SGPT Dan SGOT [PDF]

Citation preview

GPT (ALAT) IFCC MOD. LiquiUV Test Alanine Aminotransferase (EC 2.6.1.2) Ukuran Paket REF



12212



16 x 5 ml



Kit Uji M Lengkap



12012



10 x 10 ml



Kit Uji Lengkap



12022



8 x 50 ml



Kit Uji Lengkap



12032



4 x 250 ml



Kit Uji Lengkap



IVD Metode Metode Kinetik metode penentuan aktivitas ALAT sesuai rekomendasi Panel Pakar IFCC (Federasi Internasional Kimia Klinik) tanpa aktivasi piridoksalfosfat. Prinsip Reaksi GPT 2-oksoglutarat + L-alanin



GPT



L-glutamat piruvat



piruvat + NADH + H



LDH



L-laktat + NAD



Isi REF



12212



12012



12022



12032



BUF ml



16 x4 ml



10 x 8 ml



8x 40 ml



4x 200



SUB



1x16 ml



2x 10 ml



8x 10 ml



4 x 50 ml



BUF



Buffer / Reagen enzim Buffer TRIS (pH 7,4) L-alanin LDH Natrium azida



SUB



125 mmol/l 625 mmol/l ≥1,5 kU/l 0,095 %



Substrat 2-oxoglutarat



75 mmol/l



NADH



0,9 mmol/l



Natrium azid



0,095 %



Persiapan Reagen dan Stabilitas Prosedur 1 dengan Substrat Start Reagen siap untuk digunakan dan stabil, bahkan setelah dibuka, hingga tanggal kedaluwarsa yang dinyatakan bila disimpan terlindung dari cahaya pada 2,8 °C Kontaminasi reagen harus dihindari! Prosedur 2 dengan Sample Start REF 12032 dan 12022: Tuang seluruh isi satu botol SUB ke dalam satu botol HU aduk hingga rata. REF 12212: Pipet 1 ml dari botol SUB ke dalam satu botol BUF aduk rata REF 12012: Pipet 2 ml dari botol SUB ke dalam satu botol BUF diaduk rata. Reagen kerja stabil selama 4 minggu pada suhu 2,8 ° C dan 5 hari pada suhu 15 25 ° C Spesimen Serum, plasma heparin atau plasma EDTA Hindari hemolisis! Kehilangan aktivitas dalam 3 hari: pada +4° C: -10% pada 20-25° C: -17% Pengukuran Panjang gelombang:



Hg 365 nm, 340 nm atau Hg 334 nm



Jarak optik:



1 cm



Temperatur:



25° C, 30° C atau 37° C



Pengukuran Suhu:



terhadap udara (menurunkan absorbansi ) Hangatkan reagen dan kuvet ke suhu yang diinginkan. Suhu harus dijaga konstan (± 0,5° C) selama durasi pengujian



Prosedur 1 Pipet ke dalam kuvet 25° C, 30° C 37° C Sampel 200 µl 100 µl BUF 1000 µl 1000 µl Campur, inkubasi selama 5 menit pada temperatur yang diinginkan SUB 250 µl 250 µl Campur, baca absorbansi setelah 1 menit dan pada waktu yang sama mulai stopwatch. Baca absorbansi lagi tepat setelah 1. 2 dan 3 menit



Metode semi mikro; untuk metode makro gandakan volume. Prosedur 2 Pipet ke dalam kuvet 25° C, 30° C 37° C Sampel 200 µl 100 µl Kerja reagen 1000 µl 1000 µl Campur, baca absorbansi setelah 1 menit dan pada saat yang sama mulai stopwatch. Baca kembali absorbansi tepat setelah 1, 2, dan 3 menit Metode semi mikro ; untuk metode makro menggandakan volume Perhitungan Untuk ΔA / min dengan 0,06-0,08 (Hg 365 nm) atau 0,12-0,16 (Hg 334 nm, 340 nm) (prosedur 1 + 2) gunakan hanya pengukuran dari 2 menit pertama untuk perhitungan ( 1 menit inkubasi, pengukuran 2 menit) U/l = ΔA/min x Awal Sample Awal Substrat Panjang 25° C, 30° C 37° C 25° C, 30° C 37° C gelombang Hg 334 nm 971 1780 1173 2184 340 nm 952 1745 1151 2143 Hg 365 nm 1765 3235 2132 3971 Faktor konversi dari satuan tradisional (U / I) dalam satuan Sl (kat / l): 1 U/l



