan hati akibat penggunaan obat dan zat kimia, dengan stiap serum mencapai 2004000 U/L. Kadar SGOT serum tinggi dapat ditemukan setelah terjadi Infark Miokardium (MI) akut dan kerusakan hati. Pada penyakit hati, kadar serum akan meningkat 10 kali atau lebih dan tetap demikian dalam waktu yang lama (Kee JL, 2007). Kadar SGPT seringkali dibandingkan dengan SGOT untuk tujuan diagnostik. SGPT meningkat lebih khas daripada SGOT pada kasus nekrosis hati dan hepatitis akut, sedangkan



SGOT meningkat lebih khas dari pada nekrosis miokardium (infark miokardium akut) sirosis, kanker hati, hepatitis kronis dan kongesti hati. Kadar SGPT kembali lebih lambat ke kisaran normal daripada kadar SGOT pada kasus hati. Pada salah satu sampel pemeriksaan SGOT dalam penelitian ini terjadi peningkatan, peningkatan tersebut dapat disebabkan karena faktor kelelahan akibat aktivitas yang berat dan juga SGOT tidak spesifik hanya terdapat di dalam hati. SGOT juga di temukan di sel darah, sel jantung dan sel otot, oleh karena itu peningkatan SGOT tidak selalu menunjukkan adanya kelainan di sel hati.Oleh karena itu diperlukan pemeriksaan SGPT juga, ketika kedua enzim ini meningkat maka sudah dapat dipastikan adanya kerusakan pada sel hati. Prinsip pemeriksaan SGOT/AST didasarkan pada reaksi kinetic enzim dengan bantuan Malat Dehidrogenasi dan NADH. AST mengkalatisis transfer gugus amino dan L-aspartat ke ɑ Ketoglutarat menjadi Oxaloasetat dan L-glutamat. Oksaloasetat kemudian mengalami reduksi dan terjadi oksidasi NADH menjadi NAD+ dengan bantuan enzim Malat Dehidrogenase (MDH). Untuk pemeriksaan SGPT/ALT dilakukan dengan prinsip glutamate piruvattransaminase atau alanine transaminase (ALAT) mengkatalis transfer gugus amino dan L-alanin ke 2-oxoglutarat untuk membentuk L-glutamat dan piruvat. Kemudian LDH mengkonversi piruvat menjadi L-lactat dengan mengoksidasi NADH menjadi NAD+. Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan didapatkan nilai SGPT yaitu 12.90 U/L dan SGOT 20.41 U/L. Kadar SGPT serta SGOT normal pada perempuan adalah