= 16,67 x 101 µkat/l



1 µkat/l



= 60 U/l



Karakteristik Kinerja Linearitas Jika absorbansi berubah per menit (AA / menit) atau melebihi aktivitas Panjang gelombang (nm) Hg 365 Hg 334/340



ΔA/min



25° C, 30° C (U/l)



37° C (U/l)



0.080 0.160



170 190



320 350



encerkan 0,1 ml sampel dengan 0,9 ml garam fisiologis (0,9%) dan ulangi pengujian menggunakan pengenceran ini. Kalikan hasilnya dengan 10. Dalam serum dengan aktivitik sangat tinggi, absorbansi irisial mungkin sangat rendah karena sebagian besar NADH mungkin telah dikonsumsi sebelum pembacaan pertama. Dalam kasus ini, jalankan kembali sampel setelah pengenceran seperti yang dijelaskan di atas. Data kinerja umum dapat ditemukan di Laporan Verifikasi. Nilai Referensi/ nilai rujukan: Temperatur Laki-laki Perempuan



25° C 22 U/l 17 U/l



30° C 30 U/l 23 U/l



37° C 42 U/l 32 U/l



IFCC 45 U/l 34 U/l



* dengan aktivasi piridoksalfosfat Kontrol kualitas Semua serum kontrol dengan GPT nilai yang ditentukan oleh metode ini dapat digunakan. Kami merekomendasikan untuk menggunakan serum kontrol kualitas kami HumaTrol berdasarkan serum hewan atau serum kontrol kualitas SERODOS kami berdasarkan serum manusia. Otomasi Proposal untuk menerapkan reagen pada penganalisis tersedia berdasarkan permintaan Setiap laboratorium harus memvalidasi aplikasi dalam tanggung jawabnya sendiri. Catatan (SUB) dan (BUF) mengandung natrium azida (0,095%) Jangan tertelan Hindari kontak dengan kulit dan selaput lendir.



GOT (ASAT) IFCC MOD. LiquiUV Test Aspartat Aminotransferase (EC 2.6.1.1) Ukuran Paket REF



12211



16 x 5 ml



Kit Uji M Lengkap



12011



10 x 10 ml



Kit Uji Lengkap



12021



8 x 50 ml



Kit Uji Lengkap



12031



4 x 250 ml



Kit Uji Lengkap



IVD Metode Metode Kinetik untuk penentuan aktivitas ASAT sesuai dengan rekomendasi panel ahli IFCC tanpa aktivasi piridoksalfosfat. Prinsip Reaksi GPT 2-oksoglutarat + L-aspartat



oxaloacetat + NADH + H+



GOT



MDH



L-glutamat oxaloacetat



L-malate + NAD



Isi REF



12211



12011



12021



12031



BUF ml



16 x4 ml



10 x 8 ml



8 x 40 ml



4 x 200



SUB



1 x 16 ml



BUF



Buffer / Reagen enzim



8 x 10 ml



Buffer TRIS (pH 7,4)



100 mmol/l



L-aspartat



300 mmol/l



LDH



≥ 1,13 kU/l



MDH



≥ 0,75 kU/l



Natrium azida SUB



2 x 10 ml



0,095 %



Substrat 2-oxoglutarat



60 mmol/l



4 x 50 ml



NADH



0,9 mmol/l



Natrium azid



0,095 %



Persiapan Reagen dan Stabilitas Prosedur 1 dengan Substrat Start Reagen sudah siap digunakan. Reagennya stabil, bahkan setelah dibuka hingga tanggal kadaluwarsa yang ditentukan ketika disimpan ditemoat yang terlindungi dari cahaya pada 2...8° C. Hindari kontaminasi pada reagen. Prosedur 2 dengan Sample Start Ref 12031 dan 12021 : tuangkan isi yang ada didlam satu botol substrat ke dalam satu botol buffer, campur sepenuhnya. Ref 12211 : pipet 1 ml dri botol substrat kedalam satu botol buffer, campur sepenuhnya Ref 12011 : pipet 2 ml dri botol substrat kedalam satu botol buffer, campur sepenuhnya dengan baik. Reagent bekerja dengan stabil selama 4 minggu pada suhu 2...8° C dan 5 hari pada susuh 15...25° C Spesimen Serum, plasma heparin atau plasma EDTA Hindari hemolisis Kehilangan aktivitas dalam 3 hari: pada +4° C: -8% pada 20-25° C: -10% Pengukuran Panjang gelombang:



365 nm, 340nm atau 334 nm



Jarak optik:



1 cm



Temperatur:



25° C, 30° C atau 37° C



Pengukuran Suhu:



terhadap udara (menurunkan absorbansi) Hangatkan reagen dan kuvet sesuai dengan suhu yang diinginkan. Suhunya harus tetap konstan selama waktu tes.



Prosedur 1 Pipet ke dalam kuvet 25° C, 30° C Sampel 200 µl BUF 1000 µl Campur, inkubasi selama 5 menit pada temperatur yang diinginkan



37° C 100 µl 1000 µl



SUB 250 µl 250 µl Campur, baca absorbansi setelah 1 menit dan pada waktu yang sama mulai stopwatch. Baca absorbansi lagi tepat setelah 1. 2 dan 3 menit Metode semi mikro; untuk metode makro gandakan volume.



Prosedur 2 Pipet ke dalam kuvet 25° C, 30° C 37° C Sampel 200 µl 100 µl Kerja reagen 1000 µl 1000 µl Campur, baca absorbansi setelah 1 menit dan pada saat yang sama mulai stopwatch. Baca kembali absorbansi tepat setelah 1, 2, dan 3 menit Metode semi mikro ; untuk metode makro menggandakan volume Perhitungan Untuk ΔA / min dengan 0,06-0,08 (Hg 365 nm) atau 0,12-0,16 (Hg 334 nm, 340 nm) (prosedur 1 + 2) gunakan hanya pengukuran dari 2 menit pertama untuk perhitungan ( 1 menit inkubasi, pengukuran 2 menit) U/l = ΔA/min x Sample Substrat Panjang 25° C, 30° C 37° C 25° C, 30° C gelombang Hg 334 nm 971 1780 1173 340 nm 952 1745 1151 Hg 365 nm 1765 3235 2132 Faktor konversi dari satuan tradisional (U / I) dalam satuan Sl (kat / l): 1 U/l



37° C 2184 2143 3971



= 16,67 x 101 µkat/l



1 µkat/l



= 60 U/l



Karakteristik Kinerja Linearitas: sampai dengan 600 U/l pada sistem otomatis Prosedur manual: Jika absorbansi berubah per menit (AA / menit) atau melebihi aktivitas Panjang gelombang (nm) Hg 365 Hg 334/340



ΔA/min



25° C, 30° C (U/l)



37° C (U/l)



0.080 0.160



170 190



320 350



Diencerkan 0.1 ml sampel dengan 0.9 ml Nacl fisiologis (0,9%) dan ulangi pengukuran menggunakan pengenceran ini. Lalu hasilnya dikalikan 10 dalam serum dengan aktivitas yang sangat tinggi, absorbansi awal mungkin sangat rendah karena sebagian besar NADH



mungkin telah dikonsumsi sebelum pembacaan pertama. dalam hal ini lakukan kembali sampel setelah pengenceran seperti dijelaskan di atas.Nilai Referensi/ nilai rujukan: Temperatur 25° C Laki-laki 18 U/l Perempuan 15 U/l * dengan aktivasi piridoksalfosfat



30° C 25 U/l 21 U/l



37° C 37 U/l 31 U/l



IFCC 35 U/l 31 U/l



Kontrol kualitas Semua serum kontrol dengan GOT nilai yang ditentukan oleh metode ini dapat digunakan. Kami merekomendasikan untuk menggunakan serum kontrol kualitas kami HumaTrol berdasarkan serum hewan atau serum kontrol kualitas SERODOS kami berdasarkan serum manusia. Otomasi Proposal untuk menerapkan reagen pada penganalisis tersedia berdasarkan permintaan Setiap laboratorium harus memvalidasi aplikasi dalam tanggung jawabnya sendiri. Catatan (SUB) dan (BUF) mengandung natrium azida (0,095%) Jangan tertelan. Hindari kontak dengan kulit dan selaput lendir.